Nanodrop中文操作手册.docx
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Nanodrop中文操作手册.docx
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Nanodrop中文操作手册
Nanodrop2000/2000C分光光度计
用户手册
基因仪器应用技术支持
亲爱的用户,您好!
超级感激您选购我公司代理的仪器。
咱们将竭诚为您提供优质的售后效劳及免费的专业应用培训。
为了更好地进行仪器的应用培训,咱们依照您所选购的仪器特点,将需要您配合预备的工作敬告如下:
1.应用培训内容:
仪器操作培训和软件应用培训。
仪器操作培训包括:
仪器的操作、保护和仪器利用注意事项。
软件应用培训包括:
用户本次所购买的同仪器配套的所有软件的软件应用培训。
2.培训时刻:
仪器正式安装调试后,由安装工程师现场培训仪器操作。
3.应用培训中所需预备的试剂、耗材和仪器均需由用户提供,并在系统培训开始前预备好。
4.用户签收售后效劳工作报告后,基因公司正式的系统培训内容即完成。
您以后在利用的进程中有任何疑问都能够向咱们咨询,咱们超级乐意为您们解决应用上碰到的问题。
5.在仪器的利用进程中,不管碰到您以为何等微小或繁琐的问题,请您及时和咱们联系,一个及时的通知能节约您的时刻,也能帮忙咱们更好的了解仪器和软件。
6.联系咱们时请您提供:
仪器型号、软件名称,版本、错误代码、实验目的、操作系统(98/2k/xp/NT)、维修历史等相关资料。
本守那么提的信息仅供参考,本守那么包括的所有信息应该是正确和完整的。
若是对本守那么中的描述有疑问,请参考厂家的英文操作说明。
若是由于您的不合法利用而对仪器造成损坏或致使仪器的性能损伤,本公司将可不能对此负责。
1.仪器介绍
仪器描述
ThermoScientificNanoDrop2000/2000C分光光度计能够检测的样本,而且检测是超级高的准确性和重复性。
ND2000C分光光度计不仅提供了NanoDrop样品保留专利技术的便利性,也能够利用传统的比色皿来进行样本检测。
样本保留系统应用了表面张力来把样本保留在两根检测光纤中间,这使得仪器能够检测较高浓度的样本而不用稀释。
应用那个技术,全波长(190-840nm)NanoDrop2000/2000C分光光度计检测样本的最高浓度是标准比色皿的200倍。
仪器规格
NanoDrop2000/2000C—基座模式
仪器类型:
分光光度计
最小样品量:
波长:
1mm(能够自动调整到)
光源:
氙闪烁灯
检测器类型:
2048—象素线型硅CCD阵列
波长范围:
190-840nm
波长准确性:
±1nm
光谱分辨率:
≤(FWHM@Hg)
吸收光精准性:
吸光值(1mm光程)
吸收光准确性:
±2%(257nm波长下,个吸光值)
吸光值范围:
—300(等同于10mm光程时)
检测极限:
2ng/uldsDNA
最大检测浓度:
15,000ng/ul(dsDNA)
检测时刻:
<5秒
仪器占地面积;14cm×20cm
重量:
2kg
样本基座材料:
303不锈钢和石英光纤
工作电压;12V
工作功率:
12-18W(最大30W)
软件兼容性;WindowsXP和Vista(32bit)
NanoDrop2000C—比色皿模式
光束高度:
加热:
37±0.5℃
搅拌:
150-850RPM
光程:
10,5,2,1mm
检测极限:
uldsDNA
最大检测浓度:
750ng/uldsDNA
检测时刻:
<3秒
重量:
2.1kg
样品保留基座检测
用移液器加1-2ul样品到检测基座上,关于高浓度的核酸和蛋白A280检测,最少能够利用的样本。
在基座上包埋一根光纤(同意光纤),把待检测样本加到检测基座上,第二根光纤(光源光纤)放下来与液体样本接触,在两根光纤结尾形成液柱。
由一个脉冲氙灯作为光源而且利用一个线性CCD阵列来检测通过液体的光信号。
仪器由一个装由Nanodrop软件的电脑操纵,所有实验数据都以workbook(*.twbk)文件形式保留在电脑中。
基座检测需要的样本量
尽管基座检测时样本的量不是专门关键,可是必需保证两根光纤之间形成完整的液柱,如此才能保证两根光纤之间形成样本液桥。
决定液滴表面张力的要紧因素是溶液中水分子的氢键结合力。
通常情形下,溶液中所有的溶质(包括:
蛋白,DNA,RNA,盐离子,去垢剂分子)都会降低表面张力,因为这些分子能够和水分子的氢键产生作用。
尽管一样情形下1ul的样本就足能够检测了,但关于那些表面张力比较小的样本最好利用2ul样本来检测。
现场实验的体会说明以下样本的用量足够取得准确重复性高的检测结果:
核酸水溶液:
1ul
纯蛋白:
2ul
Bradford,BCA,Lowry或蛋白Pierce660nm实验:
2ul
微生物细胞悬浮液:
2ul
最好利用精准的移液器(0-2ul)和tip头来取样来保证取样的准确。
低精准度的移液器(0-10ul或更大的)很难准确的加1ul样本到检测基座上。
若是用户对样本的特点或移液器精准性不太确认,最好利用2ul样本来做检测。
基座大体利用
1.抬起样品臂,把样品加到检测基座上。
2.放下样品臂,利用电脑上的软件开始吸光值检测。
在上下两个光纤之间会自动拉出一个样品柱,然后进行检测。
3.当检测完成后,抬起样品臂,并用干净的无尘纸把上下基座上的样品擦干净。
如此擦拭样品就能够够幸免样品在基座上的残留。
比色皿检测
Nanodrop2000C能够检测最高48mm的10mm光程的比色皿。
当利用微量,半微量或超微量的比色皿时,咱们建议利用周边不透明的比色皿,不透明的比色皿保证了光穿过样本后全数抵达检测器。
而透明的比色皿会让那些没有透过样本的光也抵达检测器,如此会致使检测专门是低浓度样品的检测不准确。
当检测的波长为紫外区域时(<340nm),要利用石英白色皿,如此才能透过紫外光。
尽管有一些制造商提供紫外透过的一次性塑料比色皿,可是即便质量最好的塑料比色皿也不能让低于220nm以下波长的紫外光透过,而大部份玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透过性的。
一样单光束的分光光度计都会推荐相配的比色皿,而许多比色皿生产厂家都有严格的质控来保证比色皿的性能而不用在换比色皿时需要校准,这些比色皿都能够用在Nanodrop2000C上。
比色皿检测样品量
在样品检测时必需保证比色皿中的样品量足够,能够让光线完整穿过样品。
2mm的光速从比色皿底部以上的位置穿过,请参考比色皿生产厂家的建议来确信需要的样品体积。
比色皿检测大体操作
1.把样品加到比色皿中,要保证加入的样品量足够,要盖过光束。
2.抬器样品臂,把比色皿查入到仪器中,插入比色皿时要注意仪器上面的光路的指向的方向。
3.在做比色皿检测时样品臂必需放下来。
4.利用电脑上的软件对仪器进行初始话。
5.当检测完成后,移出比色皿,倒出样品,清洗干净比色皿。
空白对照和吸收光计算
当Nanodrop2000/2000C分光光度计做好空白对照后,仪器会自动记录空白参照液的光谱结果并保留起来作为波长的光强度参比值。
当进行样品检测时,透过样品的光强度将被记录下来。
样品的透过光强度和空白对照的透过光强度按以下公式来计算样品吸光值:
如此,能够通过样本和空白对照的透过光强度来计算特定波长下的吸光值。
通过Beer-Lamber定律来确信样品浓度和吸光值之间的关系:
A=吸光值(A)
ε=波长依托的摩尔消光系数(单位L/mol*cm)
b=光程(单位cm)
c=样品浓度(单位mol/L)
参比溶液,或空白溶液,一般是那些融解靶向分子的溶剂,那个溶剂要和样品溶液具有相同的pH值和离子强度。
基座检测空白循环
咱们建议把空白对照当做样品来检测,如此能够确认仪器性能完好而且基座上没有样品残留,按以下操作来运行空白循环:
1.软件中打开将进行的操作模式,把空白对照加到基座上,并把样品臂放下。
2.点击Blank来进行空白对照检测并保留参比图谱。
3.从头加空白对照到基座上,把它当做样品一样来检测,点击Measure来进行检测,结果应该是差不多为一水平线,吸光值转变应不超过(10mm光程)
4.擦去上下基座上的液体,重生进行上面的操作,直到检测光谱图的转变不超过(10mm光程)。
尽管不需要在每一个样品之间进行空白校准,但咱们建议在检测多个样品时,最好每30min进行一次空白校准。
30min后,最后一次做空白检测的时刻将显示在软件下面的状态栏上。
荧光染料
在进行MicroArray和Protein&Labels检测时,软件利用Beer-Lambert定律来进行荧光染料计算。
用户能够利用Dye/Chrom来编写新的新的染料。
下表是软件中保留的染料的参数:
2.软件
电脑配置
MicrosoftWindowsXP或Vista(32bit)操作系统
或更高速的处置器
CDROM光驱
1GB或更高的内存(Vista系统需要2GB)
40MB硬盘空间
具有USB端口(仪器通过USB与电脑连接)
软件安装
系统软件必需在仪器连接到电脑上之前安装好,安装软件时必需利用治理员用户进入电脑。
按以下步骤来正确的安装软件:
1.关闭所有程序,并把USB线拔出。
2.把软件光盘插入到驱动器中,软件的安装menu会自动显示,若是安装不能自动开始,点击Start并选择Run。
在Run对话框,输入x:
\Set-up,那个地址的“x”代表电脑的光驱,点击OK.
3.依照屏幕提示来进行操作来安装软件,然后连接USB线。
若是显现“发觉新硬件提示”,WindowsXPSP2操作系统将询问是不是需要通过Internet来寻觅适合的软件,选择—No,notthistime,然后自动进行软件安装。
这时NanoDrop2000/2000c分光光度计就能够够利用了。
若是软件不能打开,参考“DiagnosticsandTroubleshooting”来寻觅解决方法。
能够在NanoDrop公司的网站上及时下载软件更新。
Thermo软件安装资质
Thermo软件的安装资质程序执行NanoDrop2000/2000c软件的安装资质。
安装资质查验安装的是不是是正确的软件,并可用来查验这些文件在安装时是不是被修改,删除或覆盖。
运行Thermo软件安装资质程序:
1.选择桌面Start打开Startmenu。
2.选择Allprograms>Thermo>ThermoSoftwareIQ。
3.依照操作提示来认证您系统软件的安装。
4.利用Help菜单进入ThermoIQUserGuidePDF.
线连接
在利用仪器进行样品检测前,需要利用USB连接线把仪器和电脑相连,把12V的电源线接到仪器反面的插口上,并连接电源。
当仪器不利历时,电源不用拔下,当仪器处于“待命”状态时,其功率为5W,这时闪烁氙灯处于关闭状态。
在仪器反面的电源线插口上面有一个LED灯指示仪器正连接上12V电源。
注册您的仪器
请及时注册您的仪器,咱们会在网上升级软件而且免费增加新的特性。
咱们会及时更新咱们的用户名单,如此咱们能够及时通知您这些软件的更新。
所有提供的信息都市完全可信的,请在网上注册您的仪器。
软件特点
NanoDrop2000/2000c软件被分为左右两块,状态栏和工作按键在左侧,而右边显示主菜单和数据窗口。
在NanoDrop2000的用户守那么中有一个“附件”中包括一页软件特点总那么。
软件左侧部份
任务栏
任务栏选项包括以下几个选项:
Home-显示特定用户群所能够操作的应用的主菜单,默许的用户群为Classic。
MyDate-治理数据的存档和恢复。
样品数据保留在用户指定的文件夹中,请参考“数据和帐户治理”来查看详细内容。
Options-包括4个操纵键,请参考“数据和帐户治理”来查看详细内容。
任务工具栏选项能够打开特定的应用,包括:
Measure(指定应用)-显示最近选择的应用。
Reports-包括以下三个功能键:
◆Report-显示积存的样品数据结果表格,并显示选择样品的吸光图谱。
◆Configuration-选择一个报告栏显示,并选择报告栏显示的顺序。
◆Print-选择需要打印的相关信息,设定打印页面格式和报告中打印图标的格式。
OligoCalc(仅应用于核酸和MicroArray)-计算特定核酸分子的分子量,激发效率,浓度因子和熔点。
请参考“核酸”和“MicroArray”中的“OligoCalc”来获取详细信息。
Dye/(仅应用于MiroArray和Protein&Labels)-让用户进入并编写新的染料参数,参考MiroArray和Protein&Labels中的Dye/来获取详细信息。
EditorOptions(方式编辑栏内)-微编辑方式设定可用的选择。
功能键
当应用被打开时,以下的四个功能键被显示在左侧栏的顶部:
Measure-开始进行样品检测,那个功能键在刚进入一个应历时是灰色的,当做好空白对照后才能利用。
PrintScreen-在默许打印机上打印样品的数据和相应的光谱图。
Blank-利用溶解样品的缓冲液来做空白对照。
在进行样品检测前必需先做空白对照。
Re-Blank-利用溶解样品的缓冲液来再做个空白对照。
Re-Blank功能会对最近的一个样品浓度从头计算,并在屏幕上显示修正后的光谱图。
被选择MethodEditor或KineticEditor时,会显示以下四个功能键:
New-开始成立一个新的客户定制型方式。
Save-在当前选择的组中保留编写的方式。
Measure-打开新编写好的方式。
Delete-删除一个方式。
左侧栏的其他特点选择
主工具栏选择
File-主工具栏下拉菜单中包括以下选项:
◆NewWorkbook-打开一个新的工作本,而当前利用的工作本将被保留并自动关闭。
◆CloseWorkbookandgoHome-关闭当前的工作本并回到主页面,当工作本被关闭时所有的数据都会自动保留。
◆CloseAllWorkbookandgoHome-关闭所有工作本(所有运用和方式)并回到主页面。
◆PrintReport-在默许打印机上打印当前报告。
◆Usecurrentsettingasdefault-当一个新的应用工作本被打开时,把当前的应用参数如:
样品类型,单位,基线校准波长和比色皿类型设定为默许。
设定好后,当前报告格式也会被设定为默许。
那个功能在每一个应用和方式中设定特定用户选择时超级有效。
◆E-mailcurrentworkbook-把当前的工作本粘贴到一个新的Email中。
当要把这些数据发到NanoDrop残缺技术支持那里时,请利用MyDate任务栏来定位适合的自动保留文件。
利用软件打开文件并发送给技术支持。
注意:
尽管在打开自动保留的文件时所有报告内容不能显示,可是所有内容能够被技术支持恢复。
Help-在任何界面下都有能够运用[Ctrl]-m,[Ctrl]-h或F1键来进入帮忙文件。
在帮忙菜单下的上诉选项都市针对当前的软件版本和仪器型号的。
左栏仪器设定
AddtoReport-显示哪些样品数据被添加到当前的报告中。
尽管所有数据被备份到自动保留工作本中并能够以后恢复。
在日常利用中最好把AddtoReport选择上,如此使数据恢复更易。
在样品检测前选择添加到报告中来把结果保留到报告和工作本中。
Overlayspectra-显示独个光谱图,一个交叉指针被显示并和最近检测的样品相关联。
当覆盖光谱被选择,点击一个光谱来关联交叉指针。
⏹覆盖的样品编号显示在左侧突变的顶部,最后一个检测的样品显示在图的最上面并被标记为红色。
在不同的图谱上点击能够把那个图谱显示为红色。
⏹在进行新样品检测时,去选择OverlaySpectra将清空所有光谱。
Smallsamplevolume-(仅仅适用于核酸和蛋白A280运用)-当样品在10mm光程的吸光值在或以上时,能够只利用样品进行检测。
UseCuvette(仅仅适用于NanoDrop2000c)-激活比色皿检测,客户利用比色皿检测时可进行的选择包括:
⏹Pathlengh-包括10,5,2,和1mm
⏹StirSpeed-速度设定范围是1-10,默许设定为关闭。
⏹Heatto37℃-把比色皿槽加入到37±5℃。
选择上后,当前的温度将被显示在软件屏幕的底部。
加热需要大约1-10min才能达到37℃。
把样品加热到37℃需要的时刻依托于样品温度,在默许情形下,加热模块是关闭的。
注意:
若是更改一个不同的应用,加入模块将被关闭。
但是若是利用相同的运用但利用基座检测,加热模块将继续运行。
右边栏
右边栏包括以下主菜单:
Groupdrop-downbox-选择首选菜单显示和相应的应用,默许的选择是ClassicNanoDrop。
Predefinedapplicationbuttons-额外的主菜单项选择择。
User-Definedlist-在用户概念方式或动力学前是空的,当客户概念了方式或动力学,定量方式左侧有一个量标签,而动力学方式左侧有一个时钟标签。
当一个应用被打开时,右边栏显示样品的光谱图和相关运用的数据。
在用户守那么文件图标上部有基座检测或比色皿检测的标签。
图像显示
图像面板显示最新检测的样品光谱图。
被选择了附件图片的功能,就能够够显示多个样品的数据结果。
样品名称号显示在左侧栏的顶部。
最近检测的样品显示在结果栏的最上面,其光谱图显示为红色。
注意:
点击较早检测的样品名能够打开结果并让其图谱显示为红色。
尽管样品光谱图显示的数量没有限度,软件在全屏状态下只能在左侧最多显示28个样品的名称。
当达到显示最大数量时,样品列表就会显现一个下拉框。
光谱图上的区域能够被放大,点击鼠标左键,在想放大的区域拉一个框,然后再点击一下框。
要把放大的区域缩小归去,鼠标右击显示多项选择择菜单:
Autoscaleallsample-为高浓度样品设定较高的Y-轴上限,为低浓度样品设定较低的上限,来保证样品吸收光图谱完整显示。
FullDisplayallsamples-为所有样品从头设定X和Y轴值来显示全数光谱图。
SetScale-手动设定Y轴最大和最小值。
Samplelabels(仅适用于UV-Vis)-为最近的样品选择一个特定的吸收光波长,显示在光谱图中。
Samplelegend-确信是不是要显示样品的名称
数据和帐户治理
我的数据
样品检测的结果被记录在工作薄中并保留在客户指定的文件夹。
通过左侧栏我的数据任务栏来保留工作薄。
利用查询框来找到保留的感爱好的工作薄。
当我的数据任务栏被选择时在左侧栏有两个有效的工具。
选择New打开一个新的工作薄在右边突出其应用。
选择Open打开选择的工作薄并开始相关的应用。
额外的检测结果能够添加到打开的工作薄中。
在新建和打开按键下有五个快速链接能够进入存档的工作薄,然后显示在右边栏中。
双击一个工作薄打开文件,并可让其他的检测结果附加到工作薄中。
注意:
若是要把一个样品的检测结果加到一个工作薄中,在进行样品检测前必需把“添加到报告”键选上。
Report
报告是用户定制型的显示样品结果的表格。
一旦打开一个应用或用户方式,就能够够看到报告任务栏,能够通过点击任务栏来打开报告。
被选择了报告任务栏后,在右栏中显示以下三个设定:
●Report-在一个打开的工作薄中显示保留的样品数据。
在页面底部的报告栏中能够显示选择的样品光谱图。
若是没有选择样品,那么报告栏显示表格中第一个样品的光谱图。
能够通过选择报告表格中的的多个样品数据来显示多个光谱图。
●Configuration-选择报告栏显示的内容和顺序。
只有那些选择的栏目的信息才会出此刻导出的报告文件中。
参考以下的导出报告内容获取更多信息。
●Print-为报告添加题目和副题目。
检测的方式信息和光谱图能够随报告表格一路打印。
注意:
能够通过点击应用或检测方式显示图下面的波浪图标签来显示一个仅仅查看的报告文件。
被选择了报告任务栏,在左侧栏的顶部能够显示三个图标:
●Preview-在打印报告前预览报告。
应用选择工具栏或打印图标来显示选择的页眉和页脚信息。
参考“DateandAccountManagement”中的“Options”来获取详细信息。
●Print-开始打印一个报告。
●把报告导出为.xml,.tsv,或.tebk格式文件,特定的选项包括:
⏹Report,ExcelXMLSpreadsheet(*.xml)-把报告保留为能够利用Excel表格打开的文件。
那个保留格式只能把报告保留为表格。
在保留报告前必需配置报告显示内容。
⏹Report,TabSeparatedValues(*.xml)-把报告保留为能够用记事本或Excel文件打开的格式。
那个保留格式只能把报告保留为表格。
在保留报告前必需配置报告显示内容。
⏹Spectrum,ExcelXMLSpreadsheet(*.xml)-保留选择样品的每一个波长下的吸光值,能够在Excel表格中打开结果。
若是选择了多个样品,那么能够在Excel的多个工作表中保留每一个波长下相应的吸光值。
⏹Spectrum,TabSeparatedValue(*.tsv)-保留选择样品的每一个波长下的吸光值,能够在Excel表格或记事本中打开结果。
多个样品的结果能够别离保留在一个工作栏中。
⏹Spectra,NewWorkbook(*.twbk)-把选择的样品数据保留为一个新的工作薄,能够在NanoDrop2000/2000c软件中再打开。
⏹NDLegacy(*.tsv)-保留相应波长下的每一个吸光值,并在报告中保留调整好的特定区域。
那个功能能够在一个工作薄中保留多个样品数据并能够利用记事本或Excel打开。
在导出前必需配置报告显示内容。
注意:
Spectra,NewWorkbook(*.twbk)和NDLegacy(*.tsv)在动力学检测时不能利用。
若是电脑不能识别.xml文件为Excel,能够通过Excel打开这些文件。
向以前的工作薄中添加数据
若是在一个工作薄打开时关闭软件,会显现一个信息为你是不是想把数据添加到工作薄中,如此下次打开那个应历时就能够够显示这些信息。
通过我的数据工具栏来感动工作薄,如此能够在软件关闭前把数据添加到关闭的工作薄中。
在做蛋白定量实验时,建议在添加新结果到工作薄之前,依照操作说明成立一个标准曲线。
从头处置
在某些应用模式下,在左侧栏的顶部有从头处置工具。
那个工具能够基于不同的基线校准波长,浓度单位或样品类型对样品从头进行浓度计算。
那个功能不能用于重命名的样品。
从头处置栏能够在报告内容配置栏上选取。
注意:
从头处置的样品数据将作为一个新的数据出此刻当前报告中,从头处置数据可不能备份倒自动保留的工作薄中。
重命名一个样品
任何时刻都能够在报告中修改样品的名称。
注意:
样品名称的修改可不能反映到自动保留的文件中。
自动保留文件
除动力学检测结果,其他所有结果都自动存档为Autosavefile(*.twbk),存档位置依托于电脑的操作系统。
Vista:
C:
\Users\Public\PublicDocuments\Thermo\Autosave\(SoftwareApplication)
XP:
C:
\Documentsa
- 配套讲稿:
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- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
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