发酵操作流程Word文档下载推荐.docx
- 文档编号:22958226
- 上传时间:2023-02-06
- 格式:DOCX
- 页数:12
- 大小:21.89KB
发酵操作流程Word文档下载推荐.docx
《发酵操作流程Word文档下载推荐.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《发酵操作流程Word文档下载推荐.docx(12页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
连接补料瓶调节至发酵条件。
16.无菌操作将大罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐并转入种子罐。
17.利用压力差将种子罐里的种子液移接到大罐。
18.补碱时,将管道上阀门打开。
程序设为自动,控制流量。
19.补料罐补料培养基的领料定容配制。
20.补料罐补料培养基在位灭菌,同时对管道上段灭菌。
21.补料时,将管道上阀门打开。
程序设为自动,设置流量。
22.诱导剂领料,在配料罐中加水配制定容。
23.将诱导剂打入种子罐,灭菌后保持罐压。
24.利用压力差将种子罐里的诱导剂移接到大罐。
25.一段时间后,大罐的PH、DO呈上升形态即为发酵结束,可放罐离心。
芽孢杆菌发酵操作流程
14.大罐基础培养基在位灭菌,同时对移种管道、进料管道、碱罐及碱管道上段的灭菌。
连接酸、消泡剂补料瓶调节至发酵条件。
19.发酵一定时间后,程序中PH设为手动,停止对PH、DO控制
20.一段时间后,大罐里孢子大量生长后即为发酵结束,可放罐离心。
设备操作规程
一.种子罐灭菌
1.首先排夹套水,关闭所有阀门。
然后先后打开夹套排污阀、夹套进蒸汽阀。
夹套开始进蒸汽对罐体进行预热。
2.微开取样排蒸汽阀、取样进蒸汽阀,对取样管路进行灭菌。
灭菌时间一般10分钟。
取样管路灭菌结束后,先后关闭排蒸汽阀、进蒸汽阀。
3.全开过滤器后端隔离阀,微开过滤器蒸汽排放阀、过滤器进蒸汽阀,对过滤器及管路进行灭菌,每隔一段时间需打开过滤器下端排污阀排放过滤器壳内冷凝水,通过调节进出蒸汽流量的大小将过滤器壳内压力维持在0.11MPa左右。
过滤器灭菌结束后,同时关闭过滤器后端隔离阀、过滤器进蒸汽阀,关闭阀门时过滤器壳内压力不允许跌到0,然后开启过滤器前端隔离阀通入空气,过滤器壳内压力在0.10MPa左右后,关闭过滤器前端隔离阀,将过滤器段保压。
需注意,因过滤器壳与管路降温时,内部压力也会损失,因此在压力损失后通入空气以便维持其保压压力。
4.在种子罐温度上升期间,要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。
当罐内温度升到90℃时,打开取样进蒸汽阀和取样阀,使蒸汽从取样阀进入罐内,并打开进气路进蒸汽阀,先将进气路进蒸汽阀到过滤器蒸汽排放阀间那段管路灭透后,关闭过滤器蒸汽排放阀,打开进气隔膜阀,使蒸汽从空气管路进入罐内。
5.当温度达到设定灭菌温度121℃后,通过调节取样进蒸汽阀、进气路进蒸汽阀、尾气调节阀的开度,使罐压保持在0.11MPa及灭菌温度121℃。
夹套进蒸汽阀可以根据蒸汽情况微开或关闭,夹套排污阀一定要开着。
注意:
尾气调节阀不能全部关闭,以保证蒸汽流通,达到有效灭菌。
6.当罐温达到121℃后,灭菌倒计时开始。
此时可对种子罐接种管、移种补料管(3000L罐)进行灭菌操作。
对于种子罐接种管可全开罐体端隔离阀,微开排放阀对管路进行灭菌,灭菌时间30分钟。
7.当倒计时为0时,程序自动将灭菌开关关闭,灭菌结束。
先关闭取样阀、取样进蒸汽阀,再关闭进气路进蒸汽阀,全开过滤器前后端隔离阀,将空气通入罐内。
(注意:
此操作时需保持过滤器处压力高于罐体压力)调节尾气调节阀,使罐压始终高于大气压。
检查所有进蒸汽阀是否关闭。
实罐灭菌过程保证罐压始终处于正压状态,否则会染菌。
8.关闭夹套排污阀,打开夹套排水阀、夹套手动进冷水阀,进冷水对罐体进行降温。
待罐温低于100℃后,关闭夹套排水阀、夹套手动进冷水阀,打开自控进水隔离阀、回水阀。
系统进入发酵控制状态:
按工艺要求设置控制参数,打开发酵开关,各单项控制开关,如温度控制开关、转速控制开关等进入发酵正常运行。
二.发酵罐灭菌
取样管路灭菌结束后,先后关闭排蒸汽阀、进蒸汽阀
4.在发酵罐罐温度上升期间,要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。
当罐内温度升到90℃时,打开放料进蒸汽阀和放料阀,使蒸汽从放料阀进入罐内,并打开进气路进蒸汽阀,先将进气路进蒸汽阀到过滤器蒸汽排放阀间那段管路灭透后,关闭过滤器蒸汽排放阀,打开进气隔膜阀,使蒸汽从空气管路进入罐内。
5.当温度达到设定灭菌温度121℃后,通过调节放料进蒸汽阀、进气路进蒸汽阀、尾气调节阀的开度,使罐压保持在0.11MPa及灭菌温度121℃。
此时可对发酵罐移种补料管及补碱管道(3000L罐)进行灭菌操作。
打全开移种管道、补料管道及补碱管道阀门,微开移种管道、补料管道及补碱管道的排蒸汽阀门,灭菌30分钟。
先关闭放料阀、放料进蒸汽阀,再关闭进气路进蒸汽阀,全开过滤器前后端隔离阀,将空气通入罐内。
三.补料罐灭菌
4.在补料罐温度上升期间,要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。
灭菌时间30分钟。
当倒计时为0时,程序自动将灭菌开关关闭,灭菌结束。
7.关闭夹套排污阀,打开夹套排水阀、夹套手动进冷水阀,进冷水对罐体进行降温。
降至一定温度后为发酵罐的补料做准备。
四.碱罐灭菌
4.在碱罐温度上升期间,要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。
6.关闭夹套排污阀,打开夹套排水阀、夹套手动进冷水阀,进冷水对罐体进行降温。
降至一定温度后为发酵罐的补碱做准备。
五.配料罐操作规程
1.在配料之前应确保配料罐里面干净,并关闭配料罐底阀和排污阀门。
2.加料进配料罐后,打开罐顶的水阀进水溶料,然后定容。
最后打开配料罐搅拌机充分搅拌培养基。
3.打开底阀,启动料泵,然后根据要求打开大料管道阀门为发酵罐打基础培养基。
基础培养基打完后停料泵,关闭配料罐底阀和打料管道阀门。
4.清洗配料罐。
六.储罐操作规程
1.在打发酵液过来之前要保证储罐干净,关闭储罐底阀和排污阀门。
2.打开发酵罐的放料阀门、打开发酵罐至储罐管道阀门,利用发酵罐与储罐的压力差将发酵液输送至储罐。
3.打开储罐至离心机之间阀门,利用储罐与离心机间高度差将发酵液输送至离心机离心。
4.发酵液离心完成后储罐要清洗。
七.PH电极校正、安装与保养
1.在主菜单中点击电极校正按钮,选择要校正的PH电极,点击校正,则进入相应的校正界面。
打开PH校正开关。
(总开关必须处于关闭状态)设置一号标准液和二号标准液的值,不必考虑大小顺序。
第一步:
设置一号标准液和二号标准液的值,不必考虑大小顺序。
第二步:
将PH电极放入一号标准液里,观察屏幕右上角的反馈电压的数据,当数值基本稳定后,点击一号采集电压后面的开关进行电压采集。
第三步:
将PH电极取出,用蒸馏水洗净擦干后放入二号标准液里,观察屏幕右上角的反馈数据,当数值基本稳定后,点击二号采集电压后面的开关进行电压采集。
第四步:
点击计算后的开关,则PH电极离线校正完毕。
2.PH电极的在线校正:
待实罐灭菌完毕,各控制参数都控制到设定值,接种前后(一般大罐宜在接种后马上进行),还需进行一次在线校正(直接在发酵界面调出在线校正界面)。
方法如下:
对罐内培养液取样;
用台式酸度计测定培养液的PH值;
将台式酸度计测得的PH值输入到实测PH值后,点击确定按钮。
至此,PH电极校正完毕。
3.PH电极平时不使用,可以浸泡在3mol/L的kcl溶液或饱和kcl溶液中,严格禁止将电极浸泡在蒸馏水,去离子水或自来水等离子含量极少的液体中。
如果PH电极长期干放而暴露在空气中,在重新使用之前,请先将电极浸泡在3mol/L的kcl溶液或饱和kcl溶液中2-3天,使电极恢复活性,如果有条件,请先将电极浸泡在9895电极再生液中1分钟左右,再用蒸馏水洗干净,然后浸泡在3mol/L的kcl或饱和kcl溶液中至少1天才能使用。
如果PH电极被无机物质污染可以用0.1mol/L的Hcl或NaOH溶液清洗数分钟,然后再用蒸馏水洗干净。
如果PH电极被有机物质污染,可以用酒精或丙酮清洗,然后再用蒸馏水洗干净。
PH电极上端和电缆线相连接处的接头是高阻抗部件,禁止用水等液体浸泡或蒸汽等潮湿空气侵蚀,可以用新电极所带的红色小螺帽盖住,电极电缆的接头也属于高阻抗部件,严禁用水等液体浸泡或蒸汽等潮湿空气侵蚀,一定要存放在干燥处。
八.DO电极校正、安装与保养
1.在主菜单中点击电极校正按钮,选择要校正的DO电极,点击校正,则进入相应的校正界面。
打开DO校正开关。
设置一号标准液和二号标准液的值,一个为0值,另一个为100。
其中0值对应的是饱和亚硫酸钠标定值,100值对应为DO电极在空气中标定值。
将DO电极放入一号标准液里,观察屏幕右上角的反馈电压的数据,当数值基本稳定后,点击一号采集电压后面的开关进行电压采集。
将DO电极取出,用蒸馏水洗净擦干后放入二号标准液里,观察屏幕右上角的反馈数据,当数值基本稳定后,点击二号采集电压后面的开关进行电压采集。
点击计算后的开关,则DO电极离线校正完毕。
2.DO电极的在线校正:
将DO满度值后的数值改为您习惯使用的DO满度值(如100),点击确定按钮。
至此,DO电极校正完毕。
3.如果长期不用请将电极从罐上取下,清洗后放入电极盒中即可。
如果敏感膜脏了,请用干净的水冲洗干净。
如果冲洗不掉,可放入开水中浸泡一下再冲洗。
切不要用坚硬物体刮擦,以免刮伤敏感膜。
勿用水等液体浸泡。
防止蒸汽等潮湿空气侵蚀电缆线接头和电极接头。
勿用利器刮擦敏感膜,以免损伤。
九.接种操作规程
1.用75%消毒酒精对双手进行消毒。
然后板酒精灯放在罐接种帽下端,点燃,然后慢慢旋开接种帽。
2.用火焰封住接种口,将接种瓶上硅胶管处包着的纱布取下,将硅胶管迅速套到接种口上并绑住固定。
熄灭酒精灯。
3.将罐侧接种隔离阀打开,罐内压力升高,然后关闭接种瓶上阀门。
将罐内压力降低,然后打开接种瓶上阀门,利用压差法将接种瓶内菌种液压入罐内。
4.关闭罐侧接种隔离阀,酒精灯放在罐接种口下端,点燃,在火焰上拔下硅胶管,然后旋上接种帽。
种子罐接种完毕。
十.移种操作规程
1.对移种管路灭菌。
灭菌时间为30分钟。
2.打开移种管路上所有相关隔离阀,打开放料阀利用压力差将种子液从种子罐移至发酵罐。
3.移种后,关闭移种管路上所有相关阀门。
根据工艺要求对种子罐及管路空消或清洗。
十一.取样操作规程
1.微开取样进蒸汽阀、取样出蒸汽阀,对取样阀灭菌15分钟左右,先后关闭取样出蒸汽阀、取样进蒸汽阀。
拧下取样阀帽,用火焰封住取样口,打开取样阀排放少许培养液,把预先灭菌的取样瓶置于火焰上,拔去瓶塞取样。
2.取样后,关闭取样阀;
再打开取样进蒸汽阀进行短时灭菌,待取样阀内的残液放尽后,关闭取样出蒸汽阀,拧好取样阀帽。
出师表
两汉:
诸葛亮
先帝创业未半而中道崩殂,今天下三分,益州疲弊,此诚危急存亡之秋也。
然侍卫之臣不懈于内,忠志之士忘身于外者,盖追先帝之殊遇,欲报之于陛下也。
诚宜开张圣听,以光先帝遗德,恢弘志士之气,不宜妄自菲薄,引喻失义,以塞忠谏之路也。
宫中府中,俱为一体;
陟罚臧否,不宜异同。
若有作奸犯科及为忠善者,宜付有司论其刑赏,以昭陛下平明之理;
不宜偏私,使内外异法也。
侍中、侍郎郭攸之、费祎、董允等,此皆良实,志虑忠纯,是以先帝简拔以遗陛下:
愚以为宫中之事,事无大小,悉以咨之,然后施行,必能裨补阙漏,有所广益。
将军向宠,性行淑均,晓畅军事,试用于昔日,先帝称之曰“能”,是以众议举宠为督:
愚以为营中之事,悉以咨之,必能使行阵和睦,优劣得所。
亲贤臣,远小人,此先汉所以兴隆也;
亲小人,远贤臣,此后汉所以倾颓也。
先帝在时,每与臣论此事,未尝不叹息痛恨于桓、灵也。
侍中、尚书、长史、参军,此悉贞良死节之臣,愿陛下亲之、信之,则汉室之隆,可计日而待也
。
臣本布衣,躬耕于南阳,苟全性命于乱世,不求闻达于诸侯。
先帝不以臣卑鄙,猥自枉屈,三顾臣于草庐之中,咨臣以当世之事,由是感激,遂许先帝以驱驰。
后值倾覆,受任于败军之际,奉命于危难之间,尔来二十有一年矣。
先帝知臣谨慎,故临崩寄臣以大事也。
受命以来,夙夜忧叹,恐托付不效,以伤先帝之明;
故五月渡泸,深入不毛。
今南方已定,兵甲已足,当奖率三军,北定中原,庶竭驽钝,攘除奸凶,兴复汉室,还于旧都。
此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。
至于斟酌损益,进尽忠言,则攸之、祎、允之任也。
愿陛下托臣以讨贼兴复之效,不效,则治臣之罪,以告先帝之灵。
若无兴德之言,则责攸之、祎、允等之慢,以彰其咎;
陛下亦宜自谋,以咨诹善道,察纳雅言,深追先帝遗诏。
臣不胜受恩感激。
今当远离,临表涕零,不知所言。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 发酵 操作 流程
![提示](https://static.bdocx.com/images/bang_tan.gif)