生物制药工艺学思考题及答案Word文档下载推荐.docx

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pH控制在中性或微碱性；

供氧充足；

磷酸盐适量。

2.氨基酸生产菌有什么特性，为什么？

L-谷氨酸发酵微生物的优良菌株多在棒状杆菌属、小短杆菌属、节杆菌属和短杆菌属中。

具有下述共同特性：

①细胞形态为短杆至棒状；

②无鞭毛，不运动；

③不形成芽孢；

④革兰氏阳性；

⑤生物素缺陷型；

⑥三羧酸循环、戊糖磷酸途径突变；

⑦在通气培养条件下产生大量L-谷氨酸。

3.生物素在谷氨酸发酵过程中的作用是什么？

生物素是不饱和脂肪酸合成过程中所需的乙酰CoA的辅酶。

生物素缺陷型菌种因不能合成生物素，从而抑制了不饱和脂肪酸的合成。

而不饱和脂肪酸是磷脂的组成成分之一。

因此，磷脂的合成量也相应减少，这就会导致细胞膜结构不完整，提高细胞膜对谷氨酸的通透性，解除其对谷氨酸脱氢酶的抑制，源源不断生产谷氨酸。

维生素发酵生产工艺

1.比较分析现行维生素C的两种生产工艺过程及本质区别，有什么优势？

现行的维生素c生产工艺过程有：

莱氏化学合成法和两步发酵法。

莱氏化学合成法：

D-葡萄糖为原料，进过催化氢化生成D-山梨醇，然后生物氧化转变为L-山梨糖，酸性液中丙酮化，对α-β-二仲醇进行保护。

L-山梨糖高锰酸钾在碱性溶液中氧化为二丙酮-2-酮-L-古龙酸，除去丙酮，内酯化和烯醇化得到L-抗坏血酸。

整个合成过程必须保持第4位碳原子的构型不变。

两部发酵法：

①催化氢化：

催化氢化D-葡萄糖，控制压力，在氢做还原剂、镍做催化剂的条件下，将醛基还原成醇基，从而制备D-山梨醇。

②第一部发酵：

D-山梨醇C2位羟基氧化为羰基，其他基团不变，微生物转化得L-山梨糖。

③第二部发酵：

L-山梨糖到2-酮基-L-古龙酸需要将C1位醇基氧化为羧基，保持其他基团不发生变化。

其中两步发酵法更具有优势。

原因如下：

①以生物氧化代替化学氧化简化了生产工艺。

②省略了丙酮化反应步骤，节省了丙酮、硫酸等大量化工原料和其防爆设备，节约了成本，有利于安全生产。

③三废和污染较小。

④提高了生产能力。

2.维生素C的生产工艺中，手性中心是如何实现的？

维生素C分子中含有两个手性碳原子，故有四个光学异构体。

其中L（+）-抗坏血酸括性最高，D（-）-异抗坏血酸活性仅为其20％，工业上将其作为食品抗氧剂。

D（-）-抗坏血酸和L（+）-异抗坏血酸几乎无活性。

3.在未来，一步发酵能取代两部发酵，成为维生素生产的主流工艺吗，为什么？

一步法发酵对工业菌株的山梨醇/糖旁路代谢途径进行敲除。

与原始菌株比较，发现单菌发酵24h后，培养基中剩余的山梨醇糖含量基本保持恒定，NSR缺失株相对于原始菌株残糖量提高了85.9%。

基因工程制药工艺

1.工程菌与宿主菌对培养基要求有何不同，为什么？

碳源：

大肠杆菌以蛋白胨等蛋白质的降解物作为碳源；

酵母利用葡萄糖、半乳糖等单糖类物质为碳源。

氮源：

不同工程菌对氮源利用能力差异大，具有很高的选择性。

大肠杆菌利用酵母粉等大分子有机氮源；

酵母利用氨基酸为氮源。

选择剂：

基因工程大肠杆菌含有抗生素抗性基因，抗生素作为选择剂；

基因工程酵母菌常用氨基酸营养缺陷型。

2.影响工程菌培养工艺的主要参数是什么？

如何优化控制？

温度：

生长与生产温度不一致。

较高温度表达量大，易形成包涵体。

策略：

较低温度下有利于表达可溶性蛋白质。

对于热敏感的蛋白质，高温会降解破坏。

生产期可采用先高温，然后低温，变温表达，避免蛋白质降解。

pH：

了解发酵过程中各个阶段的适宜pH以后，进一步设法控制pH在合适的范围内。

分阶段控制pH：

根据试验结果来确定生长最适pH和产物最适pH，以达到最佳生产。

溶解氧：

从供应量和需要量（菌体生长、质粒稳定性、产物积累）二个方面考虑，使之需氧不超过设备的供氧能力，在临界溶解氧浓度之上。

3.诱导物对生长和产物合成有何影响，为什么？

诱导物用来诱导表达型工程菌。

在细胞生长到一定阶段，必需添加诱导物，以解除目标基因的抑制状态，活化基因，进行转录和翻译，生成产物。

适宜的诱导时间非常重要。

诱导物的浓度及其发酵温度会影响表达量和产物存在形式。

化学诱导型启动子：

lzc、tac、T7等，诱导时间为对数生长期。

温度诱导型启动子：

PL、PR等，诱导时间为对数期或稍后一些。

1.什么是基因工程菌，工程菌构建的基本过程和各阶段的主要任务是什么，所涉及基因工程原理是什么？

将目的基因导入细菌体内使其表达，产生所需要的蛋白的细菌称为基因工程菌。

工程菌构建的基本过程如下：

目标基因克隆（PCR、文库筛选、化学合成）→表达载体构建（酶切、链接）→遗传转化与筛选（外源基因导入与培养）→工程菌（获得新形状、功能、产生物质）

酶切：

在特异位点上催化双链DNA分子的断裂，产生相应的限制性片段。

（DNA+缓冲液+限制性内切酶；

37℃，1小时；

加热、加EDTA终止；

电泳检查酶切完整性）

链接：

DNA双链上相邻的3’羟基和5’磷酸基团共价结合形成3’-5’磷酸二酯键，使原来断开的DNA缺口重新连接起来。

（载体片段和基因片段，缓冲液，连接酶；

16-26℃，数小时；

70℃加热10min终止反应）

转化：

把外源基因导入宿主细胞的过程。

（氯化钙法向大肠杆菌导入外源基因）

2.目标基因克隆的主要方法有哪些？

分析其特点及其适用范围

①PCR扩增。

优点：

简便快速，高效，数kb单基因克隆。

缺点：

DNA聚合酶活性和保真性限制。

（94℃变性→55℃退火→72℃延伸→94℃变性……）

②文库筛选。

长片段，无碱基错误，位置序列基因克隆。

繁琐，过程复杂，耗时，昂贵。

③化学合成：

简便，准确，已知序列基因克隆，引物合成。

受合成仪性能限制，长度很短。

3.大肠杆菌中高效表达蛋白药物着重设计哪几个方面？

为了确保工程菌构建的有效性，必须遵循GMP及其有关生物制品研究技术指导原则，做好菌种的记录和管理。

①表达载体，详细记录表达载体，包括基因的来源、克隆和鉴定，表达载体的构建、结构和遗传特性。

②宿主细胞:

详细记录宿主细胞的资料，包括细胞株系名称、来源、传代历史、鉴定结果及基本生物学特性等。

③目标基因序列:

目标基因的序列包括插入基因和表达载体两端控制区的核苷酸序列，以及所有与表达有关的序列，做到序列清楚。

重组人干扰素生产工艺

1.重组人干扰素生产工艺路线有哪几条，有何缺点？

①体外诱生干扰素制备工艺：

仙台病毒诱导人白细胞：

血浆→人白细胞（病毒诱导）→分离纯化→人白干扰素。

产量低，1gIFNα需要105L人血白细胞，来源困难，工艺复杂，收率低，价格昂贵，潜在的血源性病毒污染的可能性。

②Namalva细胞培养（病毒培养）→合成干扰素→分离纯化→多压型混合干扰素。

首次实现大规模商业化生产，用细胞培养8000L。

活性低，退出临床应用。

③工程菌构建→发酵培养→包涵体→复性→重组人干扰素。

工艺特点：

发酵过程，随后变性、复性过程。

生物合成、纯化及制剂阶段均使用了一些动物或人血液提取成分，仍然没有摆脱潜在的传播血源性疾病的危险。

④工程ＣＨＯ细胞系构建→细胞培养→收集培养液→分离纯化→重组人干扰素。

分泌表达，产量低，成本高，过程控制严格。

可以做到无血清培养。

⑤基因工程假单胞杆菌发酵生产工艺。

发酵周期短：

几个小时，无需变性、复性过程，获得有活性产品，纯化过程：

淘汰抗体亲和层析，制剂中采用非人血清白蛋白新型保护剂，使得整个制造过程中不使用任何血液提取成分。

2.重组人干扰素发酵工段的关键控制点是什么，如何实现最优化过程控制？

①摇瓶培养：

摇瓶培养：

30℃，pH7.0，250rpm，16-20h；

②种子罐培养：

接种：

接入50L种子罐，接种量10%培养：

30℃，pH7.0控制：

级联调节通气量和搅拌转速。

3.干扰素纯化工艺的原理是什么？

基于蛋白质的电荷性除去杂质，准确控制缓冲液和上样液的pH及电导值，纯化干扰素

4.干扰素纯化工艺过程中各工段的目的是什么？

①溶解粗干扰素：

配置缓冲液（超纯水，pH7.5磷酸缓冲液，0.45μm滤器和10ku超滤系统，百级层流下收集），冷却至2-10℃。

在均浆器中完全溶解粗干扰素。

②等点沉淀与疏水层析：

磷酸调节至pH5.0，沉淀杂蛋白，离心收集上清液（含有人干扰素）。

用NaOH调节上清液pH7.0，并用5MNaCl调节溶液电导值180ms/cm，上样，进行疏水层析，利用干扰素的疏水性进行吸附。

在2-10℃下，用0.025M磷酸缓冲液（pH7.0）+1.6MNaCl进行洗涤，除去非疏水性蛋白。

用0.01M磷酸缓冲液（pH8.0）进行洗脱，收集洗脱液，干扰素。

或②等电点沉淀与盐析：

磷酸调节pH4.5，调节电导值40ms/cm，2-10℃静置过夜，除杂蛋白。

1000ku超滤膜过滤，除去大蛋白。

调整溶液pH8.0，10ku超滤膜，0.005M缓冲液。

③阴离子交换层析与浓缩：

0.01M磷酸缓冲液（pH8.0）平衡树脂，盐浓度线性梯度5~50ms/cm进行洗脱，2-10℃，配合SDS-PAGE收集干扰素峰。

把目标馏分合并，调整溶液pH和电导值，10ku超滤膜，0.05M醋酸缓冲液（5.0）中透析。

④阳离子交换层析与浓缩：

用0.1M醋酸缓冲液（pH0.5）平衡树脂。

上样，相同缓冲液冲洗。

盐浓度线性梯度5-50ms/cm进行洗脱，配合SDS-PAGE收集干扰素峰。

合并馏分，10ku超滤膜系统。

⑤凝胶过滤层析：

0.15MNaCl的0.01M磷酸缓冲液（pH7.0）清洗系统和树脂。

上样，相同洗脱液进行洗脱。

合并干扰素部分。

⑥无菌过滤分装：

0.22μm膜过滤干扰素溶液，分装，-20℃以下的冰箱中保存。

动物细胞培养制药工艺

1.离体动物细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的代谢特征是什么？

蛋白质的合成、修饰、分泌功能与制药有何关系？

葡萄糖代谢：

糖酵解为主，生成丙酮酸和乳酸。

丙酮酸经TCA循环，氧化产生CO2和水，释放能量。

葡萄糖一小部分进入PPP途径，生成4、5、7碳糖和NADPH。

谷氨酰胺：

作为氮源，转氨、脱氨（为主），合成非必需氨基酸。

大多数谷氨酰胺通过脱氨生成谷氨酸，并释放铵离子。

小部分谷氨酰胺通过转氨生成其他嘌呤、嘧啶和氨基糖等合成代谢的前体。

氨基酸在粗糙内质网上的核糖体上，以mRNA为模板，进行密码翻译，生成蛋白质的多肽链。

在粗糙内质网腔和高尔基体内加工修饰形成糖基化蛋白质。

糖基结构易变化，不同细胞系糖基化特征不同，要根据药物的结构选择适宜细胞系。

2.制药动物细胞系的种类和特点有哪些？

有限细胞系：

是生长和寿命有限的细胞，经过若干传代培养后失去增殖能力，老化死亡。

有限生长，无致瘤性，有接触抑制性。

e.g.2BS。

寿命取决于细胞来源的物种和年龄、器官。

胚成纤维细胞人（50代），鸡胚（30代），小鼠（8代）

无限细胞系：

寿命和活性不受传代次数影响的细胞系，可连续培养。

也称为永久细胞系或连续细胞系。

没有接触抑制现象，对培养条件和营养因子等要求低，倍增时间短，非常适合于制药工业生产。

人源细胞系：

Namalwa，WI-38，MRC-5

哺乳动物细胞系：

CHO，贴壁或悬浮培养，对剪切力和渗透压有较高的忍受能力。

BHK-21，C127，Vero

杂交瘤细胞系：

脾脏B细胞与骨髓瘤细胞通过原生质体融合，获得的杂交细胞。

无血清培养，高密度悬浮生长，容易转染和生长，大量分泌和高效表达

3.与大肠杆菌和酵母系统相比，哺乳动物源细胞系统制药的优缺点，如何选择？

CHO细胞：

Chinesehamsterovary，中国仓鼠卵巢，亚二倍体核型，2n=22。

特点：

贴壁型生长，也可悬浮培养，对剪切力和渗透压有较高的忍受能力。

最为普遍和成熟表达糖基化蛋白药物的细胞。

多种衍生突变株，高表达。

BHK-21细胞：

成纤维样细胞，非整倍体，2n=44.用于增殖病毒、制备疫苗和重组蛋白。

C127细胞，贴壁生长，适合于牛乳头病毒DNA载体的转化。

Vero细胞：

多倍体核型，贴壁依赖性。

Vero6最为常用，增至病毒，生产疫苗。

4.工程动物细胞系的建立：

基本过程，表达载体设计，转化与培养方案筛选和鉴定方法。

它们与基因工程微生物的异同是什么？

5.动物细胞培养基组成成分及其作用是什么？

与微生物培养基培养基相比，有何特殊性？

动物细胞培养基的成分主要有糖类、氨基酸、维生素与无机盐、激素及附加成分。

作用：

糖类提供细胞生长的碳源和能源。

分解后释放出能量ATP。

氨基酸可通过生糖或生酮途径转变为糖或脂肪酸，间接提供能量。

维生素既不是细胞的物质基础，也不是能量物质，对代谢和生长起调节和控制作用。

无机盐是细胞代谢所需酶的辅基，同时保持细胞的渗透压和缓冲PH的变化。

激素对细胞的生长有刺激作用。

贴附因子的作用是让细胞的贴壁生长。

6.生产用最适动物细胞培养基应该选择哪种，为什么？

合成培养基，组分稳定，容易配置。

已有几十种合成培养基，大部分已商品化

7.如何控制动物细胞培养基的质量？

培养用水质：

必须按照GMP要求进行制备，除去普通水中的各类元素、有毒或有害物质及微生物和热源，达到纯水标准。

缓冲液：

H2CO3/NaCHO3；

NaH2PO4/Na2HPO4；

恒定pH。

平衡盐溶液：

BBS，由NaCl、无机盐和葡萄糖、缓冲剂、指示剂组成。

满足细胞对盐离子、碳营养要求；

pH和渗透压要求；

直观观察pH。

磷酸盐缓冲液：

PBS，KCl、KH2PO4、NaCl、NaHPO4。

培养物、器皿的洗涤液。

氨基酸配置：

50倍浓缩液。

使用L型氨基酸，对于DL混合型氨基酸，使用量应该加倍。

谷氨酰胺不稳定，需单独配置（100倍浓缩液，-20℃保存）。

8.基质依赖性与非依赖性细胞系对培养条件的要求有什么不同？

如何满足？

贴壁依赖性细胞：

依赖于生长基质，并在表面才能生长的细胞。

只能贴壁生长。

多数天然细胞。

非贴壁依赖性细胞：

不依赖于生长基质，可悬浮生长。

淋巴细胞、杂交瘤细胞、肿瘤细胞。

生长基质：

改变介质表面特性，支撑、促进动物细胞贴附的物质。

为支持介质表面提供适量带正电荷，细胞被吸附在介质上。

9.细胞大规模培养有几种方法，有何特点，如何选择应用？

①单层贴壁培养。

单层贴壁培养是指把细胞贴附于一定的固体支持表面上，生长形成单层细胞的培养方法，适合于贴壁依赖性细胞培养。

②悬浮培养。

悬浮培养是指细胞在细胞反应器内游离悬浮生长的培养过程，主要对于非贴壁性依赖性细胞，如杂交瘤细胞。

③微囊培养。

把动物细胞包埋在微载体内或胶囊内固定化后，进行悬浮培养，适合于贴壁依赖性和非贴壁依赖性细胞。

④微载体培养。

微载体是三维培养系统，有很大的比表面积，细胞贴附于载体上增值，再悬浮于细胞液中，兼具有贴壁和悬浮培养的双重优点。

10.比较微生物发酵控制过程的异同

动物细胞

微生物

温度

在线，恒温，水套层，电热片，加温

三基点，发酵热对生长和生产影响，变温控制，降温

搅拌，泡沫

低转速，加剪切保护剂，消沫剂

基于供氧与混合，化学消沫剂与分散剂，机械消沫

溶解氧

临界氧浓度

供氧与耗氧的平衡，临界氧浓度之上

CO2

需要通入，调节pH

尾气，呼吸强度

pH

恒定，缓冲剂，通气，补料，综合控制

三基点，变pH，加酸/碱；

缓冲剂，补料

代谢检测与分析

底物消耗，副产物生成，胞内代谢，分泌

底物消耗，产物的生成，生物化学变化

补料

补充营养，控制代谢过程

解除底物抑制，增加前体

放料

解除副产物，收获产物

解除产物抑制

重组人红细胞生成素的生产工艺

1.比较各种表达系统生产rhEPO的优缺点。

①SV40病毒启动子的表达载体，在COS-1中瞬时表达hEPO。

②昆虫SF9细胞中杆状病毒载体表达rhEPO。

产率有所改善，糖基化程度较小。

③家蚕系统表达，糖基化简单，药物在体内稳定性较低、活性较差等问题。

④大肠杆菌表达，仅具体外抗原结合活性。

⑤干扰素-α基因启动子的rhEPO表达载体，BALL-1细胞，产生较高量的rhEPO。

⑥CHO、BHK细胞中稳定表达，rhEPO与天然EPO结构、活性相似。

2.CHO培养生产rhEPO的基本工艺过程及其控制点是什么，为什么？

①复苏：

液氮冻存的CHO细胞系在37℃中水浴快速融化。

无菌离心，弃上清。

②培养：

加适量DMEM（10%小牛血清），37℃、CO2培养箱培养，连续传三代。

③消化：

用胰蛋白酶消化贴壁细胞后，制成细胞浓度约为2.5×

106个/ml。

用于接种。

④反应器灭菌：

加纤维素载体片及pH7.0的PBS缓冲液，高压灭菌。

⑤接种：

排出PBS缓冲液，加DMEM培养基（含10％血清），接入种子细胞。

⑥贴壁培养：

pH7，<

50r/min，37℃，DO50-80%。

⑦扩增培养：

80－100r/min。

pH7，37℃。

⑧灌流培养：

控制温度、DO、pH值等培养条件，进行无血清培养基连续培养。

⑨收获培养物：

连续收获，4℃－8℃保存。

控制点：

①搅拌控制：

接种后,搅拌速度缓慢，使细胞贴附于载体上，随着细胞数量的增加逐渐提高搅拌速度。

②温度控制：

较为严格，恒定37℃

③pH值控制：

7.2-7.4,输入CO2和碳酸氢盐溶液维持其恒定。

④溶解氧控制：

在50-80％的范围内，通入氧气、空气、氢气或氮气的比例混合气体。

⑤葡萄糖控制：

流加补料

⑥代谢废物控制：

监测铵、乳酸盐类等，维持较低浓度，减少对细胞损害。

3.rhEPO分离纯化工艺中使用了哪些操作单元，为什么？

收获培养液、透析、过滤、DEAE离子交换、凝胶过滤。

三废处理工艺

1.简述制药企业清洁生产的途径

①资源综合利用——原料资源的综合利用、水资源的综合利用、二次资源综合利用、废物综合利用；

②改革工艺和装备——原料处理工艺的改革、产品制造工艺的全过程统筹、装备技术的更新；

③改进操作和加强管理；

④必要的末端处理。

2.简述制药工业的末端污染特点

制药厂排出的污染物通常具有毒性、刺激性和腐蚀性。

化学制药厂的污染物还具有数量少、组分多、变化大、间歇排放、pH不稳定、COD高等特点。

这些特点与防治措施的选择有直接关系。

3.制药废水分为哪几种类型？

有何特点？

如何治理？

①含悬浮物或胶体的废水。

废水中所含的悬浮物一般可通过沉淀、过滤或气浮等方法除去。

是废水的常规预处理程序。

气浮法的原理：

利用高度分散的微小气泡作为载体去粘附废水中的悬浮物，使其密度小于水（相对密度<

1）而上浮到水面，从而实现固液分离。

对于悬浮物质：

用沉淀、气浮、过滤等方法去除。

对于树脂状物：

由于不易上浮和沉淀，须采用辅助手段（如通入压缩空气、直接蒸汽加热、加入无机盐等）使悬浮物聚集起来沉淀或气浮分离。

对于极小胶体：

可用混凝法或吸附法处理。

②含酸碱性废水。

化学制药过程中常排出各种含酸或碱的废水，其中以酸性废水居多。

含酸浓度高的废水——应考虑尽量回收利用及综合利用，如利用废硫酸制作磷肥等。

含酸（碱）1%以下而没有经济价值的废水——经中和后才能排放，以免腐蚀排水管道，危害水中生物。

中和时，尽量采用废碱或废酸，也可考虑用氨水中和，然后用于灌溉。

若中和后的废水水质符合国家规定的排放标准，可直接排入下水道，否则需进一步处理。

③含无机物废水。

药厂中常见的无机物是溶解于废水中的卤化物、氰化物、硫酸盐及重金属离子。

稀释法——不含毒物且一时无法回收综合利用的无机盐废水。

浓缩结晶法——单纯的无机盐废水。

化学处理法——剧毒的氰化物、氟化物废水。

化学沉淀法——重金属废水（汞、铜、铬等）形成碳酸盐、氢氧化物、硫化物等。

④含有机物废水。

此类废水中所含的有机物一般为原辅材料、产物和副产物等。

在进行无害化处理前，应尽可能考虑回收和综合利用。

常用的回收和综合利用方法有蒸馏、萃取和化学处理等。

对于成分复杂、难以回收利用或者经回收后仍不符合徘放标准的有机废水，则需采用适当方法进行无害化处理。

生物处理法——易被氧化分解的有机废水。

沉淀、萃取、吸附——低浓度、不易被氧化分解的有机废水。

焚烧法——浓度高、热值高、又难以用其它方法处理的有机废水。

4.简述废水处理的基本方法

①物理法——是利用物理作用将废水中呈悬浮状态的污染物分离出来，在分离过程中不改变其化学性质。

如沉降、气浮、过滤、离心、蒸发、浓缩等。

物理法常用于废水的一级处理。

②化学法——是利用化学反应原理来分离、回收废水中各种形态的污染物。

如中和、凝聚、氧化和还原等。

化学法常用于有毒、有害废水的处理，使废水达到不影响生物处理的条件。

③物理化学法——是综合利用物理和化学作用除去废水中的污染物。

如吸附法、离子交换法和膜分离法等。

近年来，物理化学法处理废水已形成了一些固定的工艺单元，得到了广泛的应用。

④生物法——是利用微生物的代谢作用，使废水中呈溶解和胶体状态的有机污染物转化为稳定、无害的物质，如H20和CO2等。

生物法能够去除废水中的大部分有机污染物，是常用的二级处理法。

5.制药废渣的处理方法主要有哪几种？

各自有何特点？

①综合利用。

废渣经回收及除毒后，应尽量进行综合利用。

用作生产的原辅材料；

用作燃料；

用作饲料和肥料；

用作铺路或建筑材料；

投海、深埋、焚烧、深井排放等处理。

②焚烧。

焚烧既能大大减少废渣的体积，消除其中的有害物质，又能回收热量。

对于一时无回收价值的可燃性废渣，特别是当含有毒性或有杀菌作用的废渣，无法用厌气处理时，可以焚烧处理。

③填埋法。

埋入土中，通过微生物自然降解，但容易污染水源（包括地下水）。

为了防止有机物潜在的危险性，目前倾向于先焚烧变成少量残渣后，再用填埋法处理。