植物组织培养试题库Word文档下载推荐.docx

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二、填空题

1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。

2、组织培养实验室必要的设备有 

超净工作台、 

高压灭菌器 

、 

空调机 

天平 

显微镜、蒸馏水发生器等。

3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的 

碳源 

，而且还能维持 

培养基渗透压 

4、培养基灭菌一般在108kPa的压力下，锅内温度达121℃，维持20-30min。

5、在离体叶培养中，6-BA和KT利于芽的形成；

2,4-D利于愈伤组织的形成

6、在离体叶组织脱分化和再分化培养中，茎和芽的分化主要有4个途径：

直接产生不定芽、由愈伤组织产生不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。

7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。

8、花药培养前的预处理:

低温冷藏是最常用的方法。

1、植物组织培养的发展分为三个阶段：

萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。

2、培养基最常用的碳源是蔗糖，使用浓度在1%-5%常用3%。

3、培养基的种类按其态相不同分为固体培养基与液体培养基，其灭菌方法一般采用湿热消毒灭菌方法。

4、pH的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pH大于6.0时，培养基将会变硬，低于5.0时，琼脂不能很好地凝固。

5、一般情况下，生长素/细胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成；

比值低，有利于芽的形成。

6、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。

7、花药和发粉培养的共同特点是利用花粉（小孢子）染色体数目的单倍性，培育出单倍体植株。

8、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。

1、组织培养植株再生的途径：

体细胞胚胎发生途径和器官发生途径。

2、培养基的主要成分包括 

①无机营养成分（大量元素、微量元素和铁盐） 

②有机营养成分（包括维生素、氨基酸等） 

③植物生长调节物质 

④碳水化合物 

⑤其它物质 

。

3、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物，一般用量为6-10g／L之间。

4、一般情况下，生长素/细胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成；

5、试管苗的生态环境：

高温且恒温、高湿、弱光、无菌。

6、愈伤组织的形态发生方式主要有 

不定芽方式 

和胚状体方式。

7、无病毒苗的保存分：

隔离保存和长期保存两种方法。

8、压片染色法是检测划分发育时期的简便有效方法，常用染色剂为醋酸洋红。

三、单项选择题

1、1974年我国朱至清等设计了（B）培养基，目前广泛应用在花药培养中。

A、马铃薯-2号B、N6C、W14D、c17

2、组培室应建立在安静、清洁，并且在该地长年主风向的（A）方向。

A、上风B、下风C、左风D、右风

3、制作每升固体培养基常用琼脂的用量为（B）克。

A、4—6B、6—10C、10—15D、15—20

4、下列培养类型不属于液体培养的是（D）

A、旋转培养B、纸桥培养C、振荡培养D、看护培养

5、进行茎尖培养脱毒时，通常以带1-3个幼叶原基的茎尖作外植体较合适。

则茎尖的长度约为（B）。

A、0.1-0.3mmB、0.3-0.5mmC、0.4-0.6mmD、0.6-0.8mm

6、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是（C）。

A、污染B、褐变C、黄化D、玻璃化

7、超低温种质保存的温度为（C）。

A、0～15℃；

B、-80℃；

C、-196℃；

D、-280℃

8、在植物组织培养表面灭菌时，常用的酒精浓度为（A）。

A、70%-75%B、80%-85%C、90%-95%D、100%

9、一般来说，在愈伤组织培养时，幼年细胞和组织比成年细胞和组织（B）。

A、困难B、容易C、一样D、不一定

10、利用花粉或花药培养，进行单倍体育种选育一个新品种只需（C）年。

A、1-3B、2-4C、3-5D、4-6

1、细胞工程、（B）、酶工程、发酵工程是生物技术的主要范畴。

A、蛋白质工程B、基因工程C、微生物工程D、生化工程

2、配制（B）溶液时应先用10%的HCl溶解，再加蒸馏水定容。

A、2,4-DB、BAC、GA3D、IAA

3、炼苗的环境开始时和（A）相似，后期类似于田间栽培条件。

A、培养室条件B、无菌界室条件C、缓冲间条件D、准备室条件

4、离体培养常用的诱导生根的生长调节物质主要是（A）。

A、生长素B、细胞分裂素C、脱落酸D、乙烯

5、植物组织培养实验室需要定期用（A）进行熏蒸。

A、高锰酸钾和甲醛B、酒精和洗液C、高锰酸钾和酒精D、高锰酸钾和洗液

6、进行无菌操作前，工作人员可以不必（A）。

A、洗脸B、换拖鞋C、穿工作服D、洗手

7、电子天平的感量一般在（C）范围。

A、0.1g或0.01gB、0.01g或0.001gC、0.001g或0.0001gD、0.1g或0.0001g

8、进行干热灭菌时，应在150℃时保持（B）分钟。

A、30B、60C、90D、120

9、适合双子叶植物花药培养的培养基是（A）。

A、MS培养基B、B5培养基C、N6培养基D、White培养基

10、下列不属于原生质体培养的是（D）

A、平板培养B、液体浅层培养C、悬滴培养D、糖培养

1、为了减少污染，一般选择培养材料的大小，在（A）之间。

A、0.1-0.5cmB、0.5-1.0cmC、1.0-1.5cmD、1.5-2.0cm

2、世界上首次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（B）。

A、MorelB、HaberlandtC、SchleidenD、White

3、在植物组织培养表面灭菌时，常用的氯化汞浓度为（A）。

A、0.1-1%B、0.2-2%C、0.3-3%D、0.4-4%

4、在细胞悬浮液成批培养过程中，细胞数目会不断发生变化，其中细胞数目迅速增加，增长速率保持不变的是（C）。

A、减慢期B、延迟期C、对数生长期D、静止期

5、下列不属于原生质体培养的是（D）

6、在愈伤组织培养时，一般双子叶植物比单子叶植物诱导愈伤组织（B）。

7、在进行花药和花粉培养时，最适宜的花粉发育时期是（B）。

A、成熟花粉粒B、单核花粉期C、二核花粉期D、三核花粉期

8、植物组织培养中大多数植物都适用的培养基是（A）培养基。

A、MSB、N6C、WhiteD、B5

9、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是（C）。

10、配制微量元素母液时，浓缩了200倍保存在1升容量瓶内，当制作4升培养基时，应取用铁盐母液（D）ml。

A、50B、40C、30D、20

四、单或多项选择题

1.下列不属于细胞分裂素类的植物激素是____AC_____。

ABA；

BNAA；

CZT；

DKT

2.植物组织培养的特点是____A_____：

A培养条件可人为控制；

B生长周期短，繁殖率高；

C管理方便；

D产量大

３、诱导试管苗生根，培养基的调整应＿BD＿＿＿＿

A加大生长素的浓度B加大分裂素的浓度C加活性炭D降低盐的浓度

4.下列不属于大量元素的盐是___B______。

ANH4NO3；

BKNO3；

CZnSO4.7H2O；

DMgSO4.7H2O

5.培养休眠的植物材料时必需加入的激素是：

AGA；

BIAA；

CNAA；

DZT

五、判断题

1、PH增高不利于原生质体的再生。

（×

）

2、剥离法是植物离体培养中花粉分离的一种方法。

3、茎尖培养一般采用半固体培养基，也可使用液体培养基。

（√）

4、培养基的营养成分越复杂、营养成分越丰富，植板细胞的临界密度越低。

5、晴天下午取材在一定程度上可以减轻污染。

6、细胞悬浮培养的培养基中氧浓度低于临界水平时，利于根的形成。

7、植物组织培养有利于快速繁殖稀有植物并挽救濒临灭绝得植物。

8、培养室的试管苗瓶内湿度在80%左右。

9、愈伤组织继代培养中铵态氮的含量一般不能高于8mmol/L。

10、“脱毒苗”是指不含该种植物的主要危害病毒。

（√）

1、叶柄和叶脉的切口处不能形成愈伤组织和分化成苗（×

）。

2、在植物组织培养过程中，所用外植体是指植物体上的根、茎、叶、花、果、种子。

3、植物组织培养的培养基使用前须经过高压灭菌。

4、离体叶培养中，消毒后的叶片应整理切割成5×

5mm大小。

5、一般来说单叶子植物的愈伤组织培养比双子叶植物容易。

6、连续培养是植物脱毒的常用方法。

7、试管苗与常规苗相比，茎、叶绿色，光合作用更强。

8、茎尖培养主要用于消除病毒，也可消除植物体中其他病原菌，包括类病毒、类菌质体、细菌和真菌。

9、细胞悬浮培养的培养基中氧浓度低于临界水平时，利于形成胚状体。

10、漂浮释放法是植物离体培养中花粉分离的一种方法。

1、植物组织培养属于有性繁殖范畴。

2、茎尖分生组织主要是指对茎尖长度不超过0.1mm的茎尖进行培养。

3、外植体是指用于组培接种用的离体植物材料。

4、悬浮培养属固体培养的一种。

5、植物离体培养中细菌污染的特点是污染部分长有不同颜色的霉菌。

6、试管苗的茎叶呈绿色，光合作用弱。

7、大多数植物组织培养要求的PH范围是4.0-7.0。

8、植株进行一次病毒鉴定未发现病毒，就可确定该植株不带病毒。

9、大多数外植体组织培养的温度要求在25±

2℃。

10、IAA/KT高，利于芽分化。

1．×

一般将微量元素母液均配制成100倍，在配制培养基时，使用量为10ml/L。

2．×

细胞分裂素/生长素的比值较高时，有利于愈伤组织芽的诱导。

3．×

对于金边虎尾兰等遗传学上的嵌合体植物，要是组织培养繁殖的植株保持原有的园艺价值，只能通过茎尖和侧芽培养。

4．×

植物生长调节物质使用不当时，材料也容易褐变，细胞分裂有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。

5.×

利用茎尖分生组织进行脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成反比。

6.√某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗。

7.√无病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，体内营养和生理状况发生改变，因而对其他病毒和病原体的侵染更为敏感，因此在种植脱毒苗的一定要隔离种植。

8.×

微繁不定芽的产生有两个途径，一是不定芽不通过愈伤组织由外植体直接产生，二是外植体诱导产生愈伤组织，由愈伤组织上产生不定芽。

前一途径相对较为优越，因为通过愈伤组织会出现一些突变。

9.√细胞的全能性，可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过程得以体现。

10．√培养基中的铁盐，常用不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物，以防在pH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。

简答

1.无病毒苗培育的意义？

答：

①从根本上消除只靠种苗传播的病毒病的危害。

②无病毒栽培可改善果树品质，提高丰产性，抗逆性及利用砧木的优良性状

③减少农药的使用，降低生产成本，减少或避免对环境的污染。

2.组培苗基质选配的原则？

①需具有良好的物理特性，通气性好。

②需具有良好的化学特性，不含有对植物和人类有毒的成分，不与营养液中的盐类发生化学反应而影响苗正常生长。

③需对盐类要有良好的缓冲能力，维持稳定，适且植物生长的PH值。

④选用基质还需物美价廉，便于就地取材。

3.褐化现象的产生原因和预防措施各是什么？

褐变的主要原因：

植物品种；

生理状态；

培养基成分；

培养条件不当。

预防措施：

选择合适的外植体；

合适的培养条件；

使用抗氧化剂；

连续转移。

4.在植物组织培养中，造成组培材料污染的因素都有哪些？

如何采取相应的措施防止或降低污染？

造成污染的原因：

培养基灭菌不彻底；

外植物体表面消毒灭菌不彻底；

操作不当。

防止污染的措施是：

培养基正确灭菌，外植体冲洗充分，消毒灭菌彻底，严格无菌操作。

5.花药和花粉培养在育种学方面的作用是什么?

花药培养和花粉培养使单个花粉粒发育成完整的单倍体植株，经过染色体的加倍处理成为正常结实的二倍体植株，其后代属于真正的纯系。

可以大大缩短育种年限。

MS固体培养基的制作步骤如下:

⑴母液取出。

⑵适量蒸馏水放入加热容器，接通电源加热。

⑶加入称量好的琼脂至完全溶化，称取相应量的蔗糖至溶解，将母液混合液加入混匀，最后用蒸馏水定容至所需体积。

⑷测试培养基溶液的PH值（5.8-6.0），调整。

2.简述通过小叶嫁接法鉴定草莓病毒的操作步骤。

①从被鉴定的草莓采集长成不久的新叶，除去两边的小叶，中央的小叶带1～1.5cm的叶柄，把它削成楔形作接穗。

②将指示植物除去中间的小叶，在叶柄的中央用刀切入1～1.5cm，再插入接穗，用线把接合部位包扎好。

为了防止干燥，在接合部位涂上少量的凡士林。

③观察。

约经2周时间，撤去塑料袋。

若带有病毒，嫁接后1～2个月，在新展开的叶、匍匐茎或老叶上会出现病症。

3、制作配方为MS+6-BA0.5mg/L的培养基2L（大量元素母液为10×

，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为100×

，激素母液浓度为1mg/ml）

（1）按配方移取各母液：

大量元素母液为200ml，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为20ml，6-BA激素母液为1ml。

（2）定容：

用蒸馏水定容至2L。

（3）称量蔗糖和琼脂：

蔗糖50－60g，琼脂14－16g。

（4）培养基熬制：

加入蔗糖和琼脂后进行培养液熬制，直至琼脂全部融化。

（5）调PH值：

先用PH计或PH试纸测量后再用0.1MNaOH或HCl调PH值为5.8－6.0。

（6）二次定容：

当培养基熬制后总体积少于2L时要定容至2L。

（7）分装并扎瓶口：

趁热分装，100ml的三角瓶约装入30－40ml,35瓶/L。

（8）高压灭菌：

及时灭菌，121-123℃条件下保持20－30分钟。

（9）冷却：

待接种。

1、在植物组织培养中，通过哪些途径可以得到完整的植株？

答:

（1）外植体→愈伤组织→根、芽→试管苗（2分）

（2）外植体→胚状体→试管苗（2分）

（3）外植体→根、芽→试管苗（2分）

2、母液配制意义是什么？

答：

（1）在植物组织培养中，配制培养基是日常必备的工作。

（3分）

（2）为简便起见，通常先配制一系列母液。

3、茎段培养与茎尖培养有什么主要区别?

答:

茎尖培养是指带有顶芽的器官培养，可用于脱毒和快繁；

（2分）

茎段培养指不带芽和带1个以上定芽或不定芽的，包括块茎、球茎在内的幼茎切段的无菌培养。

茎段培养的主要目的是快速繁殖,茎尖培养的主要目的是脱毒。

4、简述茎段培养基本过程？

选健壮的枝梢,去叶片用自来水冲洗（1分）→75％酒精浸1min（1分）→0.1%Hgcl2浸泡5－10min（1分）→用无菌水冲洗4-5次→接种（1分）→培养（1分）

5、培育无病毒苗常用的方法及其优缺点？

（1）茎尖培养脱毒：

脱毒率高，但成本较高。

（1.5分）

（2）愈伤组织培养脱毒：

脱毒率较高，但成本高。

（3）微尖嫁接脱毒：

适合于难生根树种，但方法繁琐，技术要求高。

（1.5分）

（4）高温处理脱毒：

方法简单、易操作，适合于生产，但易伤害植物。

五、计算题（每题5分，共5分）

1、培养基的配方是MS＋BA2＋NAA0.5＋30g/L糖，要配制400mL，MS母液的浓度分别是：

大量元素20倍，微量元素200倍，铁盐100倍，有机物50倍。

要吸取各种母液各多少mL？

糖称取多少克？

大量元素：

20mL（2分）

微量元素：

2mL（2分）

铁盐：

4mL（2分）

有机物：

8mL（2分）

糖：

12g（2分）

六、论述题（共15分）

1、某地区的一种马铃薯经多年的种植后，植株变的矮小，产量和品质都下降，怀疑是由病毒所至。

请你设计一个脱毒的技术方案。

（每题10分，共10分）

无病毒苗培养：

（1）取材：

从田间切取6-8cm顶芽，放入培养箱中生长2-3周，除去顶芽促

进腋芽生长，剪取腋芽1-2cm。

（2）消毒：

在自来水下冲洗干净，无菌条件下先用70％的酒精消毒30秒，再

用0.1%氯化汞消毒数7-8分钟，最后用无菌水冲洗材料4-5次。

（3）剥去茎尖与接种：

在电子显微镜下剥去茎尖，接种在MS+0.1mg/L（NAA）+0.2mg/L（2分）

（GA3）+0.5mg/L（6-BA）+2%蔗糖+PH5.8液体培养基上。

（4）培养

温度：

21-25℃

光照度：

2000-3000lx

光照时间：

12小时/天（1分）

（5）生根培养

生根培养基：

MS+0.3mg/L（NAA）+0.1%活性炭（2分）

（6）炼苗移栽（1分）

2、试论述组培实验室的基本构造及其主要设备？

（每题5分，共5分）

（1）准备室（0.5分）

主要设备：

①高压灭菌锅（0.3分）；

②器皿干燥箱（0.3分）；

③冰箱（0.3分）；

④小推车（0.3分）；

（2）缓冲室（0.5分）

①衣服架（0.3分）；

②鞋架（0.3分）；

（3）接种室（0.5分）

①超净工作台（0.3分）

（4）培养室（0.5分）

①培养架（0.3分）；

②空调（0.3分）③除湿机（0.3分）

1、试论述原生质体分离的过程？

若用叶片作为材料，取已展开的生活叶片，用0．53％次氯酸钠和70％酒精进行表面灭菌，然后切成2cm见方。

（2分）把4g叶组织置于含有200ml不加蔗糖和琼脂的培养基500ml三角瓶中。

（1分）在4℃黑暗条件下培养16~24h，以后叶片转入含有纤维素酶、果胶酶、无机盐和缓冲液的混合液中，pH值为5．6，然后酶液真空渗入叶片组织。

（1分）在28℃条件下，每分钟40转的旋转式转床上培养4h后，叶片组织可完全分离。

（1分）

七、论述题

1.请阐明大花蕙兰通过组织培养技术生产的过程是什么？

培养基的配方的确定：

⑴诱导培养基：

MS+BA4-10mg/L+NAA0.1-1mg/L（花梗）

MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L（种子萌发）

⑵增殖培养基：

MS+BA3mg/L+NAA1.0mg/L

⑶生根培养基：

1/2MS+IBA1.5mg/L+2%蔗糖

操作步骤：

⑴.选材：

选择健壮无病虫害、性状优良、生长120天以上、未开裂的蝴蝶兰蒴果。

⑵.灭菌：

蝴蝶兰蒴果→流水冲洗→75%酒精浸泡20~30秒→0.1%升汞8~10分钟→无菌水冲洗3～5遍→用无菌滤纸吸干水分。

⑶.接种与初代培养：

把灭过菌蝴蝶兰蒴果放在无菌培养皿中，并用解剖刀切开果皮使种子散出，放入种子萌发培养基中培养。

60天后，种子萌发成4高、2~3片真叶的无菌苗。

⑷继代培养：

取无菌苗接种到诱导培养基中，30天后长出愈伤组织，继续培养形成原球体。

⑸.增殖培养：

将原球体切割成小块，接种到增殖培养基中，40天后，每个原球体形成13~15个原球茎芽，然后再切割培养，周而复始的进行。

⑹.生根培养：

将增殖培养中的健壮芽接种到生根培养基中，20天后芽基小根，40天后根变得健壮生根率95%以上。

⑺.驯化和移栽

①选择基质：

苔藓或树皮。

②驯化：

置于炼苗室内自然光下培养1周。

③移栽：

洗根，用500倍托布津水溶液浸泡苗根数秒后移栽到苔藓或树皮基质中。

④移栽后管理：

注意温、光、湿度（89%）