任杰2草稿.docx
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任杰2草稿
Supplementary.Fig.1.(a)Sirt1andmutantHTT(detectedbyHTT81-90antibody)
补充。
图1。
(一)与突变高温热处理(即抗体检测81-90)
proteinlevelsweredetectedbyWesternblottingincerebralcortexofN171-82Qmice.(b)
蛋白水平,免疫印迹检测大脑皮层n171-82q小鼠。
(二)
Sirt1andmutantHTT(detectedby1C2antibody)proteinlevelsweredetectedbyWestern
与突变高温热处理(检测1-2抗体)蛋白水平检测西方
blottingincerebralcortexofBACHDmice.
在大脑皮层的bachd小鼠印迹。
SupplementaryFig.2.Sirt1improvesglucosetoleranceandregulatesenergy
补充图2。
SIRT1的改善糖耐量和调节能量
metabolisminN171-82QHDmice.(a)Bloodglucoselevelsweremeasuredafteran
代谢n171-82q高清小鼠。
(一)血糖水平测定后
overnightfastin14-week-oldmice.Mean±S.E.M.,n=10.(b-c)Micewerefasted
隔夜快14周大的老鼠。
平均±扫描,10例。
(b-c)小鼠禁食
overnightandthenadministeredD-glucose(1g/kg,i.p);bloodsamplesweretakenbefore
一夜之间,然后管理葡萄糖(克/千克,知识产权);血液样本被带到之前
andatindicatedtimesafterglucoseadministration.Theabsolutevalues(b)andarea
在表示时间后血糖管理。
绝对值
(二)和面积
undercurve(AUC)(c).n=12.Mean±S.E.M.(d-f)EffectsofSirt1overexpressionon
在曲线(联合自卫军)(丙)。
12例。
平均±扫描电镜(东风)影响,SIRT1的表达
bodyweight(d),foodintake(e),energyexpenditure(f)measuredbyanOxymax
(四)体重,食物摄入量,能源支出(电子)(女)衡量一个oxymax
metabolicsystemat16weeksoldmice.Mean±S.E.M..n=12.*p<0.01comparedwith
代谢系统在16周大的老鼠。
平均±扫描。
12例。
*<0.01相比
thevalueofwildtype(WT);**p<0.05comparedwiththevalueofHD.
价值的野生型(野生);**<0.05相比的价值,高清。
SupplementaryFig.3TransgeneSirt1ishighlyexpressedinthebrainandbarely
补充图3基因SIRT1高表达在大脑和勉强
detectableinthepancreasbyimmunofluorescentstaininginSirt1transgenicmice.
检测胰腺中的免疫荧光染色在转基因小鼠中。
(a)RepresentativepicturesofimmunofluorescentstainingoftransgeneSirt1(HA-tagged,
(一)代表的照片,免疫荧光染色的基因SIRT1(医管局标记,
green),NeuNstaining(red),andDAPIindifferentbrainregionsfromaSirt1trangenic
绿色),抗原染色(红色),与不同脑区从一个SIRT1转基因
mouse(Sirt1)andawildtypecontrolmouse(WT).Scalebar100μm.(b)Representative
小鼠(中)和野生型(野生)控制鼠标。
规模100μ米(乙)代表
picturesofimmunofluorescentstainingoftransgeneSirt1(HA,green),insulin(red),and
图片的免疫荧光染色的基因SIRT1(哈哈,绿),胰岛素(红色),和
DAPI(blue)inpancreaticisletsofLangerhansfromaSirt1transgenicmouse(Sirt1)and
吲哚(蓝色)胰腺胰岛从SIRT1转基因小鼠(SIRT1)和
awildtypelittermatecontrol(WT).Scalebar50μm.
野生型窝控制(野生)。
规模50μM
SupplementaryFig.4.Sirt1hasnoeffectsonmutantHTTaggregatesinN171-82Q
补充图4。
SIRT1没有影响突变高温热处理总量在n171-82q
HDmice.(a)DiagramshowstheareasofthecortexthatwereevaluatedforHTT
小鼠高清。
(一)图显示该地区的皮层,被评价为高温热处理
aggregates.(b)AveragenumberofcellswithmutantHTTaggregatesinthecerebralcortex
集料。
(二)平均人数细胞突变高温热处理总量在大脑皮层
ofmiceineachmicroscopefield.(c)Representativeimagesfromstriatumimmunostained
小鼠在每个显微镜。
(三)代表图像从纹状体染色
withEM48antibody.Scalebars50μm.(d)AveragenumberofcellswithmutantHTT
与em48抗体。
规模酒吧50μ米(四)平均人数细胞突变高温热处理
aggregatesinthestriatumofmiceineachmicroscopefield.Mean±S.E.M.from5miceper
聚集在小鼠纹状体在每个显微镜。
平均±扫描电镜从5个小鼠每
group.(e)N-terminalmutantHTT(N63-148Q-myc)expressionwasinducedbywithdrawal
集团。
(五)N-末端突变高温热处理(n63-148q-myc)表达诱导撤出
ofdoxycyclinefromthemedium,andSirt1overexpressionwasintroducedbyretrovirusat
强力霉素的媒介,并介绍了逆转录病毒在SIRT1的表达
thesametimeasmutantHTTinduction.Cellswerefixedforimmunofluorescentstainingat
同时突变高温热处理感应。
细胞是固定的,免疫荧光染色
48hafterinductionofmutantHTTexpression.MutantHTTwaslabeledwithmycantibody
48小时后诱导表达的突变高温热处理。
突变高温热处理标记基因抗体
(myc-taggedN63-148Q).Mean±S.E.M.fromthreeindependentexperiments.
(基因n63-148q)。
平均±扫描电镜从三个独立的实验。
SupplementaryFig.5.Sirt1increasesneuronalresistancetomutantHTTtoxicity.(a)
补充图5。
SIRT1增加神经元抗突变高温热处理毒性。
(一)
PrimarycorticalneuronswereculturedfromSirt1transgenicmiceorwildtype(WT)control
初级皮层神经元培养SIRT1转基因小鼠和野生型(野生)控制
mice.LevelsofSirt1inprimarycorticalneuronsweredetectedbyWesternblotting.(b)
小鼠。
水平对初级皮层神经元的免疫印迹检测。
(二)
NeuronsoverexpressingSirt1aremoreresistanttomutantHTT-inducedneurotoxicity.
神经过度SIRT1的抗突变高温热处理引起的神经毒性。
CorticalneuronswereculturedfromSirt1transgenicmiceorwildtypecontrolmice,and
皮层神经元培养SIRT1转基因小鼠或野生型小鼠,以及
transfectedwithmutantHTT(Htt-N63-148Q)ornormalHTT(Htt-N63-16Q)fragmentat
转染突变高温热处理(htt-n63-148q)或正常的高温热处理(htt-n63-16q)片段
DIV5,andneuronalsurvivalwasassessedat48haftertransfectionbynuclearDNA
div5,与神经元生存进行了评估在48小时后转染核脱氧核糖核酸
morphology.Thenumbersofsurvivingneuronsintransfectedneuronsweremeasured.
形态。
存活神经元数量在转染细胞测定。
*p<0.05vsthevalueofWTneuronstransfectedwithHTT-N63-148Q.
*<0.05与价值型细胞转染htt-n63-148q。
SupplementaryFig.6.EffectsofFoxo3aandSirt1onmutantHTT-inducedATP
补充图6。
影响及意义在突变高温热处理引起的三磷酸腺苷
deficitsinSTHdh
赤字sthdh
Q111/Q111
q111/q111
cells.(a)HPLCchromatogramsshowingadenosine
细胞的。
(一)的液相色谱显示腺苷
nucleotidesATP,ADP,andAMPinwild-typeSTHdh
三磷酸腺苷二磷酸腺苷,磷酸腺苷核苷
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