机能学实验报告Word文档格式.docx
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滴,观察小肠运动的
反应。
当效果明显后,立即更换台氏液。
4.氯化钙的作用加
2%cac12
溶液
2~3
滴入灌流浴槽内,观察其反应,效果明显后迅速
冲洗。
5.盐酸的作用加
滴
1mol/l
溶液入浴槽内,观察其反应。
6.氢氧化钠的作用在(5)基础上加等容量的
溶液入浴槽内,观察其反
应。
按上述方法更换台氏液,反复冲洗。
7.温度的影响将浴槽内台氏液放出,注入
25℃台氏液,观察平滑肌收缩有何改变,当
效应明显后再换入
38℃台氏液,持续一段时间后,再换入
42℃台氏液,观察收缩活动的变化
(亦可根据室温的具体情况选做其中的一项)。
五、注意事项——
1.实验过程中必须保证标本的供氧(通气)及浴槽内台氏液的恒温(38℃),以维持标
本活性。
2.灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。
3.放大器零点调好后不要再移动旋钮,以免影响基线。
4.上述各药液加入的量系参考数据,效果不明显者可以添加。
5.每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液,并冲洗多次,以免平滑肌出现不可
逆反应。
6.各项处理必须有处理标记。
六、相关知识
家兔小肠平滑肌以胃幽门与十二指肠交界处的肠管活动最好,对生物化学因素也较敏
感,所以选取用此处肠管作标本。
七、实验讨论:
1、正常情况下,我们观察到离体小肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收缩,但其
节律性很不规则。
小肠平滑肌自律性产生的离子基础尚未完全清楚,目前认为,它的产生可能
与细胞膜上生电性钠泵的活动具有波动性有关,当钠泵的活动暂时受抑制时,膜便发生去极
化;
当钠泵活动恢复时,膜的极化加强,膜电位便又回到原来的水平。
2、在浴槽中加入
0.01%乙酰胆碱(ach
)2
滴(约
0.2ml)后,可见离体肠管活动增
强,描记曲线出现收缩频率变快,幅度增加。
出现上述现象的机理,目前认为与消化道平滑肌
细胞产生动作电位的离子基础是
ca2+的内流有关。
乙酰胆碱可与肌膜上的
m
受体结合,使得
两类通道开放:
一类为电位敏感性
ca2+专用通道,另一类为特异性受体活化
ca2+
专用通
道。
前一类通道对
ach
敏感,小剂量
即引起开放;
后一类通道对
相对不敏感,只有
大剂量
才会引起开放。
这两类通道开放都使得肌浆中
ca2+增高,进而激活肌纤蛋白—肌
凝蛋白—atp
系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
3、在浴槽中加入
0.01%肾上腺素
2
0.2ml)后,可见离体肠管活动减弱,描记
曲线出现收缩频率变慢,幅度减小以及基线下移。
出现上述现象的机理,目前认为与肠肌细胞
膜上存在
α
和
β
两中受体,α
受体又分为
抑制型受体和
兴奋型受体有关。
肾上腺素作用
于
抑制型受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使
k+外流增多,细胞膜发生超极化,
肠肌兴奋性降低,肌张力下降。
同时,肾上腺素还作用于
受体,①它的激活引起肠肌细胞
膜中的
camp
合成增多,camp
激活肠肌膜及肌浆网上
ca2+泵活动,使肌浆中
ca2+浓度降
低,亦使肌张力降低;
②β
受体激活后还促使
k+及
ca2+外流增加,加速膜的超极化,促进
了肠肌肌张力的减低。
4、在浴槽中加入
2%氯化钙溶液
滴后,离体肠管活动增强,描记曲线出现收缩幅度增
加。
这是因为加入氯化钙后,细胞外液
ca2+浓度升高,则
ca2+内流增加,使得细胞内液中
ca2+浓度升高,ca2+与钙调蛋白结合增加,促进了横桥的激活。
因而收缩力增加。
5、在浴槽中加入
盐酸溶液
滴后,离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩幅
度降低,频率变慢。
出现这一现象,目前认为其原因在于:
①细胞外
h+升高时,ca2+通道的
活性受到抑制,使得
ca2+内流减少。
②
h+升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程:
h+能与
ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白
atp
酶活性降低(近期有理论认为是直
接抑制作用而非竞争作用);
使肌原纤维对
ca2+的敏感性和
ca2+从肌质网的释放量减少。
6、在加盐酸使平滑肌收缩减弱的基础上,再加
于浴槽中,则肠管活动出现相
反的情况,即肠管活动增强。
原因在于
可以中和
h+,改变了细胞外液的
ph
值,ph
过
高、过低,收缩幅度及张力都会降低,最适
时收缩效果最好。
7、浸浴小肠肠管的台氏液温度以
38℃~40℃为宜,低于或高于这个温度,都会影响结
果。
因为肠管平滑肌对温度改变极为敏感,当温度降到
30℃以下时,由于代谢水平的降低,
兴奋性减弱,可出现收缩曲线基线下移,频率变慢,收缩幅度变小。
有时可能会见到基线先上
移后下降的现象。
这是因为降温本身对肠管是一种刺激,也可短暂地加强代谢活动,所以肌张
力升高。
当温度高于
40℃时,由于酶活性提高,各离子通道活性增加,使得基线上移,收缩
频率增高,幅度增加。
当然,如果台氏液温度过高(50℃以上),可因蛋白变性,使肠管收缩
功能消失。
八、结论:
1、消化道平滑肌具有自律性,但其收缩缓慢,节律性不规则。
2、消化道平滑肌具有一定的紧张性。
3、消化道平滑肌的活动易受温度、ph
值及其它化学因素、药物因素的影响。
【基本原理】
哺乳动物的胃肠平滑肌具有自动节律性收缩、伸展性、紧张性和对理化刺激较敏感等生
理特性。
这些特性对维持消化管一定压力,保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容
物的理化变化具有生理意义。
在整体内受中枢神经系统和体液因素的调节。
本实验观察及记录
哺乳动物等离体肠段的一般特性及在一些药物作用下引起的各种效应。
实验二、化学因素对心脏活动的影响
1.理解
k+,ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品对心脏活动的影响。
2.掌握离体心脏标本的制备方法。
3.记录信号同时打标记的方法。
4.观察内环境理化因素的相对恒定对维持心脏正常节律活动的重要作用。
二、实验原理——
1.心脏的正常节律性活动的维持需要一个适宜的理化环境,如钾、钠、钙浓度比例,
适宜的酸碱度和温度。
在体内心脏还受植物神经双重支配,交感神经兴奋时,其末
梢释放去甲肾上腺素,使心肌收缩力加强,传导加速,心率加快;
而迷走神经兴奋
时,其末梢释放乙酰胆碱,使心房肌收缩力减弱,心率和传导减慢。
2.蟾蜍心脏离体后,用理化特性近似于血浆的任氏液灌流,在一定时间内,可保持节
律性收缩和舒张。
改变任氏液的组成成分,心脏的活动就会受到影响。
三、实验讨论——
由实验所记录的曲线结果可以看出,改变蟾蜍离体心脏的灌流液成份,可影响其心脏的
舒缩节律和幅度。
1.用任氏液灌流心脏,可以保持较长时间的节律性舒缩活动。
这是因为任
氏液的主要离子成份、渗透压、ph
值和蟾蜍
cell
外液相近,为蛙心提供了一个适宜的理化
环境。
2、用
065%nacl
溶液灌流心脏,其心跳减弱。
心肌的收缩活动是由
ca++触发的,
由于心肌细胞的肌浆网不发达,故心肌收缩的强弱与细胞外
ca++浓度呈正比。
用
065%nacl
溶液灌蛙心,灌注液中缺乏
ca++,以致心肌动作电位
期内流
ca++减少,心肌收缩活动也
随之减弱。
3.用高钾任氏液灌注心脏时,心跳明显减弱,甚至出现心脏停到舒张状态。
因为细胞
外
k+浓度增高时,导致
(1)、k+与
ca++有竞争性拮抗作用,k+可抑制细胞膜对
ca++,的转运,使进入细胞内
ca++,减少,心肌的兴奋---收缩耦联过程减弱,
心肌收缩力降低;
(2)动作电位
期
k+外流增加,平台期缩短,使平台期
ca++
内流减少,收缩力减弱。
当细胞外
k+浓度显著增高时,膜内外的钾离子浓度梯度
减小,静息电位的绝对值过度减小(膜内达—55mv
左右时,na+通道失活),心肌的
兴奋性完全丧失,心肌不能兴奋和收缩,停止于舒张状态。
长时间用,心脏最终会
停止收缩。
4.用高
ca++任氏液灌流蛙心时,心收缩力增强,舒张不完全,以致收缩基线上移。
在
ca++,浓度高的情况下,会停止在收缩状态,这种现象称之为”钙僵”。
心肌的
舒缩与心肌肌浆网中
ca++浓度高低有关。
当钙离子浓度升高到一定水平(10-5m)
时,作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的
ca++,就引起了肌钙蛋白分子构型的改
变,从而触发了肌丝滑行,肌纤维收缩。
当钙离子浓度降低至
10-5m
时,钙离子
与肌钙蛋白解离,心肌随之舒张,如果钙离子浓度持续升高,钙离子与肌钙蛋白结
数量不断增加,甚至达到只结合不解离的程度,致使心肌持续收缩(钙僵)。
5.向蛙心插管中加去甲肾上腺素后,可见蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏
曲线幅度明显增大、心跳加快、曲线密度明显变大。
其原因是去甲肾上腺素与心肌
细胞膜上的
受体相结合,从而激活肌浆网释放的
ca++也增多。
同时静脉窦
4
期
去极化速度加快,故心肌舒缩增强,心跳加快。
6.
在任氏液内滴加乳酸,心跳
减弱,其原因是
h+进入心肌内膜后,可降低
ca++与肌钙蛋白的亲和力,促使
ca++的解离。
7.
在上述灌流液中加入与乳酸同当量的
naoh,心肌的舒缩逐渐
恢复。
其原因是
中和了乳酸,解除了
ca++与肌钙蛋白亲和力的抑制
8.
任氏液内滴加
ach,蛙心收缩减弱,收缩曲线基线下移,心率减慢,最后心跳停止
于舒张状态。
原因是
与心肌细胞膜
受体相结合,一方面提高心肌细胞膜
k+的通透性,
促使
k+外流,导致
(1)
静脉窦复极时
k+外流增多,最大复极电位绝对值增大;
ik
衰减过程
减弱,自动除极速度减慢。
导致静脉窦自得律性降低,心律减慢。
(2)
复极过程中
k+外流增
加,动作电位
2,3
期缩短,ca++进入心肌细胞内减少,使心肌收缩减弱;
另一方面
可
直接抑制
ca++通道,减少
ca++内流,进而使心肌收缩减弱。
四、实验结论——
由此可以看出:
蟾蜍离体心脏对细胞外液离子浓度的改变,酸碱,ne,ach
敏感。
实验三、红细胞渗透脆性测定、影响血液凝固的因素及血型鉴定
(一)、红细胞渗透脆性的测定
1、本实验学习测定红细胞渗透脆性的方法。
2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。
3、观察不同因素对红细胞渗透脆性的影响。
将红细胞悬浮于等渗
naci
液中,其形态不变。
若置于低渗
溶液中则发生膨胀破
裂,此现象称为红细胞渗透脆性。
但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力,其大小可用
naci
溶液浓度的高低来表示。
将血液滴入不同浓度的低渗
溶液中,开始出现溶血现象的
溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力(正常为
0.42-0.46%naci
溶液)。
出现完全
溶血现象时的
溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力(正常为
0.28-0.32%naci
前者代表红细胞的最大脆性(最小抵抗力),后者代表红细胞最小脆性(最大抵抗力)。
生理
学上将能使悬浮于其中的药细胞保持正常形态的溶液称为等张溶液,不能跨过细胞膜的微粒所
形成的力,但等渗溶液并不一定是等张溶液(如
1.9%的尿素溶液)。
三、材料与方法——
1.实验对象:
2.器械药品:
试管架、小试管
45
支、载玻片、盖玻片注射器、8
号注射针头、棉
签,1%naci
溶液、0.85%氯化钠溶液、蒸馏水,1.9%尿素溶液、地塞米松、皂
甙。
3.方法与步骤:
配制不同浓度的低渗
溶液取口径相同的干洁小试管
36
支,分
别编号排列在三个试管架上,按下表分别向各试管内加入
1%naci
溶液和蒸馏水混
匀,配制从
0.68-0.24%12
种不同浓度的
低渗溶液,每管总量均为
2.5ml。
试剂试管编号
1.
5
6
7
8
9
10
11
12
1%nacl(ml)
1.7
1.6
1.5
1.4
1.3
1.2
1.1
1.0
0.9
0.8
0.7
0.6
蒸溜水(ml)
1.8
1.9
nacl
浓度%
0.68
0.64
0.60
0.56
0.52
0.48
0.44
0.40
0.36
0.32
0.28
0.24
四、实验结果——
皂甙(ml)
另取
支小试管,在三个试管架中分别编号
13-15,分别加入
0.85%naci
溶液、
1.9%尿素和蒸溜水
采集标本家兔麻醉后,仰卧固定于兔手术台上,分离一侧颈总动脉或股动脉插管备放血
用(具体方法参见第章)。
依次向
15
支试管内各加
1
滴,轻轻颠倒混均,切忌用力振荡。
先
观察
13、14、15
管的变化,其他
12
管在室温下放置
小时。
五、观察指标——
血液溶血情况,其现象可分为以下几种:
1、试管内液体完全变成透明红色,说明红细胞完全破裂,称为完全溶血。
2、试管内液体下层为混浊红色,上层无色透明,表示部分红细胞没有破坏,称为不完全
深血。
3、试管内液体下层为混浊红色,上层无色透明,说明红细胞完全没有破坏。
六、观察项目——
1、观察不同浓度低渗
混合液的颜色和透明度。
2、比较第一个试管架第
管的溶血情况及第二、第三个试管架中与第一个
试管架中对应试管的溶血情况并分析其原因。
七、注意事项——
1、每支试管内血液滴入量应准确无误(只加一滴)。
2、确保每支试管
溶液的浓度、容量一致。
3、小试管必须清洁、干燥。
篇二:
机能学实验报告范文
四川大学实验报告
篇三:
机能实验学实验报告书写格式示例
篇四:
缺氧的类型及影响缺氧耐受性的因素
浙江中医药大学
中七一班
沈维
201212201501009
摘要:
【目的】:
复制小鼠乏氧性缺氧模型,观察温度、中枢神经系统机能状态对小鼠缺氧耐
受性的影响。
复制小鼠血液性缺氧模型,观察还原剂对小鼠缺氧耐受性影响.
【方法】:
乏氧性缺氧中,分别腹腔注射生理盐水和氯丙嗪作为对照,计算耗氧量。
亚
硝酸钠中毒中,注射亚硝酸钠溶液后,分别注射生理盐水和美蓝作为对照,取肝脏和肺脏观察
血液颜色。
【结果】:
乏氧性缺氧中,注射生理盐水的小鼠耗氧率为
26.73;
注射氯丙嗪的小鼠耗
氧率为
1.56。
亚硝酸钠中毒实验中,注射生理盐水的小鼠在
14
分
秒死亡,耳尾唇颜色
出现青石板色。
小鼠死亡后解剖观察肝脏的其颜色为深咖啡色,肺脏为咖啡色;
注射美兰的小
鼠在
32
30
秒处死,耳尾唇颜色出现较浅的青石板色。
小鼠死亡后解剖观察肝脏的颜色为
紫黑色,肺脏为淡咖啡色。
【结论】:
给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率,延长其存活时间。
亚硝
酸盐可显著缩短小鼠存活时间,降低呼吸频率。
美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠的作用,已定程
度延长小鼠存活时间,延缓呼吸频率的下降。
关键词:
乏氧性缺氧;
亚硝酸钠中毒;
死亡时间
引言:
当供应组织的氧不足,或组织利用氧障碍时,机体的机能和代谢可发生异常变
化,这种病理过程称之为缺氧。
缺氧是多种疾病共有的病理过程。
许多原因都能使机体发生缺
氧。
不同类型的缺氧,其机体的代偿适应性反应
[1]和症状有所不同。
1.材料
1.1.
实验对象:
小鼠
只
1.2.
器材:
广口瓶(带有橡皮管及橡
皮塞)2
个,1ml
注射器,剪刀,镊子;
1.3.
实验试剂:
0.25%氯丙嗪;
生理盐水,5%亚硝酸钠溶液;
1%美蓝溶液,冰块,钠
石灰。
2.方法
2.1.
乏氧性缺氧实验
2.1.1.
取两只老鼠先编号,再进行称重,1
号小鼠
18.7g,2
16.7g。
2.1.2.
对
号鼠按
0.1ml/10g
进行腹腔注射
0.187ml
的生理盐水,将它放在室温
下
分钟,记录呼吸频率。
而对
号鼠则腹腔注射
0.167ml
的
0.25%氯丙
嗪,注射完后冰浴
时间到后,将两只老鼠放入广口
瓶内,加入钠石灰,塞进瓶塞,并将移液管放入盛满水的量筒内计入当时的液
面高度数据。
2.1.3.
实验观察
观察皮肤黏膜颜色变化,呼吸频率的快慢,活动强度,至小鼠死
亡,记录其存活时间。
并读取液
[2]面变化量即耗氧量。
解剖小鼠尸体,记录肝脏、肺血液颜色变化。
2.1.4.
总耗氧量计算
根据
a(ml),存活时间
t(min),鼠体量
w(g)三项指
标,求出总耗氧量。
2.2.
亚硝酸钠中毒实验
2.2.1.
取性别相同,体重相近的鼠
只,进行编号
4,并观察皮肤黏膜色泽。
2.2.2.
向两只老鼠均注射
5%亚硝酸钠
0.2ml,注射完后,立即向
号鼠腹腔内注射美
兰溶液
0.2ml,向
号老鼠注射相同量的生理盐水作为实验组。
2.2.3.
观察皮肤黏膜颜色变化,呼吸频率的快慢,活动强度,3
号鼠死亡
后,观察肝、肺的血液颜色;
号鼠处死,观察肝、肺的血液颜色。
3.实验结果
组别体重(g)药物剂量(ml)存活时间(min)
耗氧量耗氧率
号小鼠18.7g0.187ml
的生理盐水29
39
秒
15ml26.73
号小鼠16.7g0.167ml
0.25%氯丙嗪38
33
1ml1.58
号小鼠注射前呼吸
200
次/分钟,注射后呼吸
188
次/分钟,实验中呼吸约
分钟时
为
236
次/分钟,13
分钟时为
132
次/分钟。
小鼠的运动状态为基本不动,但偶尔有剧烈运
动,持续时间较短。
小鼠在
29
秒死亡,耳尾唇颜色出现紫绀。
小鼠死亡后解剖观察肝
脏的其颜色为暗红色,肺脏为鲜红色。
220
112
小鼠的运动状态为基本不动。
38
秒死亡,耳尾唇颜色出现紫
绀。
小鼠死亡后解剖观察肝脏的其颜色为暗红色,肺脏为鲜红色。
硝酸钠实验
组别药物剂量(ml)存活时间(min)
号小鼠硝酸钠+生理盐水14
号小鼠硝酸钠+美兰32
秒处死
号小鼠,注射后活动剧烈,一段时间后变安静,死前有剧烈挣扎。
死亡,耳尾唇颜色出现青石板色。
小鼠死亡后解剖观察肝脏的其颜色为深咖啡色,肺脏为咖啡
色。
号小鼠,注射后较为安静。
秒处死,耳尾唇颜色出现较浅的青石板
小鼠死亡后解剖观察肝脏的颜色为紫黑色,肺脏为淡咖啡色。
4.实验结论
氯丙嗪可缓解缺氧,小鼠存活时间更长;
美兰具有还原性可解救小鼠亚
硝酸钠中毒。
5.讨论
5.1.
实验结果显示氯丙嗪组的存活时间显著长于生理盐水组,耗氧率也显著低于生理
盐水组。
氯丙嗪为吩噻嗪类抗
精神病药物,主要阻断脑内多巴胺受体和
肾上腺素受体和
胆碱受体,具有神经安定
作用,它对中枢神经系统有较强的抑制作用。
氯丙嗪可以抑制中枢的体温调节中枢,使体温随
外界温度变化而变化,所以当外界温度降
[3]低到冬眠温度,体温也降到冬眠温度。
小鼠注射氯丙嗪后,置于低温使其进入假冬眠
状态。
小鼠外界活动停止,
新陈代谢率降至最低,因此能量利用减少,单位时间的耗氧量减少,即耗氧率减小。
在
氧总量相等的情况下,存活时间就比生理盐水组长。
6.2
亚硝酸盐可使
hb
中二价铁氧化成三价铁,形成高铁
hb(hbfe3+oh),三价铁
因与羟基牢固结合而丧失携氧能
力,加上
四个二价铁中有一部分氧化为三价铁后使剩余的
fe2+与氧亲和力增高,导
致氧离曲线左移,使组
[4]织缺氧。
高铁
呈咖啡色或青石板色,因而使皮肤和粘膜呈现相同颜色。
低浓度美
兰为还原剂,抑制了氧化剂(亚硝酸钠)的中毒反应,中毒后即刻肌注可有效使小鼠存活时间
延长
倍以上。
本实验结果也显示,亚硝酸钠+美兰组小鼠的存活时间明显长于亚硝酸钠中毒
小鼠的存活时间,说明美兰具有较好的拮抗作用。
注射美兰后肝脏的颜色为黑紫色原因是美兰
是染色剂。
5.3
实验中
号小鼠在实验时由于装置的气密性不高,有一些漏气,导致其耗氧率偏
低。
并且由于理解错误,在将
号小鼠放置于冰水中
分钟后又将小鼠在冰水中多放了
16
分钟,使得小鼠的耗氧减
少,导致实验结果有误差。
【参考文献】
[1]
陆源,林国华,杨午鸣.机能学实验教程[m].北京:
科学出版社.2005
[2]
王太一,韩子玉.2000.实验动物解剖图谱.沈阳:
辽宁美术出版社.
[3]
陈季强.基础医学各论(上册).北京:
科学出版社,200
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