解剖实验报告.docx

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解剖实验报告

蛙类坐骨神经–腓肠肌标本制备、不同频率刺激对肌肉收缩的影响

一．目的要求

1.掌握蛙类双毁髓的试验方法；

2.掌握坐骨神经—腓肠肌标本标本的制作方法；

3.观察不同刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。

二．基本原理

蛙类动物的某些基本活动，如神经的生物电活动、肌肉收缩等与哺乳动物相似。

其离体组时所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握，而且动物来源丰富，因此在生理实验中常用蛙类的坐骨神经—腓肠肌标本和坐骨神经标本来观察组织的兴奋性、刺激与反应的规律以及骨骼肌收缩的特点等。

肌肉受到一次阈上刺激而产生的一次收缩为单收缩，其过程可分为三个时相，即潜伏期、缩短期和舒张期。

肌肉受到连续的阈上刺激时，如果刺激间隔小于单收缩的过程，相邻两单收缩的时相会出现融合，表现为强直收缩现象。

如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩的缩短期，称完全强直收缩，如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩的舒张期，称不完全强直收缩。

使用生物信号采集处理系统，可以观察到腓肠肌收缩的情况。

三．实验材料

实验动物：

健康青蛙一只；

实验器材和药品：

蛙类手术器械一套（粗剪刀一把，组织剪一把，眼科剪一把，镊子一把，探针一根、玻璃分针2把，蛙钉4个、培养皿一个，蛙板一个、滴管一个、棉线若干），张力换能器，肌槽，刺激电极，铁架台，生物信号采集处理系统，微机，任氏剂。

四．实验步骤

捣毁蟾蜍脑脊髓：

取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。

左手握蛙，用食指下压头部前端，拇指按压背部，使头前俯。

中指与无名指夹其前肢，无名指与小指夹其后肢，使整个躯干做最大屈曲。

把探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使其逐渐刺入整个椎管内，完全彻底捣毁脊髓。

脊髓破坏完全的标志是：

下颌呼吸运动消失，反射消失，四肢松软。

剪除躯干上部和内脏，去皮，制备下肢标本：

用粗剪刀在骶髂关节前1厘米处剪断脊柱，握住蟾蜍下肢，沿躯干两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。

此时躯干上部及内脏即全部下垂。

剪除全部躯干及内脏组织。

剪去肛周皮肤；用圆头镊子夹住脊柱，注意不要碰到坐骨神经，捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。

将全部皮肤剥除后，把标本置于盛有任氏液的培养皿中。

2.1.1.3洗净双手和用过的全部手术器械。

分离两下肢：

避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开，将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。

2.1.1.5取出一下肢，用蛙钉固定于蛙板上，固定时要注意，坐骨神经和腓肠肌朝上。

先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分直至腘窝，在分离过程中，把神经周围的结缔组织去除干净，并把神经的细小分支剪断，但要注意不要用金属器械碰触神经，也不要对神经过度牵拉。

实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。

用玻璃分针游离腓肠肌，并在下面穿线，在跟腱处打结。

在结扎线的下方剪断跟腱，在膝关节处把除腓肠肌外的小腿其他部分剪除。

注意保持完整的腓肠肌。

2.1.1.7用棉线在靠近脊柱的位置结扎坐骨神经，并在结扎线的上方剪断神经，用眼科剪剪断坐骨神经的全部分支。

从腘窝处开始剪掉大腿所有的肉，尽量把股骨刮干净，在膝关节上至少1cm处剪去上段股骨。

将标本浸入任氏剂的培养皿中。

实验装置与仪器连接：

1.将标本股骨残端固定在肌槽上的小孔内；2.将结扎腓肠肌肌腱的棉线与张力换能器连接，调节棉线的松紧，要与桌面垂直；3.将神经置于肌槽的刺激电极上，用任氏剂保持标本湿润；4.刺激电极插入微机上的刺激输入孔；5.张力换能器与微机相应通道相连。

打开电脑，进入生物信号采集处理系统，在菜单栏选择“实验项目”--------》“神经肌肉”-------》“刺激强度与反应的关系实验模块”点击开始，调节刺激参数，使频率自动逐渐递增，串间隔为2.连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线。

五．结果与分析

不同频率刺激对肌肉收缩的影响：

串间隔为2,频率增量为1时的张力变化（如图）可见单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩。

分析：

刺激强度到达阈刺激时腓肠肌开始收缩，在最大刺激收缩力前随刺激强度增大而增大，到达最大刺激强度后，收缩力不发生明显改变；在最大刺激强度条件下，某较小频率使腓肠肌发生单收缩（如图中第一次刺激），频率增大到，单收缩变为不完全强直收缩（如图中第2-6次刺激），频率继续增大，不完全强直收缩变为完全强制收缩（如图中第7、8次刺激）。

不同的腓肠肌其阈刺激，最大刺激均存在差异；其单收缩，不完全强直收缩和完全强直收缩所要频率也不尽相同。

六．实验总结

本次试验严格按照操作步骤进行，所得实验结果较为理想，很容易观察到腓肠肌的单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩现象。

在实验的过程中，制备坐骨神经-腓肠肌标本是最繁琐的步骤，也是实验成功的关键所在，期间，我们进行的比较缓慢，生怕弄错了哪一步，一步步想原理、回忆老师是怎么说的，所幸的是我们最终成功了，得到了较好的结果，在这次的不断尝试和思考中，很好地锻炼了我们的动手能力和思维能力。

离体蛙心灌流

一、【目的要求】

1、学习斯氏离体蛙心灌流法;

2、了解心肌的生理特性;

3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素（Adr）,乙酰胆碱（ACh）等对离体心脏活动的影响。

二、【原理】

将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。

血钾浓度过高时（高于7.9mmol/L），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。

血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。

血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。

血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。

肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。

三、【实验仪器】

青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘）、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿（或小烧杯）、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液。

蛙心套管（斯氏套管或八木氏套管）、套管夹、0．65％NaCl、5％NaCI、2％CaCl2、1％KCl、1：

5000肾上腺素、1：

10000乙酰肌碱、300U／mL肝素。

四、【方法与步骤】

1、斯氏蛙心插管法

（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管（见右图）。

在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎（动物个体小时，结扎位置可靠上些）。

再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量（套管内2～3cm高度）任氏液（内加入一滴肝素溶液）的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥（见右图）。

当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口）。

此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功（否则需退回并重新插入）。

用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。

稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧（不得漏液），再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管。

轻轻提起套管和心脏，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系，使心脏离体（切勿损伤静脉窦）。

用任氏液反复冲洗心室内余血，使套管内灌流液不再有残留血液。

保持套管内液面高度一致（1.5～2cm），即可进行实验。

（2）将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉（不可夹得过多，以免因夹破心室而漏液）。

再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连（如右图）。

注意：

勿使灌流液滴到传感器上。

调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。

2、实验观察

（1）记录正常心搏曲线

（2）改用0．65％NaCI溶液灌流，并作好加药标记，观察心搏变化。

待曲线氏插管装置出现明显变化时，立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗2—3次，待心搏恢复正常。

注意：

换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线，同时保持灌流液面一致（以下同）。

观察可得，NaCI溶液会阻遏心脏搏动。

（3）迅速用新鲜任氏液清洗2～3次，待心搏恢复正常。

向套管内加入1～3滴2％CaCI：

溶液，观察并记录心搏曲线的变化。

当出现明显变化时，立即更换任氏液，待心搏恢复正常（如果恢复迟缓，可多次冲洗）。

（4）同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液，记录心搏曲线的变化。

当心搏曲线变化时，同法更换灌流液，待心搏恢复正常。

（5）同法记录套管中加入l～2滴的肾上腺素溶液（1：

10000）后心搏曲线的变化。

（6）同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液（1：

10000）后心搏曲线的变化。

五、【实验结果与原因分析】

曲线的幅度————收缩的程度

曲线的密度————心率

曲线的基线————舒张的程度

1、正常收缩曲线图

分析：

2、滴加含钠离子溶液图

分析：

滴加Na离子溶液后，心跳减弱，这种现象出现的原因是由于灌注液中缺乏Ca2+，当Na＋明显增高时，膜内外钠离子的浓度梯度增大，因此，细胞Na离子内流加快，去极速度和幅度均增加，导致传导性和自律性增高。

同时，Na离子内流的增多促进细胞内Ca2＋的外运使细胞内Ca2＋浓度降低，因此，心肌收缩能力减弱。

3、滴加2%CaCl溶液

分析：

细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。

[Ca2＋]

增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。

[Ca2

＋]增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。

Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。

[Ca2＋

]降低时，所引起的变化与高钙时相反。

因此加入CaCl2后，心率减少、振幅减少，基线上移。

4、滴加1%KCl溶液

分析：

滴加1％KCl后的心搏曲线，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度逐渐下降，最后停止在基线处，即心脏停博于舒张状态。

因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低。

所以心搏曲线振幅减小。

5、滴加1：

10000肾上腺素溶液

分析：

滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增大。

其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强。

另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强。

6、滴加1：

10000乙酰胆碱溶液

分析：

上图可示，蛙心收缩减弱，心率减慢，最后出现蛙心停止舒张阶段。

其机理为：

乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合，一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性，促使K+外流，将引起：

1）窦房强细胞复极时K+外流增多，最大复极电位绝对值增大；Ik衰减过程减弱，自动除极速度减慢。

这两方面因素导致窦房自律性降低，心率减慢。

2）复极过程中K+外流增加，动作电位2、3期缩短，Ca2+进入细胞内减少，使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱。

六、【实验总结】

通过实验前认真预习和听老师讲解，本次试验进行的比较顺利，其中最难也是最关键的一步要数将套管插入心室了，我们最开始也没有很好地插进去，但意识到错误后，经过调整，最后我们总算插对了，也得到了比较好的结果。

通过本次课程的学习，不仅提高了我的动手能力、加深了我对心搏规律的认识，更教会了我遇到挫折、犯了错误并不可怕，关键是要坚持下去并不断的向对的方向调整，这样成功自会光临。

小鼠骨髓半横切

一、实验目的：

观察小白鼠脊髓半横切之后的表现，加深对脊髓功能的认识。

二、实验原理：

脊髓是高位中枢与外周的感觉、运动功能联系的传导道。

在正常情况下痛觉、温度觉、部分触-压的传导路径先交叉再上行。

肌肉本体感觉和部分触-压觉传导路径先上行再交叉。

脊髓损伤时，外周血管平滑肌紧张性下降，血管扩张。

三、实验器材：

小白鼠、乙醚、蛙板、青霉素空瓶、药棉、手术缝针、丝线、解剖刀、剪刀、眼科手术刀、镊子。

四、实验步骤：

1.用乙醚麻醉小白鼠；

2.把小白鼠俯卧和固定在改装了的蛙板上，剪去胸腰部背面的毛，在正中处用解剖刀纵切皮肤，画一个1.5cm长的切口；

3.用解剖针沿中线划肌肉，直到针划到脊柱上，将解剖针顺着两椎体的缝隙插入椎管，然后将解剖针向一方上挑，即破坏了一方的脊髓。

4、等待小鼠苏醒，观察小鼠的活动。

五、实验结果：

当上述手术成功时，可观察到如下结果：

（1）小白鼠在运动时，与脊髓损伤同侧的后肢不能运动。

（2）用镊子夹捏不会运动的后肢时，小白鼠发出吱吱的叫声。

（3）镊子夹捏脊髓未被损伤一侧的后肢，小白鼠却没有叫声。

以上结果说明：

（1）由大脑发出的运动指令到达脊髓后，通过脊髓白质的神经纤维继续向下传送，脊髓两侧的运动神经纤维大都在本侧里行走（即不交叉到对侧）。

在脊髓被损伤的一侧，运动指令无法传到横切以下的部位，该侧后肢得不到运动指令，因而不能随意运动；脊髓未遭横切的一侧，大脑发出的运动指令，可以通过脊髓白质的神经纤维传到后肢肌肉，所以这一侧后肢运动如常。

（2）脊髓损伤一侧的后肢虽瘫痪，但皮肤的痛觉仍存在，这是由于脊髓内接受皮肤感觉信息的神经纤维是交叉到对侧（脊髓未被损伤一侧），然后问上传导到大脑，产生痛觉引起小白鼠鸣叫；同理，会运动一侧后肢的皮肤痛觉反应不存在，是由于传导痛觉信息的神经纤维交叉到脊髓被横切一侧，传导纤维被切断，痛觉信息无法上传到大脑，因而不产生痛觉反应。

六、注意事项：

（1）本实验成功的关键在于手术。

首先麻醉要适度，麻醉过深小白鼠易死亡，过浅小白鼠易苏醒，会给手术带来不便。

其次，用柳叶刀横切一侧脊髓时要防止损坏对侧脊髓。

（2）半横切部位必须在相当于第二腰椎的脊髓处，实验效果才好。

（3）手术中要防止出血过多，术后伤口应用丝线缝合，饲养几天再进行观察效果更好。

七．实验感想

通过本次实验，我们切实了解了脊髓神经控制运动的机理。

虽然因为本次实验比较难做，我们最后挑骨髓的时候没有成功地破坏一边的骨髓，以致最后没有得到预期的实验结果，但从失败中吸取教训，分析实验失败的原因，再结合实验原理仔细思考，加深了对脊髓是高位中枢与外周的感觉、运动功能联系的传导道的理解，所以，本次试验我们还是获益匪浅的。

心血管活动的神经—体液调节

1、目的要求

1、学会辨认家兔颈部颈总动脉、迷走神经。

2、学会颈总动脉插管、直接测定和记录动脉血压的急性实验方法。

3、观察影响动脉血压的几种因素。

2、实验原理

在正常生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。

这种相对稳定性是通过神经体液因素的调节而实现的。

参与支配心血管活动的神经主要有心交感神经和副交感神经。

体液因素主要为肾上腺素和去甲肾上腺素。

他们的作用主要是通过对心脏收缩力、心率、房室传导速度、心输出量、外周阻力等的调节来实现的。

3、材料与器械

家兔、常用手术器械、压力换能器、生理信号记录系统、双凹夹、气管插管、动脉套管、动脉夹、纱布、棉球、丝线、注射器、生理盐水、柠檬酸钠、麻醉剂、肝素、肾上腺素、乙酰胆碱。

4、实验步骤

1、动物的麻醉与固定：

取一只家兔，由耳缘静脉远端缓慢注入麻醉剂，共注入约20ml的药量。

动物麻醉后背位固定于兔手术台上。

2、气管插管：

剪去颈部至耻骨联合之间的被毛，沿颈正中线在喉头上一指至锁骨上一指的地方作一个5～7cm的皮肤切口。

分离皮下组织及肌肉，暴露，分离气管。

在气管下方穿一根丝线，于甲状软骨下方2～3cm处（第三与第四软骨环之间）作“⊥”形切口，插入气管插管，以丝线结扎固定。

3、分离颈部神经和血管：

在气管两侧辨别并分离颈总动脉、迷走神经、交感神经、减压神经，在右侧迷走神经下方穿线备用。

分离时特别注意不要过渡牵拉，并随时用生理盐水润湿。

左侧颈总动脉下方穿两条线备用。

4、插动脉插管：

在左侧颈总动脉的近心端夹一个动脉夹，并在动脉夹远心端距动脉夹约3cm处结扎。

用眼科剪在结扎线与动脉夹之间沿向心方向剪一个楔形切口（约占管径的一半），向心脏方向插入动脉插管，由备用的线结扎固定。

小心松开动脉夹，即可见血液冲进动脉插管。

5、开启仪器：

打开计算机采集系统，接通压力换能器。

选择实验，点击开始，观察记录正常血压。

6、观察项目：

（1）观察正常血压曲线；

（2）轻轻提起迷走神经上的线，观察血压曲线的变化；

（3）沿耳缘静脉注入0.2ml0.01%去甲肾上腺素，观察血压曲线的变化；

（4）燕耳缘静脉注入0.2ml0.01%乙酰胆碱，观察血压曲线的变化；

5、注意事项

1、一项试验后，需待血压基本恢复正常后再进行下一项实验。

2、随时注意动物麻醉深度，本实验持续时间较长，实验过程中如发现动物挣扎，表明有一定程度的苏醒，可补注1/3剂量的麻醉剂。

3、麻醉可使动物体温降低，注意给动物保暖，冬季保温不当易引起动物死亡。

4、实验完毕后，用蒸馏水将压力换能器内的柠檬酸钠冲洗干净，以免干燥后钠盐沉积损毁换能器的应变片。

6、实验结果

图1家兔的正常血压曲线

图2

图2刺激迷走神经后，观察到平均动脉压降低。

这是由于迷走神经中含从延髓下行的传出纤维，通向心脏。

节前纤维末端释放乙酰胆碱,节后纤维末端释放乙酰胆碱,属于副交感神经纤维，能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱，从而使心输出量变小，平均动脉压降低。

图3

图3为加入0.2ml0.01%去甲肾上腺素后，观察到平均动脉压抬高。

这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的α和β2甲肾上腺素能受体结合，使血管收缩，管径变小，外周阻力增加，从而使平均动脉压升高。

此外，去甲肾上腺素还可以使心率增加，心收缩力变大。

只是缩血管效应更明显。

图4

图4为加入0.2ml0.01%乙酰胆碱后，观察到平均动脉压下降。

原因是Ach能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。

心率变慢则流向外周的血量变多，舒张压更低。

心房收缩力减弱则收缩压也有下降。

平均动脉压降低。

但是因为血回心时间变长，因此，回心血量较多，脉压增加。

而大多数血管没有Ach受体，Ach对外周阻力影响不大。

七、实验总结

本次实验我觉得比较难的就是分离颈部神经和血管了，起初，我们找了很久都没有找到，通过对比别组的和向老师请教，我们最终还是找对了，并得到了比较好的实验结果，通过这次试验，我的实验动手能力又提高了点，对心血管活动的调节也有了进一步的认识。

影响尿生成的因素及呼吸运动的调节

一、目的要求

观察某些因素对尿生成的影响，进一步认识和理解尿液生成的调节。

二、实验原理

尿生成过程包括：

肾小球滤过、肾小管和集合管的重吸收及分泌。

任何影响这些过程的因素都会影响尿量的变化。

临床上常常通过观察尿量来了解病人的肾脏、血压等情况，亦用来作为重病或休克病人的监护。

三、实验材料与器械

家兔、BL-410生物机能实验系统、压力换能器、刺激电极、受滴装置、手术器械一套、兔手术台、动脉夹、动脉插管和导尿管插管、铁架台、注射器（1ml、20ml）、生理盐水、呋塞米、1%肝素生理盐水、麻醉剂。

四、实验步骤

1、麻醉与固定：

沿静脉注射麻醉剂，待动物麻醉后，将它仰卧固定在手术台上。

剪去颈部、左腰背部和下腹部的毛。

2、手术

（1）气管插管：

同实验4；

（2）在耻骨联合上缘向上沿下中线切开皮肤4-8cm，剪开腹壁（勿损伤腹腔脏器），将膀胱移出腹腔；

（3）输尿管插管：

在膀胱底部找出两侧输尿管，在其中一侧下穿线，结扎，在其近肾端剪一切口，把一根输尿管插管插入输尿管，结扎固定。

3、观察项目

（1）记录1min正常尿量；

（2）由耳缘静脉快速注入30ml生理盐水，观察尿量变化；

（3）耳缘静脉注入呋塞米5ml，观察尿量变化。

（4）记录正常呼吸曲线；

（5）将长约1cm的橡皮管边在气管插管的一侧管上，另一侧管的橡皮管可用止血钳夹闭，使无效腔增加，观察并记录呼吸运动的变化。

五、注意事项

1、手术操作应尽可能减少手术创伤，避免损伤性闭尿。

2、麻醉可使动物体温降低，注意给动物保暖，冬季保温不当易引起动物死亡。

六、实验结果

（1）影响尿液生成的因素实验结果

（1）快速注射生理盐水

现象：

静脉快速注射大量生理盐水后，在2~3分钟后尿量增加明显。

原理：

静脉快速注射大量生理盐水后,血浆蛋白被稀释，使血浆胶体渗透压降低，肾小球有效滤过压增加；另一方面肾血浆流量增加，血浆胶体渗透压升高速度减慢，达到滤过平衡时间推迟，于是肾小球滤过率增加，尿量增加，且反应时间相对较长。

（2）呋塞米

现象：

注射呋塞米后，尿量明显增多，4—5分钟时达到最多。

原理：

因髓袢升支粗段对Na＋和Cl－的主动重吸收是外髓部渗透梯度形成的动力，所以，该段NaCl的重吸收直接影响尿的浓缩和稀释。

呋塞米等利尿剂能阻抑髓袢升支粗段上皮细胞管腔膜的载体转运功能，使其对Na＋、Cl－的重吸收受到抑制，影响肾髓质渗透梯度的形成，从而干扰尿的浓缩机制，导致利尿。

（二）呼吸运动调节实验结果

图一：

正常呼吸

正常呼吸时平稳、均匀

图二：

增大无效腔后的呼吸

增大呼吸无效腔后，家兔呼吸张力增加，呼吸频率增加。

增加气道长度等于增加无效腔，增加无效腔使肺泡气体更新率下降，引起血中PCO2、PO2-下降，刺激中枢和外周化学感受器引起呼吸运动会加深加快；另外，气道加长使呼吸气道阻力增大，减少了肺泡通气量，反射性呼吸加深加快；增加家兔气道长度可使家兔通气量增加，呼吸频率加快。

图三：

切断一侧迷走神经后的呼吸

切断一侧迷走神经后，呈现慢而深的呼吸，但不是很明显。

这是由于迷走神经是肺牵张反射的传入纤维。

肺牵张反射中的肺扩张反射（亦称吸气抑制反射）的生理作用，在于阻抑吸气过长过深，促使吸气及时转入呼气，从而加速了吸气和呼气活动的交替，调节呼吸的频率和深度，当切断一侧迷走神经以后，中断了该侧肺牵张反射的传入道路，肺扩张反射的生理作用就被消除，故呈现慢而深的呼吸运动。

由于对侧的迷走神经尚未剪断，对侧仍然存在肺牵张反射，故整体情况下，慢而深的呼吸不是很明显。

图四：

切断双侧迷走神经后的呼吸

切断双侧迷走神经后，呈现很明显的慢而深的呼吸（主要是吸气相）。

当切断双侧迷走神经以后，中断了左右两侧的肺牵张反射的传入道路，肺扩张反射的生理作用就被完全消除，故呈现很明显的慢而深的呼吸运动。

七．实验总结

这次是两个实验一起做，第一个影响尿生成因素的实验比较简单