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杏鲍菇菌种培养基配方筛选研究论文
杏鲍菇菌种培养基配方筛选研究
摘要:
本文研究了杏鲍菇不同的母种、原种和栽培种培养基对菌丝生长的影响。
结果表明,不同配方的各级菌种培养基上杏鲍菇菌丝的生长存在明显差异,其中菌丝生长速度最快的母种培养基为配方6和配方4,而且长势良好,洁白浓密;菌丝生长速度最快的原种、栽培种培养基为配方1(麦粒培养基),但是麦粒菌种成本高,老化快,不耐贮放,而配方7和配方8上的菌丝不仅生长速度快,同时菌种成本低,老化慢,较耐贮放,在生产上更为实用。
关键词:
杏鲍菇;菌丝生长速度;菌丝长势;培养基配方筛选
杏鲍菇(Pleurotuseryngii)隶属担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属[1]。
其子实体菌肉肥厚,质地脆嫩,风味极佳,口感独特,而且药用能提高免疫力,有抗癌,降血脂,润肠胃,美容的效果[2],早已受到国内外消费者的青睐。
我国20世纪90年代开始从国外引种栽培,商业化栽培规模尚小,技术仍不完善,远不能满足市场需求,有广阔的发展前景。
目前对杏鲍菇的研究主要限于其生物学特性,菌种选育和栽培技术等方面[2-6],对生产上杏鲍菇各级菌种配方的研究尚未见报道。
而目前生产上杏鲍菇菌种的制备过程中明显存在菌丝生长速度慢、长势弱等问题,本文旨在通过对杏鲍菇各级菌种不同培养基配方的比较研究来探讨生产上适用的杏鲍菇菌种培养基优良配方,从而推动杏鲍菇栽培业的发展。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
杏鲍菇3号。
1.2 试验设计
1.2.1母种培养基配方本试验初步选择8种母种培养基配方进行比较研究,筛选适合杏鲍菇母种生长的培养基。
其中配方1(PDA培养基)为生产上常用的一种通用培养基,作为对照。
各培养基配方组成见表1。
表1母种培养基配方的组成
Table1Theformulacompositionsofmotherculturemedia(g/1000mL)
培养基编号
No.ofmedium
土豆
Potato
棉籽皮
Cottonseedhull
木屑
Sawdust
杏鲍菇出菇料
Full-myceliasubstrateofP.eryngii
麸皮
Wheatbran
葡萄糖
Glucose
琼脂
Agar
蛋白胨
Peptone
1
200
20
20
2
200
20
20
5
3
100
100
50
20
20
2
4
100
100
50
20
20
8
5
100
100
50
20
20
15
6
100
100
50
20
20
8
7
200
20
20
5
8
200
20
20
15
注:
除配方1外其它各处理中均要加入KH2PO43g,MgSO41.5g,维生素B12片。
1.2.2 原种、栽培种培养基配方本试验选择8种生产上常用的原种、栽培种培养基配方进行比较研究,筛选适合杏鲍菇原种、栽培种生长的配方,以最为常用的配方4作为对照。
各配方组成见表2。
表2原种、栽培种培养基配方的组成
Table2Theformulacompositionsofstockculturemedia%
培养基编号
No.ofmedium
麦粒
Wheatgrain
棉子皮
Cottonseedhull
木屑
Sawdust
麸皮
Wheatbran
玉米面
Cornmeal
蔗糖
Sucrose
石膏
Calciumsulfate
1
98
2
2
65
33
2
3
87
10
1
2
4
82
15
1
2
5
82
10
5
1
2
6
77
20
1
2
7
41
41
15
1
2
8
82
15
1
2
注:
配方1和2中的麦粒前处理:
先将麦粒用冷水浸泡12h后水煮,开锅后小火再煮20min左右,使麦粒充分煮透,胀而不破,切开后无白心,用水冷却后沥水摊开,晾干表面水分,将石膏拌入麦粒即可装瓶。
1.3 试验方法
1.3.1 不同母种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响母种培养基以常规方法配制后进行分装,每个配方5个φ90mm*18mm的培养皿,每皿分装培养基15mL,制成平板培养基,常规灭菌后等量接种(8mm菌丝圆片),然后置于25℃恒温培养箱中培养,每2d标记测量1次菌丝生长量,并把各配方培养基上的菌丝生长情况进行观察比较,当有一种配方的菌丝长满培养皿时,停止试验。
1.3.2 不同原种、栽培种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响采用750mL的罐头瓶,每个配方分装10瓶,装至瓶肩处,料水比例为1﹕1.3~1.5。
按常规方法灭菌后接种,每管母种接4瓶原种,然后置于25℃恒温培养箱中培养,定期观察菌丝生长情况,并记录菌丝长满瓶的天数。
2 结果与分析
2.1不同母种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响
测定平板培养基上菌丝8d的生长量,算出平均生长速度,并记录菌丝生长情况(见表3)。
从表3可以看出:
杏鲍菇母种菌丝在8种培养基上均能生长,但是生长速度及菌丝长势明显不同。
其中菌丝生长最快的是配方6和配方4,菌丝的生长速度分别达到5.187mm/d和5.156mm/d,而且长势良好;生长最慢的是配方7,菌丝的生长速度只有4.312mm/d,而且长势较弱。
F测验及多重比较结果表明:
各配方间菌丝的生长速度存在极显著差异,配方6和配方4上的菌丝生长速度极显著得快于配方1(对照),配方7上的菌丝生长极显著慢于对照,而配方5、8、2与对照间差异不显著。
从菌丝的生长速度和生长势综合表现可以看出,生产上最适宜的杏鲍菇母种培养基为配方6和配方4。
表3不同母种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响及生长速度的差异显著性分析(LSR法)
Table3EffectofdifferentmotherculturemediaonthegrowthofP.eryngiimyceliaandsignificanceanalysisofdifference
培养基编号
No.ofmedium
菌丝生长速度/(mm•d-1)
Myceliagrowthrate
差异显著性
Significanceofdifference
菌丝长势
Myceliagrowthvigour
0.05
0.01
6
5.187
a
A
菌落边缘整齐,菌丝洁白浓密并扭结成菌丝团
4
5.156
a
A
菌落边缘整齐,菌丝洁白浓密并扭结成菌丝团
3
4.968
ab
AB
菌落边缘整齐,菌丝洁白浓密
5
4.906
bc
ABC
菌落边缘整齐,菌丝洁白
1
4.718
cd
BCD
菌落边缘稀疏,菌丝洁白,略显羽毛状
2
4.625
d
CD
菌落边缘稀疏,菌丝白,略显羽毛状
8
4.593
d
DE
菌落边缘整齐,菌丝白
7
4.312
e
E
菌落边缘整齐,菌丝白
注:
表中结果为4次重复的平均值。
2.2不同原种、栽培种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响
研究表明,杏鲍菇菌丝在8种原种、栽培种培养基上均长势良好,但生长速度存在明显差异,菌丝长满瓶的天数及其差异显著性分析见表4,可以看出,菌丝在配方1中生长最快,仅用15.9d就长满培养基,其次是配方7、2、8,其菌丝生长速度也较快,而在配方3和4上生长最慢,长满培养基分别用了26.6d和26.5d。
通过F测验及多重比较表明:
配方1、7、2、8、5、6中的菌丝生长速度均极显著地快于配方4(对照),其中配方1、7、2、8中的菌丝长速与配方5、6之间的差异也达极显著水平,而配方3与对照间差异不显著。
可见配方1、7、2、8为较理想的原种、栽培种培养基配方,但在实际生产中,由于麦粒种(配方1、2)成本较高,菌丝易老化,不耐贮存,而配方7和8中不仅原材料来源广泛,价格低廉,而且菌种老化慢,较耐贮放。
综合考虑可知,麦粒菌种适合于生产上急需时做快速制种,长满后要尽快用完,而配方7、8更适合用于生产上常规原种、栽培种的制备,长速较快,又能短期存放。
表4不同原种、栽培种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响及差异显著性分析(LSR法)
Table4EffectofdifferentstockculturemediaonthegrowthrateofP.eryngiimyceliaandsignificanceanalysisofdifference
培养基编号
No.ofmedium
长满天数/d
Fullspawn-runtime
差异显著性
Significanceofdifference
0.05
0.01
3
4
6
5
8
2
7
1
26.6
26.5
25.3
24.2
19.9
19.8
19.2
15.9
a
a
b
c
d
d
d
e
A
A
B
C
D
D
D
E
注:
表中结果为10次重复的平均值。
3 讨论
3.1 杏鲍菇菌丝生长适宜的碳源及碳氮比(C/N)
腐生型食用菌是食用菌中最大的一群,靠分泌胞外酶分解基质中的有机物而生活,据腐生菌分解的基质不同可分为两大类:
木腐生菌和粪草土腐生菌。
目前大多数人工栽培的食用菌均属于木腐菌,但许多木腐菌分解木质素的能力并不强,以分解纤维素和半纤维素为主。
而杏鲍菇是一种分解纤维素和木质素能力较强的食用菌,生长发育要求丰富的碳源和氮源[4]。
兰瑞芳等[5]以杏鲍菇、双孢蘑菇、美味侧耳、茶薪菇、凤尾菇和香菇的新鲜子实体为试材,研究了其中漆酶的活性,结果发现杏鲍菇中漆酶酶活最高。
而漆酶在木质素降解中起着重要作用。
本研究中发现,以木屑为主料的原种、栽培种培养基(配方7和8)中菌丝生长速度均极显著快于纯棉子皮为主料的,从而也证实了杏鲍菇菌丝确实有较强的分解木质素能力,与其漆酶酶活高相一致。
另外,各种食用菌菌丝的生长均需要适宜的C/N,宫志远等[6]以合成培养基研究表明杏鲍菇母种菌丝生长的最佳碳氮源分别为葡萄糖和蛋白胨,适宜的C/N为40:
1~70:
1,最适C/N为60:
1。
本研究中用的母种培养基为生产上常用的天然培养基,由于是浸煮液,不能算出较准确的C/N;而原种、栽培种培养基各配方的C/N经计算在25:
1~100:
1之间,各培养基上菌丝均长势良好,但菌丝生长速度与C/N无相关关系,这可能与菌丝对不同主料的分解程度不同有关。
可以利用主、辅原料相同的配方调节其C/N来进一步研究杏鲍菇菌丝生长最适宜的C/N。
3.2 最适宜的原种、栽培种配方
由于原种、栽培种用种量大,占据空间大,很难冷藏保存,而生产上又难以避免原种、栽培种的短期存放,因此,与母种不同,选择适宜的原种、栽培种培养基配方时需考虑多方面因素,除了菌丝的生长速度及菌丝长势外,还应考虑培养基配方中原料的来源应广泛,成本要低,同时要考虑菌种的耐贮性。
在本研究中,虽然麦粒种长速最快,但它的成本高,老化快,前处理烦琐,如果时间紧,急需菌种时可选用;而配方7和8中不仅菌丝生长速度快,而且原料成本低,菌种老化较慢,较耐贮存,因此是生产上最适宜采用的原种、栽培种培养基配方。
参考文献:
[1]黄年来.一种市场前景看好的珍稀食用菌——杏鲍菇[J].中国食用菌,1998,17(6):
3-4.
[2]颜明娟,江枝和,蔡顺香.杏鲍菇营养成分的分析[J].食用菌,2002,24
(2):
11-12.
[3]洪建基,曾日秋,卢川北,等.不同培养料栽培杏鲍菇试验[J].中国食用菌,2003,22
(2):
23-24.
[4]陈为平.珍稀菌蕈杏鲍菇特性及覆土栽培新技术[J].中国食用菌,2002,21
(1):
18-19.
[5]兰瑞芳,林少琴,林玉满,等.杏鲍菇漆酶的生物学特性[J].食用菌学报,2002,9
(2):
14-16.
[6]宫志远,于淑芳,曲玲.碳、氮营养对杏鲍菇菌丝生长的影响[J].中国食用菌,2002,21(3):
24-26.
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二〇一〇年九月二十日
基本要求:
写毕业论文主要目的是培养学生综合运用所学知识和技能,理论联系实际,独立分析,解决实际问题的能力,使学生得到从事本专业工作和进行相关的基本训练。
毕业论文应反映出作者能够准确地掌握所学的专业基础知识,基本学会综合运用所学知识进行科学研究的方法,对所研究的题目有一定的心得体会,论文题目的范围不宜过宽,一般选择本学科某一重要问题的一个侧面。
毕业论文的基本教学要求是:
1、培养学生综合运用、巩固与扩展所学的基础理论和专业知识,培养学生独立分析、解决实际问题能力、培养学生处理数据和信息的能力。
2、培养学生正确的理论联系实际的工作作风,严肃认真的科学态度。
3、培养学生进行社会调查研究;文献资料收集、阅读和整理、使用;提出论点、综合论证、总结写作等基本技能。
毕业论文是毕业生总结性的独立作业,是学生运用在校学习的基本知识和基础理论,去分析、解决一两个实际问题的实践锻炼过程,也是学生在校学习期间学习成果的综合性总结,是整个教学活动中不可缺少的重要环节。
撰写毕业论文对于培养学生初步的科学研究能力,提高其综合运用所学知识分析问题、解决问题能力有着重要意义。
毕业论文在进行编写的过程中,需要经过开题报告、论文编写、论文上交评定、论文答辩以及论文评分五个过程,其中开题报告是论文进行的最重要的一个过程,也是论文能否进行的一个重要指标。
撰写意义:
1.撰写毕业论文是检验学生在校学习成果的重要措施,也是提高教学质量的重要环节。
大学生在毕业前都必须完成毕业论文的撰写任务。
申请学位必须提交相应的学位论文,经答辩通过后,方可取得学位。
可以这么说,毕业论文是结束大学学习生活走向社会的一个中介和桥梁。
毕业论文是大学生才华的第一次显露,是向祖国和人民所交的一份有份量的答卷,是投身社会主义现代化建设事业的报到书。
一篇毕业论文虽然不能全面地反映出一个人的才华,也不一定能对社会直接带来巨大的效益,对专业产生开拓性的影响。
但是,实践证明,撰写毕业论文是提高教学质量的重要环节,是保证出好人才的重要措施。
2.通过撰写毕业论文,提高写作水平是干部队伍“四化”建设的需要。
党中央要求,为了适应现代化建设的需要,领导班子成员应当逐步实现“革命化、年轻化、知识化、专业化”。
这个“四化”的要求,也包含了对干部写作能力和写作水平的要求。
3.提高大学生的写作水平是社会主义物质文明和精神文明建设的需要。
在新的历史时期,无论是提高全族的科学文化水平,掌握现代科技知识和科学管理方法,还是培养社会主义新人,都要求我们的干部具有较高的写作能力。
在经济建设中,作为领导人员和机关的办事人员,要写指示、通知、总结、调查报告等应用文;要写说明书、广告、解说词等说明文;还要写科学论文、经济评论等议论文。
在当今信息社会中,信息对于加快经济发展速度,取得良好的经济效益发挥着愈来愈大的作用。
写作是以语言文字为信号,是传达信息的方式。
信息的来源、信息的收集、信息的储存、整理、传播等等都离不开写作。
论文种类:
毕业论文是学术论文的一种形式,为了进一步探讨和掌握毕业论文的写作规律和特点,需要对毕业论文进行分类。
由于毕业论文本身的内容和性质不同,研究领域、对象、方法、表现方式不同,因此,毕业论文就有不同的分类方法。
按内容性质和研究方法的不同可以把毕业论文分为理论性论文、实验性论文、描述性论文和设计性论文。
后三种论文主要是理工科大学生可以选择的论文形式,这里不作介绍。
文科大学生一般写的是理论性论文。
理论性论文具体又可分成两种:
一种是以纯粹的抽象理论为研究对象,研究方法是严密的理论推导和数学运算,有的也涉及实验与观测,用以验证论点的正确性。
另一种是以对客观事物和现象的调查、考察所得观测资料以及有关文献资料数据为研究对象,研究方法是对有关资料进行分析、综合、概括、抽象,通过归纳、演绎、类比,提出某种新的理论和新的见解。
按议论的性质不同可以把毕业论文分为立论文和驳论文。
立论性的毕业论文是指从正面阐述论证自己的观点和主张。
一篇论文侧重于以立论为主,就属于立论性论文。
立论文要求论点鲜明,论据充分,论证严密,以理和事实服人。
驳论性毕业论文是指通过反驳别人的论点来树立自己的论点和主张。
如果毕业论文侧重于以驳论为主,批驳某些错误的观点、见解、理论,就属于驳论性毕业论文。
驳论文除按立论文对论点、论据、论证的要求以外,还要求针锋相对,据理力争。
按研究问题的大小不同可以把毕业论文分为宏观论文和微观论文。
凡届国家全局性、带有普遍性并对局部工作有一定指导意义的论文,称为宏观论文。
它研究的面比较宽广,具有较大范围的影响。
反之,研究局部性、具体问题的论文,是微观论文。
它对具体工作有指导意义,影响的面窄一些。
另外还有一种综合型的分类方法,即把毕业论文分为专题型、论辩型、综述型和综合型四大类:
1.专题型论文。
这是分析前人研究成果的基础上,以直接论述的形式发表见解,从正面提出某学科中某一学术问题的一种论文。
如本书第十二章例文中的《浅析领导者突出工作重点的方法与艺术》一文,从正面论述了突出重点的工作方法的意义、方法和原则,它表明了作者对突出工作重点方法的肯定和理解。
2.论辩型论文。
这是针对他人在某学科中某一学术问题的见解,凭借充分的论据,着重揭露其不足或错误之处,通过论辩形式来发表见解的一种论文。
3.综述型论文。
这是在归纳、总结前人或今人对某学科中某一学术问题已有研究成果的基础上,加以介绍或评论,从而发表自己见解的一种论文。
4.综合型论文。
这是一种将综述型和论辩型两种形式有机结合起来写成的一种论文。
如《关于中国民族关系史上的几个问题》一文既介绍了研究民族关系史的现状,又提出了几个值得研究的问题。
因此,它是一篇综合型的论文。
写作步骤:
毕业论文是高等教育自学考试本科专业应考者完成本科阶段学业的最后一个环节,它是应考者的总结性独立作业,目的在于总结学习专业的成果,培养综合运用所学知识解决实际问题的能力。
从文体而言,它也是对某一专业领域的现实问题或理论问题进行科学研究探索的具有一定意义的论说文。
完成毕业论文的撰写可以分两个步骤,即选择课题和研究课题。
首先是选择课题。
选题是论文撰写成败的关键。
因为,选题是毕业论文撰写的第一步,它实际上就是确定“写什么”的问题,亦即确定科学研究的方向。
如果“写什么”不明确,“怎么写”就无从谈起。
教育部自学考试办公室有关对毕业论文选题的途径和要求是“为鼓励理论与工作实践结合,应考者可结合本单位或本人从事的工作提出论文题目,报主考学校审查同意后确立。
也可由主考学校公布论文题目,由应考者选择。
毕业论文的总体要求应与普通全日制高等学校相一致,做到通过论文写作和答辩考核,检验应考者综合运用专业知识的能力”。
但不管考生是自己任意选择课题,还是在主考院校公布的指定课题中选择课题,都要坚持选择有科学价值和现实意义的、切实可行的课题。
选好课题是毕业论文成功的一半。
第一、要坚持选择有科学价值和现实意义的课题。
科学研究的目的是为了更好地认识世界、改造世界,以推动社会的不断进步和发展。
因此,毕业论文的选题,必须紧密结合社会主义物质文明和精神文明建设的需要,以促进科学事业发展和解决现实存在问题作为出发点和落脚点。
选题要符合科学研究的正确方向,要具有新颖性,有创新、有理论价值和现实的指导意义或推动作用,一项毫无意义的研究,即使花很大的精力,表达再完善,也将没有丝毫价值。
具体地说,考生可从以下三个方面来选题。
首先,要从现实的弊端中选题,学习了专业知识,不能仅停留在书本上和理论上,还要下一番功夫,理论联系实际,用已掌握的专业知识,去寻找和解决工作实践中急待解决的问题。
其次,要从寻找科学研究的空白处和边缘领域中选题,科学研究。
还有许多没有被开垦的处女地,还有许多缺陷和空白,这些都需要填补。
应考者应有独特的眼光和超前的意识去思索,去发现,去研究。
最后,要从寻找前人研究的不足处和错误处选题,在前人已提出来的研究课题中,许多虽已有初步的研究成果,但随着社会的不断发展,还有待于丰富、完整和发展,这种补充性或纠正性的研究课题,也是有科学价值和现实指导意义的。
第二、要根据自己的能力选择切实可行的课题。
毕业论文的写作是一种创造性劳动,不但要有考生个人的见解和主张,同时还需要具备一定的客观条件。
由于考生个人的主观、客观条件都是各不相同的,因此在选题时,还应结合自己的特长、兴
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