芳乙酰胺去乙酰化酶AADACELISA试剂盒说明书.docx
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芳乙酰胺去乙酰化酶AADACELISA试剂盒说明书
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书
本试剂仅供研究使用 标本:
体液
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书试验原理:
BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书自备材料
1.蒸馏水。
2.加样器:
5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书操作注意事项
1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
标准品:
标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:
蒸馏水50倍稀释。
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书操作步骤
1.使用前,将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。
避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书性能
1. 灵敏度:
最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:
不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:
板内、板间变异系数均小于10%。
芳乙酰胺去乙酰化酶(AADAC)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析
1、仪器值:
于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:
0-800pg/ml
4、敏感度:
1.0 pg/ml
PAI兔子纤溶酶原激活物抑制因子规格:
48T/96T
ICAM-3/CD50兔子细胞间粘附分子3规格:
48T/96T
ICAM-2/CD102兔子细胞间粘附分子2规格:
48T/96T
ICAM-1/CD54兔子细胞间粘附分子1规格:
48T/96T
DPD兔子脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉规格:
48T/96T
DHEA-S兔子脱氢表雄酮硫酸酯规格:
48T/96T
HA兔子透明质酸规格:
48T/96T
MBP兔子髓磷脂碱性蛋白规格:
48T/96T
RBP-4兔子视黄醇结合蛋白4规格:
48T/96T
GHRP兔子生长激素释放多肽规格:
48T/96T
ADM兔子肾上腺髓质素规格:
48T/96T
NT-4兔子神经营养因子4规格:
48T/96T
NT-3兔子神经营养因子3规格:
48T/96T
NSE兔子神经特异性烯醇化酶规格:
48T/96T
NGF兔子神经生长因子规格:
48T/96T
GFAP兔子神经胶质纤维酸性蛋白规格:
48T/96T
PGE2兔子前列腺素E2规格:
48T/96T
PGE1兔子前列腺素E1规格:
48T/96T
GIP兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽规格:
48T/96T
CORT兔子皮质酮/肾上腺酮规格:
48T/96T
Cortisol兔子皮质醇规格:
48T/96T
FⅡ兔子凝血因子Ⅱ规格:
48T/96T
TR兔子凝血酶受体规格:
48T/96T
BNP兔子脑钠素/脑钠尿肽规格:
48T/96T
ES兔子内皮抑素规格:
48T/96T
eNOS-3兔子内皮型一氧化氮合成酶3规格:
48T/96T
ET-1兔子内皮素1规格:
48T/96T
ET-1兔子内皮素1规格:
48T/96T
IgM兔子免疫球蛋白M规格:
48T/96T
IgG兔子免疫球蛋白G规格:
48T/96T
IgE兔子免疫球蛋白E规格:
48T/96T
IgA兔子免疫球蛋白A规格:
48T/96T
Sam兔子可溶性粘附分子规格:
48T/96T
sVCAM-1兔子可溶性血管细胞粘附分子1规格:
48T/96T
sEPCR兔子可溶性血管内皮细胞蛋白C受体规格:
48T/96T
sICAM-1兔子可溶性细胞间粘附分子1规格:
48T/96T
sCD40L兔子可溶性白细胞分化抗原40配体规格:
48T/96T
sP-selectin兔子可溶性P选择素规格:
48T/96T
sE-selectin兔子可溶性E选择素规格:
48T/96T
ANGA兔子抗中性粒细胞颗粒抗体规格:
48T/96T
MIP-5兔子巨噬细胞炎性蛋白5规格:
48T/96T
MIP-1α/CCL3兔子巨噬细胞炎性蛋白1α规格:
48T/96T
CollagenaseII兔子胶原酶II规格:
48T/96T
CollagenaseI兔子胶原酶I规格:
48T/96T
bFGF兔子碱性成纤维细胞生长因子规格:
48T/96T
T4兔子甲状腺素规格:
48T/96T
TIMP-1兔子基质金属蛋白酶抑制因子1规格:
48T/96T
MMP-9兔子基质金属蛋白酶9规格:
48T/96T
MMP-5兔子基质金属蛋白酶5规格:
48T/96T
MMP-4兔子基质金属蛋白酶4规格:
48T/96T
MMP-3兔子基质金属蛋白酶3规格:
48T/96T
Cr兔子骨胶原交联规格:
48T/96T
T兔子睾酮规格:
48T/96T
HGF兔子肝细胞生长因子规格:
48T/96T
TE兔子端粒酶规格:
48T/96T
CETP兔子胆固醇酯转移蛋白规格:
48T/96T
MCP-1/CCL2/MCAF兔子单核细胞趋化蛋白1规格:
48T/96T
PRL兔子催乳素规格:
48T/96T
PRL兔子催乳素规格:
48T/96T
ACTH兔子促肾上腺皮质激素规格:
48T/96T
FSH兔子促卵泡素规格:
48T/96T
TSH兔子促甲状腺素规格:
48T/96T
LH兔子促黄体激素规格:
48T/96T
LH兔子促黄体激素规格:
48T/96T
E2兔子雌二醇规格:
48T/96T
iFABP兔子肠脂肪酸结合蛋白规格:
48T/96T
C3a兔子补体片断3a规格:
48T/96T
C4兔子补体蛋白4规格:
48T/96T
EGF兔子表皮生长因子规格:
48T/96T
LIFR兔子白血病抑制因子受体规格:
48T/96T
LTB4兔子白三烯B4规格:
48T/96T
IL-4兔子白介素4规格:
48T/96T
IL-3兔子白介素3规格:
48T/96T
IL-2兔子白介素2规格:
48T/96T
IL-1sRⅠ兔子白介素1可溶性受体I规格:
48T/96T
IL-1β兔子白介素1β规格:
48T/96T
IL-10兔子白介素10规格:
48T/96T
IL-1兔子白介素1规格:
48T/96T
IFN-γ兔子γ干扰素规格:
48T/96T
β-TG兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白规格:
48T/96T
IFN-α兔子α干扰素规格:
48T/96T
S-100兔子S100蛋白规格:
48T/96T
S-100B兔子S100B蛋白规格:
48T/96T
E-Selectin/CD62E兔子E选择素规格:
48T/96T
D2D兔子D二聚体规格:
48T/96T
CRP兔子C反应蛋白规格:
48T/96T
Bcl-2兔子B细胞淋巴瘤因子2规格:
48T/96T
PⅢNP兔子Ⅲ型前胶原肽规格:
48T/96T
PⅢNT兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽规格:
48T/96T
ColⅢ兔子Ⅲ型胶原规格:
48T/96T
ColⅡ兔子Ⅱ型胶原规格:
48T/96T
PⅠCP兔子Ⅰ
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