高中生物实验专题复习归纳Word下载.docx
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处理条件,光照、培养温度要相同。
三、实验操作设计(四步曲)
(1)取材、分组、编号
(2)根据原理进行实验处理(遵循对照、等量、单一变量原则)
(3)培养与观察,记录实验结果
(4)结果与结论分析
四、实验设计与分析中要注意语言规、科学、简明
1、实验组别编号描述
如:
凡实验中涉及到两组或两组以上,所用器材需用1、2、3……或A、B、C……或甲、乙、丙……等加以编号便于区分。
2、实验步骤分步描述并加以编号(一般不宜连续描述)
3、在实验中因素不能做到准确量化的描述,应尽可能用“定性”的语言表达。
如:
“一段时间”、“适宜的温度”、“适量的”、“一定量的”等。
4、叙说中尽量要用规的实验术语,不能用含糊的口语
“盖玻片”不能说是“玻璃片”;
“等量的”不宜说成“一样多的”;
“振荡”不宜说成“晃动”“摇动”等等。
五、实验复习要点
a、对实验相关基础知识(实验的目的、原理、材料、用具、现象)准确记忆,透彻分析。
b、熟练掌握实验中涉及的方法及操作技能并能灵活运用
c、提升对实验设计和对实验结果进行解释、分析及处理的能力。
光学显微镜构造
注1:
目镜镜头越长,放大倍数越小;
物镜镜头越长,放大倍数越大。
注2:
放大倍数:
目镜和物镜二者放大倍数的乘积,显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积。
注3:
显微镜的使用:
置镜(装镜头)→对光→置片→调焦→观察
注4:
换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后,只准调节细准焦和反光镜(或光圈)
问1:
低倍镜换为高倍镜后,若看不到或看不清原来的像,可能原因?
(ABC)
A、物像不在视野中B、焦距不在同一平面C、载玻片放反,盖玻片在下面D、未换目镜
问2:
放大倍数与视野的关系:
放大倍数越小,视野围越大,看到的细胞数目越多,视野越亮,工作距离越长;
放大倍数越大,视野围越小,看到的细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。
故装片不能反放。
问3.污点判断:
1)污点随载玻片的移动而移动,则位于载玻片上;
2)污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜;
换物镜后消失,则位于物镜;
3)污点不随载玻片移动,换镜后也不消失,则位于反光镜上。
实验专题一观察类实验
实验一:
观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)
一.实验目的:
初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
二.实验原理:
1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。
利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
2.盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
三.方法步骤:
操作步骤
注意问题
解释
取口腔上皮细胞制片
载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液
用消毒牙签在自己漱净的口腔侧壁上轻刮几下取细胞
将载玻片在酒精灯下烘干
防止污迹干扰观察效果
保持细胞原有形态
消毒为防止感染,漱口避免取材失败
固定装片
水解
将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C水浴保温5min
改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色
冲冼涂片
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S
洗去残留在外的盐酸
染色
滴2滴吡罗红甲基绿染色剂于载玻片上染色5min
观察
先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察
使观察效果最佳
实验三用显微镜观察多种多样的细胞(必修一P7)
1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点
2)运用制作临时装片的方法
利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:
可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。
第一步:
转动反光镜使视野明亮
第二步:
在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央
第三步:
用转换器转过高倍物镜
问
(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?
为什么?
提示:
低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;
高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。
问
(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?
如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野围而找不到。
因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。
问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?
不行。
用高倍镜观察,只需微调即可。
转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。
第四步:
观察并用细胞准焦螺旋调焦。
四:
讨论:
1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?
答:
(1)首先用低倍镜观察,找到要观察的物像,移到视野的中央。
(2)转动转换器,用高倍镜观察,并轻轻转动细准焦螺旋,直到看清楚材料为止。
2.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点,并描述它们之间的差异,分析产生差异的可能的原因:
这些细胞在结构上的共同点是:
有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞还有细胞壁。
各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是:
这些细胞的位置和功能不同,其结构与功能相适应,这是个体发育过程中细胞分化产生的差异。
3.P8图是一个大肠杆菌的电镜照片和结构模式图,大肠杆菌与你在本实验中观察到的细胞有什么主要区别?
从模式图中可以看出,大肠杆菌没有明显的细胞核,没有核膜,细胞外有鞭毛,等等。
实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体(必修一P47)
使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。
叶绿体的辨认依据:
叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。
线粒体辨认依据:
线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。
三.实验材料:
观察叶绿体时选用:
藓类的叶、黑藻的叶。
取这些材料的原因是:
叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。
若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。
因为表皮细胞不含叶绿体。
四.方法步骤:
步骤
注意问题
分析
1.制片。
用镊子取一片黑藻的小叶,放入载玻片的水滴中,盖上盖玻片。
制片和镜检时,临时装片中的叶片不能放干了,要随时保持有水状态
否则细胞或叶绿体失水收缩,将影响对叶绿体形态和分布的观察。
2.低倍镜下找到叶片细胞
3.高倍镜下观察叶绿体的形态和分布
4.制作人的口腔上皮细胞临时装片
在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液→用牙签取碎屑→盖盖玻片
5.观察线粒体
蓝绿色的是线粒体,细胞质接近无色。
1、细胞质基质中的叶绿体,是不是静止不动的?
不是。
呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能接受较多光照,又不至于被强光灼伤。
2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系?
叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用。
如叶绿体在不同光照条件下改变方向。
又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以接受更多的光照。
实验六观察植物细胞的质壁分离和复原(必修一P61“探究”)
一、实验目的:
1.学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。
2.了解植物细胞发生渗透作用的原理。
1.质壁分离的原理:
当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而失水,细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。
由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。
2.质壁分离复原的原理:
当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
二、实验材料:
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。
因为液泡呈紫色,易于观察。
也可用水绵代替。
0.3g/ml的蔗糖溶液。
用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。
三、实验步骤:
步骤
分析
1.制作洋葱表皮的临时装片。
在载玻片上滴一滴水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平(也可挑取几条水绵放入水滴中)。
盖上盖玻片。
盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。
防止装片产生气泡。
2.观察洋葱(或水绵)细胞
可看到:
液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。
(或水绵细胞中有带状叶绿体,原生质层呈绿色,紧贴着细胞壁。
液泡含花青素,所以液泡呈紫色。
先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。
3.观察质壁分离现象。
从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
镜检。
观察到:
液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。
原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。
重复几次
糖液浓度不能过高
蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞通过渗透作用失水,细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大,液泡和原生质层不断收缩,所以发生质壁分离。
为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。
否则,细胞严重失水死亡,看不到质壁分离的复原。
4.观察细胞质壁分离的复原现象。
从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层恢复原状。
发生质壁分离的装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。
重复几次。
细胞液的浓度高于外界溶液,细胞通过渗透作用吸水,所以发生质壁分离复原现象。
因为细胞失水过久,也会死亡。
为了使细胞完全浸入清水中。
实验讨论答案:
1.如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什么现象?
表皮细胞维持原状,因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时,红细胞会不会发生质壁分离?
不会。
因为红细胞不具细胞壁。
实验十观察细胞的有丝分裂(必修一P115)
1.制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片
2.观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期,比较细胞周期不同时期的时间长短。
3.绘制植物细胞有丝分裂简图。
1.在高等植物体,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。
由于各个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。
2.染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞染色体(或染色质)的存在状态,就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程。
洋葱(可用葱、蒜代替)。
因为根尖生长点属于分生组织,细胞分裂能力强,易观察到有丝分裂各个时期的细胞。
四.实验步骤:
一、根尖的培养
实验前3~4天,让洋葱放在广口瓶上,底部接触清水。
根长约5cm时可用。
置于温暖处,常换水。
因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。
二、装片的制作
(解离→漂洗→染色→制片)
1.解离:
上午10时至下午2时,剪取洋葱根尖2~3mm,立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:
1)的玻璃皿中,室温下解离3~5min。
解离时间要保证,细胞才能分散开来。
解离时间也不宜过长。
目的:
溶解细胞间质,使组织中的细胞相互分离开来。
此时,细胞已被盐酸杀死。
否则,根尖过于酥软,无法取出。
2.漂洗:
待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。
漂洗要充分,可换水1~2次。
洗去解离液,便于染色。
3.染色:
把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。
染色时间不宜过长,否则显微镜下一片紫色,无法观察。
龙胆紫等为碱性染料,可使染色体着色。
醋酸洋红溶液也能使染色体着色
4.制片:
用镊子将这段洋葱根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把洋葱根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。
然后,用拇指轻轻地压载玻片,使细胞分散开来。
要弄碎根尖,再垂直向下均匀用力压片,不可移动盖玻片,
使细胞分散,避免细胞重叠,便于观察。
做得成功的装片,标本被压成云雾状。
三、观察
1.低倍镜观察:
把装片放在低倍镜
下,慢慢移动装片,找到分生区细胞。
2.高倍镜观察:
移走低倍镜,换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,仔细观察,找出处于细胞分裂期中期的细胞,再找出前期、后期、末期的细胞。
一定要找到分生区。
在一个视野里,往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。
如果是这样,可以慢慢地移动装片,从邻近的分生区细胞中寻找。
分生区细胞特点是:
细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正处于分裂期。
制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么?
制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键有以下几点:
(1)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱根尖细胞一天之中分裂最活跃的时间;
(2)解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离;
(3)压片时,用力的大小要适当,要使根尖被压平,细胞分散开。
实验十二观察细胞的减数分裂(必修二P21)
通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片,识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目,加深对减数分裂过程的理解。
蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞,再形成精子。
此过程要经过两次连续的细胞分裂:
减数第一次分裂和减数第二次分裂。
在此过程中,细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化,因而可据此识别减数分裂的各个时期。
四.课后讨论题:
1.减数第一次分裂会出现同源染色体联会、四分体形成、同源染色体在赤道板位置成对排列、同源染色体分离、移向细胞两极的染色体分别由两条染色单体组成等现象。
减数第二次分裂的中期,非同源染色体成单排列在细胞赤道板位置,移向细胞两极的染色体不含染色单体。
2.减数第一次分裂的中期,两条同源染色体分别排列在细胞赤道板的两侧,末期在细胞两极的染色体由该细胞一整套非同源染色体组成,其数目是体细胞染色体数的一半,每条染色体均由两条染色单体构成。
减数第二次分裂的中期,所有染色体的着丝点排列在细胞的赤道板的位置。
末期细胞两极的染色体不含染色单体。
3.同一生物的细胞,所含遗传物质相同;
增殖的过程相同;
不同细胞可能处于细胞周期的不同阶段。
因此,可以通过观察多个精原细胞的减数分裂,推测出一个精原细胞减数分裂过程中染色体的连续变化。
实验十三低温诱导染色体加倍(必修二P88)
1.学习低温诱导植物染色体数目变化的方法
2.理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制
1.进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,在有丝分裂后期,染色体的着丝点分裂,子染色体在纺缍丝的作用下分别移向两极,最终被平均分配到两个子细胞中去。
2.用低温处理植物组织细胞,使分裂前期的纺缍体的形成受到抑制,以致影响染色体被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是,植物细胞染色体数目发生变化。
四.课后讨论题答案:
秋水仙素和低温都是通过抑制分裂细胞纺锤体的形成,使染色体不能移向细胞两极,而引起细胞染色体数目加倍。
实验专题二提取分离鉴定类实验
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.可溶性还原糖(含游离的醛基或酮基的糖类物质:
如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。
葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓(砖红色)+H2O,即Cu(OH)2被还原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
2.脂肪可以被丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被丹Ⅳ染液染成红色)。
淀粉遇碘变蓝色。
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。
)
三.实验材料
1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。
(因为组织的颜色较浅,易于观察。
2.做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。
四、实验试剂
斐林试剂(包括甲液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:
质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)、丹Ⅲ或丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括A液:
质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:
质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。
五、方法步骤:
(一)可溶性糖的鉴定
操作方法
1.制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)
苹果或梨组织液必须临时制备。
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2.取1支试管,向试管注入2mL组织样液。
3.向试管注入1mL新制的斐林试剂,振荡。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;
甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH)2生成。
4.试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:
浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)
最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热。
防止试管的溶液冲出试管,造成烫伤;
缩短实验时间。
(二)脂肪的鉴定
操作方法
解释
花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。
切片要尽可能薄些,便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴丹Ⅲ或丹Ⅳ染液,染色1分钟。
染色时间不宜过长。
用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。
酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。
同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长,油滴会溶解在乙醇中。
三、蛋白质的鉴定
制备组织样液。
(浸泡、去皮研磨、过滤。
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。
加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;
再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制,储存。
鉴定时先加A液后加B液。
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。
A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
附:
淀粉的检测和观察
用试管取2ml待测组织样液,向试管滴加2滴碘液,观察颜色变化。
碘液不要滴太多
以免影响颜色观察
实验八叶绿体色素的提取和分离(必修一P97)
1.尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。
2.分析实验结果,探究叶绿体中有几种色素,以及各自所呈现的颜色。
1.叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。
2.层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。
叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
所以用层析法来分离四种色素。
三、实验材料:
幼嫩、鲜绿的菠菜叶
四、实验步骤:
1.提取色素
5克绿叶剪碎,放入研钵,加SiO2、CaCO3和5mL丙酮(或10mL无水乙醇)迅速、充分研磨。
(若没有无水乙醇,也可用体积分数为95%的乙醇,但要加入适量的无水碳酸钠,除去水分)
加SiO2
加CaCO3
加丙酮
迅速
加SiO2为了研磨得更充分。
加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。
因为叶绿素含镁,可被细胞液中的有机酸产生的氢代替,形成去镁叶绿素,CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸,防止叶绿体被破坏。
叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。
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