电泳相关溶液配制.docx
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电泳相关溶液配制.docx
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电泳相关溶液配制
电泳相关溶液配制
溶液配制Solutiontorecord
文件编号:
版本:
A/0No:
生产日期(ProducingDate):
中间产品品名
Name:
批号
Lot.No.:
计划产量
PlanYields:
指令
Directive
1、生产许可证(Productioncertificate)有(yes)□无(no)□
2、设备状态(Equipmentstatus)
完好(ready)□未完好(notready)□清洁(cleared)□未清洁(notcleared)□
3、已清场(Clearedornot)是(yes)□否(no)□
4、清场合格证(clearancecertificate)有(yes)□无(no)□
5、生产指令单编号(ProductiondirectiveNo.):
_____________
2%琼脂糖
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
琼脂糖
g
2
1*电泳液
ml
100
1.将琼脂糖加入250ml的锥形瓶中,倒入100ml的1*电泳液,摇匀,放入微波炉中反复加热2-3次,直至琼脂糖完全溶解为止。
2.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:
下层有无沉淀,有□、无□;
(Istherefloatingsubstance?
onthesurfaceofthesolution,yes□no□;
onthebottom,yes□no□)
备注(Remark):
30%丙烯酰胺
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
丙烯酰胺
g
300
N-N亚甲基双丙烯酰胺
g
8
纯水
ml
定容至1000
1.将丙烯酰胺和N-N亚甲基双丙烯酰胺置于1L烧杯中。
2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,于40℃左右水浴加热,并用玻璃棒搅拌至完全溶解。
3.加水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。
4.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:
下层有无沉淀,有□、无□;
(Istherefloatingsubstance?
onthesurfaceofthesolution,yes□no□;
onthebottom,yes□no□)
5.于棕色瓶中4℃保存。
备注(Remark):
丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。
聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。
10%十二烷基硫酸钠(SDS)
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
十二烷基硫酸钠(SDS)
g
20
纯水
ml
定容至200
1.将SDS置于烧杯中,加入一定量的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解,用水定容至200ml。
2.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:
下层有无沉淀,有□、无□;
(Istherefloatingsubstance?
onthesurfaceofthesolution,yes□no□;
onthebottom,yes□no□)
备注(Remark):
10%过硫酸铵(APS)
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
过硫酸铵(APS)
g
0.1
纯水
ml
定容至1
1.将过硫酸铵倒入2ml的离心管中,加1mL去离子水,用漩涡振荡器震荡溶解,贮存于4℃。
备注(Remark):
10%过硫酸铵溶液在4℃保存可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。
4%分离胶
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
纯水
ml
11.9
30%丙烯酰胺
ml
5.4
1.5MTris-HCl(pH8.8)
ml
10
10%SDS
μl
200
10%过硫酸铵
μl
200
TEMED
μl
12
1.按照配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。
备注(Remark):
TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。
20%分离胶
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
纯水
ml
1.3
30%丙烯酰胺
ml
13.3
1.5MTris-HCl(pH8.8)
ml
5
10%SDS
μl
200
10%过硫酸铵
μl
200
TEMED
μl
8
1.按照上述配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。
备注(Remark):
TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。
5%积层胶
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
纯水
ml
10.2
30%丙烯酰胺
ml
2.55
1.5MTris-HCl(pH8.8)
ml
1.875
10%SDS
μl
150
10%过硫酸铵
μl
150
TEMED
μl
15
1.按照上述配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。
备注(Remark)TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。
封闭液
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
脱脂奶粉
g
5
纯水
ml
定容至100
1.将脱脂奶粉加入烧杯中,加入100ml的1*PBS,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
备注(Remark):
10*TBST
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
1MTris-HCl(pH7.4)
ml
40
NaCl
g
17.532
Tween20
ml
1
纯水
ml
定容至200
1.将Tris-HCl、NaCl加入烧杯中,加入一定量水,置于磁力搅拌器上搅拌,再用移液枪(剪枪头)加入Tween20,继续搅拌至完全溶解,用纯水定容至200ml。
备注(Remark):
1.5MTris-HCl(pH8.8)
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
Trisbase
g
36.33
纯水
ml
定容至200
1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2.用盐酸调节pH至8.8,定容至200ml。
备注(Remark):
1MTris-HCl(pH6.8)
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
Trisbase
g
24.22
纯水
ml
定容至200
1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2.用盐酸调节pH至6.8,定容至200ml。
备注(Remark):
1MTris-HCl(pH7.5)
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
Trisbase
g
24.22
纯水
ml
定容至200
1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2.用盐酸调节pH至7.4,定容至200ml。
备注(Remark):
5*上样缓冲液
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
1MTris-HCl(pH6.8)
ml
0.6
甘油
ml
5
10%SDS
ml
2
巯基乙醇
ml
0.5
溴酚蓝
g
1
纯水
ml
4.4
1.先用少量的水将溴酚蓝溶解后,将1MTris-HCl(pH6.8)、甘油、10%SDS、巯基乙醇、溴酚蓝、纯水依次加入烧杯中,用磁力搅拌器搅拌混匀。
置于-20℃保存。
备注(Remark):
PBS
品名(Name)
单位
(Unit)
配方量
(Prescription)
实际称量(Actualusage)
备注
(Remark)
KH2PO4
g
0.27
Na2HPO4
g
1.42
NaCl
g
8
KCl
g
0.2
纯水
ml
800
1.按配方将KH2PO4、Na2HPO4、NaCl、KCl依次加入烧杯中,用磁力搅拌器搅拌混匀。
用纯水定容至800ml。
备注(Remark):
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- 电泳 相关 溶液 配制