法医物证考试题库及答案Word下载.docx
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五、免疫血清学
六、生物化学
七、分子生物学
八、遗传学等方法
第四节法医物证检材的提取、保存
一、一些基本原则
(一)基本规则
1.检材均应直接提取,易携带物品整体提取;
不易携带物品提取附着检材的部位。
2.根据检材附着的不同载体,应采取擦拭、剪切、刮削、吸附、浸泡、凿锯、挖取等方法提取。
3.在提取检材前后应进行照相或录像。
4.不同部位的检材应分别提取,单独包装。
5.提取用具要洁净。
6.使用适当的封装材料,做好检材提取记录。
7.提取检材时,注意要提取对照样品。
8.提取的各种新鲜液体物证应尽快检验,剩余部分应制成纱布斑迹干燥保存;
人体组织应冷冻保存。
9.提取的各种体液性的检材应在阴凉通风、可防止污染处自然干燥成纱布斑迹,禁止暴晒或加热烘干。
10.提取的检材在包装和携带运送过程中应避免互相摩擦、冲撞以及失落,易碎检材防止挤压和震动,易散失检材严密包装,易腐败检材低温保存送检。
(二)防止污染原则
1.提取检材时必须使用一次性用具,每提取完一份检材应及时更换,禁止重复使用和赤手触摸检材。
2.提取检材时必须使用无菌的提取试剂和转移用载体。
3.提取检材时不得说话、打喷嚏等,以免造成污染。
4.提取检材时一次只能提取一件检材。
5.禁止多件检材混合包装,禁止重复使用封装材料。
(三)个人防护原则
1.所有的检材应都视同为可能的传染源,提取检材时应穿戴好防护用品。
2.检材提取人员手上的任何切口和擦伤都要用防水织物包扎。
3.在提取开始和结束后对手部进行消毒。
二、检材的提取和保存
1.法医物证检材包括血液(痕)、精液(斑)、唾液(斑)、毛发、组织、骨骼等各种含有人体细胞的生物检材。
由于载体的不同,现场提取时需注意去发现和提取各种形式的生物物证检材。
2.提取检材前注意记录检材的大小、形态等特征提取的检材必须分别包装,在包装袋上注明检材名称、来源、数量、采集日期等,并有采集人及采集见证人的签名。
3.对于活体检材,一般用医用消毒纱布或中速滤纸采集指血或耳垂血(2cm2以上),自然晾干。
可以用口腔拭子提取口腔粘膜细胞,提取前须清水漱口,检材自然晾干;
或取毛发3根-5根。
以上检材均用纸袋包装后常温保存。
4.对于血痕,类似衣裤、地毯、床单上的血痕,可以剪下一部分纸袋包装后常温保存;
类似衣柜、墙壁、地面、刀、斧上的血迹可以刮取,或用生理盐水浸湿的纱线提取,自然晾干后纸袋包装常温保存。
5.涉嫌性侵害的,应用棉签分别提取阴道外端、中部和后穹窿部,必要时还应注意会阴、下腹、口腔、肛门等部位有无精液(斑),以及现场怀疑有精斑的其他检材,如床单、被褥、卫生纸、避孕套、内裤、衣物等。
所有检材应该分别提取、标明记号、自然晾干、纸袋包装后常温保存。
6.现场的可疑毛发用镊子提取,用纸折叠后置纸袋内常温保存。
7.含有唾液斑的检材如烟头、果核、香口胶等用镊子提取,纸袋包装后常温保存。
8.人流刮宫组织,取5g以上确认为绒毛的组织;
引产胎儿,取5g以上的组织;
羊水,取2ml以上的液体。
提取的检材洁净容器包装、冰冻保存、冷藏送检。
9.新鲜尸体,可用医用消毒纱布或中速滤纸提取血液(3cm2以上),自然晾干,纸袋包装后常温保存。
新鲜尸体也可取肌肉组织(50g以上);
腐败尸体,尽量提取相对新鲜的组织,包括指甲(2枚以上)、肋软骨(5cm以上)或者其它软骨(5g以上)、深部肌肉组织(5g以上)、毛发(10根以上);
白骨化的尸体尽可能提取指甲、长骨、牙齿、毛发。
以上检材洁净容器包装、冰冻保存、冷藏送检。
10.根据案件情况,注意提取对照样本。
第二部分法医生物物证检验的遗传学基础
了解基本概念,遗传规律。
第一节遗传的物质基础
一、人类个体细胞分类:
可分二类
(一)体细胞
体细胞又称二倍体细胞,含有23对46条染色体,即含有23对46条DNA分子。
人二倍体细胞中23对染色体是由精子的23个染色体和卵子的23个染色体形成合子后配对而成。
其中22对为常染色体,男、女性共有。
一对为性染色体,决定性别。
男性为xy,女性为xx。
人的二倍体细胞经有丝分裂产生下一代同类的细胞。
(二)性细胞
性细胞又称单倍体细胞,含23个染色体。
即含有23个DNA分子。
经减数分裂形成下一代同类细胞。
二、真核细胞中的二套遗传物质及遗传规律
DNA存在于人类细胞核及线粒体中。
形成二套遗传物质,分别称为染色体DNA(核内DNA)和线粒体DNA(核外DNA),二者的遗传规律不同。
它们没有组织特异性,但有个体和种属特异性。
(一)染色体DNA
1概念,细胞核中含染色体,染色体由DNA和蛋白质组成,染色体中的DNA称为染色体DNA。
人类染色体中的DNA是双链线性多核苷酸,每个染色体中含有一个双链DNA分子。
2遗传特点:
遗传方式符合孟德尔分离律和自由组合率。
(二)线粒体DNA
1概念:
真核细胞核外部分组成分之一细胞器又称线粒体,含有DNA和核糖体。
其中含有的DNA称线粒体DNA(mtDNA)。
人线粒体DNA为双链环状。
(1)无有丝分裂和减数分裂的周期变化;
(2)遗传方式不按孟德尔分离律和自由组合律;
(3)子代只表现母方的特征;
说明遗传特征是通过卵细胞传递的。
三、遗传方式
遗传信息传递的特点称为遗传方式。
人类性状遗传方式可分二大类,即单基因遗传和多基因遗传。
单基因遗传基本按孟德尔遗传规律进行,它又分为常染色体遗传和性染色体遗传(伴性遗传)。
多基因遗传的性状受2对或2对以上的基因所控制。
四、一些基本概念
(一)基因:
是具有特定的核苷酸顺序的核酸片段,是储存特定遗传信息的功能单位。
(二)等位基因:
指在一对同源染色体同一位置的基因。
(三)显性:
在子一代表现出来的性状。
隐性:
在子一代中未表现出来的性状。
(四)基因型:
一对等位基因组成基因型。
基因型是指一个或几个基因座位上等位基因的加合,是生物体全部基因的总称。
(五)纯合子,杂合子:
一对等位基因相同时,称为该基因的纯合子,不同时则称为基因的杂合子。
(六)遗传:
一般指亲代的性状又在下代表现的现象。
但在遗传学上,指遗传物质从上代传给后代的现象。
(七)变异性:
生物体的一种属性。
是生物体因环境的改变而同化了的新的生活条件之后,能改变自身遗传性的一种特性。
(八)基因突变:
指染色体上一个座位的遗传物质发生变化,也称点突变。
基因突变分二种:
(八)基因组:
指某物种的总DNA。
人有二套基因组、即染色体基因组和线粒体基因组。
第二节遗传物质——DNA
一、DNA结构
(一)核酸
生物界的核酸可分二大类,即脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。
二者均由三种基本成分即含氮的有机碱,戊糖和磷酸组成。
核酸也称多核苷酸。
核苷酸:
由一个含氮的碱基,一个五碳糖环和一个磷酸组成。
(二)DNA的碱基组成
1组成:
由4种主要的碱基:
腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)。
2具有的特征:
(1)所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的克分子含量相等,即A=T;
鸟嘌呤与胞嘧啶的克分子含量相等,即G=C。
因此,嘌呤的总数等于嘧啶的总数即AG=CT。
(2)DNA碱基组成具有种的特异性,即不同种属生物的DNA具有自己独特的碱基组成。
(3)DNA的碱基组成没有组织、器官特异性,即同一生物体的各种不同组织,不同器官的DNA具有相同的碱基组成。
(4)年龄、营养状态、环境条件不影响DNA的碱基组成。
(三)DNA的一级结构
DNA的一级结构是由数量极其庞大的四种脱氧核糖核苷酸,通过3’,5’一磷酸二酯键彼此连接起来的直线形或环状分子。
(四)DNA的二级结构
DNA分子由两条反向平行的多脱氧核苷酸链组成,两条链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起,碱基必须是A与T配对,G与C配对。
这种碱基之间互相匹配的情形称为碱基互补。
这种结构也称为DNA双螺旋结构。
(五)DNA的三级结构
在双螺旋结构的基础上的进一步扭曲,DNA还可以形成三级结构,双链环型DNA的超螺旋型和开环型。
超螺旋DNA有更为紧密的结构,更高的浮力密度,更高的熔点。
二、DNA复制。
二条平行链之间碱基氢键断裂,双螺旋变成二条单链,每一条链作模板,与互补链结合形成新链。
三、DNA作为信息载体的功能
1复制,
DNA复制使用母链模板,严格遵从碱基配对规律,子链就是母链的准确抄本。
即把遗传信息传给子代DNA,以保证自身的准确。
2转录,
把DNA的碱基序列抄录成RNA的碱基序列,RNA把遗传信息从核内输至核外,作为蛋白质合成的直接模板。
即将传递信息给mRNA而翻译成蛋白质。
DNA通过复制把遗传信息传递给子代DNA,通过转录来表现亲代DNA信息所携带的性状,这就是基因表达,通过修复保持DNA遗传信息的稳定性,这三方面表示了基因的保守性。
第三节遗传的基本规律
基因世代间传递的方式,概括的可分为单基因遗传和多基因遗传二大类。
基因的分配与组合都遵循着遗传的基本规律。
这些规律包括孟德尔的分离律、自由组合律和摩尔根的联锁与交换定律。
一、分离律
体细胞通过碱数分裂形成配子时,成对的基因随着染色体彼此分离,各自进入一个配子中,每个配子只含亲代一对基因中的一个,即不同性状独立遗传。
该定律阐述的是等位基因间的遗传规律。
二、自由组合律
不同位点上的基因在形成配子时自由组合形成子代的基因型。
决定着子代的遗传性状,子代半数基因来自父亲,半数基因来自母亲。
该定律主要阐述不同染色体之间基因的自由组合规律。
三、连锁和交换定律
同一条染色体上的遗传因子可连在一起一同遗传,二个同源染色体上遗传因子可以交换。
第四节DNA翻译产物
一、蛋白质
蛋白质是由无数个氨基酸亚单位——称为氨基酸残基聚合而成。
以不同的氨基酸序列先形成特异的肽链,然后再以非共价键结合形成具有高级结构的蛋白质。
蛋白质是表现细胞功能的重要生物大分子。
各种酶、肽激素、抗原和抗体、受体、各种调节因子,各种结构蛋白都是蛋白质。
(一)蛋白质的组成
氨基酸(aminoacid)是蛋白质的基本组成单位。
组成蛋白质的基本氨基酸有20种。
(二)蛋白质的结构
1蛋白质的一级结构:
是指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。
不同的氨基酸组成和不同的排列顺序,形成不同的蛋白质。
蛋白质分子中氨基酸连接的基本方式是肽键。
2蛋白质的二级结构:
是指多肽链主链骨架中的若干肽段各自沿着某个轴盘旋或折迭,形成氨基酸残基的相对空间位置并以氢键维持,从而形成有规则的构象。
如α—螺旋、β—折迭等。
3蛋白质的三级结构:
是指一条多肽链在二级结构的基础上,进行范围广泛的盘旋和折叠,从而产生特定的不规则的球状构象。
4蛋白质的四级结构:
是指各个亚基(具有一、二、三级结构的每条肽链)在寡聚蛋白中的空间排布及亚基间的相互作用。
(三)蛋白质的酸碱性质
蛋白质是两性电解质,能和酸或碱发生作用。
各种蛋白质都有自己特定的等电点。
在小于等电点的pH溶液中,蛋白质分子作为阳离子向阴极移动。
相反地,大于等电点的pH溶液中,蛋白质分子作为阴离子向阳极移动。
(四)蛋白质变性作用
蛋白质受到某些物理或化学因素作用时,引起生物活性的丧失、溶解度的降低以及其他的物理化学常数的改变,这种变化称为蛋白质的变性作用。
变性的实质是由于维持高级结构的次级键遭到破坏而造成的天然构象的解体。
二、酶
酶是生物体内特有的催化剂。
(一)酶的化学本质
除了极少数核酸代谢反应以核糖核酸作为催化剂以外,生物体内绝大多数酶的本质为蛋白质。
(二)酶蛋白的结构与功能(催化活性)
酶蛋白的结构
蛋白质酶主要由20种L—氨基酸组成,具有一、二、三或四级结构
三、催化性能与结构关系
酶的催化功能依赖于完整的蛋白构象。
改变或破坏酶蛋白构象,酶的催化功能也随之为减弱,甚至完全失去活性。
(一)酶蛋白的一级结构和催化功能
1结构:
是指组成酶蛋白分子的氨基酸序列。
2催化活性:
一级结构是酶催化的基础,结构中的主要化学键——肽键,二硫键破坏酶活性会减弱或丧失。
(二)酶蛋白的二、三级结构与催化功能
是由特定的一级结构派生的。
酶的二、三级结构是所有酶都必备的空间结构。
2催化功能:
二、三级结构是维持酶活性中心的必需构型。
当在底物诱导下发生某些改变,使催化基团形成正确配位,使酶的催化功能更好的发挥出来。
(三)酶蛋白的四级结构和催化代谢调节功能
与催化作用有关具有四级结构的酶是由数个相同亚基组成,每个亚基都有一个活性中心。
四级结构完整时,酶的催化功能充分发挥。
3代谢调节功能:
与代谢调节有关的四级结构酶,其组成的亚基中有活性中心的,可与底物结合发挥催化功能。
亚基中有调节中心,分激活和抑制中心,可与激活剂和抑制剂结合调解酶反应速度和调控代谢作用。
酶是球状蛋白质,不同的酶各有其特有的空间构象。
同功酶的多态性在法医的个人识别和亲子鉴定中有重要意义。
第三部分红细胞血型血清学基本原理
掌握抗原、抗体、抗原引起的免疫应答的有关知识及影响因素。
血液的遗传学差异统称为血型(bloodgroups)。
当一类血型抗原独立于其他血型系统时,则这一类血型抗原同属于某一个特殊的血型系统。
红细胞的遗传学差异称为红细胞血型。
血型物质系红细胞表面抗原。
同一种属中的某些个体,具有某种血型抗原,而其他个体没有这种抗原,所以同一种属的不同个体红细胞血型可同、也可不同。
血型抗体存在于抗血清中,具有特异性,能与相对应的血型抗原发生特异性抗原抗体反应,决定血型,这种方法称为血型测定。
第一节红细胞血型抗原
一、一些概念
(一)抗原;
(二)半抗原;
(三)免疫原;
(四)抗原性。
二、红细胞血型抗原的化学性质
(一)细胞抗原的组成;
(二)抗原决定簇的部位;
(三)分泌型与非分泌型个体在抗原组成的区别。
分泌型个体,部分A与B抗原是糖蛋白;
非分泌型个体,A与B抗原(不是H抗原)仅存在于糖脂部分。
第二节红细胞血型抗体
红细胞抗体分天然抗体和免疫抗体二类。
一、天然抗体(规则抗体)
(一)天然抗体的概念
未曾与有关抗原接触过血清中的抗体,称为天然抗体。
众所周知的天然抗体是抗A与抗B抗体。
这类抗体有规律地存在于人类血清中,也称为规则抗体。
(二)有天然抗体的血型系统
除ABO血型系统外,常用的还有MNSs、Lewis、Kell、P.Rh系统也有天然抗体。
(三)天然抗体包括免疫球蛋白的种类
天然抗体全部或部分是IgM。
抗A与抗B抗体可以部分是IgM,也可以全部是IgM,但抗A、抗B抗体也常是IgG。
二、免疫抗体(不规则抗体)
概念:
抗原刺激机体所产生的抗体,称免疫抗体。
除上述天然抗体以外,绝大多数红细胞抗体都是免疫抗体。
免疫抗体不经常存在于血清中,故称不规则抗体。
第三节ABO血型系统
ABO血型系统是最早发现,最重要的血型系统。
人类学与遗传学研究、器官移植,以及法医学实践中的个人识别与亲子鉴定均需应用这个系统。
一、ABO血型4种普通血型的划分及存在相应的抗体
1红细胞ABO血型系统的分型。
ABO血型系统分四种型:
即O型、A型、B型与AB型。
2四种血型个体血清中存在的相应抗体:
血清中有天然抗体,B型血清中有抗A抗体;
A型血清中有抗B抗体;
O型血清中有抗A、抗B及抗A,B等抗体;
AB型血清中没有抗体ABO血型抗体恒定地存在于正常人的血清中,可以预测其存在,故称为规则抗体。
3正常的A、B、AB、O型的检测。
利用抗A与抗B血清,以及A与B型红细胞,可以测定未知血液的ABO血型。
二、ABO血型抗体
正常情况下,凡红细胞没有某一种或某两种ABO抗原,又无明显的外来A或B抗原的刺激,其血清中含有与红细胞上缺失抗原相对应的天然抗A、抗A1或抗B抗体。
(一)抗A、抗B抗体的生成
新生儿血中的IgG抗A与抗B抗体多来自母体,故一般不对新生儿进行血型测定。
3~6个月以内的婴儿,多数尚未产生抗A与抗B抗体;
6个月以后,抗体逐渐产生;
5~10岁抗体效价达最高峰;
随着年龄的增长,抗体效价逐渐降低,老年人抗体水平明显地低于年轻的成年人。
(二)抗A、抗B抗体的特性
1、抗A与抗B抗体最显著的血清效应是凝集反应,在适当的条件下也可以发生溶血反应;
2、ABO血型测定都在室温中(22~25℃)进行,偶尔在4℃下进行;
3、抗A和抗B抗体可以是天然的,也可以是免疫抗体;
4、B型与A型血液中的天然抗A与抗B抗体大多数是IgM;
5、天然IgM与IgG抗A与抗B抗体均能在盐水介质中使红细胞发生凝集反应,在室温中具有抗体活性。
(三)抗H抗体
由于O、A、B或AB型红细胞结构上含有H成分,故其血清中很少有抗H抗体。
三、ABO血型的遗传
(一)各种不同表型的双亲所生子女的血型。
(二)ABO血型按孟德尔规律遗传
ABO血型系统按孟德尔定律遗传,人类染色体上的一个座位为A、B、O三个等位基因之一所占,每一个体有一对染色体,一条来自父亲,另一条来自母亲,红细胞ABO型的表达由基因决定。
ABO血型有4种普通型,由复等位基因A、B及O所控制,有6种基因型,决定4种表现型。
四种表现型、六种基因型,一个基因座位,三个等位基因。
第四节DNA的主要特征
1.DNA是遗传物质,控制遗传特征;
2.除同卵双生子外,每个人的DNA结构互不相同;
3.一个个体的DNA一般保持终生不变(特殊情况下,如癌变、骨髓移植等会造成DNA的改变);
4.一个个体的每个细胞的DNA是相同的;
5.DNA存在于所有的有核细胞内;
6.一个个体的核DNA一半来自父亲,一半来自母亲(孟德尔遗传规律);
7.DNA由两条链状分子组成;
8.DNA链由四种碱基组成,并且以A与T、G与C分别配对;
9.DNA分子中四种碱基的排列顺序构成遗传密码;
10.每个人都有独特的DNA图谱。
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