食品化学实验指导书.docx
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食品化学实验指导书
实验一食品水分活度(Aw)的测定
一、实验目的
通过实验,进一步加深对水分活度概念的理解,掌握水分活度测定仪的使用和食品水分活度的测定方法。
二、实验原理
食品中的水是以自由态、水合态、表面吸附态等状态存在。
不同状态的水可分为两类:
由氢键结合力联系着的水分称为结合水;以毛细管力联系着的水称为自由水。
自由水能被微生物利用,结合水则不能。
一般食品水分测定方法定量测定所得为含水量,不能说明这些水是否都能被微生物所利用,对食品的生产和保藏均缺乏科学的指导作用;而水分活度则反映食品与水的亲和能力大小,表示食品中所含的水分作为生物化学反应和微生物生长的可用价值。
水分活度近似的表示为在某一温度下溶液中水蒸气分压与纯水蒸汽压之比。
拉乌尔定律指出,当溶质溶于水,水分子与溶质分子变成定向关系从而减少水分子从液相进入汽相的逸度,使溶液的蒸汽压降低,稀溶液蒸汽压降低率与溶质的摩尔分数成正比。
水分活度也可用平衡时大气的相对湿度(ERH)来计算。
故水分活度(Aw)可用下式表示:
Aw=p/p0=n0/(n1+n0)=ERH/100
式中p—样品中水的分压;p0—相同温度下纯水的蒸汽压;n0—水的摩尔数;n1—溶质的摩尔数;ERH—样品周围大气的平衡相对湿度(%)。
水分活度测定仪主要是在一定温度下利用仪器装置中的湿敏元件,根据食品中水蒸气压力的变化,从仪器表头上读出指针所示的水分活度。
本实验要求掌握利用水分活度测定仪器测定食品水分活度的方法和了解食品中水分存在的状态。
三、实验材料、试剂和仪器
苹果块,猕猴桃果脯,面包,饼干;氯化钡饱和溶液;水分活度测定仪。
四、实验内容
⑴将等量的纯水及捣碎的样品(约2克)迅速放入测试盒,拧紧盖子密封,并通过转接电缆插入“纯水”及“样品”插孔。
固体样品应碾碎成米粒大小,并摊平在盒底。
⑵把稳压电源输出插头插入“外接电源”插孔(如果不外接电源,则可使用直流电),打开电源开关,预热15分钟,如果显示屏上出现“E”,表示溢出,按“清零”按钮。
⑶调节“校正Ⅱ”电位器,使显示为100.00±0.05.
⑷按下“活度”开关,调节“校正Ⅱ”电位器,使显示为1.000±0.001
⑸等测试盒平衡半小时后(若室温低于25℃,则需平衡50分钟),按下相应的“样品测定”开关,即可读出样品的水分活度Aw的值(读数时,取小数点后面的三位数)。
⑹测量相对湿度时,将“活度”开关复位,然后按相应的“样品测定”开关,现实的数值即为所测空间的相对湿度。
⑺关机,清洗并吹干测试盒,放入干燥剂,盖上盖子,拧紧密封。
五、注意事项
⑴在测试前,仪器一般用标准溶液进行校正。
下面是几种常用盐饱和溶液在25℃时的水分活度的理论值(如果不符,要更换湿敏元件)。
氯化钡(BaCl2.2H2O)0.901;溴化钾(KBr)0.842;氯化钾(KCl)0.807;氯化钠(NaCl)0.752;硝酸钠(NaNO3)0.737。
⑵环境不同,应对标准值进行修正。
温度(℃)校正数温度(℃)校正数
15-0.01021+0.002
16-0.00822+0.004
17-0.00623+0.006
18-0.00424+0.008
19-0.00225+0.010
20±0.00126
⑶测定时切勿使湿敏元件沾上样品盒内样品。
⑷本仪器应避免测量含二氧化硫、氨气、酸和碱等腐蚀性样品。
⑸每次测量时间不应超过一小时。
六、思考题
1、食品水分活度测定的原理是什么?
2、水分活度(Aw)与食品贮藏稳定性的关系。
实验二果胶的提取及果冻制作
一、实验目的
通过实验,进一步加深对果胶特性的理解,掌握果胶的一般提取方法和技术,了解果胶的应用。
二、实验原理
果胶是高分子糖类化合物,是一种植物性天然交替物质,广泛地存在于苹果、山楂和柑桔类等的果实及其它植物体内。
果胶在植物体中,以原果胶、果胶和果胶酸二种形式存在。
原果胶用稀酸处理或与果胶酶作用时可转变为可溶性果胶。
可溶性果胶的基本结构是多聚半乳糖醛酸,其中部分羟基被甲醇脂化为甲氧基。
一般植物中的果胶甲基含量,约占全部多聚半乳糖醛酸结构(包括被脂化的羟基)的7~14%,甲氧基含量高于7%的果胶,称为高甲氧基果胶,即普通果胶。
普通果胶中甲氧基含量越多,胶冻能力越大。
甲氧基含量低于7%的果胶,称为低甲氧基果胶,几乎无胶凝力但有多价金属离子如Ca2+、Mg2+、Al3+等存在时可生成凝胶,多价离子起到果胶分子交联剂的作用。
果胶为白色淡黄褐色粉末,溶于水成粘稠状液体,对石蕊试纸呈酸性。
果胶与适量的糖和有机酸一起煮,可形成柔软而有弹性的胶冻。
基于此特性,所以果胶在食品工业中具有用来制造果酱、果冻、巧克力、糖果等食品,也可用作冷饮食品、冰淇淋、雪糕等的稳定剂。
在医药上果胶可作为肠出血的止血剂,低甲氧基果胶能与金属离子形成不溶于水的化合物,因而果胶又是铅、汞、钴等金属中毒的良好解毒剂。
三、实验材料、试剂和仪器
干桔皮;0.1NHCl;95%C2H5OH;白糖;柠檬酸;500mL烧杯2只;10mL1只;表面皿6cm1块;干燥器、抽滤瓶1只;布氏漏斗1只;龙头布袋一只;电炉;滤纸φ=7.0cm;研钵、量筒100mL1只;10mL1只。
四、实验内容
(一)果胶提取
称取干桔皮15克,用水洗净,稍软,剪碎,置于600mL烧杯中加水150~200mL煮沸10分钟(去除糖类、色素、苦味等)弃去水,用冷水反复漂洗残渣,挤干后称重,置500mL烧杯中,加残渣3倍量0.1NHCl煮沸10分钟,趁热用尼龙细布袋(布袋用水浸湿挤干),挤压布袋使滤渣挤干,弃去滤渣,把布袋洗净后将滤液再滤一次,把滤液浓缩至50mL,冷却,滤液中加95%乙醇至混合液中乙醇浓度达60%止,用玻璃棒搅匀,得到胶体溶液。
用布氏漏斗吸滤得到果胶沉淀把果胶转移到烧杯中用少量95%乙醇洗涤,吸滤(重复一次),把果胶转移到滤纸上,用滤纸吸干,搓碎后放表面皿于干燥器中过夜,也可用烘箱烘干,用研钵研磨后得果胶粉,计算得率。
(二)果冻制作
称取自制果胶0.2克于50mL烧杯中,加水3mL,加热使果胶溶解,加蔗糖3克搅匀,放至数小时后即得凝胶,(果胶的凝胶,需在酸性介质中,pH值为2.8~3.3胶凝作用最好,若果胶酸度不够,可以加柠檬酸加以调节。
)
五、思考题
1、如何提高分离果胶的产率和质量?
2、通过制作果冻的实验,你能看出果胶质量的高低吗?
应当做什么检验才能通过果冻品质来判断果胶质量?
实验三羧甲基纤维素的制备
一、实验目的
通过羧甲基纤维素的制备,加深对多糖高聚物—纤维素性质及其改性加工等知识的理解;进一步熟练机械搅拌、同流加热、过滤、洗涤、干燥等操作技术。
二、实验原理
羧甲基纤维素(缩写CMC)是由天然纤维素经过化学改性而得到的具有醚结构的一种纤维素衍生物。
因其不溶于水,所以常用的其钠盐,即羧甲基纤维素钠(缩写CMC-Na),习惯上仍简称CMC。
CMC是白色或微黄色粉末,无色无味,有吸湿性,不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂,溶于水,在水中形成透明胶体,CMC的许多用途,就是根据这一性质决定的。
CMC是一种用途广泛的精细化工产品。
它广泛用于食品,医药,纺织印染、石油钻井、造纸、化妆品、制革、和陶瓷等工业方面,可以作为上浆剂,上光剂,路化剂、调厚剂、悬浮剂、稳定剂、粘和剂、结晶生成的防止剂等。
工业生产CMC的原料多采用棉纤维,实验室可用滤纸或脱脂棉制备CMC,若改用稻草、纸浆或废棉花制备CMC更具有实用价值。
纤维素是β-D-葡萄糖以1,4甙键连接形成的高聚物,每个葡萄糖链接上有3个极性烃基,在碱的作用下生成碱纤维素。
[C6H7O2(OH)OH]n+nNaOH—→[C6H7(OH)2ONa]n+nH2O
碱纤维素在碱性环境中与氯乙酸发生醚化反应,变得CMC-Na。
[C6H7O2(OH)2ONa]n+nClCH2COOH—→[C6H7(OH)2OCH2COOH]n+nNaCl
三、实验材料、试剂和仪器
纯净棉花(或造纸浆泊)、95%乙醇、75%乙醇、26%氯乙酸酒精溶液、30%NaOH、乙酸。
三颈瓶(25mL)、电动搅拌器、冷凝管、滴液漏斗、水浴锅、热水漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、烧杯、锥型瓶、克式烧瓶、水泵。
四、实验内容
在三颈瓶中放入4g棉花,加入75%酒精100mL,搅拌。
在剧烈搅拌下通过滴液漏斗缓缓加入30%NaOH40mL,水浴回流温热(30~35℃)并搅拌30min。
乙醇可促进碱对纤维的渗透与扩散。
碱化过程温度不超过35℃,以防止碱纤维发黄。
待碱纤维冷却至室温后通过滴液漏斗加入12.5mL氯乙酸酒精溶液,在55℃水浴中搅拌回流45min,而后将温度升至70℃,回流加热搅拌1.5h。
反应温度过高过低都不好,偏低回影响转化率,偏高则影响成品的吸水性及粘性。
取小试样,能容于水,说明反应完成。
用乙酸调节反应液的pH至7~8。
酸不可过量,否则成品久置会变成溶于水的羧甲基纤维素。
趁热过滤,弃去滤液。
将制成的CMC-Na粗制品移入烧杯,在50℃水浴中加入95%乙醇100mL调成浆状,过滤,用少量95%乙醇洗涤(15mL×2),直至产物不含NaCl(检验!
)。
将产物在80℃水浴中减压蒸馏,回收乙醇,烧杯中便为白色粉末状CMC-Na纯品。
五、思考题
1、本实验制备羧甲基纤维素的原理是什么?
2、实验成功的关键在哪里?
3、使用氯乙酸等要注意什么?
实验四淀粉醋酸酯的制备及粘度测定
一、实验目的
通过实验,进一步加深对淀粉改性相关知识的理解;掌握淀粉改性的常用方法和实验操作技术,以及改性淀粉粘度的测定方法。
二、实验原理
通过化学、物理和生物化学等方法来改进淀粉的特性,以强化或抑制淀粉的某些原有特性或增添新的特性,称淀粉改性。
淀粉改性及其应用有助于发展淀粉深加工,提高淀粉的经济价值。
用乙酸酐对淀粉进行酯化,制备淀粉醋酸酯,是淀粉改性中常见的一种。
其一般的反应式如下:
酯化反应一般是用试剂处理含固体量35~45%的淀粉悬浮液,而反应条件的选择是要使淀粉不胶凝,并使产物能成颗粒状分离出来。
以便于洗涤和干燥。
产物的性质与其取代度(D.S)有关(取代度是指每个脱水葡萄糖单位上取代基的平均数)。
普通商业产品是在pH7~11,25℃淀粉与乙酸酐作用得到D.S为0.5的淀粉醋酸酐。
低取代度的淀粉醋酸酯具有较低的糊化温度,并在成糊和冷却后,具有良好的抗老化性能,由于其糊状物的稳定性和透明性,在食品中常用于做馅饼、布丁、肉制品等添加剂。
高取代度产品则降低形成凝胶的能力。
对于不同种类的淀粉,在不同浓度时,将其悬浮液加热到55~80℃时,会使淀粉颗粒结合在一起的氢键减弱,并迅速进行不可逆溶胀。
发生这种现象的临界温度称为糊化温度(或胶凝温度),当对混合物继续加热和搅拌时,淀粉因吸水,体积膨胀数十倍。
继续加热,淀粉胶束全部崩溃,淀粉分子形成单分子,并为水包围,而成为液体状态,结果形成具有粘性的糊状溶液(称淀粉糊化)。
因此,淀粉悬浮液加热时测量其粘度和稠度的变化,对估计某种淀粉或改性淀粉的有用性质,是具有实际意义的。
常用粘度测定仪器来观测这些变化。
在未达糊化或胶凝温度之前,淀粉悬浮液的粘度不受温度的影响,当达到胶凝温度后,粘度则明显上升(如图1)。
因此,可用粘度开始增大时的温度来表示凝胶温度。
一般未加工的玉米淀粉的胶凝温度为62~72℃,而其衍生物则随D.S的增加,胶凝温度下降。
粘度测定:
测定液体或塑性流体的粘度有如下三种基本方法。
⑴自毛细管流出法;⑵旋转粘度计法;⑶落球、落针、升泡等方法。
图1淀粉悬浮液热煮和冷却时粘度的变化
1、流出法原理
当液体在毛细管内流动时,据Poiseuille定律,粘度为(η)为:
其中:
h为流体高度,d为密度,t为流动时间,g为重力速度,r、V、L分别为毛细管半径、容积和长度。
考虑到液体离开毛细管时还带有一些动能,此式又修正为:
其中m是一个常数,一般可当它是1,在实际中,则上式常简化为:
η=Cdt-Bd/t
其中C、B要用两种标准液体校正求得。
对于流出法,液体流出的小孔实际上是一根极短的毛细管,但流动条件不符合Poiseuille定律所假定的条件,所以不能用Poiseuille定律直接计算粘度,而用上述获得相对粘度的公式的实用形式η=Cdt-Bd/t来表示其测得的粘度。
实际中让粘度计设计得B很小,t很大,于是,就直接用定量液体流出所用的秒数(t)来表示相对粘度了。
2、旋转式粘度计(NDJ-1型)原理
如图2所示,同步电机以稳定的速度旋转,连接刻度圆盘,再通过游丝和转轴带动转子旋转。
如果转子未受到液体阻力,同游丝、指针与刻度盘同速旋转,指针在刻度盘上指出的读数为“零”。
反之,如果转子受到液液体的粘滞阻力,则游丝产生扭矩,与粘滞阻力抗衡最后达到平衡,这时与游丝连接的指针在刻度圆盘上指示一定的读数(即游丝的扭转角)。
将读数乖以特定的系数即得到液体的粘度(mpa·s)。
粘度计算如下:
η=k·α
式中:
η是绝对粘度;K是系数(由系数表中查取);α为指针所指读数(偏转角度);
三、实验材料、试剂和仪器
玉米淀粉;乙酸酐;3%NaOH;2MHCl
250mL三颈瓶;滴液漏斗;电动搅拌器;抽滤瓶;布氏漏斗;,旋转粘度计或毛细管粘度测定装置。
四、实验内容
1、淀粉醋酸酯的制备
在装有搅拌器250mL三颈瓶中加入玉米淀粉60g,水67mL,搅拌成均匀淀粉浆,滴加3%NaOH调节pH≈8,在搅拌下从滴液漏斗慢慢滴加乙酸酐6mL,同时滴加3%NaOH溶液,保持pH≈8.0~8.4,控制反应温度在25~40℃(室温),当乙酸酐加完后,继续搅拌0.5~1小时。
用2MHCl调节pH为4.5,过滤,用少量水洗涤,干燥得产品,计算产率。
2、粘度的测定
(1)流出法(毛细管粘度计):
分别称取原料淀粉和淀粉醋酸酯产品各5g,配成100mL悬浮液,搅拌均匀后放恒温水浴锅中。
分别测定60℃、65℃、70℃、75℃、80℃时液面从刻度90落到20所需的时间(或用旋转粘度计测定),每次测定前应在该温度下恒温5分钟以上,并搅拌均匀。
(2)旋转法(旋转粘度计):
同
(1)方法准备被测液体,然后将其置于直径不少于70mm的400mL烧杯中或直筒形容器中,准确地控制被测液体温度。
将保护架装在仪器上,将选配好的转子旋入连接螺杆(自左旋入装上,向右旋出卸下),旋转升温旋扭,使仪器缓慢下降,转子浸入被测液体中,使转子液面标志与液面相平为止,调整仪器水平。
按下指针控制杆,开启电机开关,转动变速旋扭,使所需转速数向上,对准速度指示点,放松指针控制杆,使转子在液体中旋转(一般20~30秒),待指针趋于平稳,(或在规定的时间内进行读数)按下指针控制杆,使读数固定下来,再关闭电机,使指针停在读数窗内,读取读数。
3、作时间—温度曲线,估计胶凝温度。
五、注意事项
1、当转速较快时(30rpm,60rpm),为了精确读数,要利用指针控制杆。
按下指针控制杆时,不宜用力过猛。
但转速较慢时,可不用控制杆,而直接读数。
2、读取读数时,当电机关停后,如指针不处于读数窗内,可继续按下控制杆,反复开启和关闭电机,直至指针能停于读数窗内,然后读数。
3、当指针所指读数值过高或过低时,可变换转子和转速,务必使读数约在30~90格之间为佳。
4、当使用0号转子低粘度液测试时,外试筒(有底)内只能注入20~25mL被测液体。
当将外试筒套入固定套筒,并用试筒固定螺钉旋紧时,必须注间试筒固定螺钉之锥端应旋入外试筒上端之三角形槽内(可以利用侧面之圆孔观察试筒三角槽是否位于圆孔中心)。
5、本仪器适于常温下使用,并在规定的频率和电压允许范围内测定,否则会影响测理精度。
6、在测定时,尽可能使仪器保持水平和稳定,而且装上转子后不得将仪器侧放或倒放。
7、不得在未按下指针控制杆时开动电机,一定要在电机运转时变换转速。
8、装上号转子后,不得在无液体情况下旋转,以免损坏轴尖。
9、每次使用完毕应及时清洗转子,但不得在仪器上进行转子清洗耳恭听,清洁后,要妥善安放于转子架内。
10、在使用过程中,应保持仪器的清洁,尤其是连接螺杆和转子连接端面及螺纹处,以及转子本身。
六、思考题
1、通过本实验,结合食品化学的有关知识,试述玉米改性淀粉有哪些特性?
2、用旋转法测粘度时,使用旋转粘度计的过程中主要应注意哪些问题?
实验五卵磷脂的提取、鉴定和应用
一、实验目的
通过实验,进一步加深对卵磷脂特性和用途等相关知识的理解,掌握卵磷脂的提取和鉴定方法。
二、实验原理
卵磷脂是甘油磷脂中的一种,由磷酸、脂肪酸、甘油及胆碱组成:
其中,R1为硬脂酸或软脂酸;R2为油酸、亚油酸、亚麻酸或花生四烯酸等不饱和脂肪酸。
卵磷脂广泛分布于动植物中,在植物种籽和动物的脑、神经组织、肝、肾上腺以及红细胞中含量较多;蛋黄中含量最丰富,高达8~10%,因而得名。
卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等,因而可以利用这些溶剂进行提取。
本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。
通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂,两者浓缩后通过离心进行分离,下层为卵磷脂。
新提取的卵磷脂为白色蜡状物,遇空气即氧化变成黄褐色,这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。
卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺,三甲胺有特异的鱼腥臭味,可以此鉴别之。
卵磷脂在食品工业中广泛用作乳化剂,抗氧化剂和营养添加剂。
三、实验材料、试剂和仪器
鸡蛋;花生油;乙醚;10%NaOH;磁力搅拌器;离心机等。
四、实验内容
1、卵磷脂的提取
取15g生鸡蛋黄(通常含水50%,脂类32%,蛋白质16%,灰分2%),于150mL三角锥瓶中加入40mL乙醚,放入磁力搅拌器,室温下搅拌提取15分钟,然后静置30分钟,上层清液于带棉花塞到50mL烧杯中过滤,往残渣中再加入15mL乙醚,搅拌提取5分钟。
第二次提取液过滤后,与第一次提取液合并,于60oC热水浴蒸去乙醚,将残留物倒入烧杯中,约可得5g粗提取物。
粗提取物进行离心(4000转/分)10分钟,下层为卵磷脂,约得2.5~2.8g。
卵磷脂可以通过冷冻干燥得无水的产物。
2、卵磷脂的鉴定
取以上提取物约0.1g,分为两份于试管内加入10%氢氧化钠溶液2mL,水浴加热数分钟,嗅之是否有鱼腥味,以确定是否为卵磷脂。
3、乳化作用
在两支试管中各加入3~5mL水,一支加卵磷脂少许,溶解后滴加5滴花生油;另一支也滴入5滴花生油,加塞极力振摇试管,使花生油分散。
观察比较两支试管内的乳化状态。
五、思考题
1、试述卵磷脂的提取原理。
2、举例说明卵磷脂有哪些重要用途?
实验六从牛奶中分离奶油、酪蛋白和乳糖
一、实验目的
要研究各种蛋白质的性质就要把它从水混合食品体系中分离出来,其它物质亦然。
通过本实验,掌握奶油酪蛋白和乳糖的分离、提取和鉴定方法。
二、实验原理
奶油是食品工业的一种重要产品和原料,从鲜奶中分离奶油仅需用离心分离,在离心场下,鲜奶中脂肪球因比重轻于水而上浮,在离心管上凝结成一层,可直接取出。
乳蛋白是完全蛋白质,含八种必需氨基酸,有胱氨酸这种含硫氨基酸,属于磷蛋白质,又是多亚基蛋白质,它的4种亚基之一K酪蛋白在钙离子浓度很宽的范围内溶解性很大,这一性质使它起着稳定酪蛋白沉淀下来。
分离出去后其它蛋白在介质调回中性后加热就可沉淀出去,清液中的乳糖则可用乙醇沉淀出来。
遵循的操作步骤如下:
首先将脱脂乳温热并加入稀乙酸使酪蛋白沉淀。
重要的是不要加热过度或使用太强的酸。
因为这些条件也会使乳糖水解成其它的组分,除去酪蛋白后剩余的乙酸用碳酸钙中和,然后将溶液加热至沸,使原溶液(脱脂乳)中溶解的其它蛋白质(主要是白蛋白)变性沉淀,过滤掉这些沉淀后,滤液进行浓缩,于浓缩液中加酒精,并将溶液脱色,用真空过滤使溶液通过助滤剂后,α-乳糖便在冷却时结晶析出,杂质可用活性炭及助滤剂吸附去除。
三、实验材料、试剂和仪器
鲜牛奶(经过巴氏杀菌);电炉1台;天平1台;离心机1台;试管架1个;500mL、100mL烧杯各2个;试管5支;抽滤装置1套;玻动搅棒2个;滤纸1盒;冰箱;
1:
10乙酸溶液,取10mL冰乙酸,溶解到90mL水中;碳酸钙(原包装);95%乙醇(原瓶);活性炭(原包装);硅藻土;2%醋酸铅溶液;浓硝酸;乳糖、半乳糖和葡萄糖少许。
米伦试剂:
按重量溶解1份于2份量硝酸(比重1.42)中,再用2倍体积水稀释之。
注意:
配制的作用剧烈,应少量配制,容器亦大,缓慢操作,并应于通风设备中操作。
四、实验内容
1、从牛奶中分离生奶油
取400mL鲜奶,分装于四支离心管中,在台秤上称量,使每管重量相等,插装在离心机的离心管架中,在4000转/分钟的速度下离心5~10分钟,直到奶油层完全形成,然后用小钢勺轻轻将生奶油取出。
并将四份奶油合并,装入一烧杯中,后放入冰箱冷冻层待用。
2、从牛奶中分离酪蛋白
取600mL烧杯一只,注入已撇除脂肪球(或已离心脱脂过)牛奶200mL,在水浴锅上温热此牛奶至约40℃,用吸移管逐滴加入乙酸溶液,直至酪蛋白不再析出,不要加入太多酸(如果酸加入太多会影响乳糖的收率),搅拌生成的酪蛋白,直至形成无定形的大块状物质,用搅棒或粗过滤的方法将酪蛋白移动到另一个烧杯中,母液中立即加3.5克碳酸钙,并将其搅拌几分钟,留于分离乳糖。
将酪蛋白所在的那只杯中物质真空抽滤,去掉多余液体,然后用面巾纸将酪蛋白吸干,然后在空气中自然干燥一天(也可以在105℃烘干),计算产率。
3、酪蛋白的鉴定
米伦氏实验原理为:
将所得酪蛋白稀释20倍,取稀释蛋白液5mL于试管中,滴加米伦试剂3~4滴,搅匀,在小火焰上加热至沸。
最初所见的白色沉淀是白色蛋白质汞盐。
在受热后则徐徐转为红色,若不显色或红色较淡,可再加米伦试剂几滴,但也应避免过多加入而产生黄色,黄色并非阳性的反应。
4、含硫氨基酸
在高温和碱性条件下胱氨酸残基分解产生H2S,而可溶性铅盐可与它产生黑色硫化铅。
取一份酪蛋白的20倍稀释液,加入2滴醋酸铅溶液。
用10%KOH调至溶液为碱性,加热至沸如出现黑色沉淀,则为阳性。
5、从牛奶中分离乳糖
把从2实验中留下的混合物加热,使平稳沸腾约3~4分钟,这一加热过程使白蛋白近乎完全沉淀,将热的混合物真空过滤以除去白蛋白和残余碳酸钙。
倒入600mL烧杯中,加热浓缩至溶液剩余约30mL,借助插几根细搅棒以防止暴沸,暴沸是由于白蛋白进一步沉淀而造成,要避免加热过于剧烈而引起起泡和溢泛。
于热溶液中加95%乙醇100mL(不准有明火)再加1~2克活性炭,混匀后,用温和的真空抽滤使热溶液通过一层预先湿透的助滤剂(硅藻土),如果滤液不清,再过滤至清,应把快速生成的乳糖结晶造成的浑浊和抽滤不净造成的浑浊区分开。
滤液转入一锥形瓶,加上塞,静置放到下次实验,然后把清液滤去,乳糖结晶刮下后称量计算产率。
6、半乳糖、乳糖的粘酸实验
半乳糖、乳糖和葡萄糖一样是还原糖,但其它还原不能生成粘酸,原理如下:
粘酸不溶于反应混合物而沉淀析出,葡萄二酸较易溶于氧化介质中,不产生沉淀。
于四支试管分别加入0.2克的乳糖制品,0.2克乳糖,0.1克葡萄糖和0.1克半乳糖,各试管中加入2mL水使固体溶解,必要时加热助溶,然后冷却后各管加2mL浓硝酸,于通风橱中(因有氧化氮生成)置试管于沸水浴内加热1小时,含乳糖、半乳糖的试管产生粘酸沉淀,这将在溶液自然冷却并使用玻棒摩擦试管壁后静放一周后来观察,是粘度酸再加2mL水也不溶。
7、奶油的转化
将冰箱中的奶油取出,在室温下稍放置一段时间使其温度达到约8~10℃,然后用搅棒不断搅打奶油,搅打时要不断观察奶油的变化,记录出水以前奶油的表现性状,继续搅打到出水后,
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