实验动物学复习题答案全Word文档格式.docx
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如果整合的部分组织细胞恰为生殖细胞,也可将外原基因遗传给子代。
克隆动物;
不经过有性生殖过程,而是通过核移植生产的遗传结构完全相同的动物,称动物克隆。
免疫缺陷动物;
免疫缺陷动物(Immunodeficientanimal):
由于先天性遗传突变或用人工的方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。
SCID鼠;
严重的联合免疫缺陷小鼠(Severecombinedimmunodeficientmice,SCID)
为严重的免疫缺陷疾病,动物临床表现为低γ球蛋白血症、低淋巴细胞血症。
●裸鼠;
裸小鼠(Nudemice):
指先天无胸腺的小鼠,简称裸小鼠。
●特点:
11号染色体上的裸基因(nu)发生突变,导致出现裸体异常状态。
●纯合裸基因的小鼠(nu/nu)临床表现为2个主要缺陷特征:
●毛发缺乏呈裸体外表;
●仅有胸腺上皮,使T淋巴细胞不能正常分化,导致细胞免疫功能低下。
●B细胞功能正常,NK细胞活力增强。
●繁育能力差,乳腺发育缺损,以雄性纯合子与雌性杂合子繁育。
●T细胞缺陷可通过移植成熟T细胞、胸腺细胞得到恢复。
渗漏现象。
少数SCID小鼠的免疫功能可出现极小程度的恢复,把这种现象称为渗漏现象。
简答题和问答题:
近交系,系统杂交动物和封闭群小鼠的遗传分类命名,特点,应用。
☞近交系:
命名:
由1~4个大写英文字母组成;
大写英文字母开头,结合数字命名。
特点:
基因纯合性,遗传稳定性,遗传同源性,表型一致性,独特性,可分变性,分布广泛性,资料可查性。
☞系统杂交动物:
1、杂交优势,克服了近交引起的近交衰退。
2、遗传与表型上的均质性;
具有相同的基因型。
3、分布广泛。
应用:
1、干细胞研究。
2、移植免疫研究。
3、细胞动力学研究。
4、单抗研究
☞封闭群动物:
⏹特点:
1、一定的杂合性:
不引入新的基因,又不使群体内基因丢失。
2、相对的稳定性:
群体在一定范围内保持相对稳定的遗传特征。
3、个体差异取决于祖代动物。
4、较强的繁殖力、抗病力。
5、群体易保存有模型价值的突变基因。
⏹命名:
用2-4个大写英文字母命名。
如:
KM,ICR,LACA
N:
NIH
由美国国立卫生研究院保存的NIH小鼠。
⏹应用:
1、类似人群体遗传的异质性组成,在药物筛选、毒性试验方面有不可替代的作用。
2、可大量供应,用于预试验、教学。
3、携带突变基因,评估群体对自发或诱发突变的遗传负荷能力。
实验动物选择的基本原则。
●一、相似性原则
●二、特殊性(易化)原则
●三、标准化原则
●四、规格化原则
●五、经济性原则
先天性免疫缺陷动物分几种,其特点和应用;
1、T淋巴细胞功能缺陷:
裸鼠。
11号染色体上的裸基因突变,出现裸体异常状态;
毛发缺乏呈裸体;
T淋巴细胞不能正常分化导致免疫功能低下;
B细胞正常;
繁殖能力差。
肿瘤学,微生物学,免疫学,寄生虫学。
2、B淋巴细胞功能缺陷动物:
性连锁性免疫缺陷小鼠(XID)。
X染色体基因缺陷导致;
血清中分泌免疫球蛋白IgG和IgM缺失,细胞免疫功能正常.与人的Bruton氏丙种球胆白缺乏症相似.;
移植正常鼠的骨髓过来可恢复免疫。
研究B细胞的发生、功能、异质性。
3、NK细胞功能缺陷动物Beige小鼠:
13号染色体bg隐性基因突变,NK细胞缺乏。
影响T细胞功能,溶酶体功能缺陷。
色素缺乏易感性增高症。
4、严重的联合免疫缺陷小鼠(SCID):
位于第16号染色体的scid单个隐性基因突变所致。
动物临床表现为低γ球蛋白血症、低淋巴细胞血症;
白细胞缺乏,对抗原无细胞免疫和抗体免疫反应;
纯合子血清中无免疫球蛋白,淋巴结、胸腺变小,缺乏体液、细胞免疫功能。
饲养于SPF环境中;
通过移植人免疫组织或免疫细胞,可使SCID小鼠具有人类部分免疫系统,称为SCID-hu小鼠。
5、虫蛙小鼠:
第6对染色体上的me基因发生突变,寿命不超过8周。
出生后2天皮肤有脓肿出现,有严重的联合免疫缺陷,对抗原无反应,NK细胞活性低;
纯合子(me/me)小鼠有自身免疫倾向。
用于判断生命早期免疫功能缺陷和某种自身免疫性疾病的模型;
C57BL/6J-me在1-2日龄表皮可见嗜中性白细胞集聚,表皮色素呈斑点状,故称虫蛙小鼠。
6、T、B和NK细胞三联免疫缺乏小鼠
7、其他免疫缺陷动物。
转基因动物与克隆动物的区别;
Ø
前者是将外源基因通过不同的方式引入受体细胞,随受体细胞经分化发育成为动物个体。
基因是人工合成的。
后者是供体细胞的细胞核与受体去核的细胞融合,移植到母体内发育成为动物个体。
基因是供体细胞核中包含的全部基因。
转基因动物的基本方法;
✦外源基因的获得和构建;
✦外源基因导入受体细胞(生殖细胞或胚胎干细胞);
✦选择适当的体外培养系统和宿主动物,使转基因的胚胎发育;
✦鉴定和筛选所得的转基因动物。
✦目的基因的获得和构建;
©
(1)基因组DNA的非特异性断裂;
(2)染色体DNA的限制性内切酶酶解;
(3)通过mRNA合成cDNA;
(4)人工体外合成DNA片断;
(5)通过载体在适当的宿主中克隆;
(6)通过PCR反应克隆目的基因
✦鉴定和筛选所得的转基因动物:
Southernblotting(DNA印迹杂交)
Nouthernblotting(RNA印迹杂交)
特异性探针杂交法
转基因的方法:
●转基因方法:
●显微注射法
●逆转录病毒感染法
●胚胎干细胞介导法
●精子载体法
显微注射技术制备转基因动物的基本过程;
卵子在受精后,在卵子核内注入DNA序列,植入小鼠体内孕育。
动物克隆技术的基本方法;
“核移植”是克隆动物的基本方法。
将身体某一部位的细胞核取出(如耳上皮或乳腺细胞的细胞核),移植到去掉核的卵细胞中,再移植到雌性动物的子宫中孕育成与核供体动物在遗传上完全相同个体。
⏹实验动物学的基本内容。
☞实验动物的标准化:
1、研究实验动物品系培育和遗传学控制;
2、研究实验动物解剖和生物学特点;
3、研究环境条件、饲料、垫料对实验动物的影响;
4、研究实验动物微生物、寄生虫控制及疫病防治。
☞动物实验的标准化
1、研究人类疾病动物模型或模型动物;
2、研究动物实验的基本条件、方法、技术。
⏹3R原则的要点。
3、Replacement:
指用低等级的动物代替高等级的动物,或不用活的脊椎动物进行实验,而采用其他方法搭到与动物实验相同的目的。
4、Reduction:
如某一研究方案中必须使用实验动物,又没有可行的替代方法时,应把使用动物的数量降低到实现科研目的所需最小量。
5、Refinement:
通过改善动物设施、饲养管理和实验条件,精选实验动物、技术路线和实验手段,优化实验操作技术等方法,尽量减少实验过程对动物机体的损伤,减轻动物遭受的痛苦和应激反应,使动物实验得出科学的结果。
⏹实验动物学的作用与意义。
☞作用:
6、提供动物模型;
7、药物安全评价和疗效评估;
8、提供生物制剂和制品;
9、医学教育教学实验。
☞意义
10、是人类的替难者;
11、缩短实验期限;
12、研究疾病全过程。
⏹我国主要的实验动物法规条例。
《实验动物管理条例》;
《药品非临床研究质量管理规定》;
《实验动物质量管理办法》《实验动物许可证管理办法(试行)》;
新的实验动物国家标准;
《关于善待实验动物的指导性意见》
⏹实验动物学发展的突破性进展。
《实验动物管理条例》,第一部。
⏹我国现行的实验动物管理制度。
《实验动物许可证管理办法(试行)》;
新的实验动物国家标准。
人类疾病动物模型
⏹基本概念:
人类疾病动物模型、诱发性动物模型
人类疾病动物模型:
指为阐明人类疾病的发生机制和建立治疗方法而制作的,具有人类疾病模拟表现的实验动物。
诱发性动物模型:
通过人为方式使实验动物受到物理、化学、生物等致病因素的作用,而发生类似某些人类疾病的动物模型,也叫实验性动物模型。
⏹人类疾病动物模型的设计原则
1、相似性
2、重复性
3、可靠性
4、适用性和可控性
5、易行性和经济性
⏹人类疾病动物模型的分类
☞按产生原因分类:
诱发性动物模型和自发性动物模型;
抗疾病型动物模型(东方田鼠),生物医学动物模型。
☞按系统范围分类:
疾病的基本病理过程动物模型和各系统疾病动物模型。
☞按模型种类分类:
整体动物模型、离体器官和组织模型、细胞株模型和数学模型。
☞按中医药体系分类:
五脏证候动物模型、气血津液证候动物模型、六淫动物模型、七情证侯动物模型等。
良好动物模型的标准:
易获得。
背景清楚,易操作,易重现,易得模型,寿命长。
•容易获得
•遗传、微生物、寄生虫和饲养条件等背景清楚
•便于实验操作
•寿命长
•重现性好
•一种疾病有两种以上动物模型,以利比较研究
⏹诱发性动物模型制作的条件
1、疾病
2、动物
3、造模方法
4、表现
各论
⏹小鼠、大鼠等常用实验动物的一般生物学特性。
☞小鼠生物学特性:
(一)外型特征
小鼠全身被毛,面部尖突,嘴脸前部两侧有19根触须,耳耸立呈半圆形,眼鲜红,尾长约与体长相等,尾部覆有横列环状角质的小表皮鳞,约200片。
(二)品系繁多。
便于提供同胎和不同品系动物。
可根据实验要求选择不同品系或同胎小鼠做实验,也可选择同一品种(或品系)、同年龄、同体重、同性别的小鼠做实验。
(三)体型小,生长快,易于饲养管理。
(四)性情温驯,胆小怕惊。
(五)对环境的适应性差。
(六)对外来刺激极为敏感。
(七)喜居于光线暗的安静环境,昼伏夜动。
(八)喜欢啃咬。
(九)染色体2n=40
☞大鼠
(一)昼伏夜出,嗅觉发达。
是夜间活动的动物,夜间活动,噪声和不适光照对其繁殖影响很大。
喜独居,喜安静环境。
嗅觉发达,味觉很差,食性大,食性广泛,以谷物为主兼食肉类,对营养缺乏非常敏感。
(二)不能呕吐
不能用于做催吐实验。
(三)性情较凶猛、聪敏。
易于调教和捉取。
如捕捉方法粗暴使其变得紧张不安,会难于捕捉甚至攻击人。
(四)喜啃咬
(五)寿命短,繁殖快。
大鼠2月龄时性成熟,性周期4天左右,妊娠期20(19-22),哺乳期21天,每胎产仔平均8只,为全年多发情性动物。
(六)对外环境适应性强,抗病力较强。
(七)染色体2n=42
(八)汗腺不发达。
尾巴是散热器官。
当周围环境温度过高时,靠流出大量唾液调节体温,但当唾液腺机能失调时,易中暑引起死亡。
(九)对外界环境刺激敏感。
对湿度极为敏感,相对湿度低于40%时,易患环尾病,还会引起哺乳母鼠食仔现象发生,一般饲养室湿度应保持在50%-65%之间。
对温度反应敏感,高温可引起中暑死亡。
对气味反应敏感,粉尘和氨浓度过大可引起肺部大面积坏死和支气管炎。
对粉尘、氨气和硫化氢等极为敏感,如果饲养室内空气卫生条件较差,在长期慢性刺激下,可引起肺部大面积的炎症。
强烈的噪音可导致内分泌紊乱,哺乳母鼠吃仔鼠或死亡。
⏹小鼠、大鼠等常用实验动物的解剖生理特点。
⏹举例说明小鼠、大鼠等常用实验动物的应用
☞小鼠:
(一)药理学和毒理学实验
1、药品筛选。
2、药物安全性评价试验。
急性、亚急性、慢性毒性实验
三致实验
半数致死量的测定(毒性实验)
药物的实验治疗
3、药效学评价试验。
4、生物制品的生产和检定。
(二)免疫学的研究
1、制备单克隆抗体——BALB/c小鼠
2、动物模型——免疫缺陷小鼠
3、免疫功能
(三)病毒、细菌和寄生虫学研究
提供传染性疾病的小鼠模型。
(四)肿瘤学的研究
1、自发性肿瘤
2、诱发性肿瘤——抗癌药物的筛选,肿瘤发生的病因、发病机制、转移机制和实验性的治疗等。
3、人癌细胞移植——建立人类的肿瘤模型
4、肿瘤遗传学研究——原病毒基因组学说和癌基因假说。
(五)遗传病、遗传学的研究
小鼠有许多个突变品系,不但可以作为疾病的动物模型,还可作为遗传学和基因治疗的动物模型。
(重组近交系和同源近交系)
(六)老年病学的研究
小鼠晚年时老年病多,肿瘤发病率高,是研究老年病的良好材料。
(七)其它疾病研究
1、神经系统疾病
2、呼吸系统疾病
3、消化系统疾病
4、计划生育
(一)是生物医学中常用的动物
大鼠在实验动物中的用量仅次于小鼠,占第二位。
(二)内分泌研究
垂体-肾上腺系统的研究
肾上腺和卵巢等内分泌腺切除手术。
(三)肝胆研究:
无胆囊,胆管相对较粗大,可采用胆总管插管收集胆汁进行消化功能的研究。
(四)营养和代谢性疾病的研究
(五)药物学和毒理学的研究:
药物安全性评价试验:
药物亚急性毒性试验、慢性毒性试验、致畸试验、药物毒性作用机制研究、某些药物不良反应研究等等。
大鼠血压和血管阻力对药物的反应敏感,适合作心血管药物的筛选。
常用的有高血压大鼠。
但对许多药物易产生耐药性。
如强心甙的作用较猫敏感性低671倍。
(六)肿瘤学的研究:
可用于自发性和诱发性肿瘤模型研究。
大鼠对化学致癌物敏感,可诱发形成肺癌、肝癌、食管癌。
如肝癌的形成可通过化学药物、真菌毒素、乙型或丙型肝炎病毒感染诱发。
(七)呼吸系统疾病的研究:
用于慢性支气管炎、肺病的研究。
(八)行为学研究
迷宫试验
奖励与惩罚试验
成瘾性药物的行为学研究
高级神经活动研究
问答题:
1.实验动物标准化的意义
实验动物标准化包括实验动物生产条件、动物质量(微生物质量及遗传学)和动物实验条件的标准化。
并对应三种合格证。
生物医学实验研究的四个基本条件:
Animal,Equipment,Information,Reagent,简称AEIR四要素。
实验动物质量往往成为制约性要素,影响实验的质量和水平。
使用标准的实验动物并在标准的环境条件下进行实验是保证医学生物学研究质量的重要条件。
2.按微生物控制程度可将实验动物分为哪几级?
他们各自特点?
答:
可将实验动物分为四类:
无菌动物(Germfreeanimal,GF)指用现有的实验手段检测,动物的体表体内不携带任何微生物和寄生虫的实验动物。
1。
在动物体内外任何部位均检不出任何细菌、真菌、原虫、内外寄生虫。
2无菌动物必须是生来就无菌的动物。
3消化系统:
(1)盲肠肥大;
(2)肠道肌层薄,肠绒毛变细变短;
(3)肝脏变小;
4循环系统:
(1)心脏变小;
(2)白细胞数变少,且数量波动范围小;
5免疫系统:
(1)胸腺,淋巴组织,网状内皮系统发育不良。
(2)脾脏小,无二级滤泡;
6免疫功能:
(1)血清中IgG、IgM水平低,几乎不存在丙种球蛋白和特异性抗体。
(2)免疫应答速度慢,过敏反应、对异体移植物的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱。
7生长率:
(1)不同种属不同;
(2)无菌鸟类生长率高于同种普通鸟;
(3)无菌大、小鼠与普通鼠差不多;
(4)无菌豚鼠和无菌兔比普通的慢;
8生殖:
(1)无菌大、小鼠略高于普通大小鼠;
(2)豚鼠和兔繁殖能力比普通级低。
9代谢和营养:
无菌动物血中含氮量少,肠管对水的吸收率低,代谢周期比普通动物长;
体内不能合成维生素B和K,易产生这两种维生素的缺乏症。
10抗辐射能力:
无菌动物抗辐射能力强,抗实验性烫伤和抗休克死亡能力也强于普通动物。
11寿命:
无菌动物的寿命普遍长于普通动物。
悉生动物(Gnotobioticanimal,GN)又称已知菌动物,指动物体内带有明确的微生物种类的动物。
1微生物特点:
体内携带有已知微生物
2来源:
无菌动物植入微生物
3饲养管理:
必须饲养在温湿度恒定的空气净化的隔离系统中,实行严格的微生物控制。
4GN动物是动物与微生物的共生复合体。
肠道存在能合成维生素和氨基酸的细菌,不会出现维生素缺乏症。
生活力、抵抗力明显增强,易于饲养。
无特定病原体动物(Specificpathogenfreeanimal,简称SPF动物)——指不携带特定病原体(细菌、病毒、寄生虫),但带有未知的微生物群的动物。
特点:
SPF动物除一、二级动物应排除的病原体外,不携带主要潜在感染或条件致病和对研究实验干扰大的病原。
小鼠病原菌应排除16种,病毒11种;
大鼠病原菌应排除16种,病毒7种。
2、来源:
SPF动物来源于无菌动物或剖腹产动物。
3.饲养管理:
SPF动物必须饲养在温湿度恒定的空气净化的屏障系统中,实行严格的微生物控制。
4。
与悉生动物比较
相同点:
1)体内无病原微生物,实验结果准确可靠。
2)带有非致病的其他微生物。
不同点:
1)悉生动物带有的微生物是已知的,SPF动物所带微生物情况不清楚。
2)悉生动物饲养在隔离环境中,SPF动物饲养在屏障环境内。
清洁动物(Cleananimal,CL)——微生物控制级别介于SPF动物和普通动物之间的动物
清洁级动物比普通级动物要求排除的微生物和寄生虫多,但比SPF动物少。
清洁级动物除肉眼观察无病外,尸体解剖时,主要脏器、组织无论是肉眼观看还是病理组织切片均应无病变。
血清病毒抗体检测可检测出一定滴度的抗体。
小鼠病原菌应排除10种,病毒5种;
大鼠病原菌应排除10种,病毒2种。
清洁动物来源于SPF动物、无菌动物、悉生动物或剖腹产动物。
3、饲养管理:
清洁级动物饲养于温湿度恒定的空气净化的屏障系统中。
其所用的饲料、垫料、饮用水、笼器具等都经过消毒灭菌处理。
工作人员需换灭菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物室进行操作。
普通动物(Conventionalanimal,CV)——不携带人兽共患病和动物烈性传染病的病原体。
1、微生物学特点:
要求不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。
是微生物控制要求最低。
2、饲养管理:
饲养于开放系统。
但仍然对温度,湿度,饲料,垫料,饮水,卫生等有一定控制。
3、生理学特点:
外观健康,饮食排泄正常,无异常分泌物,无临床症状,脏器无眼观病灶。
3.什么叫SPF级动物?
写出英文全称及其在医学中的作用。
无特定病原体动物(Specificpathogenfreeanimal,简称SPF动物)——指不携带特定病原体(细菌、病毒、寄生虫),但带有未知的微生物群的动物。
目前国际上公认SPF动物适用于所有科研实验,是国际标准级别的实验动物。
1)血清、疫苗的制造:
用无病的动物组织、脏器来生产各种疫苗和细菌病毒性诊断血清。
2)生物学鉴定;
用于鉴定破伤风毒素、结核菌素、狂犬病疫苗等。
3)实验外科学的短期或长期研究:
例如一些放射实验、烧伤实验等。
4)其他研究工作:
如药理学、毒理学、肿瘤免疫学、传染病学等。
4.微生物寄生虫潜在感染对实验研究的影响
寄生虫感染对实验的干扰
1掠夺宿主的营养
2体表寄生虫对宿主的干扰
3对宿主产生机械损伤
4产生毒性作用
5比较洁净动物和普通动物的特点
1洁净动物通常是指来源于剖腹产、实行严格的微生物控制、饲养于空气净化系统设施内的动物,包括清洁动物、SPF动物、悉生动物和无菌动物。
洁净动物与普通动物相比,在很多方面均存在一定差异。
2洁净动物与普通动物相比,在血液学、血液生化指标及主要脏器系数方面均产生一定变化。
如清洁级大鼠与普通大鼠相比,白细胞较少,其中中性粒细胞少,淋巴细胞相对增加;
血清碱性磷酸酶、胆红素、胆固醇值较高;
尿素氮、肌酐值比较低;
空肠淋巴结、脾脏较轻;
肺、肾组织形态比普通大鼠健康。
6实验动物环境监控与动物实验结果的关系
实验动物的性状实际上是遗传和环境因素相互作用的结果。
基因型——表现型——演出型。
周围环境对于动物的表现型和演出型有一定的影响,动物实验实际上是控制实验动物的演出型,并对演出型动物作严格策划的处理;
只有演出型稳定,实验结果才有良好的可重复性和高度的可信性。
7实验动物环境因素的分类以及影响实验动物的各种环境因素
分类:
1气候因素:
温度、湿度、气流、风速等
2理化因素:
光照、噪声、粉尘、臭气(NH3、H2S等)、杀虫剂、消毒剂、有害气体等
3营养因素:
饲料、饮水、笼具、垫料等
4生物和栖居因素:
各种病原体(细菌、病毒、寄生虫等)、落菌数、社会因素和饲养密度等
8营养因素对动物实验结果的影响
非营养研究时的影响
1、对动物采食量的影响
2、对动物生长发育的影响
3、对动物生理生化指标的影响
4、对动物免疫功能的影响
5、对动物疾病的发生、发展和转归的影响
6、对动物麻醉反应的影响
7、饲料中其它因素的影响
营养研究时的影响
●1动物早期的营养状况对营养研究的影响
●2动物实验时的营养对所研
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