《》项目总结报告江苏省海洋资源开发研究院Word下载.docx

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项目组根据项目计划任务书的研究人员组成情况进行了分工，明确任务，责任到人。

1.1课题组负责人曹梅负责整体实验方案的制定、实施监督、协调参加实验的各方和全体成员，检查工作进度，出现问题及时分析解决，对实验结果进行汇总等。

秦蕾博士负责水质监测和亲体越冬；

吴建新副教授负责亲体越冬培育。

1.2腾龙水产陈治臣总经理提供31亩土池，提供必要的人力和物力资源，保证项目的顺利实施；

腾龙水产苗种场姚继凯场长负责小棚搭建和虎斑乌贼苗种培育；

腾龙水产陈守军副总负责土池成体养殖和小棚回收；

潘翰迪师傅负责日常水电杂物，保证项目的顺利运作。

不定期召开课题组成员会议，及时总结实验过程中出现的问题，分析原因，针对性采取有效措施，确保实验的顺利进行。

定期向主管部门汇报项目进展情况，总结前一阶段工作，制定下一步工作计划，使整个实验工作都能够按照计划任务书的要求逐步推进，确保按时保质保量完成。

2实施计划的制定与落实

本项目的研究期限为2年，2016年3月开始，2018年6月结束，全面完成了预期的各项经济、技术指标，具体实验如下：

2.1前期准备工作

除了收集相关的文献资料以外，主要是实验场所的选定和受精卵的收集，既要保证实验的需要，又因为资金有限而不能造成浪费，所以，对实验用品的采购进行了合理控制。

2.2苗种繁育和养殖实验

2016年4月19日和2017年5月1日分别从广东湛江空运2万粒虎斑乌贼受精卵，水泥池孵化，水泥池人工培育，池塘养殖，室内育肥和越冬。

虎斑乌贼受精卵

孵化出的虎斑乌贼幼乌

虎斑乌贼土池放苗

虎斑乌贼土池围网养殖

2.3小棚改造

2017年3月2日，池塘晒干，对31亩长方形土池改造。

土池开挖环沟

土池高潮进水

土池虎斑乌贼收集

小棚顶部设施

小棚智能控制设施

小棚室内辅助设施

土池遮阳实验

长方形土池

养殖小棚

养殖小棚和土池

2.4小棚实验

2017年5月6日，将空运来的受精卵4400粒放到塑料筐中，在小棚内充氧孵化；

幼乌暂养期间，通过水泵和80目饵料收集网将大池中的饵料源源不断的抽入小棚。

当外界水温升高到20℃时，提起闸门，撤掉拦网和地笼，使两池相通，土池和小棚连通养殖，利用大池饵料优势进行土池养殖。

秋季水温降低到20℃时，通过闸门设置的拦网及其连接的地笼使大池中的乌贼成体进入小棚内育肥和越冬，同时为翌年苗种繁育提供所需亲体。

养殖小棚内的幼乌

幼乌的收集和测量

幼乌的收集

采用室内和室外实验，生产性实验和综合实验相结合的方式，实现了企业和科研院所的产学研联合。

3企业研发人员的培养培训

3.1培养崔春辉、沈晔和马鸿梅3名硕士研究生，他们将成为今后一段时间内该领域的年轻后备骨干力量，具体研究内容如下。

（1）虎斑乌贼室内人工育苗技术

2016年4月19日从广东湛江空运2万粒虎斑乌贼受精卵，经过10天的室内水泥池孵化，孵出幼乌4020只；

幼乌经30天室内水泥池人工培育，存活2830只，胴长3cm左右，育苗成活率实现70.4%。

2017年5月1日从广东空运2万粒虎斑乌贼受精卵，孵出幼乌5200只；

幼乌经22天室内水泥池人工培育，存活3960只，胴长3.2cm左右，育苗成活率实现76.2%。

（2）虎斑乌贼幼体培育技术

刚孵出的幼乌1-2天后便可寻食，白天多底栖池底，晚上游动频繁，理想的开口饵料是活着的糠虾。

随着幼乌的生长发育，糠虾的投喂量要适当增加。

半个月后，幼乌对饵料的选择性有所降低，此时可适量添加挠足类和大卤虫作为补充。

利用本地饵料资源，结合对虾饵料，对孵化的幼乌进行室内培育，并进行虎斑乌贼幼体饵料组合优化配置，建立与幼体培育相匹配的饵料系列，提高幼体成活率，为营养生态学优化和养殖模式探讨提供足够量的苗种。

培育饵料前10天首先选择鲜活枝角类和糠虾类，投饵率为4-6%；

10-25天选择轮虫和卤虫，投饵率为6-8%，25天后过度到冰鲜饵料，投饵率为7-10%，然后移入土池养殖。

（3）虎斑乌贼虾池养殖技术

2016年6月2日，水温20-22℃，2500只投入池塘，10月16日，秋季水温降到15℃时，收获平均体重253克乌贼1608只，成活率64.3%。

2017年6月4日，3500只投入池塘，10月21日，秋季水温降到15℃时收获平均体重275克乌贼2222只，成活率63.5％。

虎斑乌贼幼体放养前后池塘投喂对虾配合饲料。

养殖过程中利用虎斑乌贼与脊尾白虾、花蛤的生态互补性进行混养，增加养殖池塘生态结构的空间成层性，提高养殖池塘环境的稳定性，解决养殖过程中虎斑乌贼的饵料和水质问题，从而实现高产、高效、环保的目标。

虎斑乌贼喜食活物，对死去的饵料食欲大减。

在养殖的初期，为了便于幼乌摄取饵料，可将较大的鱼虾切成条状，直径约为幼乌体长的1/4。

随着乌贼的生长，小鱼小虾等新鲜饵料可直接投喂，毋须加工，但一定要保证饵料不变质。

虎斑乌贼夜间比较活跃，因而投饵一般安排在晚上。

养殖前期（体长5-8厘米）日投饵3次，投喂量为体重的4-5%；

养殖中期（体长9-15厘米）日投饵2-3次，日投喂量为体重的3-4%；

养殖后期（体长16厘米以上）日投饵2次，日投喂量为体重的2-3%。

由于虎斑乌贼游动速度快，有时会擦到池壁受伤。

可定期在饵料中添加或泼洒免疫增强剂进行预防，提高成活率。

早晚巡塘，高温季节发现乌贼浮头立刻打开增氧机进行增氧。

要认真观察乌贼的活动情况，发现病死乌贼或摄食量明显下降时应及时采取应对措施，对死乌贼要做无害化处理；

经常查看网箱是否有破损情况，并及时采取补救措施。

（4）虎斑乌贼室内暂养技术

春季池塘晒干后，用挖掘机将土池深挖环沟，将空运来的受精卵放到塑料筐中，在室内充氧孵化，适时室外土池养殖。

当外界水温降到20℃时，将乌贼收集到室内进行育肥和越冬。

虎斑乌贼缓冲池和暂养池为连云区大板桥某水产育苗场秋冬季闲置的虾蟹育苗车间的水泥池，有2个长方形0.6米深的缓冲池和20个长方形3米深的暂养池。

先用分级捕捞地笼将贼虾混养池中的对虾尽量捕尽，大约持续1周时间，然后才用普通地笼捕获乌贼，大约持续1周；

每次收起地笼时，将地笼中的乌贼充氧带水运输到1个长方形0.6米深的缓冲池适应2.5小时，然后带水转到1个长方形3米深的暂养池，同时将缓冲池中带墨汁的水排干，然后加上新水，进入下1个循环；

暂养池上盖上一块遮光布，面积为池口的2/3，加注沙滤海水，水深维持在2-2.5米；

金乌贼第1周投喂小蟹子，第2周转为脊尾白虾和沙蚕。

（5）盐度胁迫对虎斑乌贼幼体存活、生长和免疫的影响

实验设置17、20、23、26、29和32六个盐度梯度，分别处于同等规格的6个培养池中，每个培养池中再分置三个同等规制的塑料筐，每个塑料筐周围用绳子系着几块泡沫使其悬浮于水中。

三个筐算作3个重复，每个重复用40×

30×

20cm的塑料筐分养，每个筐子里放40只乌贼幼体。

控制实验室实验用水水温20-25℃，pH值7.50-8.00，连续充气，保证乌贼幼体不会因此死亡。

试验周期为30d。

在30d实验周期之后，我们从每个重复的筐子中取存活的乌贼幼个体10尾，去除墨囊，在低温操作下，加入3mL的生理盐水匀浆，再用冷冻离心机设置在低温4℃条件、转速达到3000r/min的情况下离心20min，取上清液作酶活测定。

（6）低盐胁迫对虎斑乌贼基因表达的影响

对测序获得的原始数据进行数据筛选，去掉里面的接头序列还有那些低质量的高通量测序中反应获得的测序序列，最终获得筛选的高质量测序序列。

把这些高质量的测序序列进行组装，获得这个物种的非重复序列基因库；

然后以这个基因库为基础我们可以对测序的文库进行质量评估，当评估合格后，我们可以进行各方面的分析。

使用一边合成一边测序这一技术对cDNA文库进行测序，可以获得大量的测序序列，并且这些序列的碱基质量值绝多数都大于等于30，原始数据可用FASTQ格式来储存。

为了保证进一步分析的准确性，我们必须要保证测序序列拥有足够高的精确度。

此外，一般的原始数据中会有极少部分的测序数列带有人工引物等序列，我们必须要将它们从测序序列里面摘除。

我们将获得的高质量的测序数列称做CleanData。

（7）改造土池，搭建塑料小棚，延长虎斑乌贼生长时期，结合土池和小棚连通养殖，实现土池养殖规模化

2017年3月2日，池塘晒干，对31亩长方形土池改造，用挖掘机将31亩土池分成30亩和1亩两个，中间以土坝相隔，通过闸门相连；

1亩土池深挖环沟，环沟深3米，宽3米，环沟底部铺设加热不锈钢管道和微孔充氧管道；

模仿苏南凡纳滨对虾小棚养殖模式，1亩土池上面搭建双层塑料小棚，闸门处设置拦网和地笼，拦网和地笼通过接头相连。

当外界水温升高到20℃时，提起闸门，撤掉拦网和地笼，使AB两池相通，土池和小棚连通养殖，利用大池饵料优势进行土池养殖。

秋季水温降低到20℃时，通过闸门设置的拦网及其连接的地笼使大池B中的乌贼成体进入小棚内育肥和越冬，适时销售，同时为翌年苗种繁育提供所需亲体。

在小棚进行苗种繁育，4400粒受精卵孵化率83.5%，幼乌暂养成活率61.8%，结合连通池养殖，215只成乌小棚育肥和越冬，使虎斑乌贼生长时间延长3-4个月，建成虎斑乌贼小棚养殖繁育基地1个，实现南贼北养；

优化养殖参数，提高土池连通养殖密度，小棚育肥实现批量销售，少量优质个体选育、越冬；

优化越冬和苗种繁育参数，建设土池养殖繁育基地1个；

通过虎斑乌贼北方小棚养殖，实现正常发育、育肥和越冬，结合土池养殖，使虎斑乌贼生长时间延长3-4个月，促进乌贼养殖产业化进程。

土池盐度测量

室内分析实验

室内养殖实验

土池温度测定

3.2进行30人次培训，为企业培训陈治臣、陈守军、潘翰迪等一批技术骨干人员，安置12人就业，具体培训内容如下。

（1）海洋头足类人工养殖产业浅析（培训提纲）

海洋头足类人工养殖具有潜在的推广价值和经济效益，但也面临着诸多瓶颈。

本文回顾了海洋头足类养殖业发展的历史和现状，总结了头足类养殖的理论与关键技术，发现有限的头足类亲体和苗种来源和日益恶化的养殖环境是制约头足类养殖业发展的主要限制因素，目前当务之急是加强海洋头足类人工养殖产业的宏观调控力度，投入大量资金和人力来建立遗传育种场所，稳步发展头足类育苗业，集中攻关培育抗逆、适应高密度工厂化养殖的头足类优良品种，加强头足类养殖新品种的引进、驯化和推广；

综合水源、水质和底质等因素，提高池塘抗病相关设施标准，做好头足类疾病防治，加强产业的科学管理，推进规模化、产业化经营进程；

同时，建立头足类交易平台，促进头足类加工与贸易，延伸做大头足类加工产业链，带动海水头足类养殖业整体发展。

近年来，学者们和养殖专业技术人员开始利用野生或人工繁育的头足类苗种，在海水网箱、废旧的对虾养殖土池和室内工厂化养殖设施进行头足类人工养殖试验。

但真正产业化意义上的头足类养殖业，即头足类全人工苗种培育和养殖技术的关键环节还未实现实质性的突破。

不过，从产业化发展的角度来看，前五次海水养殖浪潮已过，头足类养殖业无疑是海洋经济中最具有发展前景的产业之一，具有掀起第六次海水养殖浪潮的潜质。

但由于头足类苗种繁育和人工养殖的基础理论体系研究滞后以及伴随的一系列的技术瓶颈问题，海洋头足类人工养殖业目前还没有实现根本性的突破。

海洋头足类人工养殖产业发展现状；

海洋头足类人工养殖产业存在的主要问题；

发展趋势浅析；

对策和建议（加强海洋头足类人工养殖产业的宏观调控力度；

抓好头足类新品种培育工作；

头足类疾病防治；

头足类加工与贸易）

（2）虎斑乌贼人工育苗和养殖技术（培训提纲）

虎斑乌贼俗称墨鱼，主要分布于印度洋和大西洋海域；

在我国，虎斑乌贼主要分布于东海和南海等海域。

虎斑乌贼体型较大，肉质鲜美，营养丰富，具有重要的经济价值。

国外学者早在上世纪70年代后期就开始从事虎斑乌贼的繁殖和养殖研究，国内对虎斑乌贼的研究较晚，从本世纪初才刚刚开始，但在短期内取得了可喜的成绩。

国内虎斑乌贼主要通过近海捕捞获得，因虎斑乌贼人工养殖过程中经常会出现个体发育不良、存活率低等问题，人工养殖尚未形成规模。

本文会对虎斑乌贼的分类地位、形态特征、生活习性、苗种繁育、网箱养殖、土池养殖和养殖前景等进行综述，希望为虎斑乌贼的人工养殖提供技术支撑。

生物学特性（分类地位、形态特征、生活习性：

食性、交配产卵、胚胎发育）；

苗种繁育（影响因素、亲本选择、受精卵的收集和孵化、幼乌的投喂）；

网箱养殖（养殖海区的选择、养殖网箱的制作、放养密度、饵料投喂、病害防治、养殖管理、捕捞）；

土池养殖；

展望。

小棚养殖模式培训

4项目完成情况及成效

4.1项目完成情况

[1]2016年苗种繁育和养殖实验完成情况

6月2日，水温20-22℃，2500只投入池塘，10月16日，秋季水温降到15℃时，收获平均体重253克乌贼1608只，成活率64.3%，10月16日至26日，收获平均体重253克乌贼1608只。

[2]2017年苗种繁育和养殖实验完成情况

6月4日，3500只投入池塘，10月21日，秋季水温降到15℃时收获平均体重275克乌贼2222只，成活率63.5％，10月21日至28日，收获平均体重275克乌贼2222只。

[3]小棚改造完成情况

[4]小棚养殖完成情况

2017年5月6日，将空运来的受精卵4400粒放到塑料筐中，在小棚进行苗种繁育，4400粒受精卵孵化率83.5%，幼乌暂养成活率61.8%，结合连通池养殖，215只成乌小棚育肥和越冬，使虎斑乌贼生长时间延长100天左右，建成虎斑乌贼小棚养殖繁育基地1个。

[5]发表论文和申请专利情况

（1）张庆起,王兴强,曹梅,王力.对虾营养需求及饲料投喂技术[J].养殖与饲料,2017（12）:

50-55.

（2）王兴强,曹梅,崔春辉.贝类生态免疫学研究[J].内蒙古科技,2017,36（9）:

34-38.

（3）崔春辉,王兴强,曹梅,陈百尧,伏光辉,孙苗苗,李永.头足类产业化养殖技术研究[J].安徽农学通报,2017,23（15）:

119-122.

（4）崔春辉,王兴强,曹梅,王力,陈百尧,伏光辉,孙苗苗,李永.头足类营养生理研究[J].安徽农业科学,接受.

（5）陈百尧,王兴强,曹梅.一种土池中乌贼的收集和暂养装置,实用新型专利,ZL201720242017.7,授权.

（6）王兴强,曹梅,陈百尧.一种池塘主养金乌贼的生态混养方法,发明专利,ZL201510876530.7,授权.

（7）王兴强,曹梅,陈百尧.一种贼虾混养池塘中金乌贼的收获与暂养方法,发明专利,申请号:

CN201510904010.2,实审.

4.2成效

对31亩长方形土池进行改造，在小棚进行苗种繁育，4400粒受精卵孵化率83.5%，幼乌暂养成活率61.8%，结合连通池养殖，215只成乌小棚育肥和越冬。

该项目为公司新增产值105万元，年新增利润11万元，年出口创汇9.5万美元，实现南贼北养。

5经费预算执行情况

项目投入经费30万元，其中省拨款15万元，承担单位自筹15万元，经费预算执行情况见下表。

科目

支出数

其中：

单位自筹支出数

省拨款支出数

（一）直接费用

29.100

15.000

14.100

1、设备费

2.141

0.351

1.790

2、材料费

8.419

3.878

4.541

3、测试化验加工费

6.956

2.000

4.956

4、燃料动力费

1.179

0.680

0.499

5、差旅费

1.713

1.000

0.713

6、出版/文献

1.801

1.200

0.601

7、劳务费

6.541

5.541

8、专家咨询费

0.350

0.000

（二）间接费用

0.900

合计

30

15

三、项目技术情况

1项目的研究方法及技术路线

1.1土池改造和小棚搭建

春季池塘晒干后，用挖掘机将31亩土池分成30亩和1亩两个，中间以土坝相隔，通过闸门相连；

模仿苏南凡纳滨对虾小棚养殖模式，1亩土池上面搭建双层塑料小棚。

1.2受精卵投放、孵化和幼乌暂养

将空运来的受精卵放到塑料筐中，在小棚内充氧孵化；

1.3连通养殖

当外界水温达到20℃时，打开水闸，撤掉拦网和地笼，两池相通，利用大池饵料优势进行土池养殖。

1.4小棚养殖

当外界水温降到20℃时，通过拦网及其连接的地笼将乌贼收集到小棚中，一周时间后完成收集，放下水闸，进行育肥和越冬。

技术路线如下：

2项目解决的关键技术

虎斑乌贼较其它乌贼具有耐低盐、耐高温等特点，但对低温的耐受性有限，亲体和幼乌饵料不适或短缺，往往造成较高的死亡率，难以满足大规模养殖生产的需要，且受刺激易喷墨，没有形成规模化养殖技术。

本项目模仿苏南地区凡纳滨对虾小棚养殖的经验，引进创新，通过改造土池，搭建塑料小棚，延长虎斑乌贼生长时期，结合土池和小棚连通养殖，实现土池养殖规模化，降低外界气温变化对北方乌贼养殖的影响，为乌贼产业化进程扫清障碍。

3取得的突破性进展

虎斑乌贼具有饵料难以选择和受刺激立即喷墨等特点，人工培育亲体和幼体的成活率较低，没有形成规模化育苗技术。

3.1借鉴曼氏无针乌贼和金乌贼育苗和养成经验，结合虎斑乌贼繁育和养殖研究的前期成果，开展虎斑乌贼苗种繁育及土池养殖技术研究，建立规模化全人工育苗和养殖技术工艺，为虎斑乌贼养殖提供足够的苗种和亲体，同时优化乌贼土池养殖方法、乌贼活体运输方法、乌贼土池捕捞方法，加快推进虎斑乌贼养殖的产业化进程。

3.2亲体和幼体饵料不适或短缺，往往造成较高的死亡率，难以满足大规模养殖生产的需要，适口的饵料是幼体和亲体生长发育的基础，大量而稳定的饵料供给则是提高虎斑乌贼人工繁育及养殖成活率的重要保障，借鉴本课题组金乌贼繁育的经验，初步确立虎斑乌贼批量繁育及养殖的饵料系列，以解决虎斑乌贼产业化的瓶颈问题。

3.3单一养殖虎斑乌贼造成滩涂和浅海域利用率过低，对环境污染严重，资源利用率低，对自然环境的破坏性大，不利于虎斑乌贼养殖业的可持续发展，基于海州湾滩涂和海域的具体特点，开发综合养殖模式，优化养殖种类组合，生态防病。

3.4模仿苏南地区凡纳滨对虾小棚养殖的经验，引进创新，通过改造土池，搭建塑料小棚，延长虎斑乌贼生长时期，结合土池和小棚连通养殖，实现土池养殖规模化，降低外界气温变化对北方乌贼养殖的影响，为乌贼产业化进程扫清障碍。

3.5在小棚进行苗种繁育，4400粒受精卵孵化率83.5％，幼乌暂养成活率61.8％，结合连通池养殖，215只成乌小棚育肥和越冬，使虎斑乌贼生长时间延长100天左右，实现南贼北养；

优化越冬和苗种繁育参数，发展绿色水产品。

通过本研究实施，促进我国虎斑乌贼养殖产业化，满足国内外市场需求。

4创新点

4.1通过产学研结合，通过池塘改造、小棚搭建和连通池养殖，优化养殖参数，促进北方虎斑乌贼养殖产业化，重振中国“四大海产”雄风，为我国滩涂增养殖业的可持续发展提供技术支撑。

4.2实现虎斑乌贼棚内孵化、幼乌暂养和成体育肥、越冬，使虎斑乌贼在江苏的产业化养殖成为可能。

四、合同任务指标完成情况

1合同约定的研究内容、技术指标和效益指标

2合同任务指标完成情况

对31亩长方形土池改造，靠近锅炉房一侧用土坝围出1亩土池A，通过一个小型闸门与大池B相通；

土池A上面搭建双层塑料小棚，底部挖深3米环沟，环沟内铺设充氧和加热管道，闸门处设置拦网和地笼。

春季从广东空运4000粒受精卵到小棚孵化和幼乌暂养，当外界水温升高到20℃，提起闸门，AB两池连通养殖；

秋季水温降到20℃，通过闸门拦网及其连接地笼使大池B中的乌贼进入小棚育肥，适时销售，200只优质个体越冬。

秋季水温降低到20℃时，通过闸门设置的拦网及其连接的地笼使大池中的乌贼成体进入小棚内育肥和越冬，适时销售，同时为翌年苗种繁育提供所需亲体。

建立北方小棚养殖模式，小鹏内苗种繁育，受精卵孵化率80%，幼体暂养成活率60%，实现200只成乌小棚育肥和越冬。

在小棚进行苗种繁育，4400粒受精卵孵化率83.5%，幼乌暂养成活率61.8%，结合连通池养殖，215只成乌小棚育肥和越冬，使虎斑乌贼生长时间延长100天左右。

建成虎斑乌贼土池养殖繁育基地1个，示范小棚养殖，