备战高考生物 考前30天冲刺押题系列 专题18 基因工程文档格式.docx

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【例1】某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。

已知质粒中存在两个抗性基因：

A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。

下列叙述正确的是

A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒

B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶

C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌

【例2】下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库 

基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）。

（2）①过程提取的DNA需要 

的切割，B过程是 

。

（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用 

扩增的方法，其原理是 

（4）目的基因获取之后，需要进行 

，其组成必须有 

以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。

（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是 

，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是 

，可以用 

技术进行检测。

【例3】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。

请回答下列问题：

（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有 

个游离的磷酸基团。

（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 

（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是 

（4）与

只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外

源DNA的优点在于可以防止 

（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 

酶。

（6）重组质粒中抗生素抗

性基因的作用是为了 

（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 

的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

题型攻略

【知识储备】1.基因组文库和cDNA文库比较

文库类型

cDNA文库

基因组文库

文库大小

小

大

基因中启动子

无

有

基因多少

某种生物的部分基因

某种生物的全部基因

物种之间的基因交流

可以

部分基因可以

说明

基因文库的组建过程就包含基

因工程的基本操作步骤。

从基因文库中获取目的基

因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性

2.将目的基因导入受体细胞

细胞类型

常用方法

受体细胞

转化过程

植物细胞

农杆菌转化

体细胞

将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上

动物细胞

显微注射

受精卵

将含有目的基因的表达载体提纯→取卵→获得受精卵→显微注射→早期胚胎培养→胚胎移植→发育成为具有新性状的动物

微生物细胞

Ca2+处理

原核细胞或酵母菌

用Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收

3.目的基因的检测和表达

4.几个应注意的问题

①基因表达载体中，启动子（DNA片段）≠起始密码子（RNA）;

终止子（DNA片段）≠终止密码子（RNA）；

②基因表达载体的构建方法：

该过程把三种工具（只有两种工具酶）全用上了,是最核心、最关键的一步,在体外进行。

【易错指导】

（1）不注意区分基因工程中的工具和工具酶；

①基因工程中有3种工具（包括运载体）,但工具酶只有2种（不包括运载体）；

②工具酶本质为蛋白质,载体本质为小型DNA分子,但不一定是环状（最常见的运载体为质粒，动植物病毒等也可作为运载体）。

（2）不熟悉标记基因的种类和作用；

标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞,常见的有抗生素抗性基因、发光基因,表达产物为带颜色物质等。

（3）对受体细胞模糊不清；

受体细胞中常用植物受精卵或体细胞（经组织培养）、动物受精卵（一般不用体细胞）、微生物（大肠杆菌、酵母菌）等。

要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必需用真核生物酵母菌（需内质网、高尔基体的加工、分泌）；

一般不用支原体,原因是它营寄生生活；

一定不能用哺乳动物成熟红细胞,原因是它无细胞核,不能合成蛋白质。

热点题型2关注发展方向，解答基因工程综合应用题

【例1】下列不属于利用基因工程技术制取的药物是（　　）

A.从大肠杆菌体内制取白细胞介素B.在酵母菌体内获得干扰素

C.在青霉菌内获取青霉素D.在大肠杆菌内获取胰岛素

【例2】下列关于基因工程应用的叙述,错误的是（）

A.基因治疗需要将正常基因导入有基因缺陷的细胞

B.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交

C.一种基因探针只能检测水体中的一种病毒

D.原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良

【解析】：

本题考查基因工程的应用。

理解基因治疗、基因诊断的概念和DNA分子杂

【例3】利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。

2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。

下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫

棉的过程，据图回答：

　　⑴在基因工程中，A表示 

，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是 

，B表示 

　　⑵在研究过程中，研究

人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用____ 

技术对目的基因进行了扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。

在重组载体的构建过程中需要的工具酶有______________________________。

　　⑶基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括哪些部分?

。

　　⑷将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是采用 

方法，在②过程中一般采用 

方法，受体细胞一般是 

　　⑸由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么?

　　⑹要确定目的的基因（抗虫基因）导入棉花细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：

【解析】：

本题主要考查基因工程的工具、步骤和应用。

熟悉各个步骤是正确解答该题的关键。

基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶、运载体等，其中限制酶具有专一性：

一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。

基因工程包括四个步骤：

目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

目的基因的获取一般有3种途径：

从基因文库中获取目的基因；

利用PCR技术扩增目的基因；

通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。

一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分。

基因基因的检测与鉴定有四种方法：

采用DNA分子杂交技术检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，检测目的基因是否转录出了mRNA，检测目的基因是否翻译成蛋白质，进行个体生物学水平的鉴定（进行抗虫或抗病的接种实验）。

【知识储备】基因工程在疾病的诊断和治疗中的作用举例。

（1）基因诊断：

基因诊断是用放射性同位素（如32P）、荧光分子等标记的DNA分子做探针,利用DNA分子杂交原理,鉴定被检测标本上的遗传信息,达到检测疾病的目的。

（2）基因治疗：

把健康动物的正常基因导入含有缺陷基因的受体细胞中,存在基因缺陷的病人细胞中既含有缺陷基因,又含有通过基因工程导入的正常基因,在病人体内两种基因都能表达,正常基因的表达产物

掩盖了缺陷基因的表达产物,从而治愈了有基因缺陷的疾病。

【易错指导】对乳腺（膀胱）反应器与微生物生产基因产品混淆不清

乳腺生物反应器与微生物生产的比较

乳腺生物反应器

微生物生产（原核生物）

基因结构

动物基因结构与人类的相同

与人类基因结构不同

基因表达

与天然蛋白质活性没有区别

由于缺少内质网、高尔基体等细胞器,产物可能不具有生物活性

产物提取

从乳汁中较易分离提取

从细胞中提取,较为复杂

生产设备

畜牧业生产;

提取设备

工业生产;

设备精良

热点题型3理清区别与联系，解答蛋白质工程与基因工程综合应用题

【例1】下列关于蛋白质工程的说法,错误的是（）

A.蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构,使之更加符合人类需要

B.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构

C.蛋白质工程能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子

D.蛋白质工程与基因工程密不可分,又称为第二代基因工程

【例2】某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只有对热稳定性较差，进入人体后容易失效。

现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物的消化不良，最佳方案是

A.对此酶中的少数氨基酸替换，以改善其功能

B.将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶

C.重新设计与创造一种全新的蛋白酶

D.减少此酶在片剂中的含量

【例3】胰岛素可以用于治疗糖尿病,但是胰岛素被注射到人体后,会堆积在皮下,要经过较长的时间才能进入血液,而进入血液的胰岛素又容易分解,因此,治疗效果受到影响。

如图是用蛋白质工程设计速效胰岛素的生产过程,请据图回答有关问题：

（1）构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是

（2）通过DNA合成形成的新基因应与结合后转移到中才能得到准确表达。

（3）若要利用大肠杆菌生产速效胰岛素,需用到的生物工程有、和发酵工程。

（4）图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是什么？

【知识储备】基因工程与蛋白质工程的比较

项目

蛋白质工程

基因工程

区别

过程

预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→推测相对应的

脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质

获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定

实质

定向改造或生产人类所需蛋白质

定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品

结果

生产自然界没有的蛋白质

一般是生产自然界已有的蛋白质

联系

蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。

因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质,必须通过基因修饰或基因合成实现

【易错指导】很多同学误认为蛋白质工程的直接改造对象是蛋白质。

实际上，之所以称为蛋白质工程，是因为整个过程是以研究蛋白质的结构和功能为起点，以改造蛋白质的结构和功能为最终目的；

但改造蛋白质是通过对基因的改造来实现的。