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微生物食品安全与检测
微生物食品安全与检测
摘要:
食品安全是一个重大的世界性公共卫生问题,不仅影响到人们的健康,更是关系到国计民生的大事,越来越受到人们的重视,其中细菌性食物中毒是引起食源性疾病的主要因素。
传统的细菌检测方法耗时长,操作繁琐,越来越不能满足实际检测的需要。
关键词:
食品安全;微生物;检测
Abstract:
Thefoodsecurityisamajorpublichealthproblemattractingmoreandmoreattentionintheworld.Itisassociatedcloselywithnotonlypeople’shealthbutalsothenationaldevelopment.Bacterialfoodpoisoningisthemainfactorwhichcausesthefood-bornediseases.Thetraditionaldetectionofpathogenicbacteriumwastrivialandtime-consuming,andcannotsatifywithdetectioninpractice.
一.食品中有害微生物的危害及流行现状
食品是人类赖以生存和发展的基础,食品安全更是广为世人瞩目,近年来,全球食品安全恶性事件频发,成为影响公共健康的重要因素。
食源性疾病的发病率居各类疾病总发病率的一前列,全世界每年有220万人因患食源性疾病而丧生[1]。
据WHO统计数据显示,发达国家每年大约有三分之一的人感染食源性疾病,美国每年发生的食源性疾病多达7600万例,住院犯32.5万人次,死亡5000例[2]。
最新数据显示,每年的感染人数已高达8200万例[3],在英国,食源性疾病每年导致236万多人发病,2万多人住院,715人死亡[4],感染食源性疾病的医疗费用占国民医疗费用总额的百分之一,达八亿美元[5],在一些发展中国家,食源性疾病监测系统尚不完善,腹泻患病率高,而且食源性疾病种类多,常见的有霍乱、空肠弯曲菌感染、大肠杆菌感染、沙门菌病、志贺菌病、布鲁菌病、及由寄生虫引起的食源性疾病,因而食物污染而致病的情况更加严重,由此带来沉重的社会负担和经济负担。
但许多公共卫生部门并未充分认识到食品安全的重要性,食源性疾病的预防控制面临着巨大挑战。
食源性疾病是指通过摄食而进入人体的有毒有害物质所造成的疾病。
近年来的流行病学监测数据表明,食源性疾病的发生和流行表现为以下两个特点:
一方面一些早己被认识的食源性疾病发病率持续上升,如沙门氏菌,霍乱,志贺氏菌,金黄色葡萄球菌等引起的疾病。
另一方面,新的食源性病原体感染层出不穷,食品作为某些微生物传播的载体,受到高度重视,肠出血性大肠杆E.cohO157:
H7和单核细胞增生性李斯特菌引起的疾病是近10年来出现的重要的食源性疾病。
虽然其发病率较低,但其病情严重,常使患者丧失劳动力,有时可致命,尤其是对婴儿、儿童和老人,因此它们引发的疾病属于最严重的食源性疾病[6]。
我国流行的食源性疾病中,微生物性食物中毒居首位[7]。
2004年的5《中国食品安全战略研究》中也指出,微生物污染,包括细菌性污染、病毒和真菌及其毒素的污染,成为中国食品安全问题的罪魁祸首,危及的中毒人数占食物中毒总人数的60%一90%,给人们的健康带来了严重的危害[8][9]。
食品的日常检测和暴发检测是保证食品安全的两个重要环节,鉴于食品安全事件多由生物性病原体引起,建立针对病原体的高灵敏度和特异性的快速检测方法迫在眉睫[10]。
我国出口的食品因为食品安全问题每年损失高达170多亿美元,此外,食物中毒频发,加上食物中毒导致的其它经济损失,总计达到数千亿计人民币[11]。
提高食品安全水平的变得越来越迫切,所以,保证食品的安全对我国经济的发展和人民的健康都有着重大的意义,食品安全问题是全世界人民共同关注的重大问题。
二.六种食源性致病微生物
根据国家食源性疾病检测网资料显示以及各医院临床检验和检验检疫部门的统计,沙门氏菌属(Salmonella.spp)、单核细胞增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、志贺氏菌属(Shigella.spp)、大肠杆菌O157:
H7(EscherichiacoliO157:
H7)、蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)为6种最常见的食源性致病细菌,因此,建立其快速检测方法对有效控制其传播和预防食物中毒意义重大。
下面就这6种食源性致病细菌的病原学特征以及致病机理等加以介绍。
①沙门氏菌属(Salmonella.spp)
沙门氏菌属是肠杆菌科中的一个重要菌属,革兰氏阴性细长杆菌,需氧或兼性厌氧菌,无芽孢,一般无荚膜,绝大多数具有周生鞭毛,能运动;最适生长温度35~37℃,最适生长pH7.2~7.4,在普通琼脂培养基上生长良好;按其生化特征可分为I、II、III、IV和V五个亚属,对葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨醇产气产酸,不发酵乳糖、蔗糖,不水解尿素和对苯丙酸不脱氨;具有复杂的抗原结构:
菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原[12]。
沙门氏菌引起食物中毒包括两个方面:
一方面沙门氏菌随食物进入人体内,首先在肠道中大量繁殖,然后经淋巴系统侵入血液,造成菌血症,引起感染;另一方面是肠道和血液内的沙门氏菌细胞在人体免疫系统作用下发生裂解,释放出大量的菌体内毒素,使人体组织中毒,出现中毒症状。
临床症状主要以急性胃肠炎为主,潜伏期12~24h。
开始时头痛、全身乏力、发冷和恶心等,随后出现呕吐、腹泻、腹痛和全身酸痛等症状。
病程3~7天,愈后良好,但老人、儿童和免疫能力低下的患者,如不及时治疗,可导致死亡[13]。
②志贺氏菌属(Shigella.spp)
志贺氏菌属是一类革兰氏阴性杆菌,均为兼性厌氧菌,可分为4个种群:
宋内氏志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌和痢疾志贺菌,无芽孢,无鞭毛,多数有菌毛;能在普通培养基上生长,形成中等大小半透明的光滑型菌落,在肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落;分解葡萄糖,产酸不产气,VP试验为阴性,不分解尿素和形成硫化氢[12-13]。
人在接触了痢疾病人的粪便或食用含有志贺氏菌的食品和饮水后,一些细菌在胃部酸性环境中生存下来,穿过小肠后达到结肠,进入结肠粘膜引起急性坏死性结肠直肠炎,临床表现为发热,肠痉挛以及排带粘膜出便等[14]。
③大肠杆菌O157:
H7(EscherichiacoliO157:
H7)
大肠杆菌O157:
H7为两端钝圆的短杆菌,属于肠杆菌科埃希菌属,有鞭毛,最适生长温度37℃,45℃以上生长不良,75℃下1min即死亡,但低温下可长期生存;葡萄糖产气产酸,靛基质、甲基红阳性,VP、柠檬酸盐阴性,革兰氏染色呈阴性,除在48h内不能发酵或迟缓发酵山梨醇外,常见生化特征与普通大肠杆菌相似;均有一个60MDa的质粒,含有多处功能蛋白编码的序列,与致病性密切相关[12]。
大肠杆菌O157:
H7是引起出血性结肠炎的主要致病菌,其致病机制可分为两个方面,即粘附和产毒。
病菌进入宿主肠道,主要依靠质粒介导的粘附因子(菌毛)与盲肠、结肠、回肠的上皮细胞接合并破坏绒毛,这种损害被称为。
粘附和消除。
菌体粘附定植后,在盲肠、结肠内大量繁殖,产生一种与志贺氏毒素极相似的毒素,称之为志贺样毒素,该毒素能使Vero细胞变性、溶解和死亡,故又称Vero毒素,在出血性大肠杆菌引起的出血性结肠炎以及溶血性尿毒综合症的发病机制中起着重要作用。
其临床症状表现轻重不一,轻患者可呈无症状感染,表现为腹痛、无热或微热,大多在5~10天内痊愈;重患者大多是急性病,突然发生腹剧痛、急性发热、呕吐并出现脓血样便,其中约10%会并发溶血性尿毒综合症、和血栓形成性血小板减少性紫癜[15]。
④金黄葡萄球菌(Staphylococcusaureus)
金黄葡萄球菌是一群常堆积成葡萄串状的革兰氏阳性球菌,需氧或兼性厌氧,无芽孢、无鞭毛,不能运动,大多数无荚膜;最适生长温度37℃,最适生长pH7.4;可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气;可分A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H9种血清型,均能引起食物中毒,其中A型毒素的毒力最强[12]。
当其进入人体后,主要吸附在胃肠道黏膜上,通过产生大量肠毒素,引起人和动物皮肤软组织感染、败血症、心内膜炎、肺炎、肠炎、脑膜炎、骨髓炎和中毒性休克综合症等[16]。
⑤单核细胞增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)
单核细胞增生性李斯特菌为革兰氏阳性小杆菌,需氧或兼性厌氧菌,通常呈V字型列,无芽孢,一般不形成荚膜;最适培养温度37℃,普通营养琼脂平板上菌落细小、半透明、边缘整齐、微带珠光的露水样菌落;可发酵多种糖类,但不发酵木糖、甘露醇、山梨醇,可水解七叶苷,VP、尿素酶、氧化酶均阴性,不液化明胶等;具有13个血清型,不同培养时期,培养形态不同[12]。
该菌经口摄入后,首先侵入肠道的上皮细胞,在细胞内和细胞间扩散,然后经入血液感染其它敏感的机体细胞,可引起人脑膜炎、败血症和流产,特别对孕妇、新生儿、老年人和免疫缺陷病人危害严重[17-18]。
⑥蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)
蜡样芽孢杆菌为革兰氏阳性大杆菌,大小为(1-1.3μm×(3-5μm,兼性需氧,能够形成芽孢,菌体两端较平整,多数呈链状排列;生长温度25~37℃,最佳温度30~32℃,在普通琼脂上生成的菌落较大,灰白色,不透明,表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状,边缘常呈扩展状;有运动性、可将硝酸盐还原、分解酪氨酸、厌氧时可利用葡萄糖,过氧化氢酶反应、卵黄反应、V-P反应呈阳性[12]。
蜡样芽孢杆菌引起食物中毒是由于该菌肠毒素产生的两种性质不同的代谢物,其中引起腹泻型综合症的是一种大分子量蛋白;而引起呕吐型综合症的被认为是一种小分子量、热稳定的多肽。
当摄入食品的蜡样芽孢杆菌数量大于106个/克时,常可导致食物中毒。
呕吐型中毒症状以恶心、呕吐为主,偶而有腹痉挛或腹泻等症状,潜伏期为0.5~6h,病程不超过24h;腹泻型症状以水泻、腹痉挛、腹痛为主,有时会有恶心等症状,潜伏期为6~15h,病程约24h[19]。
三。
食源性致病菌检测方法
3.1传统检测方法
传统检测方法,是依据国家标准中的GB/T4789一20035《食品卫生微生物学检验》中的检验流程进行操作,原理是依据不同病原体的化学组成不同,或产生的代谢产物不同,通过一系列的生化反应,对细菌进行鉴定,传统方法能对食物中所携带的病原菌进行定性检测和定量检测,是目前最常应用的金标准。
一般需要如下的步骤:
增菌、选择性增菌分离、生化试验和血清学分型鉴定,完成整个检测流程通常需要一周左右,检测周期较长,并且最终要求在培养平板上形成可见的菌落。
缺点是无法对人工难以培养的致病微生物进行检测。
制备培养基,培养计数细菌,检测生化指标等都需要耗费大量的时间,需要较多的人力、物力投入。
3.2免疫学技术
免疫学方法是以抗原抗体的特异性反应为基础。
不同的微生物有其特异的抗原,并能激发机体产生相应的特异性抗体。
1)免疫荧光技术(IFT)
IFT是用荧光素标记抗体,检测抗原或抗体的免疫学标记技术,故又称荧光抗体技术。
其原理是将不影响抗原抗体活性的荧光素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现的一种特异性荧光反应。
该技术特异性强,敏感性高,但非特异性染色以及判定客观性不足等问题尚未解决,加上仪器的昂贵,故现在应用的普及性较差[20]。
2)免疫磁珠分离技术
免疫磁珠分离技术是将病原菌特异性抗体偶联在磁性颗粒表面,与样品中被检致病菌发生特异性结合,载有致病菌的磁性颗粒在外加磁场的作用下,向磁极方向聚集,弃去检样混合液,从而使致病菌不断得到分离、浓缩。
该方法代替了传统的选择性增菌培养过程,可特异有效的将目的微生物从样品中分离出来。
Skjerve[21]等采用免疫磁性分离技术,从乳品、肉类和蔬菜中分离了沙门氏菌,其检测灵敏度为100CFU/mL。
袁辉[22]等人应用该方法对江西省各监测点292位疑似病人、847份动物粪便、535份食品样品进行了检测,首次检出大肠杆菌O157:
H7。
同时该技术还可与酶联免疫技术、PCR技术等相结合应用,如以免疫磁性分离技术为基础的免疫胶体金技术已成功应用于O1群霍乱弧菌的检测[23]。
3)酶联免疫吸附分析法(ELISA)
它以酶或辅酶作为标记物,标记抗原或者抗体,用酶促反应的放大作用来显示初级免疫学反应,并且利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原或者抗体,使其固相化,在其中进行免疫反应和酶促反应[24]。
1977年首次将ELISA用于食品中沙门氏菌的检测,并在应用中不断得以发展。
Lin[25]等利用单克隆抗体M2356和M2367成功的检测出血清型为4b的李斯特菌,在临床和食品检测中均有重要意义。
钟青萍[26]等采用双抗体夹心酶联免疫吸附方法检测食品中的志贺氏菌。
4)胶体金标记技术
胶体金是80年代继三大标记技术后发展起来的固相标记免疫测定技术。
以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术[27]。
1971年首次报道将胶体金与抗沙门氏菌抗血清结合并于电镜下观察的免疫金染色。
Takeda[28]等利用此法直接检测水样中的大肠杆菌O157:
H7,检测灵敏度达5×105CFU/mL。
杜玉萍[29]等以金黄葡萄球菌体为抗原,免疫家兔获得多克隆抗血清,利用胶体金免疫层析技术,采用两步法检测金黄葡萄球菌,结果表明该法快速、灵敏。
罗立新[30]等通过选用柠檬酸钠改良法制备胶体金,构建了李斯特菌胶体金免疫层析检测方法,检测了冷冻猪肉、牛奶、冰激凌以及不同稀释度的产单核李斯特菌标准样品,结果具有良好的重现性。
免疫学方法所需设备简单、易操作。
但免疫学方法一方面需提供数量较多的纯化细菌,或需对样品进行浓缩后收集;另一方面,每一种免疫学检测模式都存在抗体与非抗原物质之间的非特异性反应,从而产生假阳性反应。
此外,待检抗原被样品中一些物质或其它优势菌群所掩蔽,会产生假阴性反应[31]。
3.3分子生物学技术
随着微生物学和分子生物学的飞速发展,对病原微生物的鉴定已不在局限于对它的外部形态结构及生理特征等一般检验上,而是从分子生物学水平上研究生物大分子,特别是核酸结构及其组成部分。
1)基因芯片
它采用微加工和微电子技术将大量人工设计好的基因片段有序的、高密度的排在玻璃片或纤维膜等载体而集成的一种信息检测芯片。
其基本原理是将各种基因寡核苷酸固定在芯片表面,微生物样品DNA经PCR扩增后制备荧光标记探针,然后再与芯片上寡核苷酸点杂交,最后通过扫描仪定量和分析荧光分布模式来确定检测样品是否存在某些特定微生物[32]。
在微生物重要基因筛选监测、直接分析细菌基因组进行菌种鉴定、流行病学研究及基因表达的应用有不少成功报道,同时也在致病微生物检测中发挥了重要作用[33]。
它不仅可以准确检测各种E.coliO157:
H7分离物,还可准确鉴定各种近缘单核增生性李斯特菌分离物[34-35]。
徐晓静[36]等采用基因芯片技术,对几种常见的肠道菌进行了检测和鉴定,结果显示制备的基因芯片能够准确检测出沙门氏菌属、志贺菌属和葡萄球菌属等。
基因芯片作为一种新技术,仍有许多问题急待解决,如检测成本高昂,检测精确度还有待提高等。
另外,必须解决建立标准化程序,降低检测费用、简化样品制备和标记操作等一系列问题。
2)聚合酶链式反应(PCR)技术
根据已知的待扩增DNA片段序列,人工合成与该DNA两条链末端互补的两段寡核苷酸引物,在体外将待检的DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增,扩增过程由高温变性、低温退火和适温延伸等三步反应作为一个周期,反复循环,从而到达迅速扩增特异性DNA的目的[37]。
PCR技术因其特异性强、灵敏度高、快速准确,自问世以来在医学、生命科学、农业科学等许多领域得到了广泛的应用,同时结合其它技术衍生出了许多不同类型的PCR技术,其中以定量PCR技术和多重PCR技术在食源性致病微生物的检测中应用最多。
a.常规PCR
利用PCR技术检测食品中的致病菌,首先通过离心沉淀或膜过滤等方法收集细菌细胞,然后裂解菌体,使细胞释放DNA,纯化后经PCR扩增细胞靶DNA的特异性序列,最后通过电泳检测。
应用单一的PCR技术检测致病菌已得到了广泛的应用。
王振国[38]等根据蜡样芽孢杆菌溶血素hlbA基因建立了PCR检测方法,其灵敏度可达9CFU/mL。
Ward[39]利用PCR检测了马粪便的沙门氏菌。
Bonnstetter[40]利用PCR来检测金黄葡萄球菌(CA-MRSA)USA300,该方法准确快速。
张辉[38]等通过扩增hly基因部分片段,建立了单增李氏菌的PCR方法。
b.定量PCR
近几年,在对扩增产物定性鉴别的基础上,又发展了对模板DNA片段进行定量研究的方法,即定量PCR(Q-PCR),就是在PCR反应中应用化学标记的引物或探针,对扩增的标记产物进行定量。
近些年来,在食源性微生物检测中应用的定量PCR方法主要有:
传统定量PCR(定量竞争性PCR、PCR-ELISA法等)、实时定量PCR以及免疫捕捉PCR等。
其中,对扩增反应可进行实时检测的实时定量PCR技术具有很大发展潜力。
实时定量PCR(Real-timePCR,RT-PCR),是DNA定量分析的新方法,指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累,实时监测整个PCR过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,较常用的荧光探针是TaqMan荧光探针和LightCycler双探针[31]。
TaqMan荧光探针法已经用于单核李斯特菌、沙门菌、E.coliO157:
H7、E型肉毒梭菌[42]等的检测。
Tan[43]
等运用实时荧光PCR技术鉴定血平板中抗青霉素的金黄葡萄球菌,整个操作仅需要2h。
王振国[44]等利用SYBRGreenI燃料能与双链DNA结合发出荧光的特点,建立了一种用来检测致病性蜡样芽孢杆菌的实时PCR方法,其最低检出限可达8CFU/mL。
实时定量PCR的推出,实现了PCR从定性到定量的飞跃,与传统的定量PCR技术相比具有以下优点:
(A)实时定量PCR不需要PCR后处理,所以可避免PCR的实验室污染,节省了PCR后处理的时间,样品通量大大提高;(B)不需内标,具有高度重复性;(C)有很大的动力学范围。
然而,利用实时定量PCR进行食品中致病微生物定量检测时,需要注意:
在检测的样品中食品的成分会抑制PCR中酶的活性,同时DNA提取方法的差异可能会影响DNA的产率,因此会对DNA检测限产生干扰,影响检测准确度[45]。
c.多重PCR
常规PCR技术已运用于食品中单一致病菌的检测,并得到一定程度的推广,但食品中往往含有多种致病菌,需同时检测。
多重PCR(M-PCR)的建立,为实现多种食源性致病菌的同时检测奠定了基础。
M-PCR是指在同一个反应体系中,加入多对特异引物,如果存在与各引物对特异性互补的模板,即可同时在同一反应管中扩增出两条以上的目标片段,实现同时检测多种致病菌的目的。
多重PCR与常规PCR相比具有:
(A)高效性,即在同一反应内可同时检出多种致病菌或对多个目的基因进行扩增分析;(B)系统性,即可对症状相似或易污染相同食品的一类病原菌进行分析;(C)方便性,即多种致病菌在同一反应中同时检出,大大节省了时间和交叉污染,为临床或食品安全检测提供更多更准确的信息[20、39]。
目前多重PCR技术主要应用于以下两个方面:
单一致病菌的检测和多种致病菌的同
时检测。
单一致病菌的检测:
对血清型较为复杂的病原细菌,常规PCR检测容易出现假阳性,特异性差,有一定局限性,因此多重PCR可同时选择目的病原细菌多个高度保守基因序列设计引物进行扩增。
如Lim[46]根据鼠伤寒沙门氏菌编码O4抗原的rfbJ基因、编码H:
i抗原的fliC基因和编码H:
1,2抗原的fljB基因设计三对引物进行PCR检测,结果15株其它沙门氏菌型和8株非沙门氏菌均为阴性。
曾海燕[47]等利用三重PCR技术鉴定消毒牛奶中的单核细胞增生李斯特菌。
邵碧英[48]等根据沙门氏菌属特异基因hut、hilA、invA和hns进行多重PCR检测分析,但三重PCR的灵敏度有所下降。
多种致病菌的同时检测:
在同一PCR反应中同时加入多种病原菌的特异性引物进行多重PCR扩增,可快速实现多种病原菌的同时检测分析。
Ramesh[45]等通过改良DNA提取方法,采用多重PCR检测牛奶中的金黄葡萄球菌和小肠耶尔森氏菌,无需增菌,灵敏度可达到104CFU/mL。
Kawasaki[50]应用多重PCR以UPB作增菌液,同时检测肉类中的沙门氏菌、李斯特菌和大肠杆菌O157:
H7,其灵敏度可达1CFU/25g。
刘家云[51]等建立了检测沙门氏菌、志贺氏菌和霍乱弧菌的多重PCR系。
3)核酸探针技术
核酸探针技术是指带有标记的特异DNA片段,根据碱基互补原则,核酸探针特异性地与目的DNA杂交,最后用特定的方法测定标记物。
根据探针标记的方式可分为:
放射性标记和非放射性标记。
放射性标记是以同位素为标记物,如:
32P、3H、35S,通过放射自显检测分析结果;非放射性标记法是以生物素、酶和荧光素等为标记物,杂交后通过酶催化底物显色反应、荧光显微镜或荧光仪杂交显示结果[52]。
Fitts[53]等人首先构建了沙门氏菌属的特异性探针RF321和RF356,与所供试的沙门氏菌都能发生杂交反应,可用于食品中沙门氏菌的检测。
Volokhv[54]等以李斯特菌的6种毒力蛋白基因为靶基因,设计多对引物进行多重PCR,扩增产物与基因芯片中的经荧光标记的种特异性寡核苷酸探针杂交,可将李斯特菌属检测到种的水平,大大的缩短了检测时间。
分子生物学检测方法与传统方法相比,能大大减少工作量,一定程度上实现了灵敏、快速和特异的检测,但是分子检测的阳性样本仍然要以传统方法为参照,目前尚未完全代替传统的方法[31]。
3.4其它检测学技术
1)显色培养基鉴定法
用显色培养基鉴定微生物是在生化反应的基础上开发的新技术,其原理是将微生物胞内酶的种类及反应条件作为微生物分类鉴定的主要依据,通过在分离培养基中加入微生物特异性酶的底物,该底物由发色基团和微生物可代谢物质组成,通常无色,但在特异性酶作用下游离出发色基团并显示一定颜色,直接观察菌落颜色就可对菌种做出鉴定,减少了对菌株进行纯培养和进一步生化鉴定的步骤。
2)流式细胞术(FCM)
FCM是利用流式细胞仪对细胞悬液进行自动快速定量分析和分选的新技术。
由于FCM检测到的荧光强度与DNA片段的大小成比例,因此根据荧光信号可知细菌的DNA指纹图谱,从而确定细菌的种类,该技术可检测纯化的DNA至pg级水平,且在10min完成数据的采集和分析。
3)快速测试片技术
快速测试片技术是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体,将特定的培养基和显色物质附着在上面,通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。
四.结语
食品安全是老百姓最关心的问题,关系到国计民生和社会的稳定,对人民群众的身体健康产生直接的影响。
现代
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