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二、标本采集
标本采集是直接关系检验结果的基本功,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备,也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。
现将各种标本采集要点分述如下:
1.血液标本:
分普通管、抗凝管两大类;
抗凝管又根据抗凝剂不同分为草酸钾管、草酸钠管、枸橼酸钠管、乙二胺四乙酸二钾盐或二钠盐(EDTA-K2或EDTA-Na2)管、肝素管等。
1)草酸钾:
与钙离子结合成草酸钙,使血液抗凝,常用量为1~2g/L血液。
2)草酸钾氟化钠混合抗凝剂:
专供葡萄糖测定用,氟化钠1g,草酸钾3g混合,混合每4mg可使血液1ml抗凝。
3)枸橼酸钠:
用于血沉及血凝检查。
血沉(魏氏法)用109mmol/L(32g/L)枸橼酸钠0.4ml,与血液1.6ml混和;
血凝多用38g/L,亦可用32g/L,以抗凝剂与血液1:
9混和。
4)肝素:
是一种粘多糖体,可抑制凝血酶原转化为凝血酶,使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白,以15+-2.5IU抗凝1ml血。
可用于生化和血液学检验标本,但不可用于筛选弥散性血管内凝血的血浆鱼精蛋白副凝试验(3P)和凝血酶试验。
因肝素可与鱼精蛋白作用,发生沉淀使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现严重干扰。
5)乙二胺四乙酸(EDTA):
能与钙离子络合而抗凝,通常血常规中用其钾盐EDTA-K2,或EDTA-K3。
2.尿液标本:
根据采集时间可分为晨尿、随意尿、空腹尿,计时尿(2h3h12h24h等),午后尿、餐后尿等。
晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后采集第1次排尿,可用于常规检验。
随时尿不受时间的约束,多为门诊病人的留尿方法。
空腹尿为进餐后4h左右排尿,收集下1次的尿液供检验,主要用于了解葡萄糖代谢情况。
计时尿不论几小时,均应于计时开始进排空尿液,然后于规定时间内排尿,计时尿多用于肾功能和有形成成分排出率的评估,亦用计算淀粉酶或肌酐的排出率。
24h尿多用于化学组分的测定,亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。
尿液原则上不用防腐剂为好,如需12h或24h尿,首选以冷藏为妥,次为根据检验申请加用合适的防腐剂。
3.粪便标本:
采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定温度,且立即送检,立即检查。
如检查虫体或绦虫头节,应全部粪便送检,如检查蛲虫则不必送送验粪样,而应于晨起排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。
粪便标本不应污染容器外表,且不太满,30g容器装5~10g为妥。
,如大便上有粘液或是血液,应采集此处标本,以提高阳性率,30min内送检,放置过久易导致细胞的破坏,特别是阿米巴等原虫。
4.脑脊液、浆膜腔液、关节液:
均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,相互配合并及时检验。
5.骨髓:
采集由临床医师穿刺,为使涂片满意,必要时本科协助作骨髓涂片。
6.胃及十二指肠液:
一般均在门诊室或病房采集后送检,收样时应核对标本。
胃液分基础胃酸分泌(BAO)、最大胃酸分泌(MAO)等;
十二指肠液分甲、乙、丙管,甲管来自总胆管为橙黄色,乙管来自胆囊为黄绿色,丙管来自胆道为柠檬色,细菌培养应从乙管取样接种培养。
7.痰液标本:
采早晨第1口痰,多用于细胞学及微生物学检查。
采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。
微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已用药,则应选血药浓度最低时采样。
8.阴道分泌物:
由妇产科医师采样后送检,如成批送检应在37℃加温数分钟后检查,否则影响滴虫动力,容易漏检。
9.精液和前列腺液:
采集精液应在3~5天内勿排精,且于排精后30min内保温送达检验科,容器以广口小玻璃瓶为好,不可贮于避孕套或塑料瓶内。
收到标本后应及时检查。
前列腺液由医师作前列腺按摩术取样,收到标本后应立即检查。
10.其他标本:
根据具体检验项目而定。
总之,各种检验标本的采集合适与否,直接关系检验质量,应予重视。
第二章临床检验
一、临检标本采集要求
(1)血常规标本采集方法
1.采血前,仔细核对血常规试管上的标签与化验单上的姓名、床号、住院号是否相符。
2.检查血常规试管底部是否有抗凝剂。
3.静脉血一般用肘静脉也可选用颈静脉或股静脉,采血处应避免有皮肤红肿、溃疡等现象。
4.取1ml血,缓缓注入血常规试管中,或加血至标记线处,盖上盖子立即颠倒混匀不少于5次,避免剧烈振荡,以免产生气泡。
一小时内送检。
5.禁止在输液侧肢体采血或在输液后立即于该侧采血。
6.实行一人、一针、一管、一带、一垫,防止交叉感染。
7.若要进行比较性测定,应尽量在同一时间采血,不同时间的细胞数可能有较大的变化。
8.由于血小板极易凝集,采血者应首先采集常规血,其次为出凝血、血沉,最后才是生化免疫。
注:
网织红细胞(RET)、C反应蛋白(CRP)、糖化血红蛋白(HAlb)可与血常规共用一管
(2)出凝血、血沉标本采集方法
1.采血前仔细核对试管上的标签与化验单上的姓名、床号、住院号是否相符。
2.检查试管底部是否有抗凝剂。
3.尽量空腹采血,采血要顺利。
4.缓缓向出凝血、血沉管中加血至刻度处,务必要准确,立即加盖,颠倒充分混匀5、6次。
及时送检。
(3)其他常规血液项目标本采集方法
1.血中微丝蚴:
在夜间10时至凌晨2时之间,取末梢血2~3滴于干净玻片上,制成厚涂片,立即送检。
5.红斑狼疮细胞(LE):
请到门诊处抽血。
6.疟原虫:
最好在全身开始寒战初期,将血滴涂成薄涂片,立即送检。
9.肺炎支原体、衣原体抗体:
采血约2ml置洁净玻璃管内,2小时内送检。
(4)尿液标本采集方法
1.尿常规(URT):
取晨起第一次小便中段尿,或第二次小便中段尿约20ml置洁净器皿内,30min内送检。
如急诊可取随机尿。
2.尿淀粉酶(UAMY):
晨尿或随机尿约10ml,30min内送检。
3.尿本周蛋白(Bence-Jones):
取晨尿20ml,30min内送检。
4.乳糜试验:
随机尿20ml,30min内送检。
5.妊娠试验(尿hCG):
晨尿中段或随机尿中段约10ml,立即送检。
6.尿三杯试验:
采集标本时应连续排尿,中间不应有间断,各杯不少于10ml,立即送检。
二、临检项目的临床意义
㈠血常规
白细胞计数(WBC)
临床意义:
生理性增多:
·
初生儿、运动、疼痛、情绪变化、应激、妊娠、分娩
病理增高见于:
急性感染:
急性化脓性感染所引起的急性全身性感染`局部炎症,以及一些细胞感染。
组织损伤:
手术后急性心肌梗塞。
恶性肿瘤及白白病:
急性、慢性粒细胞性白血病,尤以慢性白血病增高最多。
各种恶性肿瘤的晚期,如肝癌、胃癌等。
其它:
骨髓纤维化、真性红细胞增多症、尿毒症、酸中毒、某些药物中毒、烧伤等。
减少见于:
某些感染:
细菌感染(如伤感、副伤寒);
病毒感染(如流感、风疹、麻疹)。
某些血液病:
再生障碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、恶性网状细胞增多症。
脾功能亢进:
各种原因所致的脾肿大,如肝硬班替氏综合症。
理化因素:
放射性物质、X线、某些抗癌药、解热镇痛药等,可造成白细胞减少。
少于0.5×
10^9/L提示患者受感染的危险极大,应采取适当的预防措施,并仔细监测。
少于3×
10^9/L可认为白细胞减少,应了解白细胞分类,并作进一步检查;
多于12×
10^9/L可视为增多,白细胞分类对确定增多原因有一定价值,应寻找感染的来源。
30×
10^9/L或更多者有白血病可能,应作白细胞分类及骨髓检查。
参考值:
成人:
4~10×
10^9/L
婴儿(两周岁内):
11~12×
新生儿:
15~20×
白细胞分类
中性粒细胞:
增高见于:
急性感染和化脓性感染:
如肺炎、败血症、脓肿等。
大手术后、心肌梗塞、肺梗塞等。
恶性肿瘤:
急、慢性白血病、淋巴瘤等。
各种中毒:
尿毒症、糖尿病酸中毒等。
某些传染病:
流感、伤寒、付伤寒、麻疹。
再障、粒细胞缺乏症、白细胞减少症。
化疗或放疗后,抗癌药物,X线及镭照射。
脾功能亢进,自身免疫性疾病,高度恶病质。
嗜酸粒细胞:
增多见于:
变态反应性疾病:
支气管哮喘、药物过敏、荨麻疹、血管神经性水肿、过敏紫癜。
寄生虫病:
蛔虫病、钩虫病、血吸虫病。
某些皮肤病:
湿疹、牛皮癣、剥脱性皮炎等。
慢粒、恶性淋巴瘤、嗜酸性粒细胞性白血症、多发性骨髓瘤、何杰金氏病等。
应用糖皮质激素、促肾上腺皮质激素。
伤寒、副伤寒等病患者。
嗜碱性粒细胞:
慢性粒细胞白血病、嗜碱性粒细胞白血病。
某些转移癌及骨髓纤维化。
淋巴细胞:
某些病毒或细胞所致的传染病:
传染性淋巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、传染病恢复期、结核病、百日咳。
淋巴细胞性白血病、白血性淋巴肉瘤。
应用肾上腺皮质激素、接触放射线。
细胞免疫缺陷病、某些传染病的急性期。
单核细胞:
单核细胞具有游走性和吞噬作用,除吞噬细胞和异物外,又能吞噬原虫及具有类脂质包膜的结核杆菌及麻风杆菌。
伤寒、结核、疟疾、黑热病、亚急性细菌性心内膜炎。
单核细胞性白血病、淋巴瘤、骨髓异常增殖综合症、恶性组织细胞病。
中性细胞:
40~70%
20~40%
3~10%
嗜酸细胞:
0.5~5%
嗜碱细胞:
0~1%
红细胞计数(RBC)
临床意义:
红细胞增多见于:
(1)严重呕吐、腹泻、大面积烧伤及晚期消化道肿瘤患者。
多为脱水血浓缩使血液中的有形成分相对地增多所致。
(2)心肺疾病:
先天性心脏病、慢性肺脏疾患及慢性一氧化碳中毒等。
因缺氧必须借助大量红细胞来维持供氧需要。
(3)干细胞疾患:
真性红细胞增多症。
红细胞减少见于:
(1)急性或慢性失血。
(2)红细胞遭受物理、化学或生物因素破坏。
(3)缺乏造血因素、造血障碍和造血组织损伤。
(4)各种原因的血管内或血管外溶血。
3.5~5×
10^12/L
血红蛋白(Hgb)
贫血、白血病、产后、手术后、大量失血、钩虫病等减少。
缺铁性贫血时尤为明显。
肺气肿、肺心病、先天性心脏病、严重呕吐、腹泻、出汗过多、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及真性红细胞增多症等时增高(长期居住高原者生理性增高)。
Hb低于45g/L者应予输血治疗(充血性心力衰竭者除外);
低于105g/L者应寻找贫血原因;
高于180g/L者应作进一步检查。
高于230g/L者,应紧急采取治疗措施。
男:
120~160g/L
女:
110~150g/L
170~200g/L
红细胞比积(Hct)
红细胞比积增加:
大量脱水、血液丢失及真性红细胞增多症,均由于血液浓缩而使红细胞比积增高。
红细胞比积减少:
见于各种贫血。
低于0.14者必须给予输血治疗(有充血性心力衰竭者不宜);
低于0.33者应进一步检查,寻找贫血原因。
男性高于0.56、女性高于0.53同时结合血红蛋白增高应考虑血浆容量问题。
达到或高于0.70者为紧急静脉放血的指征。
0.35~0.45
平均红细胞体积(MCV)
正常红细胞性贫血时正常,大细胞性贫血时增大,小细胞性贫血时减小。
体积减小常见于严重缺铁性贫血,遗传性球型细胞增多症;
体积增大常见于急性溶血性贫血及巨红细胞性贫血。
80~100fL
红细胞平均血红蛋白含量(MCH)
增加见于大细胞性贫血,减少见于单纯小细胞性贫血和小细胞低色素性贫血。
27~34pg
红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)
大细胞性贫血时MCHC正常或减小,单纯小细胞性贫血时MCHC正常,小细胞低色素性贫血时MCHC减小。
320~360g/L
各型贫血时三种红细胞平均值的改变
贫血类型
MCV
MCH
MCHC
大细胞性贫血
>正常
正常
恶性贫血,及营养性巨幼细胞性贫血等
正常细胞性贫血
急性失血、溶血性贫血、造血组织病等
单纯小细胞性贫血
<正常
感染、中毒、慢性炎症、尿毒症等
小细胞低色素性贫血
慢性失血性贫血、缺铁性贫血
红细胞分布宽度(RDW)
RDW与MCV结合可将贫血分为小细胞均一性与不均一性贫血,正常细胞均一性与不均一性贫血,及大细胞均一性与不均一性贫血。
在治疗过程中大细胞性或小细胞性贫血的这一指标会有动态变化。
11.5~15.5%
血小板计数(Plt)
(1)原发性血小板增多症、慢性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症、溶血性贫血、淋巴瘤。
(2)手术后、急性失血后、创伤、骨折。
(3)某些恶性肿瘤、感染、缺氧。
(1)原发性血小板减少性紫癜、白血病、再生障碍性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、巨幼细胞性贫血等。
(2)脾功能亢进、放射病、癌的骨髓转移。
(3)某些传染病或感染:
如败血症、结核、伤寒。
(4)某些药物过敏:
氯霉素、抗癌药等。
100~300×
血小板平均体积(MPV)
原发性血小板减少性紫癜、妊娠后期伴浮肿和蛋白尿者,以及急性失血(外伤)或大手术后的巨大血小板综合征(BermardSoulier综合征)时MPV增大;
非免疫性血小板破坏、再障、湿疹和血小板减少反复感染综合征(Wiskolt-Aldrich综合征)、骨髓移植恢复期、先兆子痫及慢性粒细胞性白血病时MPV减少。
7.5~12.5fL
血小板分布宽度(PDW)
巨幼红细胞贫血、急性粒细胞白血病、骨髓异常增生综合症(MDS)、原发性血小板减少性紫癜等时都可引起PDW增大。
15.5~17.5%
㈡纤溶系统
纤维蛋白原(FIB)
升高:
见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎,尿毒症,骨髓病,休克,外科术后及轻度肝炎等。
减低:
见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。
凝血酶原时间(PT)
PT延长:
超过正常对照3秒为延长,见于II,V,VII,X因子缺乏,及纤维蛋白的缺乏,获得性凝血因子缺乏,如DIC,原发性纤溶亢进等。
PT缩短:
先天性V因子增多,DIC早期(高凝状态),口服避孕药等。
口服抗凝药的监护:
当INR值在2~4时为抗凝治疗的合适范围,INR>4.5时应减少或停止用药。
活化部分凝血活酶时间(APTT)
APTT延长:
结果超过正常对照的10秒为延长,见于VIII,IX,XI,XII因子的缺乏。
APTT缩短:
见于DIC,血栓前状态及血栓性疾病。
肝素治疗的监护:
应维持APTT在正常对照的1.5~3.0倍为宜。
D-二聚体(D-Dimer)
增高见于纤溶亢进或DIC早期。
㈢其它
血沉(ESR)
血沉增快见于活动性结核病,风湿热,肺炎,某些恶性肿瘤,组织变性或坏死性疾病(如心肌梗死,胶原病),严重贫血,白血病,多发性骨髓瘤,严重急性感染,肾脏疾病等。
网织红细胞(RET)
网织红细胞增多见于各种增生性贫血,特别是急性溶血,急性大出血引起的失血性贫血,当缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血治疗有效时,短时间内网织红细胞会大量增加。
网织红细胞减少多见于骨髓增生低下,如再生障碍性贫血和某些溶血性贫血有再障危象时,如阵发性血红蛋白尿。
C反应蛋白(CRP)
在各种急,慢性感染,组织损伤,恶性肿瘤,心肌梗塞,手术创伤,放射性损伤等时又迅速降于正常水平。
红斑狼疮细胞(LE)
系统性红斑狼疮患者,红斑狼疮细胞阳性率一般为70~90%。
通常在活动期后常消失。
除系统性红斑狼疮外,类风湿,硬皮病,活动性肝炎等,偶亦可发现红斑狼疮细胞。
血中微丝蚴
丝虫寄生于人体淋巴管,只有微丝蚴在外周血中才能见到,镜检阳性可提示微丝蚴感染。
疟原虫
当检测到原虫或是裂殖体时均可判定有疟原虫感染。
肺炎支原体、衣原体抗体
为小儿支原体、衣原体性性肺炎提供诊断依据。
胸腹水常规
区别积液性质,判明是渗出液还是漏出液。
找出病原,进行治疗。
1.渗出液和漏出液的初步区别:
渗出液
漏出液
原因
局部炎症所致
非炎症性
比重
1.018以上
1.015以下
凝固性
易凝固
不易凝固
蛋白
30g/L 以上
30g/L 以下
李凡他试验
阳性
阴性
细胞数
200/ul以下
100/ul以下
细胞分类
急性感染以中性分叶为主,慢性感染以淋巴为主
淋巴细胞与间皮细胞为主
细菌
常有
无
葡萄糖
低于血糖
与血糖一致
中性粒细胞为主时见于化脓性渗出液。
淋巴细胞增多见于慢性疾病,如结核性,梅毒性,肿瘤等渗出液。
嗜酸性粒细胞增多,见于变态反应性和寄生虫感染,如过敏症,寄生虫感染,人工气胸等。
间皮细胞增多:
见于浆膜受刺激或受损。
妊娠试验(尿hCG)
受孕1周后可呈阳性。
过期流产或是不完全流产,子宫内仍有活胎盘组织时,本试验仍呈阳性。
人工流产后,如果本试验仍呈阳性,提示体内仍残留胚胎组织,应进一步检查。
宫外孕时hCG低于正常,但仍有60%的阳性率,有助于与其它急腹症相鉴别。
葡萄胎,恶性葡萄胎,绒毛膜上皮癌 以及男性睾丸畸胎瘤等恶性肿瘤时hCG会很高。
脑脊液常规
提供有关病原的相关信息,区分病毒性,细菌性或是外伤性的脑脊液性状改变。
1.颜色:
黄色提示脑内有陈旧性出血,红色离心后上清无色透明,提示穿刺引起的损伤,2.离心后呈淡红或黄色可能是蛛网膜下腔出血或脑出血。
3.潘氏试验:
有脑组织和脑膜 疾患时,蛋白质增加,且多为球蛋白,本试验常呈阳性。
如化脓性脑膜炎,结核性脑膜炎,梅毒性中枢神经系统疾病,颅内出血,脊髓灰质炎,流行性脑炎等。
4.白细胞:
化脓性脑膜炎时,每微升数百至数千。
结核性脑膜炎时,一般中度增加,为30~1000每微升。
流行性脑炎时,常为10~200每微升。
脊髓灰质炎,神经梅毒也有轻微增加。
5.氯化物:
减少见于化脓性脑膜炎,尤以结核性脑膜炎为明显。
病脑时无明显改变。
6.葡萄糖:
化脓性脑膜炎在早期下降明显,结脑隐球菌脑膜炎在中,后期下降较多,病脑多为正常。
7.真菌:
新型隐球菌检查。
8.细菌:
疑为细菌感染应要求革兰染色,疑为结核性脑膜炎者,作抗酸染色检查。
如在脑脊液中检测到任何的细胞,排除污染外均可视为致病菌。
精液常规
用于评价男性不育症诊断,治疗过程中很重要的检测项目,病人男子生育能力的重要依据。
白带常规
由临床医生采集,尽快送检,保持温度在25~35℃。
阴道分泌物清洁度分级及意义:
清洁度
所见成分
临床意义
I 度
大量上皮细胞,无杂菌或极少,白细胞0~5/HP
II 度
中等量上皮细胞,少量杂菌,白细胞5~15/HP(+)
III 度
少量上皮细胞,杂菌较多,白细胞15~30/HP(++)
提示有炎症
IV 度
无或有少量上皮,大量杂菌,白细胞>
30/HP(+++以上)
多见于严重的阴道炎
1.滴虫:
排除污染外可作为滴虫性阴道炎的诊断依据。
2.真菌:
白色念珠菌为正常寄生菌。
3.线索细胞:
是诊断阴道加德纳菌的重要依据。
尿淀粉酶(UAMY)
尿淀粉酶在起病12~24小时开始升高,下降也较血淀粉酶慢,故对急性胰腺炎的预后更有价值。
肾功能严重障碍时,血清AMY可增高,而尿淀粉酶下降。
血清淀粉酶和尿淀粉酶同时下降时,可见于各种肝病。
尿本-周蛋白(Bence-Jones)
阳性多见于多发性骨髓瘤等单克隆性免疫球蛋白合成不平衡的患者尿中。
乳糜试验
多见于丝虫病,也可见于
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