茯苓多糖的提取毕业设计.docx
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茯苓多糖的提取毕业设计
1概述
1.1产品概述
1.1.1茯苓多糖的简介
茯苓又称茯菟、茯灵、茯零、伏苓、伏菟、松腴、绛晨伏胎、云苓、茯兔、松
薯、松木薯、松苓。
菌核形态不一,球圆形、椭圆形等。
不规则形或板状,表面稍 皱
或多皱,黄褐色、棕褐色至黑褐色,皮壳松皮状,坚实,内部白色,淡紫色或淡粉红
色粉质物非淀粉质,整个菌核由无色菌丝、少量棕色菌丝、茯苓聚糖组成。
茯苓多糖(Poria cocos mushroom polysaccharides)从 多 孔 菌 科 真 菌 茯 苓 菌 核 中 提
取的有效成分。
具有免疫增强活性,可用于抗病毒、抗肿瘤,减轻放、化疗副作用,
以及治疗慢性肝炎、延缓衰老等。
茯苓多糖是中药多糖的一种,有效成分:
多糖,β-茯苓聚糖,三萜类化合物乙酰
茯苓酸、茯苓酸、胆碱,3β-羟基羊毛甾三烯酸,葡萄糖、腺嘌呤、组氨酸等。
1.1.2茯苓多糖的药理作用
1、利尿作用
利尿作用:
25%茯苓醇浸剂给正常兔腹腔注射 0.5g/Kg,出现利尿作用。
用切除肾
上腺的大鼠实验证明,利尿作用与影响肾小管 Na 离子的吸收有关。
2、镇静作用
3、对心血管系统的作用
茯苓水制浸膏及乙醇浸膏对家兔有降血糖作用。
茯苓水、乙醇、乙醚提取物对离
体蛙心均有增强收缩、加快心率作用。
5、抗肿瘤、抗癌作用
关 于茯 苓 抗肿 瘤 的作 用 机制 , 有实 验 证明 , 羧 甲基 茯 苓多 糖 抗肿 瘤 作用 与 胸腺 有
关。
亦有报告指出,茯苓多糖激活局部补体,使肿瘤临近区域被激活的补体通过影响
巨噬细胞、淋巴细胞或其他细胞及体液因子,从而协同杀伤肿瘤细胞。
羧甲基茯苓多
糖对艾氏腹水癌细胞的抑制作用是通过抑制 DNA 合成而实现的。
6、其他作用
茯苓煎剂内服,可使玫瑰花结形成率及植物血凝素诱发淋巴细胞转化率显著上
升。
茯苓多糖具有抗胸腺萎缩及抗脾脏增大和抑瘤生长的功能,茯苓多糖灌胃能增强
小鼠巨噬细胞吞噬功能,增加 ANAE 阳性淋巴细胞数,还能使小鼠脾脏抗体分泌细胞
数明显增多。
茯苓多糖亦能使环磷酰胺所引起的大白鼠白细胞减少加速回升。
羧甲基
茯苓多糖还有免疫调节、保肝降酶、间接抗病毒、诱生和促诱生干扰素、减轻放射副
反应,诱生和促诱生白细胞调节素等多种生理活性,无不良毒副作用。
体外实验表明,茯苓煎剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌有抑制作用。
乙醇提取物能杀死钩端螺旋体,而水煎剂则无效。
免疫增强作用:
茯苓聚糖对正常及荷瘤小鼠的免疫功能有增强作用,能增强小鼠
巨噬细胞吞噬功能。
1.2设计理论依据
1.2.1设计遵循的法律法规
1
(1) 《药品生产质量管理规范实施指南》
(2) 《工业企业噪音控制设计规范》GBJ87-85
(3) 《环境空气质量标准》GB3095-1996
(4) 《污水综合排放标准》GB8987-1996
(5) 《工业“三废”排放执行标准》GBJ4-73
(6) 《建筑工程消防监督审核管理规定》公安部第 30 号令
(7) 《建筑结构设计统一标准》 GB50068-2001
(8) 《工业企业设计卫生标准》TJ36-79
(9) 《化工工厂初步设计内容深度的规定》HG/20688-2000
(10)《化工工艺设计施工图内容和深度统一规定》HG20519-52
(11)《关于出版医药建设项目可行性研究报告和初步设计内容及深度规定的通知》
国药综经字[1995],第 397 号
(12)《化工装备设备布置设计》HG20456-92
1.2.2市场分析
茯苓多糖可以直接制成口服液,或者和别的药品搭配,又很好的市场,在治疗肿
瘤这一领域茯苓多糖有着不可替代的作用。
1.3工艺论证
茯苓多糖主要存在于茯苓细胞壁中,按照溶解度的不同又分为水溶性茯苓多糖和
碱溶性茯苓多糖。
通常采用水提醇沉法、碱提醇沉法提取。
水溶性多糖的提取主要与提取次数、时间、固液比及温度等因素有关。
随着提取
次数增多,多糖的浸出率明显增高,但提取次数不易过多,一般为两次,否则,将造
成后期工作量增大,提取成本过高。
提取时间延长可提高多糖的浸出率,但浸提时间
过长,将造成提取工艺延长。
同时,还有可能增加杂质的溶出,通常选 3h。
固液比也
影响多糖的浸出,在保证浸出率的前提下,尽可能减少液体体积,以减少浓缩工作
量。
多糖的浸出率还与浸提温度有关,随后者的升高而提高,但温度过高可能破坏多
糖的结构,一般选择 80℃提取。
碱溶性多糖的提取一般在 4℃下进行,其影响因素除
以上几点外,还与碱浓度有关,常采用 0.5mol/L。
在乙醇沉淀步骤中,浸提液浓缩比
及乙醇加量是影响茯苓多糖沉淀率的主要因素。
水提醇沉法 称取一定量茯苓粉末→热水浸提→抽滤→滤液减压浓缩(浸提液∶浓
缩液=10∶1) →95%乙醇沉淀(含醇量达 80%)→于冰箱中静置过夜→离心→沉淀物
用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→真空干燥得茯苓多糖粗品。
该法采用水作为溶剂,具
有价廉、无毒、操作安全等优点,其缺点是浸提时间长且提取率较低。
稀碱浸提法 稀碱法浸提碱溶性茯苓多糖应注意,在提取结束后应迅速用醋酸中
和,以免多糖活性受影响。
取一定量茯苓粉末溶于 0.5 mol/L 稀碱液中,4℃放置过
夜,滤液以 10%的醋酸中和至中性,再加入 95%乙醇沉淀,以下步骤同水提醇沉法。
该法提取率较水提醇沉法高,但浸提程序较繁琐,浸提条件较剧烈,极易破坏多糖的
立体结构,使其生物活性受到限制。
酶+热水浸提法 该法通过外加酶降解茯苓的细胞壁,从而促进茯苓多糖的浸出。
通常加入蛋白酶或植物复合酶,后者主要是由纤维素酶、中性蛋白酶、果胶酶等组成
的混合酶系。
采用植物精提复合酶+热水浸提法提取茯苓多糖,在普通热水浸提基础
上加入酶解步骤,通过改变酶加入量、酶解温度、酶解时间等因素将茯苓多糖的浸出
2
率提高到热水浸提法的 2.32 倍。
采用有机溶剂预处理一木瓜蛋白酶水解加热水浸提法
提取多糖,使得水溶性多糖的提取率明显提高,比常规浸泡水煮法的提取率约高
85%。
酶解法可以在较低的温度下提高多糖的提取率,与传统的热水浸提法相比,浸
提时间缩短,得率提高,是水溶性茯苓多糖提取的好方法。
微波、超声波辅助提取法 微波提取法利用加热导致细胞内的极性物质,尤其是水
分子吸收微波能,从而使胞内温度迅速上升,液态水汽化产生的压力将细胞膜和细胞
壁冲破,形成微小的孔洞,进而出现裂纹,从而使胞外溶剂容易进入细胞内,溶解并
释放出胞内产物。
利用微波辅助法提取茯苓多糖,在微波占空比 42%,固液比为 1∶
50,提取时间 18 min 条件下,提取率达 2.792%,为传统水回流提取法的两倍。
该法
具有受热均匀、快速、高效、安全、节能等优点,近年来,普遍应用于多糖的提取。
超声波提取技术也是近年来发展起来的一种提取生物活性物质的方法,具有方便、快
速、提取物活性高的特点。
采用超声波法提取茯苓多糖,但提取率不高,最高达到
1.6%。
发酵醇沉法发酵醇沉法提取茯苓多糖包括胞外多糖的提取及胞内多糖的提取,前
者将发酵液离心得上清液,浓缩至一定体积,乙醇沉淀,将沉淀物用丙酮、乙醚洗
涤,得胞外多糖。
后者包括胞内水溶性多糖及碱溶性多糖的提取。
水溶性多糖的提取:
取有机溶剂处理(脱脂)后的茯苓菌丝体粉末采用水提醇沉法进行提取;碱溶性多糖
的提取:
将上述提取水溶性多糖后的菌丝体滤渣用 5 倍量 0.5 mol/L 的 NaOH 浸提,步
骤同稀碱浸提法。
综上本设计采取复合酶+热水浸提醇沉法提取茯苓茯苓多糖。
3
2工艺流程设计
2.1生产茯苓多糖的流程设计
茯苓多糖生产工艺采用酶解+热水浸提醇沉的工艺
茯苓水 提
取
提取液(加复合
酶)
脱色
醇沉
产品
提
单效浓缩
取醇沉上清液
纯
回收乙醇
图 2.1 茯苓酶解+热水浸提醇沉法工艺流程框图
Fig2-1 Poria cocos enzyme solution for extraction and alcohol sink process flow diagram method
2.2茯苓预处理
[4] 茯苓多糖主要存在于茯苓细胞壁中,生产茯苓多糖的主要原料是中药茯苓,生产
前要将干净药材采用自然晾晒法干燥,中药一般采取粉碎方法,但根据本设计的需要
采用截切法用切药机将茯苓切成 1cm 左右的小段便于浸出使用。
2.3水提取
提取过程:
取茯苓适量,加水煎煮,第一次加 12 倍量,浸泡一小时,煎煮 2 小
时;第二次加水 8 倍量,煎煮 1 小时,滤过,合并滤液。
2.4
[1]
复合酶提取
提取中加入复合酶使提取时间缩短多糖提取率提高同时能保持茯苓多糖的生物活
性适合于茯苓多糖在医药和保健品方面的开发研究。
2.4.1复合酶加入量的影响
酶加入量可以影响多糖的浸出率。
4
图 2-2酶加入量的影响
Fig2-2 Effects of amount of enzyme added
从图2-2 中可以看出随着酶加入量的增大多糖的浸出率也在上升当酶加量达到1 %
时浸出率达到最大值酶加量过大会导致提出多糖的降解反而使多糖浸出率降低所以确
定最佳酶加量为1%。
2.4.2酶解时间的影响
酶解时间可以影响多糖的浸出率。
图 2-3 酶解时间的影响
Fig 2-3 Effects of enzymolysis time
从图2-3 中看出随酶解时间的增长多糖的浸出率不断上升当达到90min 时浸出率
已接近最大值再延长酶解时间提取率变化不大而且酶解时间过长会导致多糖降解杂质
大量溶出所以酶解时间定为90 min
2.4.3酶解温度的影响
5
酶解温度可以影响酶效的发挥。
图 2-4 酶解温度的影响
Fig 2-4 Effects of enzymolysis temperature
从图2-4 中可以看出48℃是最佳酶解温度有利于酶效的充分发挥。
2.4.4酶解液pH 值的影响
酶解液pH 值会影响酶解的效果。
图2-5酶解液pH值的影响
Fig 2-5 Effects of enzymolysis liquid pH value
从图2-5 中可以看出酶解液最佳pH 值为5.0 此时酶解可以达到最佳效果。
2.4.5酶解液中固液比的影响
[7] 固液比可以多糖浸出率。
6
图2-6酶解液中固液比的影响
Fig2-6 Effects of solid-to-liquid ratio
从图2-6 中可以看出当固液比达到1:
10 时多糖浸出率的上升趋于平缓为了减少后
继浓缩过程的工作量在不明显影响多糖浸出率的情况下浸出液体积越少越好所以确定
酶解过程的固液比为1:
10。
2.5酶解后热水浸提温度的影响
温度可以影响多糖的浸出率。
图2-7酶解后热水浸提温度的影响
Fig 2-7 Effects of water temperature after enzymolysis
从图2-7 中可以看出多糖浸出率随温度的上升而增加80℃时浸出率上升趋于平缓
考虑到温度过高易造成多糖的降解故酶解后热水浸提温度确定为95℃。
2.5.1酶解后热水浸提时间的影响
浸提时间可以影响多糖的浸出率。
7
图2-8 酶解后热水浸提的影响
Fig2-8 Effects of extracting time after enzymolysis
从图2-8 中可以看出当热水浸提时间达到90min时多糖浸出率不随时间的延长而显
著增加考虑到提取过程温度较高时间太长会影响所提多糖的活性和增加多糖中杂质的
溶出所以确定酶解后热水浸提时间为90min。
2.5.2酶解后热水浸提过程中加水量的影响
图2-9 酶解后热水浸提加水量的影响
Fig 2-9 Effects of amount of hot water added after enzymolysis
从图2-9 中可以看出多糖浸出率随加水倍数的上升而增加当固液比达到1:
40 时浸
出率上升趋于平缓考虑到浓缩过程的工作量在不明显影响多糖浸出率的情况下浸出液
体积越少越好所以确定酶解后热水浸提时的固液比为1:
40。
2.6醇沉阶段
醇沉:
将浓缩液转入醇沉罐中,加75%乙醇使醇含量达40%。
将醇沉后的上清液
转入单效浓缩罐中,回收乙醇至提取液相对密度达到1.24—1.28g/ml。
8
表2-1 茯苓多糖提取主要工艺指标
Table2-1 Poria cocos on main technological indexes extraction
编指标推荐值
号
1酶加入量1%
2热水浸提固液比1:
40
3热水浸提时间90min
4酶解固液比1:
10
5pH5.0
6酶解温度48℃
7提取液密度1.02g/ml
8出料系数16.1kg 提取液/kg 药材
9
3物料衡算
物料衡算是物料的平衡计算,是制药工程计算中最基础最重要的内容之一,是进
行药物生产工艺设计、物料查定、过程经济评估以及过程控制、过程优化的基础。
它
以质量守恒定律和化学计量关系为基础。
简单地讲,它是指“在一个特定物系中,进
入物系的全部物料质量加上所有生成量之和必定等于离开该系统的全部产物质量加上
消耗掉的和累积起来的物料质量之和”。
表示为:
∑ G进料 + ∑ G生成 = ∑ G出料 + ∑ G累积 + ∑ G消耗
式中
∑ G进料 -----所有进入物系质量之和;
∑ G生成 -----物系中所有生成质量之和;
∑ G出料 -----所有离开物系质量之和;
∑ G累积 -----物系中所有消耗质量之和(包括损失);
∑ G消耗 -----物系中所有累积质量之和;
所谓“物系”就是人为规定一个过程的全部或它的某一部分作为完整的研究对
象,也称为体系或系统。
它可以是一个操作单元,也可以是一个过程的一部分或者整
体,如一个工厂,一个车间,一个工段或一个设备。
而茯苓提取工艺物料衡算就是分别以提取工段和双效浓缩工段作为一个系统,进
行工艺设计的过程。
3.1茯苓提取工艺设计条件
(1)设计项目:
茯苓多糖车间工艺设计
(2)产品名称:
茯苓多糖
(3)产品规格:
纯度30%
(4)工作日:
300 天/年24h/天
(5)年生产能力:
300吨 日产量:
1000kg
提取工段:
提取温度:
80 C ;提取加热用蒸汽,压力:
0.475MPa
冷凝水进口温度 25 C ,出口温度 45 C
浓缩工段:
出料系数为 16.1kg 提取液/kg 药材,提取液密度为 1.02g/ml。
提取液在室温 25 C 进料;浓缩加热用蒸汽,压力:
0.475MPa
冷凝水进口温度 25 C ,出口温度 45 C ;浓缩真空度 0.03—0.05MPa
10
3.2茯苓提取工段物料衡算
采用水提醇沉法进行工艺设计,茯苓年处理量 300 吨,年工作日为 300 天,每天
生产 4 批,每批进行 6 小时。
每天处理量 W = 300 ⨯103 / 300 = 1000kg/批
以批为基准进行工艺计算,设放出药渣量为W4 ,忽略提取工段过程中物料损失。
每批处理量 W1 = 1000 / 4 = 250kg / 批
每批所得提取液量W3 = 16.1⨯ 250 = 4025kg / 批
两次共加水量W2 = (12 + 8) ⨯ 250 = 5000kg/批
依据质量守恒方程:
W1 + W2 = W3 + W4
即
250 + 5000 = 4025 + W4
求得药渣量W4 = 1225kg/批
药渣含水量 W5 = W4 - W1 = 1225 - 250 = 975kg / 批
假设提取罐中液体沸腾蒸发回流的量为总加水量的 1/4,
则提取罐中液体的回流量W6 =
1
4
W2 = 1225kg/批
3.3茯苓浓缩工段物料衡算
(1)提取液组成:
以 1 Kg 药材为基准,提取液量 m提 =16.1 Kg , ρ = 1020Kg / m3
V提 = m / ρ = 0.01578m 3
忽略提取液中有效成份的体积,则V提 = V水
25︒C 下的水的密度 ρ水 = 996.95kg / m3 则有:
m水 = ρ水V水 = 996.95 ⨯ 0.01578 = 15.732kg
m有效 = m提 - m水 = 16.1 -15.732 = 0.368kg
有效成分在提取液中的质量分数:
则x 0 = 0.368 = 0.023
16.1
(2)浓缩液的组成:
以 1 Kg 药材为基
11
准,设浓缩液量为 m浓 ,由于浓缩真空度 0.03~0.05Mpa,取 P=0.04Mpa, 则饱和温度
T= 75 C ,密度 ρ水 = 974.8kg / 3m ,取浓缩液密度 ρ浓 = 1150Kg / m3
则
m浓 -
m浓
ρ浓
ρ水 = m有效
即 m浓 = 2.42kg
有效成分在浓缩液中的质量分数
则x 2 =
0.368
2.416
= 0.152
以 1 批为基准进行工艺计算:
提取液进液量 F = W3 = 4025kg / 批
根据物料衡算式:
Fx0 = (F - M )x2
得出双效浓缩蒸出水总量 M:
M = F (1 -
x0
x2
) = 4025 ⨯ (1 -
0.023
0.152
) = 3515.95kg / 批
浓缩液量 L = F - M = 4025 - 3515.95 = 509.95kg / 批
12
4热量衡算
热量衡算是以车间物料衡算的结果为基础进行的,所以车间物料衡算是进行车间
能量衡算的首要条件。
能量衡算的主要依据是能量守恒定律,其数学表达形式为能量
守恒基本方程:
环境输入到系统的能量=系统输出到环境的能量+系统内积累的能量
对于制药车间工艺设计中的能量衡算,许多项目可以忽略,车间能量衡算的目的
是要确定设备的热负荷,而且在药品生产过程中热能是最常用的能量表现形式,所以
能量衡算可简化为热量衡算。
当内能、动能、势能的变化量可以忽略且无轴功时,根据能量守恒方程式可以得
出以下热量平衡方程式:
Q1 + Q2 + Q3 = Q4 + Q5 + Q6
式中
Q1 ------物料带入设备的热量.KJ
Q2 ------加热剂或冷却剂传给设备所处理物料的热量.KJ
Q3 ------过程热效应.KJ
Q4 ------物料离开设备所带走的热量.KJ
Q5 ------加热或冷却设备所消耗的热量.KJ
Q6 ------设备内环境散失的热量.KJ
在热量衡算过程中的 Q2 ,即设备热负荷,是衡算的主要目的
4.1茯苓提取工段热量衡算
茯苓的提取工段工艺过程中,需要计算出加热水蒸气的用量 W蒸 ,以及药液沸腾
蒸发回流所需冷凝水的量Wc 。
因为茯苓提取过程中无化学反应,仅发生物理变化,故 Q3 =0
4.1.1
Q2 的计算
设基准温度 t0 = 0 物料进料温度为 t1 = 25︒C
出料温度为 t 2 = 95︒C
查资料得 t0 - t1 之间平均温度下的定压比热容:
茯苓的比热容:
C p1 = 1.5KJ /(kg ⋅ ︒C) , 水 的 比 热 容 C p2 = 4.195KJ /(kg ⋅ ︒C) 。
13
按公式计算 Q1 :
Q1 = W1CP1 (t1 - t 0) W2CP 2 (t1 - t 0)
= 250 ⨯1.5 ⨯ 25 + 5000 ⨯ 4.195 ⨯ 25
= 533750KJ / 批
查资料得 t0 - t2 之间的平均温度下的定压比热容:
由于提取液浓度很稀接近于
水,则比热近似为水的比热为
Cp3 = 4.174KJ /(kg ⋅ ︒C) , C p4 = C p3 = 4.174KJ /(kg ⋅ ︒C) 。
95︒C 下水蒸汽的汽化潜
热 r= 2270.9KJ / kg
则按公式计算 Q4 :
Q4 = W1CP1 (t2 - t0 ) + W5C p4 (t2 - t0 ) + W3C p3 (t2 - t0 ) + W6r
= 250 ⨯1.5 ⨯ 95 + 975 ⨯ 4.174 ⨯ 95 + 4025 ⨯ 4.174 ⨯ 95 + 1225 ⨯ 2270.9
= 4787302.5KJ / 批
根据经验,茯苓提取工艺计算( Q5 + Q6 )一般为( Q4 + Q5 + Q6 )的 10%,
即
Q5 + Q6 = (Q4 + Q5 + Q6 ) ⨯10%
Q5 + Q6 =
0.1
0.9
⨯ Q4 = 531922.5KJ / 批
由公式得:
Q2 = Q4 + Q5 + Q6 - Q1
= 4787302.5 + 531922.5 - 533750 = 1583159.394KJ / 批
= 3721630KJ / 批
4.1.2提取加热蒸汽用量W蒸 的计算
提取加热用蒸汽在 P = 0.475Kpa汽化潜热r1 = 2119.3KJ / kg
按公式计算加热蒸汽用量W蒸 :
Q2 = W蒸r
W蒸 = 3721630 ÷ 2119.3 = 1756.066kg/批
4.1.3提取冷凝水用量Wc 的计算
14
平均温度下 t = 45 + 25 / 2 = 35︒C 的定压比热容为 4.174KJ /(kg ⋅ ︒C)
则提取罐中药液沸腾蒸发回流所产生的热量等于冷凝水吸收的热量
W6r = WcCP (t2 - t2 )
由此得冷凝水消耗量Wc =
1225 ⨯ 2270.9
4.174 ⨯ (45 - 25)
= 33323.58kg / 批
4.2茯苓浓缩工段热量衡算
蒸发浓缩的依据是利用溶剂具有挥发性而溶质不挥发的特性使两者实现分离。
4.2.1进料比的计算
以 1 批为基准, 忽略操作过程物料损失,物料以平行方式进料。
设进料比为 x,设第一效蒸发量为 M1 ,第二效蒸发量为 M 2 ,则
M 1 M 2 = x,M 1 + M 2 = M
xM
M
推出:
M 1 =
,M 2 =
1 + x
1 + x
同理可推出第一效进料量 F1 =
xF
1 + x
,浓缩液出量 L1 =
xL
1 + x
;
1 + x
1 + x
对第二效进行热量衡算(第 2 效加热蒸汽为第一效产生的量,过程中无热量补
给)
Q1 + Q2 +Q3= Q4 + Q5 + Q6
由于本操作属于纯物理操作故 Q3 = 0 ,设基准温度 t0 = 0 ,物料进料温度 t1 = 25 C
由于浓缩真空度 0.03~0.05Mpa,取 P=0.04Mpa,物料出料温度 t2 = 75 C 。
由于提取液浓度很稀接近于水,0~25 C 物料平均温度下的比热容近似于水的比
热容 C1 = 4.195KJ /(kg ⋅ ︒C)
其中
Q1 = F2C1 (t1 - t0 )
由于浓缩液浓度很稀接近于水 0~75 C 物料平均温度下的定压比热容近似于水的
比热容 C2 = 4.174KJ /(kg⋅ C)
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