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实验技术专论复习资料
中医药实验技术专论复习资料
1、双向电泳技术主要应用于哪种混合物的分离?
蛋白质混合物的分离
2、不适合在等电聚焦电泳中使用的有哪种表面活性剂?
强离子型去垢剂如SDS会影响蛋白所带的电荷,不适合在等电聚焦中使用
3、IPG胶条的重泡胀时间一般应掌握在什么范围?
至少10h,12-16小时,泡胀不充分会影响相对分子量较高的蛋白质的吸收。
4、双向电泳两维间的平衡时间一般应在什么范围?
平衡时间要充分长(至少2×10min),但不要超过2×15min。
5、IPG胶条的平衡采用什么平衡法?
两步平衡法(第一步平衡在平衡液中加入DTT,使变性的非烷基化的蛋白处于还原状态;第二步平衡步骤中加入碘乙酰胺,使蛋白质巯烷基化,防止它们在电泳过程中重新氧化)
6、使用离心机的注意事项?
1.应经常检查转头及实验用离心管是否有裂纹、老化等现象,如有应及时更换;2.盖好离心管,配平离心管;3.如提桶有盖的,也应该盖好;4.盖门上不得放置任何物品,样品必须对称放置;5.冷冻离心的,宜提前开启离心机预冷;6.离心平稳前不应离开;7.在离心机未停稳的情况下不得打开盖门;8.离心结束,需将仪器擦拭干净,以防腐蚀。
7、移液枪的使用注意事项和维护方法
注意事项:
a、慢吸慢放,控制好弹簧的伸缩速度。
(吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液体积不准确)b、将移液器提离液面,停约一秒钟。
观察是否有液滴缓慢的流出。
若有流出,说明有漏气现象。
(原因:
吸头未上紧;移液器内部气密性不好)c、外壁残留。
用滤纸蘸擦移液嘴外面附著的液滴d、移液器不得移取有腐蚀性的溶液,如强酸、强碱等e、如有液体进入枪体,应及时擦干f、移液器应轻拿轻放g、定期对移液器进行校准
维护方法:
a、设定的移液量程不得超过其标示的容量范围,以免损坏移液器b、移液器吸液后严禁倒置、平放,以免溶液流入内腔,损坏活塞c、移液器使用前,观察排放杆是否有弯曲;按动排放按钮,感觉是否顺畅d、移液器不用时,应在专用支架上竖直放置e、移液器长时间不用时,将刻度调至最大量程,让弹簧恢复原形,延长移液器的使用寿命f、保持移液器外表面的清洁。
当液体接触移液器时,可用75%酒精进行擦拭g、最好定期清晰移液枪,可以用肥皂水或60%的异丙醇清晰,再用蒸馏水清晰,自然晾干
8、高温消毒液体的注意事项
(1)只能采用抗高温玻璃容器,填充量只能达到玻璃瓶总容量的2/3;
(2)对于慢速排气冷却(不用压缩空气),应将玻璃容器盖上但不要密封。
9、细胞培养基的配制
水、无机盐、氨基酸、维生素和其他成分——葡萄糖、酚红、HEPES、丙酮酸钠
10、细胞复苏的操作和注意事项?
(1)从液氮中取出冻存管、迅速置于37℃温水中并不断搅动。
使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。
(2)打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中,加10ml培养液或Hanks液,1000rpm离心10分钟,弃去上清液。
(3)细胞沉淀加10ml培养液或Hanks液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。
(4)加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37℃培养,第二天观察生长情况。
注意事项:
(1)细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞最易受损的-5~0℃,细胞仍能生长,活力受损不大
(2)解冻时务必注意安全,预防冷冻管爆裂。
11.实验室发生大量感染性液体弥散而形成气溶胶并污染室内空气时,采取什么应对措施?
室内所有人员应马上撤离污染区域,并应报告主管部门。
至少在1小时内任何人员均不能进入污染区。
待气溶胶排出和较重的的感染性微粒沉淀下来,即1小时再在安全员的监督下进行消毒。
气溶胶感染人员应做相应的预防注射和抗生素治疗。
12.用已知浓度标准品建立标准曲线的实时荧光定量PCR方法?
通过标准曲线对标准样品、待测样品的目的基因及管家基因进行定量,然后根据计算公式求得相对值即为相对表达量。
校正量=目的基因定量结果/管家基因定量结果
相对量=待测样品的校正量/对照样品的校正量
13.生物安全实验室的定义和类型
生物安全实验室:
通过防护屏障和管理措施,从事感染性物质操作的实验室。
包括:
研究用实验室、动物实验室、临床检验实验室、公共卫生实验室、传染病监测实验室等。
14.实验荧光定量PCR反应性的确认,需满足什么条件
线性关系、扩增效率确认:
相关系数(R2)>0.98
PCR扩增效率(E)0.8—1.05
检测灵敏度确认:
35Cycles内可得到好的定量结果,如果采用SYBR检测方法,30Cycles内无非特异性产物扩增。
Notemplatecontrol确认:
35Cycles内无引物二聚体产生
15.发生大量霍乱弧菌污染时采取的措施
大量烈性传染性致病菌污染,必须立即封闭现场,并报主管防疫部门,请专职防疫人员参见研讨和采取相应的处理方法。
如果手和脚被微生物污染,可用碘吸附洗涤消毒;受污染的工作服应立即更换。
16、免疫组化检测的操作和常识
免疫组化主要步骤
1、洗载玻片2、包埋组织3、切片4、捞组织5、脱蜡6、抗原修复7、血清封闭
8、加一抗9、加二抗10、加SABC11、加显色剂12、复染13、脱水14、封片
常识:
1.切片常规脱蜡至水。
如需抗原修复,可在此步后进行。
2.为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在HydrogenPeroxideBlock中孵育10-15分钟。
3.滴加UltraVBlock,在室温下孵育5分钟以封闭非特异性的背景染色。
(注:
孵育不要超过10分钟,否则会导致特异性染色降低。
如果一抗的稀释液中含有5-10%正常羊血清,这一步可以省略。
)4.滴加一抗工作液37℃孵育1-2小时。
(具体孵育时间和温度由试验者最终决定。
5.滴加PrimaryAntibodyEnhancer(增强子),在室温下孵育20分钟。
6.滴加HRPPolymer(酶标二抗),在室温下孵育30分钟。
(注:
HRPPolymer对光敏感,应避免不必要的光暴露并储存在不透明的小瓶中)7.向1mlDABPlusSubstrate中滴加1-2滴DABPlusChromogen,混匀后滴加到切片上,孵育3-15分钟。
(具体时间由染色深浅决定。
)8.自来水充分冲洗,复染,脱水,透明,封片。
17.实验动物的伦理3R原则?
替代(replacement)原则:
要求尽可能采用低等实验动物或非实验动物,以替代高等实验动物进行实验。
减少(reduction)原则:
要求尽可能减少实验动物的用量,甚至可以降低统计学要求。
优化(refinement)原则:
要求优化实验设计和操作,以减轻动物的痛苦。
18.用于制作心梗模型的小鼠的要求?
小鼠年龄:
﹥6w,体重:
﹥18g
19.Westblot操作流程、优缺点?
操作流程:
1.样品前处理,提取细胞或组织蛋白;2.测定蛋白浓度,样品变性;3.通过SDS-PAGE电泳将蛋白样品分开;4.将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持体.转移后的膜就称为一个印迹(blot),用于对蛋白质的进一步检测;5.印迹首先用封闭液处理以封闭固相载体上剩余的疏水结合位点,而后用目的蛋白的抗血清(一抗)孵育,印迹中只有目的蛋白质与一抗特异性结合。
洗去游离的一抗后,用再与酶标记的二抗孵育;6.最后加上相应的底物溶液,当二抗上的酶催化底物产生化学发光时,用X光片曝光,洗片后就会产生可见的区带,指示目的蛋白质的位置和强弱。
优点:
1.高分辨率的电泳技术;2.特异敏感的抗原-抗体反应;3.1-5ng中等大小
的靶蛋白。
缺点:
1.抗体交叉反应引发的非特异性条带;2.额外的二抗孵育。
20、病检标本的处理方法、固定液的选择
处理方法(接受-核对-签收-编号-取材登记记录-扫描-录入)-取材-固定-水洗-梯度乙醇脱水-二甲苯或70透明剂透明、浸蜡处理-切片-苏木精-伊红(HE)染色。
固定液无特殊要求:
10%中性福尔马林溶液。
糖元、尿结晶:
80-95%乙醇
脂肪、睾丸、皮肤:
Bouin液。
磷酸酶、酯酶、氧化酶:
丙酮。
皮下肥大细胞:
AF液(酒精-甲醛液)
21.冷冻切片技术的操作和常识:
准备将仪器打开,样品台温度调至-40℃。
取材组织必须新鲜,尽可能不经水洗。
取材时应避免组织挤压,防止人为假象。
样品大小5X5X3mm。
速冻将样品放在样品台上,样品四周加水加固,冷冻5-10min.切片升高温度至-15℃(视样品而定),约5min后开始切片,厚度6-15um。
制片将切片直接放在载波片上或先放在盛水(固定液)的培养皿中再转移到载波片上。
染色观察吸干水,加一滴苏木精,加盖玻片,用显微镜观察。
记录将观察的结果绘于实验报告上,整理自己用过的物品。
附:
切片温度的设定脑-12℃肝脏-14℃肾脏-16℃肌肉-20℃皮肤-25℃多脂肪组织-30℃经过固定的组织-5℃~-10℃
(冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度并通过冰起支撑作用来进行切片的一种方法。
速冻可减小冰晶直径,避免组织细胞损伤。
制冷压缩机氟利昂制冷、半导体温差电制冷)
22.用什么方法染色最适合显示胶原纤维?
胶原纤维在(HE染色法)被染成粉红色,除此之外,它还可以用一些阴离子的染料来进行染色,如用淡绿可把它们染为绿色,用甲苯胺蓝可将其染为蓝色,在网状纤维染色中,如不加以处理,它又可被染为棕黄*色。
常用的特殊染色法有VanGieson.Masson和Mallary等方法。
在免疫细胞化学染色中,胶原纤维由于含的负电荷过多,常导致某些非特异性的染色,应特别注意
23、实验室常识和规范。
如着装、打电话、规章制度、写实验室记录
1.注意礼仪、仪容服装:
不能着奇装异服、无袖、大裤衩、超短裙、暴露装。
注意扣子拉链,穿上白大褂首饰:
合理得体、不炫富(耳环、项链、戒指、舌钉、鼻环、唇环)穿鞋:
不能着:
拖鞋、有金属鞋钉的、有响声的、奇臭的头发:
正常得体修剪,不能阴阳头、花哨口腔:
注意卫生和饮食,不要发出强烈异味,不乱吐口香糖脸面:
常刮胡子、不浓妆艳抺、不发出强烈香水味走路:
挺直,自然。
不左摇右摆、不刻意模仿别人坐姿:
自然,端正。
不歪歪扭扭,不要走光讲话:
不能:
说脏话、大声喧哗、滔滔不绝。
多聆听
纪律:
不能:
大声喧哗、上窜下跳、故意捣乱电话:
上课、开会时调静音,不当众人面大声接电话2.处理好人际关系尊重别人(才产生敬畏之心,才尊师敬友)换位思考:
多站在别人的角度想,才能相互礼让记住:
遇事别冲动,退一步海阔天空3.熟悉逃生通道4.实验前阅读仪器操作规程、实验技术SOP5.了解和遵守实验室的规章制度比如:
写使用记录,垃圾处理,保持卫生,保持秩序不捣乱,不吃东西不吸烟6.妥善处理实验室垃圾
24.各种英文缩写,如HE、PCR、HPLC、ELISA、HRP
HE染色法:
苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),石蜡切片技术里常用的染色法之一。
苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
PCR:
聚合酶链式反应,是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
HPLC:
高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
ELISA:
酶联免疫吸附实验(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay),主要利用的是抗原抗体特异性结合的特点,可分为直接法、间接法、双抗体夹心法、竞争法等。
是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技术。
HRP:
过氧化物酶,通常来源于辣根(因此称辣根过氧化物酶),是临床检验试剂中的常用酶。
该产品不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。
过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。
25、ELISA实验时,冻结血清融解后接着有什么操作
冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。
混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
26、如实验过程中有有害气体产生,那么,实验室应采取什么措施
打开通风橱通风或配备消毒排气柜
27.高效液相色谱仪的主要组成:
流动相、正相系统流动相:
排气泡、压力过低原因
组成:
泵、脱气机、自动进样器、柱温箱、检测器
正相系统流动相:
正已烷、氯仿、二氯甲烷等
处理办法:
用异丙醇冲洗系统,将气泡带出。
可以不过柱后用较大流量冲洗。
对于检测器中的气泡,可以通过堵放的方法导出。
压力过低的原因:
1.排液阀没有关紧。
2.系统漏液。
3.泵头磨损
28、ELISA是什么实验技术
ELIS是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技术。
29、用于检测抗原的ELISA方法有哪些
双抗体夹心法:
用于检测抗原(1.将抗体包被在固相载体上。
2.如样品中含有抗原,则结合为抗原抗体复合物。
3.再加入酶标记抗体,则结合为抗体-抗原-酶标记抗体复合物。
4.酶催化底物并显色。
)
双抗原夹心法:
用于检测抗体(1.将抗原包被在固相载体上。
2.如样品中含有抗体,则结合为抗原抗体复合物。
3.再加入酶标记抗原,则结合为抗原-抗体-酶标记抗原复合物。
4.酶催化底物并显色。
)
间接法:
用于检测抗体(1.将抗原包被在固相载体上。
2.如样品中含有抗体,则结合为抗原抗体复合物。
3.再加入酶标记抗抗体,则结合为抗原-抗体-酶标记抗抗体复合物。
4.酶催化底物并显色。
)
抗原竞争法:
用于检测小分子抗原或半抗原(1.将抗体包被在固相载体上。
2.如样品中含有抗原,则优先竞争结合抗体,结合为抗原抗体复合物。
3.同时加入酶标记抗原,抗原没有结合的位点酶标记抗原去占据,则结合为酶标记抗原-抗体复合物。
4.酶催化底物并显色。
)(比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
)
30、HE切片固封前该有什么操作?
切片固封前必须乙醇充分脱水,二甲苯透明、湿封,不得用温箱烤干或电吹风吹干后封片。
(取材与固定、脱水透明、浸蜡包埋、切片与贴片、脱蜡染色、脱水透明)
31、实验室感染事件预防原则
1.把所有未知病原都按HIV/HBV处理
2.把所有他人都按传染源警惕(除已知者外)
3.把要工作的各类设施设备都按污染物对待(除已知者外)
4.每天先做清洁消毒再开展实验工作
5.严格按操作规程工作
32.病原体检测诊断实时荧光定量PCR实验可用SYBRGreen法以减少患者经济负担,对不对。
不对。
缺点:
无模板特异性,对引物特异性要求较高,不能进行多重定量
33.显微镜透镜表面如何清洁?
在没有参照物、阴暗或分辨不清的情况下,请用放大镜仔细检查镜头正面的状况。
较低倍物镜的镜头正面面积相当大,可以用浸有甲醇的布或镜头纸包裹指头进行清洁。
40倍和100倍的物镜在清洁时需要更加小心。
注意:
为使较高倍物镜达到高度平坦,物镜镜头正面有一个半径或弯曲度相当小的凹面。
镜头正面的表面可以用带有小棉球的牙签或小棉签进行清洁。
用甲醇浸湿棉布,并挤到几乎干燥的程度(不要使用酒精)。
轻轻擦拭镜头正面,不要用力过度或进行洗擦动作。
确保棉签头接触到凹面镜头表面。
清洁后用放大镜检查物镜。
如果需要拆下显微镜镜体,注意不要碰触外部镜头表面(位于镜体下面)。
否则,留在表面上的印迹将会降低图像清晰度。
34、双向电泳根据蛋白质的哪种特性进行分析?
等电点和相对分子质量
35.凝胶电泳结束后,有一转印过程,常有的固相支持物有那些膜?
常用的固相支持物有NC(硝酸纤维素)膜、尼龙膜及PVDF(聚偏氟乙烯)膜。
36、不同物质起火,分别用什么灭火器灭火?
实验室电气设备引起的火灾用CO2或干粉灭火器
易燃、可燃液体、气体及带电设备的初起火灾用碳酸氢钠干粉灭火器
油制品、油脂等火灾用泡沫灭火器
37、发生火灾时,如你身在火灾现场,如何逃出火场?
一旦火灾发生,要立即按警铃或打电话。
保持镇静,不要惊慌,不盲目地行动,选择正确的逃生方法。
如有浓烟要用湿毛巾捂住鼻子,阻挡烟气侵袭,将衣服淋湿,采用低姿势撤离,避免呛烟和中毒。
无法撤离是,利用窗户阳台,拴上安全绳逃生。
如所有通道不通,则等在水源处等待救援。
身上着火时,就地打滚、尽快斯脱衣服,向身上泼水或用厚棉衣往身上盖。
38.什么是高效液相色谱仪的正、反相流动相?
它们之间转换的时候一般选用什么作为过渡溶剂
正相系统流动相正已烷、氯仿、二氯甲烷等
反相系统流动相水、甲醇、乙腈、缓冲液等
使用异丙醇做为过渡溶液
39.SYBRGreen法实时荧光定量PCR(两步法)实验流程
样品制备、RT、定量系统配备、上机、数据分析
40.HE切片的厚度、切片不完整、有污染、褶皱和刀痕时能否使用?
切片烤片温度不得高于多少。
C?
时间不能少于多少分钟?
不能使用,切片厚度4um为宜,切片必须完整,无污染、褶皱和刀痕。
切片烤片温度60-62。
C左右,不得超过65。
C.时间不能少于20min
41.在小鼠心梗模型造模时,用什么线结扎冠状动脉?
用8号线结扎冠状动脉左前降支。
42.高效液相色谱仪氘灯的寿命
通常普通氘灯能用1000小时或以上,而长寿命氘灯能用2000小时或以上
43.最后离开实验室人员,如何检查和确认水、电、气的关闭?
水:
1.看水龙头是否没关2看实验装置是否有跑冒滴漏现象。
3看下水道是否堵塞
电:
看指示灯是否以灭、看总闸是否拉下
气:
看压力是否为0
最后离开实验室的人员必须关好水电,检查水池和下水管道是否堵塞,严防漏水,漏气和电气设备处于长时间通电、通水而无人管理的状态,关好门窗确认无问题后方可离开
44.小鼠心梗模型造模结束缝合胸腔及皮肤后,停止麻醉,不用等小鼠有自主呼吸,就可以拔管,脱离呼吸机,对不对?
不对,因为麻醉剂有呼吸麻痹作用,过早移除呼吸机,有可能导致小鼠因窒息而死亡,造模失败,浪费时间、精力和金钱。
45.高效液相色谱仪,使用含有缓冲盐的溶液作为流动相,在每一次停机前应该做什么
要用95%的水将系统冲洗干净
46.操作酶标仪对室温和预热要求
酶标仪操作时室温宜在15~30℃,使用前先预热仪器15-30分钟,测读结果更稳定。
47.移液枪移液的方法及注意事项
方法:
1、设定体积2、装吸头:
右手握住移液器,拇指放在“取液及刻度调节复合旋钮”或“取液按钮”上,“褪管按钮”朝向身体内侧。
将移液器端垂直插入吸头,左右微微转动,上紧即可,用力不可过猛,否则会导致内部零部件松散,甚至会导致调节刻度的旋钮卡。
3、用同一样品润洗吸头:
在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在套筒室内形成负压,从而产生漏液。
预洗4-6次,让套筒内的气体达到饱和使负压自动消失。
当样品温度很低或很高时,不要润洗吸头。
4、吸液:
一般液体,正向吸液(一档吸二档排):
先将移液器排放按钮按至第一档,再将吸头垂直浸入液面,将枪头插入液面下2-3毫米。
平稳松开按钮,切记不能过快。
用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体时,最好采用反向移液法:
先按下按钮至第二档,慢慢松开按钮至原点。
接着将按钮按至第一档排出设置好量程的液体就可以了(二档吸一档排)。
5、放液:
将吸嘴口贴到容器内壁并保持10-40°倾斜。
平稳地把按钮压到一档,停约一秒钟后转二档,排出剩余液体(排放致密或粘稠液体时,一档,多等一两秒钟转二档,以确保吸头内无残留液体)。
压住按钮,同时提起移液器,使吸嘴贴容器壁擦过。
松开按钮。
按弹射器除去移液嘴。
(只有改用不同液体时才需更换吸嘴)。
6、使用完毕将移液器调至最大量程,放回移液器架。
注意事项:
a、慢吸慢放,控制好弹簧的伸缩速度。
(吸液速度太快会产生反冲和气泡,导致移液体积不准确)b、将移液器提离液面,停约一秒钟。
观察是否有液滴缓慢的流出。
若有流出,说明有漏气现象。
(原因:
吸头未上紧;移液器内部气密性不好)c、外壁残留。
用滤纸蘸擦移液嘴外面附著的液滴d、移液器不得移取有腐蚀性的溶液,如强酸、强碱等e、如有液体进入枪体,应及时擦干f、移液器应轻拿轻放
注意事项1. 量程不能超过枪所允许的范围;
2. 使用过程中,不能长时间按着;
3. 移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧;
4. 使用完毕,要把枪的量程调到最大处;
5. 不得私自拆解移液器;
6. 定期校正移液器。
48、等电聚焦电泳的优缺点
优点:
1.有很高的分辨率,分辨率可达0.01pH单位,因此特别适合于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分,可将等电点相差0.01~0.02pH单位的蛋白质分开;2.一般电泳由于受扩散作用的影响,随着时间和所走距离加长,区带越走越宽,而电聚焦能抵消扩散作用,时间越长,聚焦的区带就越集中,越狭窄,因而提高了分辨率;3.由于这种电聚焦作用,不管样品加在什么部位,都可聚焦到其等电点处,很稀的样品也可进行分离;4.可直接测出蛋白质的等电点,其精确度可达0.01P单位。
缺点:
1.电聚焦要求用无盐溶液,而在无盐溶液中蛋白质可能发生沉淀,2.样品中的成分必需停留于其等电点,不适用于在等电点时发生沉淀或变性的蛋白质
49.生物实验室常见的表面污染的规范处理程序
答:
1.告知同事
2.划定和隔离污染区域
3.使用适当的个人防护设备
4.用镊子或铲子移走玻璃或团块
5.用抹布吸除溅出物,移走大体积物品
6.用浸有消毒水的抹布擦拭表面
7.让抹布与表面接触适当的时间(20秒以上)
8.移开抹布,并擦干;随后用酒精或肥皂水清洗
9.妥善处理被污染的材料
10.通知实验室管理者
50、实验室常见的有毒危险化学品有哪些?
1.重金属及其化合物:
铊、铅、砷、汞、镉、铬、镍
2.放射性物质:
钴-60,H-3、钚-239(长崎),铀-235,超铀人工元素共27种,如锔(居)、镅、锫、锎
3.氰化物:
氰氢酸、氰化盐、氰化金钾
4.有机试剂/溶剂:
亚硝酸盐、苯、二氯乙烷(鞋厂)、正已烷、乙醚、醇类、香蕉水、甲醛、丙酮
5.动物造模剂:
肝损(氯仿),糖尿病(四氧嘧啶、链
脲佐菌素),肝癌(亚胺基偶氮甲苯、黄曲霉素),胃癌和
宫颈癌(甲基胆蒽),肺癌(二乙基亚硝胺),变态反应
(异蛋白),肠炎(硫酸葡聚糖),
6.细胞株、动物病理标本
51.(什么实验会有膜?
)膜上没有信号的原因及其处理措施有哪些?
有膜实验:
WesternBlot免疫印迹(蛋白质印迹)实验
原因:
1.细胞中不表达这种蛋白质;2.细胞中的蛋白质被降解;3.转膜过程出现失误;4.抗体或酶失活。
处理措施:
1.换一种细胞;2.必需加入PMSF或其他蛋白酶抑制剂,抑制蛋白酶活性,并且提取过程冰上操作;3.选择在有效期内的试剂。
52.防
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