显微鉴定.docx
- 文档编号:23875314
- 上传时间:2023-05-21
- 格式:DOCX
- 页数:14
- 大小:3.96MB
显微鉴定.docx
《显微鉴定.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《显微鉴定.docx(14页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
显微鉴定
植物细胞的结构
紫色洋葱细胞
碘化铋钾的配制:
直接用碘化铋钾0.85g,加冰醋酸10ml与水40ml溶解后,摇匀,即得。
水合氯醛的配制:
稀甘油配制:
稀碘液配制:
碘-碘化钾溶液配制:
临时装片的制作方法
操作步骤口诀:
擦、滴、取、展、盖、染、吸。
1、准备
擦——用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净
滴——把载玻片放在实验台上,用吸管在载玻片上滴一滴蒸馏水
2、制片
取(撕、刮、切、挑)——用镊子从洋葱鳞片叶内表皮上撕取一小块方形透明薄膜
放(展、抹)——将撕下的洋葱鳞片叶内表皮浸入载玻片上的水滴中,用镊子轻轻展平
盖——用镊子轻夹盖玻片的一边,使盖玻片另一边先接触载玻片上的水滴,而后慢慢地把盖玻片轻轻盖在材料上,尽量避免气泡产生。
如有气泡,可用镊子从盖玻片的一侧掀起,然后再慢慢重新盖上。
如有水溢出盖玻片,用吸水纸吸干净
3、染色
染——滴一滴染液(中性红试液、碘化钾试液)在盖玻片一侧,用吸水纸在另一侧吸引,直至染液浸润到标本的全部,如有染液溢出,用吸水纸吸干净
洋葱内表皮细胞注意识别下列各部分:
(1)细胞壁为植物细胞所特有。
为细胞的最外层,比较透明。
调节细调焦螺旋可见两细胞间实际上为三层;两侧为相邻两个细胞的细胞壁;中间是两个细胞共有的胞间层。
(2)细胞质:
为无色透明的胶状物,紧贴在细胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞两端较明显。
(3)细胞核:
埋在细胞质内;贴近细胞侧壁的只见其窄蔺,呈扁圆形,贴在上、下整的可见其宽面,呈球形。
仔细观察,可见包在细胞核外面的核膜,细胞核内有1—3个发亮的颗粒,即核仁。
(有的细胞看不见细胞核是因为该细胞被撕破,只剩一半了)
(4)液泡:
位于细胞中央,占细胞体积的大部分,由于澈泡内充满细胞液;所以比细胞质更透明。
植物细胞后含物
1.观察马铃薯淀粉粒
淀粉粒在形成时,先从一个点(脐点)开始,向外层层沉积,形成许多同心的层次——层纹(直链淀粉和支链淀粉交替沉积而成)。
切取马铃薯一小块,用刀片刮少许混浊液,置于载玻片上,或用马铃薯块直接涂片,加蒸馏水一滴,盖上盖玻片。
2.观察半夏淀粉粒和草酸钙针晶
草酸钙结晶类型:
蔟晶、针晶、方晶、砂晶、柱晶。
1.用牙签挑取少许半夏粉末,置于载玻片的蒸馏水滴中,搅匀,盖上盖玻片,将标本片置显微镜下观察。
2.水合氯醛透化装片:
在载玻片中央加水合氯醛试液1-2滴,用牙签挑取半夏粉末适量,置于水合氯醛试液中,拌匀,置酒精灯上微热,并用牙签不断搅拌,稍干(切勿烧焦),离火微冷,再上法处理1-2次,最后滴加稀甘油,盖上盖玻片。
半夏草酸钙针晶:
存在于薄壁细胞中,成束或散在,针晶束呈淡黄色或深灰色,散在的则无色透明,有较强的折光性。
表面标本片
主要用于叶片、萼片、花瓣和雄蕊等表皮的表面特征观察
1)整体封藏法——适用于很薄的叶片、萼片、花瓣
方法一:
剪取2小片置载玻片中央(0.5cm见方,一正一反)→加水合氯醛溶液2~3dr(加热透化)→反复2~3次至透明状→加稀甘油1~2dr→盖盖玻片→清洁→观察
方法二:
剪取材料1cm见方→放入小烧杯或试管中→加水合氯醛溶液2~3ml
隔石棉网(△)→透明状(约10分钟)→取出材料切开成等大的2片
一正一反面置载玻片→加稀甘油2~3dr→盖盖玻片→清洁观察
2)表皮撕离法——适用于较厚的叶片、萼片、花瓣
将药材的表皮直接用尖头镊子撕离下来,如带有其它各组织时用解剖刀轻轻除去,表皮正面朝上置载玻片中央→加水合氯醛溶液2~3dr微透化一次→稀甘油1~2dr→盖盖玻片→清洁观察。
Ø操作:
以镊子自下表面夹住少许叶片,往一侧撕取表皮。
将撕下的表皮外表面朝上置于滴有1~2滴水的载玻片上,使其自然展开,盖片观察。
☐粉末临时制片操作要领
Ø粉末用量:
米粒大小。
Ø每次滴加装置液2~3滴。
Ø每次滴加装置液后需要搅拌均匀。
Ø控制搅拌范围约为盖玻片大小。
Ø如加热透化,则重复进行3~4次,沸即离火,勿烧干、焦。
Ø加盖玻片时应先一侧接触装置液,缓缓放下,最后抽出镊子,以排除气泡。
Ø以吸水纸吸去溢出的装置液。
Ø稍放置待凉后,镜检。
☐水装片或斯氏液装片
Ø适用于观察淀粉粒。
Ø装置液:
蒸馏水或斯氏液(甘油醋酸)。
Ø不可加热,否则淀粉粒糊化。
☐水合氯醛加热透化装片
Ø适用于除淀粉粒、菊糖以外的大多数组织、细胞、细胞后含物的观察。
Ø装置液:
水合氯醛(水合三氯乙醛)、稀甘油。
Ø需要加热。
☐水合氯醛或乙醇装片
Ø适用于观察菊糖。
Ø装置液:
水合氯醛或乙醇。
Ø不可加热,否则菊糖溶解。
☐水合氯醛装置液的作用
Ø使细胞膨胀,便于观组织、细胞及其内含物特征。
Ø去除细胞表面或内部杂质。
Ø增强透明度。
☐稀甘油装置液的作用
Ø增加透明度。
Ø防止气泡生成。
Ø防止水合氯醛结晶析出。
(一)粉末制片技术和大黄的鉴别实验参考内容:
大黄粉末:
淡黄棕色气微特殊,味苦涩。
镜检:
①淀粉粒,甚多,单粒,大多圆形,多角形或类圆形,脐点星状、十字形、三叉状、人字形、裂缝状或点状、大粒层纹明显。
复粒较多,由2~7分粒组成,各分粒脐点明显。
②草酸钙簇晶较大,极多,棱角大多短钝,有的边缘棱角不清晰。
③导管主要为网纹导管,非木化,也有具缘纹孔和螺纹导管。
掌叶大黄草酸钙簇晶网纹导管
螺纹导管淀粉粒
①升华时应缓缓加热,温度过高,易使药粉焦化,在载玻片上产生焦油状物,影响对升华物的观察或检识。
温度的控制可通过调整酒精灯火焰与石棉板的间距来实现。
②样品粉末用量一般约0.5g,过少不易产生足够量的升华物。
③可在载玻片上滴加少量水降温,促使升华物凝集析出。
④无金属片,可用载玻片代替。
微量升华:
(检查游离蒽醌)可见黄色菱状针晶或羽状结晶。
(因升华温度不同结晶形状各异)+碱→红色
(二)徒手制片和麦冬横切面鉴别
徒手切片法:
●指用刀片把植物新鲜材料切成薄片,封藏于水中即可观察(临时水装片),通常不经染色或简单染色。
亦可经脱水与染色制成永久制片。
●优点:
临时水装片简单方便;不经化学药物处理,基本保留了植物活体的状态。
●材料不能太大,表面不超过3-5mm。
关键是平而薄,无需很完整,只需一角就够了。
●临时制片种类很多,包括涂片、压片等
●一般用左手的大拇指、食指和中指3个手指拿住材料,使材料略突出在指尖之上,避免切片时割伤手指;用右手平稳地拿住刀片,把刀口放在经解剖刀削平的材料平面中间,轻轻地压住它,以均匀的动作,从刀片刀口下方起,斜着向后拉切。
切时用臂力而不是腕力,且不必太用力,否则就不易切薄。
●在切的过程中,决不能以刀片直接挤压材料,或以刀片来回拉割材料,并且要始终保持材料与刀片在水平状态,否则会由于切面偏斜而影响观察。
●切片应该薄而透明,形状不要求非常完整,可用刀不同部位一次作几个切片,然后用蘸水的毛笔取下切片,置于盛水的培养皿中,备用。
●柔嫩的器官,例如幼叶,难以直接拿住进行切片,需借助一些维持物。
一般用胡萝卜根或土豆块茎作为维持物,把要切的材料夹于其中,进行切片,以利于把握操作。
●将切下的薄片放在载玻片上时,要先在玻片中央加一滴水,把材料放到水滴中,然后用镊子夹住盖玻片,将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴,然后用镊子顶住盖片的另一侧,慢慢放下,使盖玻片与载玻片之间充满水,如有气泡,要掀起盖片,重新放置。
●徒手制作的切片可以直接在光镜下观察,也可以经过简易的组织化学染色,以使结构看得更清楚,同时可观察到细胞各部分的化学成分。
●常用的染料有:
0.1%亚甲基蓝、0.5%~1%中性红或1%番红水溶液等。
●染色的方法是将切片放在载玻片上后,用吸水纸吸去多余的水分,滴上一滴染料,经过1~2min后,用水冲洗一下,盖上盖玻片,在显微镜下观察。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 显微 鉴定