当前猪瘟存在的问题.docx

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当前猪瘟存在的问题

◆当前我国猪瘟防治中存在的问题和对策

◆我国是世界上养猪最多的国家，历来十分重视猪病的防制和研究，在猪病中，猪瘟（Hogcholera,HC）危害最大，最受重视的一种病。

建国初期，何正礼、方时杰等选用抗原性优良的石门系毒株研究改进制成的猪瘟结晶紫疫苗效果明显，广泛应用后对控制当时猪瘟的流行曾起过一定作用。

1956年周泰冲、袁庆志等研制成功的中国系（C系）猪瘟兔化弱毒疫苗，证明有高度安全性和优良的免疫原性，且无残毒，毒力不返强，自1957年起，除在我国广泛应用外，并已推广到欧亚很多国家，使这些国家控制或消灭了猪瘟。

该疫苗被公认为目前世界上比较理想的猪瘟疫苗，这是我国兽医科学工作者的一大杰出贡献。

我国在猪瘟免疫程序，免疫诊断、免疫监测以及猪瘟病毒的跗变异等方面的研究都取得了显著成果。

◆猪瘟具有高度接触传染性，流行广泛，发病率、死亡率高，危害极大。

国际兽疫局（OIE）将之列为A类16种法定传染病之一，我国亦将这列为一类动物传染病。

由于猪瘟造成的经济损失严重，促使很多国家制定和执行猪瘟的防制和根除计划，并在欧美20多个国家取得成功。

但目前世界上仍有40多个国家和地区有猪瘟流行，近年来在一些原已宣布消灭猪温的欧洲国家（荷兰、比利时、英国、德国、意大利、西班牙等）又相继复发，我国一些地区的猪温发病率亦有上升的趋势。

目前在各国的HC流行中，除典型的病例外，HC流行和发病的特点已发生了很大变化，这种变化是世界性的。

如上世纪60年代英国在扑灭HC的过程中就证明大部分HC病例属于温和型或隐性感染；我国在70年代后期也发现HC的流行形式发生了很大变化。

由于多年实施以免疫预防为主的HC防制策略起到了决定性作用，有效的控制了HC在我国的急性发生和大流行，使流行形式转变为地区性散发流行，疫点显著减少，多局限于所谓“猪瘟不稳定地区”。

病程由急性变为慢性过程，临床症状由典型变为非典型的温和型HC，症状显著减轻，发病率不高，疫势较缓和，死亡率减低，仔猪死亡率较高，成年猪较轻或可耐过，病理变化也不特征。

由于病原毒力降低，出现持续感染（亚临床隐性感染）、胎盘垂直感染（仔猪先天性感染），妊娠母猪带毒综合征（母猪毓障碍）及新生仔猪的免疫耐受等。

这些带毒病猪的存在，成为猪瘟发生的祸根，尤其是亚临床感染猪，依靠常规方法很难确诊并剔除此类病猪，从而给HC的防制工作带来新的困难。

在出现这些现象的地区和猪场，往往还伴随有多种原因引起的免疫失败，严重威胁养猪业的健康发展。

●生猪和肉品市场流通频繁，检疫不严，防疫密度不够是HC传播流行的重要因素：

近年来集体、个体养猪发展迅速，使猪的自由贸易增多，大量生猪频繁调动常可使HC隐性感染猪在全国范围内流传，猪群中新引进的外表健康带毒仔猪常是引起HC流行的一个主要原因。

为私利驱动，宰杀和贩卖病猪肉，养猪场病死猪处理不当，加以执法检疫不严，使病猪肉产品在市场流通，也是HC广泛传播的重要原因。

我国虽早已公布实施《动物防疫法》（1998），但其配套的实施细则尚未出台，使很多防疫、检疫措施难以到位。

加以执法主体多头，各自为政、互相扯皮、分割执法，既不符合国际惯例，又不利于疫病的控制和消灭。

此外，一些基层兽医站组织焕散，技术观念落后，重治轻防，防疫密度不够，阳易促使HC传播流行。

●病原的遗传变异：

弱毒疫苗的普遍使用改变了HCV原有的生态环境和病毒群落，从70年代末开始，全世界HC流行的特点均发生了重大变化，以温和型HC为主。

而近年来我国又出现了HC疫情的反弹现象，许多猪场的免疫猪群频繁发病。

因此，了解HCV的贵传变异情况，了解HCV疫苗毒与现流行毒之间的差异，对于防制HC是十分重要的。

◆1986年Lowings对世界上20多个国家的115株HCV进行了序列比较、中和单抗反应性及内切酶分析后，将115株毒划分成2个群（或血清亚型）。

血清型I有2个亚群，主要包括Brescia株（荷兰），疫苗毒株和60年代流行毒；血清型Ⅱ有3个亚群，主要包括Alfort株（德国）和近10年来的流行毒。

在此基础上，1999年Sakoda通过对40余株HCV流行毒的序列分析，将HCV分为三群：

HCV-1称为古典HCV，以Brescia株为代表；HCV-2以Alfort株为代表；HCV-3与上述2个群均有较大差异，包括日本、泰国和中国台湾等地70~90年代的流行毒株。

◆我国开展HCV分子流行病学的研究工作虽然较迟，但在兰州兽医研究所和解放军军需大学等研究单位的不懈努力下，可反映我国HCV遗传发生关系全貌的系谱图已日渐清晰。

军需大学兽医研究所采用RT-PCR方法，从我国10个省、市、自治区收集23个HCV流行毒株中，扩增了HCVE2基因中主要抗原位点编码区。

对各扩增片段进行了序列测定，通过计算机分析构建了系统发生树，并确定了它们之间的遗传相关性。

结果表明，23个流行毒株中的18株属基因Ⅱ群，占78.26%；另外5个流行株与传统的石门系强毒，兔化弱毒株属基因Ⅰ群，占21.74%。

两群间测序区的核酸同源性只有78.9%。

此外，根据序列差异程序将基因Ⅱ群流行株分为3个亚群，各基因群HCV在地域分布上未发现明显的特征性。

该研究初步揭示了我国较大范围内流行株在地域分布的多样性。

半州兽医研究所的研究结果同样表明，我国和世界其他国家一样，近年来HCV流行毒已呈远向疫苗毒的方向演变，近期HCV流行毒与古典HCV之间已有较大差异（核酸和氨基酸同源性分别为82.2%~84.3%和87.9%~90.4%）。

◆但根据中国兽药监察所进行猪瘟兔化弱毒疫苗对不同HCV野毒株的免疫保护相关性研究结果表明：

虽然在我国不同地区所分离的HCV野毒株在其病原生物学上有所差异，但用我国目前使用的猪温兔化弱毒疫苗免疫的猪完全能够抵抗这些野毒的攻击。

结果再一次证明：

我国现用的猪温兔化弱毒疫苗对预防目前流行的HCV是完全有效的。

●疫苗的质量问题：

我国研制的中国系（C系）猪瘟兔化弱毒是国际公认的最佳疫苗用株，很多欧亚国家采用了C系弱毒苗有效的控制了HC流行，但在我国近年来常有免疫失败的报道，其原因虽然很多，但疫苗的质和量有重要的影响。

疫苗免疫效果通常以防止临床感染为标准，应用这一标准时，常有部分猪免疫后，抗体水平不能达到防止亚临床感染水平，这部分猪感染强毒后常可引起亚临床感染。

此种亚临床感染猪虽无明显症状，但在其存活期终生带毒、散毒，为HCV主要储存宿主，部检可见胸腺萎缩，淋巴结肿大，有这些猪存在，即可形成HC常发地区。

因此，专家们提出，疫苗应以能保护防止亚临床感染为标准。

◆用不同剂量的C株苗免疫猪，证实免疫剂量与保护水平密切相关。

剂量不足时，攻毒后不能阻止强毒在体内复制和带毒。

免疫剂量提高到80~100PD50（约320~400RID），攻毒后能制止亚临床感染，所有耐过猪均不带毒。

目前欧洲为消灭HC亚临床感染，多采用加大免疫剂量的方法。

欧洲药典规定用C株疫苗免疫时，肌肉注射剂量为100PD50（400RID）。

我国猪温细胞苗出厂检验以5万倍稀释能致兔体热反应为合格，即每ml原液含5万RID。

规定的免疫剂量为150RID，折算为37PD50。

这一剂量远低于国际标准，显然在HC不稳定地区应用这一剂量，不足以切断HC亚临床感染引起的恶性循环。

◆猪瘟病毒（HCV）和牛病毒性腹泻病毒（BVDV）两种瘟病毒之间有较密切的抗原性和血清学关系，两者同源性很高，能互相诱导一定程度的同源病毒抗体。

在西欧国家，猪BVDV的感染率很高（20%~40%），BVDV感染妊娠母猪可引起繁殖障碍，病毒可经胎盘传染胎儿，使所产仔猪构成亚临床感染。

据国内生产厂家反映，用家兔测定牛睾丸原代细胞生产的猪瘟兔化弱毒疫苗效价时，各批次间相差悬殊，究其原因有多种，但其中最值得注意的是瘟病毒（BVDV）污染。

因为瘟病毒在体外培养大多不产生CPE，故不易引起检验人员注意。

污染主要来源是小牛血清，从瘟病毒先天感染的小牛分离的血清含有感染性病毒，常规的热灭活又不能确保瘟病毒灭活，用BVDV污染的HC疫苗免疫母猪后，仔猪发生类似先在性HC感染，死亡率增加，因此给生产造成很大损失。

◆疫苗的运输、保存、使用不当，亦易影响免疫效果。

猪瘟冻干苗应在低温条件下运输和保存，稀释后应立即使用，不能存放过久。

曾在夏季一个市场防疫注苗点试验，早晨刚稀释的疫苗经检验完全符合出厂标准，即每头份含150个兔体反应量（RID）但到傍晚，自注苗点抽检最后剩下一瓶稀释的疫苗检测，每一头份只有15个兔体反应量，在一天中效价已损失90%，因此稀释后的疫苗如不能立即用完，应放在冰瓶内低温保存。

此外，疫苗注射操作过程中的失误，如使用夫真空的疫苗或过有效期的疫苗；消毒不严，造成潜伏期病毒的传播等都会影响疫苗的免疫效果。

●免疫程序问题：

我国各地对HC的防制工作一般都很重视，但有些地区仍时有HC暴发流行，免疫失败的现象也常有发生。

其原因除免疫剂量不够，免疫复盖率偏低以外，免疫程序不尽合理也是一个重要因素。

为了寻求更加科学、合理、有效的猪瘟免疫程序，各地进行了大量试验研究。

免疫程序的关键是排除母源抗体干扰，确定合适的首免日龄。

门常平等（1982）报道母猪在配种前免疫接种的所产仔猪血中母源抗体的中和效价，3~5日龄时约为1:

60~128。

母源抗体的半衰期约10天，仔猪20日龄前可行到母源抗体的保护，25日龄后保护力下降，至40日龄已完全丧失对强毒的抵抗力，45日龄前后母源抗体效价已降至1:

4~8。

猪瘟疫苗的仔猪首免日期最好选定在仔猪保有的母源抗体不会影响疫苗的免疫效果而又能防御病毒感染的期间，即母源抗体为1:

8~64之间时，因此提出25日龄和65日龄两次免疫的建议，此种免疫程序目前已为多数猪场采用。

如在母源抗体效价尚高时接种疫苗，即会被母源抗体中和掉部分弱毒，阻碍疫苗弱毒的复制，仔猪就不能产生坚强的主动免疫力。

●其它免疫抑制疾病的影响：

一些其它常见疾病如猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）在猪群中的存在，会使猪体免疫力下降，从而影响HC的免疫保护力。

PRRS所引起的最显著病理变化是严重损伤肺泡巨噬细胞，造成其大量破坏，并伴有循环淋巴细胞及粘膜纤毛清除系统的破坏，从而抑制免疫力，使猪对各种继发感染易感。

PRRS感染产生的免疫抑制，也可以恶化慢性传染性疾病，并使猪对其它疾病如猪瘟等各种疫苗的免疫应答下降，造成免疫失败。

●针对以上存在问题，我国为有效控制和消灭HC可采取如下对策。

●加强HC诊断和免疫监测：

典型HC可主要根据临床症状和病理变化作出诊断，实验室诊断为辅助手段。

非典型HC由于症状不明显和缺乏特异性特征，通常需取决于实验室诊断。

◆实验室诊断目前常用的方法有：

（1）冰冻组织切片（或触片）的直接荧光抗体（FA）试验，许多国家和地区已将该法作为执行消灭HC规划的法定诊断方法。

此法简便、快速、可靠。

作为FA试验的样品应采自病死猪的扁桃体、脾、肾或回肠末端。

（2）将病猪扁桃体和脾制成20g/L的混合匀浆后接种PK-15细胞，24—72h以后用FA试验或酶标抗体检查证实培养物中的病毒（HCV无CPE）。

此种病毒分离方法比FA更为敏感。

（4）间接法酶联免疫吸附试验，可作为HCV感染猪血清抗体的检测与分析。

（5）为区分HCV和BVDV需借助单克隆抗体技术和核酸探针技术。

◆为了弄清群体的免疫水平和疫苗免疫效果。

必须加强HC免疫监测。

杜念兴等（1998）建立的PPA—ELISA，曾对抗体不同水平的猪进行攻毒保护试验，结果0D490值在0.3以上100%保护，≥0.17~0.3之间者，保护率在75%左右。

据此制定了群体总保护率的估算公式：

◆免疫良好的免疫群体保护率多在90%以上，总保护率小于50%者为免疫无效或HC不稳定地区，需加强免疫或采取措施消除不稳定因素。

◆总之，做好免疫监测是减少我国HC发生的重要手段。

应用免疫检测可随时掌握猪群的免疫状态，制定适合于该猪场合理的免疫程序，并随时淘汰免疫耐受猪（疫苗接种后不产生或仅产品低水平抗体的猪），保持猪群的整体免疫。

此外，结合HCV抗原检测，坚决淘汰隐性