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脱毒苗
脱毒苗
在农业生产中,一些农作物经过几代种植,品质一般都同现不同程度的退化,在马铃薯、蔬菜、果树、花卉等农作物上表现得尤为突出。
根据科学家的长期研究,农作物品质衰退的原因主要是植物病毒的感染。
为获得高产,生产中就必须培养出无病毒苗木,即脱毒苗木,这就是脱毒苗的概念。
我国的农业科技工作者,利用生物技术措施,从感染病毒的植株中获得了无病毒种植的苗木材料。
如马铃薯植株的顶端分生组织很少或没有病毒,常采用顶端分生组织培养技术得到无病植株,即脱毒马铃薯。
用这种植株结出的薯块来作原种,繁殖更多的无病毒种薯,供生产中大面积推广使用。
脱毒苗技术现在也运用到了花卉、果树、魔芋等农业生产中,从而生产出优质无毒花卉球种、无病毒果树苗木等。
再议果树“脱毒苗”
发布:
2009-11-2010:
02|作者:
于新刚|来源:
水果邦
[i=s]本帖最后由于新刚于2009-11-2707:
32编辑
又是一个苗木销售的大好季节!
不法商家“隆重”推出“脱毒苗”(实际上应该是无毒苗,国家没有脱毒苗的生产技术规程。
因为,目前基本没有无毒苗,所以称为脱毒苗),老百姓纷纷上当。
市场上的所谓“脱毒苗”,好的是用脱毒母株采集接穗,嫁接而成。
相当一部分的,就是普通嫁接苗而已。
真正的意义上的“脱毒苗”(无毒苗),是用植物的茎尖,切片,组培而成。
或用砧木组培小苗,在无菌、无毒条件下,显微嫁接上脱毒的品种茎尖。
这些,都需要组培设备,及营养钵,在温室内培养,后移栽大田,培养而成。
造价基本上在10元左右。
你要买脱毒苗:
一看:
是否有组培实验室。
二看:
是否有温室或大棚内的营养钵小苗
三看:
大田移栽的苗木(看不出嫁接口)
若没有上述的三个条件;祝贺你,购买假苗成功!
我反复的讲,若栽培脱毒苗必须:
1.在500m,最好20~25km内没有同类树种,或寄主相同的螨类、蚜虫类、蝉等刺吸式口器的害虫(目前在中国不易找到)
2.地下挖深度为1.2~1.5m左右沟,并用水泥灌沟,以阻挡地下线虫。
3.全园架设防虫网,密度为蚜虫、螨类不能侵入。
4.土壤为生土,以前没有种植过果树。
5........
中国几个老百姓能做到,做不到,2~3年后,全园变脱毒为有毒,有何意义?
我真的不明白,中国的果农们,你要干什么?
补充:
栽培品种脱毒后,只要在大田进行人工嫁接,基本都会感染病毒病。
只有在组培条件下,进行茎尖嫁接后,在温室进行营养钵培养,后移栽大田(无地下线虫、架设防虫网等),才会培养出真正的“无毒苗”。
附录:
脱毒技术
1、热处理脱毒技术 对果树苗木整株或植株的一部分(如接穗)在钝化病毒的温度和植物休能忍受温度之间的温度范围内,保持70%至80%的相对温度的热处理装置中处理一定的时间,杀死病毒而保持处理材料的生理活性。
如柑桔速衰病毒的幼苗黄化株系,在38℃恒温条件下,处理12周即可脱毒。
2、茎尖培养脱毒技术 病毒侵入植物体后,一般是全身扩展的,但植物不同组织和不同部位病毒的分布和浓度有一定的差异,甚至有的组织或部位无病毒,如除种子之外,在生长点附近即茎尖和根尖的分生组织部位多不含病毒。
但植物体不含病毒的部分是极小的,不超过0.1至0.5毫米。
这样小的无病毒组织,采用组织培养技术可获得完整的无病毒植株培养做母本树,生产无病毒嫁接材料即接穗。
3、热处理与茎尖培养结合脱毒技术
浅谈马铃薯脱毒苗快繁生产管理技术
来源:
中国论文下载中心 [10-03-2416:
38:
00] 作者:
周淑兰 编辑:
studa090420
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论文关键词 马铃薯脱毒苗;快繁;管理技术
论文摘要 从培养基制作、温度控制、瓶装苗及其污染控制、消毒灭菌和定期检查等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁生产管理技术,以期为马铃薯脱毒苗快繁生产提供参考。
随着高科技的发展,作为植物营养繁殖的一个新手段,组织培养技术成为现代生物领域及现代农业生产的一项基本操作手段,其繁殖速度是一般常规方法所不能比的。
通过无菌方法进行快繁的方法能在较短的时间和较少的空间内由1个个体迅速繁殖大量群体,实验室脱毒马铃薯试管苗的离体繁殖正是借助这一显著优势在国内外种薯生产上得以广泛利用,是脱毒马铃薯原种大规模产业化生产的前提。
青海省农科院生物中心是青海省最大的脱毒马铃薯科研、生产相结合的经济实体,生产能力达200多万株脱毒马铃薯试管苗,为青海省脱毒马铃薯原种生产最大的省级单位。
经过多年的实际探索及对马铃薯实验室的改进,大幅度增加了脱毒马铃薯原种的生产数量,而脱毒马铃薯的优势,即高产和不易腐烂,被农民(特别是靠天吃饭及高海拔地区的农民)及市场接受,收到了良好的经济和社会效益,为青海省的经济发展做出了贡献。
1培养基及其制作对瓶装苗的生长影响
1.1培养基材料对试管苗的生长影响
培养基包括大量元素、微量元素、铁盐、食用白糖、自来水、琼脂。
试管苗单节切断繁殖宜采用固体培养基,如果工作人员在培养基灭菌过程中,不慎放气不均,一般灭菌后拿出来的培养基过稀(成糊状),影响接苗质量和幼苗生长;相反,如果培养基硬度太大,切断不易插入培养基中,影响苗切断与培养基的接触。
1.2培养基制作对试管苗成活率的影响
在快繁苗时,所需的培养基一般应提前2周做,以防使用被污染的培养基,影响试管苗的成活率。
如笔者4月中旬快繁大西洋苗时,由于培养基的污染超过了10%,影响很大。
另外,培养基的瓶或盒上的水珠影响快繁苗的污染和强壮生长。
2温度对瓶装脱毒苗生长的影响
夏天昼长夜短,日光灯照射比冬天短,而自然照射光多,可提高组培瓶苗移栽后的成活率;但夏天比冬天室内温度高,污染增高,所以室内需装空调。
一般温度应控制在20~25℃范围内,温度高于26℃,则苗顶端易产生烧苗现象,高于33℃,则苗停止生长。
另外,瓶中或盒中的培养基要比平时多放,以防抽干盒或瓶中的培养基,影响幼苗的正常生长。
生长间的生长架以用玻璃层为宜,因利用散射光可提高组培瓶苗移栽后的成活率。
试验表明,用玻璃作为培养层的生长架比用铁作为生长架好。
用铁做的生长架,散热效果比较差,当生长间放满用铁做的生长架时,一般早上关灯后,继续让空调再开2~3h才能保证整个生长间的温度较适合幼苗的生长。
3快繁瓶装苗的控制
在快繁脱毒苗时,瓶中如少放脱毒苗,其长得快,脱毒苗节间长、叶大且须根发达;如放多脱毒苗,其长得慢,脱毒苗弱、叶小且挨瓶的苗腐烂。
这2种情况对快繁都不利,故快繁苗时,在瓶中放40~50根脱毒苗为宜;同时快繁脱毒苗应控制苗的节间。
4瓶苗污染的控制
在脱毒瓶苗的继代培养过程中,常因种种原因出现细菌类和真菌类污染,细菌污染苗极弱,且扩繁后下一代大部分表现为细菌污染,在生产中通常用抗生素来处理细菌污染。
对于真菌污染的脱毒瓶苗,除严格操作规程外,可在培养基中配制不同浓度多菌灵来减轻瓶苗污染率。
最主要是快繁留的基础脱毒苗没有细菌和真菌的污染。
而对于继代扩繁4年以上的瓶苗,要定期进行病毒检测确认是无病毒苗。
因此,要定期更新脱毒瓶苗,每年应通过剥离茎尖组织的办法培养新鲜无病毒瓶苗,以确保继代培养脱毒瓶苗质量。
5无菌操作室内消毒灭菌
5.1操作前消毒
一是无菌室刚开始工作或间隔1~2个月未进行消毒时,先把高锰酸钾倒入培养皿,再倒入甲醛,关闭门窗进行熏蒸消毒,间隔1~2d即可在室内工作;二是将工作服、口罩、拖鞋、盛装75%的酒精瓶、剪刀、镊子、苗源瓶、快繁瓶等无菌室所需物品放在无菌室固定位置,启动超净工作台,通风杀菌,并将室内紫外灯打开消毒,工作人员快速离开无菌室,灭菌25~30min即可。
5.2操作中消毒
工作人员进入隔离间,穿戴好消毒服装,在组培室用75%的酒精将双手消毒,再用酒精泡的酒精棉擦超净工作台,同时将镊子、剪刀和支撑干用酒精擦过后,放在加热器进行5~6s的消毒,并将已挑拣好的无污染的脱毒苗放在超净工作台上,先打开灭菌过的快繁瓶放在超净工作台上,然后拧开脱毒苗瓶的口,用已灭菌过的镊子将脱毒苗瓶中的小苗夹出瓶口,只留根部在瓶内,用剪刀剪掉根部,然后再用镊子夹小苗离快繁瓶口1~2cm(注意不要让小苗挨上快繁瓶瓶口,以防感染),剪带1片小叶茎放在快繁瓶中。
盖上盖子,在苗瓶外壁用打号枪注明该品种的编号及快繁日期。
6定期检查
放在生长间的快繁脱毒苗,一般每隔7d要用稀释好的清洁尔灭喷撒灭菌,每天早关灯和晚开灯时,发现有污染的瓶苗,必须马上将其拿出生长间,并放入高压灭菌锅灭菌,然后用清洁热水加入适量洗衣粉,用刷子涮洗苗瓶,并换水冲洗,然后倒置木架上晾干水珠待用。
健康苗20多天就可快繁或移栽温室。
7取苗
在取苗时,有时也有真菌污染的脱毒苗,不能作快繁苗但可以作移栽苗。
如果下一批苗要得急,取苗的同时需做培养基,若在同一间进行,带有真菌的脱毒苗被取出时,就会污染正在做的培养基,故应分开进行。
草莓脱毒苗生产技术规范
发布日期:
2010-10-17 浏览次数:
87
前言
为认真贯彻福建省强制性地方标准草莓脱毒苗质量标准,指导我省草莓脱毒苗生产,提高草莓苗的质量,特制定本标准。
本标准于2001年6月26日首次发布。
本标准由福建省质量技术监督局提出。
本标准由福建省农科院生物技术中心负责起草。
本标准主要起草人:
宋亚娜、周莉娟、姜秀勇、郑伟文。
1范围
本标准规定了草莓脱毒苗生产过程中的定义、培育技术和病毒检测等技术要求。
本标准适用于通过组织培养技术培育的不带草莓斑驳病毒(S.oV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、革莓镶脉病毒(SVBV)和草莓皱缩病毒(SCrV)的草莓脱毒苗的生产。
2引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中的引用而构成为本标准的条文。
本标准出版时,所示版本均为有效。
所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
DB35/T130.2-2001《草莓脱毒苗质量标准》
3定义
本标准采用下列定义。
草莓脱毒苗
经过组织培养脱毒处理或直接引进,经检测后确认不带指定病毒的种苗。
4脱毒苗培育技术
4.1脱毒组培瓶苗的培育技术
4.1.1优良品种选择
选择适宜当地栽培的高产优质品种进行脱毒。
4.1.2草莓脱毒的主要方法
4.1.2.1茎尖组织培养法
4.1.2.1.1外植体选择
选择无病虫、品种纯正的健壮植株,切取带生长点的茎段3cm~4cm,用流水冲洗干净。
4.1.2.1.2茎尖剥离
将表面清洗过的材料置于超净工作台上,用70%酒精表面消毒30s,再用0.1%升汞消毒5min~10min,并不断搅动:
然后用无菌水冲洗3次~5次,去鳞片,在解剖镜下用针挑取0.2mm~0.3mm的茎尖,立即接种于茎尖分化培养基中。
4.1.2.1.3培养条件
草莓茎尖培养所需要温度为23℃~28℃,光照强度为1000Lx~3000Lx,每天光照12h~16h。
诱导培养2~3个月,待丛生芽形成后转入增殖培养基。
4.1.2.1.4组织培养快繁
将在茎尖分化培养基础上诱导分化的第一代丛生芽进行病毒检测,合格的试管苗在增殖培养基上增殖,增殖培养每20d~30d继代一次(总继代次数不超过10代),选2cm~3cm的小苗转入生根培养基,经过20d~30d生根培养,形成完整植株的组培苗出售给生产单位或个人;不合格的试管苗全部销毁。
4.1.2.2花药组织培养法
4.1.2.2.1外植体选择
摘取花萼未张开花粉母细胞处于单核期的花蕾,放入4℃冰箱中预处理1d~2d。
4.1.2.2.2培养过程
取预处理过的花蕾,在无菌条件下用70%酒精浸泡20s,再用0.1%升汞消毒5min~8min,并不断搅动,无菌水冲洗3次~5次,然后在无菌条件下中去除花萼、花托等,用镊子挟取黄色花药立即接种于愈伤组织诱导培养基中。
4.1.2.2.3培养条件
愈伤组织培养进行暗培养,培养温度为23℃~28℃。
4.1.2.2.4组织培养快繁
愈伤组织诱导培养2~3个月后,将0.2c,m大小的愈伤组织转入分化培养基中诱导丛芽分化,待分化成茁后,进行病毒检测,对合格的试管苗进行增殖,增殖培养每20d130d继代一次(总继代次数不超过lO代),选2cm~3cm的小苗转入生根培养基,经过20d~30d生根培养,形成完整植株的组培苗出售给生产单位或个人;不合格的试管苗全部销毁。
4.2隔离快繁培育技术
隔离快繁培育技术包括脱毒原原种苗繁殖、脱毒原种苗繁殖和脱毒生产用苗繁殖。
4.2.1脱毒原原种苗繁殖
经过病毒检测的脱毒组培苗移栽成活的植株为脱毒原原种苗。
脱毒原原种苗每年应进行一次病毒检测,发现问题即汰除。
检测机构要将病毒检测结果报告有关部门。
4.2.2脱毒原种苗繁殖
由脱毒原原种苗定植于无土壤线虫、无革莓病源和防虫隔离区内,分株繁殖的第一代植株为脱毒原种苗。
脱毒原种苗接受病毒检测机构的定期病毒检测,一旦发现问题立即更换。
4.2.3脱毒生产用苗繁殖
由脱毒原种苗定植于无土壤线虫、无草莓病源和防虫隔离区内,分株繁殖后代为脱毒生产用苗。
脱毒生产用苗接受病毒检测机构的定期病毒检测,一旦发现问题立即更换。
脱毒生产用苗直接提供给生产单位或个人。
5病毒检测
5.1病毒种类
在我省危害草莓的病毒种类主要有四种,分别为草莓斑驳病毒(SMoV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、草莓镶脉病毒(SVBV)和草莓皱缩病毒(SCrV)。
5.2检测方法
草莓脱毒苗的检测按DB35/T130.2.2001《草莓脱毒苗质量标准》第5章执行。
植物脱毒苗组织培养技术的研究
论文标题:
植物脱毒苗组织培养技术的研究
StudiesofTissueCultureofVirus-freePlant
论文作者裴智能
论文导师吴光金,论文学位硕士,论文专业森林保护
论文单位中南林学院,点击次数47,论文页数39页FileSize2053k
2004-04-01论文网植物;组织培养;脱毒苗;病毒
Plant;Tissueculture;Virus-freeseeding;Virus;
本论文对菊花、郁金香和康乃馨进行了脱除病毒培育无毒苗的适用技术研究。
现将主要结果摘要如下:
菊花脱毒苗培育试验中,以患花叶病“国庆”菊花幼嫩茎尖长0.5-0.8mm为外植体。
外植体愈伤组织的诱导和生长及分化出芽均受到BA和NAA配比的影响。
在MS+BA2.0mg/1+NAA0.1mg/1培养基上培养,愈伤组织诱导效果最好,诱导率达96.0%;愈伤组织分化出芽以MS+BA3.0mg/1+NAA0.1mg/1效果最佳,分化率达60.0%,每块愈伤组织平均分化出4个芽。
幼苗2cm长时切割转接到1/2MS培养基上培养,10天后长出白色小根,生根率达78.0%;在含有NAA0.1-0.5mg/1培养基上生根率可达92.0%以上,在1/2MS+NAA0.1mg/1中培养的每株生根数最多。
郁金香脱毒组织培养,以0.3-0.5mm茎尖为外植体。
茎尖愈伤组织的诱导在MS+NAA2.0mg/1+BA1.5mg/1培养基上诱导率达94.0%;愈伤组织分化出芽在MS+NAA0.5mg/1+BA1.5mg/1培养基分化率达86.0%;用茎尖直接分化芽的试验中,在MS+NAA0.1mg/1+2,4-D0.1mg/1上茎尖成活率达90.0%,分化率达60.0%;郁金香组培苗生根培养,在1/2MS+NAA0.5mg/1培养基中生根率达80.0%,平均每苗生根5.2条。
康乃馨脱毒组培试验表明,用0.3mm茎尖接种,以MS+BA0.7mg/1+NAA0.1-0.2mg/1为培养基诱导愈伤组织效果好,诱导率为90.0%;愈伤组织分化出芽以MS+BA0.8mg/1+NAA0.2mg/1培养分化最好,分化率为74.0%,平均每块愈伤组织有芽5.9个。
在1/2MS+NAA0.01mg/1+IBA0.05-1.0mg/1上诱导生根时间短,根条数适中,生根率为86.0-94.0%;在康乃馨组培试验中采取降低培养温度、增加光照强度,在培养基中加入20万单位青霉素可减轻玻璃苗现象。
三种花卉的组培苗,经症状观察、汁液传染试验、内含体染色检查等病毒学试验检测,以后两种方法结果为依据,菊花脱毒苗有19株,脱毒率63.3%;郁金香、康乃馨脱毒苗均有13株,脱毒率均为65%。
Threekindsofvirus-freeplantsaboutChrysanthemum,TulipandCaryophylluswerestudiedinthepaper.Intestofvirus-freeChrysanthemumplant,theChrysanthemumstemtipswithalengthof0.5-0.8mmissuitableforexplants,whichcamefrom"Guoqing"ChrysanthemumwithCMV.TheywereinoculatedinMSmediumwithdifferentconsistencyofBAandNAA.TheresultsshowedthattheproportionofBAandNAAaffectedcallusinducingandgrowing.CallusgrewwellonMS+BA2.0mg/l+NAA0.1mg/l,96.0%explantsformed.CallusdifferentiationwasaffectedbydifferentconsistencyofBAandNAA.About60.0%callusdevelopedonMS+BA3.0mg/l+NAA0.1mg/l,andtherewere4budseverycallus.Thebudswerecutandtransferredinto1/2MSmedium,andtheygeneratedsmallwriterootsafter10days.Therootingratewas78.0%into1/2MSmediumwithoutNAA,andmorethan92.0%intomedoumwithdifferentconsistencyofNAA.Butitwasgoodtorootingintomediumwithl/2MS+NAA0.1mg/l.Intestofvirus-freeTulipplant,stemtipswithalengthof0.3-0.5mmissuitableforexplants.StemtipsinducedcalluswellonmediumMS+NAA2.0mg/l+BA1.5mg/l,with94.0%explantsformed.About86.0%callusofTulipdevelopedonMS+NAA0.5mg/l+BA1.5mg/l.About60.0%TulipstemtipsdirectlydiffrentedintobudswellonMS+NAA0.1mg/l+2,4-D0.1mg/l.Therootingratewas80.0%intol/2MS+NAA0.5mg/l,andtherewere5.2budseverycallus.Intestofvirus-freeCaryophyllusplant,stemtipswithalengthof0.3mmissuitableforexplants.TheCaryophylluscallusgrewwellonMS+BA0.7mg/l+NAA0.1-0.2mg/l,90.0%explantformed.About74.0%callusdevelopedonMS+BA0.8mg/l+NAA0.2mg/l,andtherewere5.9budseverycallus.Therateofrootingandtranspiantwere86.0%-94.0%onl/2MS+NAA0.01mg/l+IBA0.05-1.0mg/l.TheratioofCaryophyllusglassyplantcounldbelightenedthroughreducingculturetempurature,increasingilluminationoraddingpenicillinintomedium.Virus-freeplantsofthreekindsofflowerweretestedbysaptransmission,symptomobservingandendosomedyring.Bytesting,therewere19Chrysanthemumvirus-freeplants,whichvirus-freerateis63.3%,13Tulipvirus-freeplantsandCaryophyllusvirus-freeplants,whichvirus-freerateis65%inthepaper.
滁菊组织培养脱病毒技术与脱毒苗的应用研究
论文标题:
滁菊组织培养脱病毒技术与脱毒苗的应用研究
ResearchonVirus-freeTechniqueofChuzhouChrysanthemumbyTissueCultureandApplicationofVirus-freePlantlets
论文作者
论文导师石淑稳,论文学位硕士,论文专业种植业
论文单位华中农业大学,点击次数45,论文页数40页FileSize2061K
2006-06-01论文网
ChuzhouChrysanthemum;TissueCulture;Virus-free;HeatingTreatment;HighYieldCultivation
本文对侵染滁菊[Dendranthemamorifolium(Ramat)Tzvel"chuju"]的病毒种类进行了鉴定,并采用改良热处理结合茎尖分生组织培养的方法,初步建立了滁菊组培脱毒快繁技术体系和高产栽培技术体系,获得主要结果如下:
1.经过指示植物鉴定、体外抗性测定、血清学测定(ELISA)和电子显微镜观察,鉴定出侵染滁菊的病毒质粒主要是番茄不孕病毒(TAV)、马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)和黄瓜花叶病毒(CMV)。
2.经过试验,筛选出滁菊芽增殖
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