全国通用届高考生物二轮复习 微生物的培养与应用专题卷5Word文档下载推荐.docx

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故C错误，D正确。

尿素分解菌的相关知识

【名师点睛】鉴定分解尿素的细菌

（1）原理：

CO（NH2）2＋H2O

CO2＋2NH3；

由于NH3的产生，培养基碱性增强，pH升高，因此可通过检测pH的变化来判断该化学反应是否发生。

（2）方法：

以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则pH升高，说明该种细菌能分解尿素。

4．将硝化细菌接种到下列培养基中，其中可以长出硝化细菌菌落的是（　　）。

A.无氮培养基，试管密闭

B.无氮培养基，试管口用棉塞塞住

C.含氮培养基，试管密闭

D.含氮培养基，试管口用棉塞塞住

【解析】培养微生物的培养基应有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等营养物质，在提供主要营养物质的基础上，培养基还需满足微生物对pH、氧气等要求。

硝化细菌是自养需氧型微生物，利用无机氮源，因此培养硝化细菌需含氮的培养基，试管口用棉塞塞住。

5．可以作为硝化细菌碳源、氮源及能量来源的物质依次是（）

A.含碳有机物、氨、光B.含碳无机物、氮、氮

C.含碳有机物、氨、氨D.含碳无机物、氨、氨

硝化细菌能利用大气当中的二氧化碳，故是含碳无机物，硝化细菌能将氨氧化常亚硝酸，进而将亚硝酸氧化成小山，能利用这两个化学反应中释放出的化学能，故氮源是氨，能量来源也是氨，故D正确，其余错误。

本题考查微生物的培养相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。

6．下面是微生物平板划线示意图．划线的顺序为1、2、3、4、5下列叙述正确的是（）

A.在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌

B.划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上

C.接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的

D.第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数

【解析】试题分析：

在五个区域中划线前后都要对接种环进行灭菌，但是在划线过程中和划线后对培养基不能进行灭菌，A错误；

划线操作时不能完全打开皿盖，划完后要立即盖上，B错误；

接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的，可能导致菌的无氧呼吸或者杂菌污染等情况，C正确；

第1区和第5区的划线不能相连，D错误。

本题考查平板划线法的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

7．下列是关于“微生物接种以及单个菌落观察”实验操作的叙述，其中错误的是（）

A．配制牛肉膏蛋白胨固体培养基，经高温、高压灭菌后倒入培养皿备用

B．接种前接种环须经酒精灯火焰灼烧

C．接种时应用无菌刮铲在培养基表面涂匀

D．倒置培养皿，37℃恒温培养48~72小时后观察

8．下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是

成分

NaN03

K2HP04

KC1

MgS04·

7H20

FeS04

（CH20）

H20

青霉素

含量

3g

1g

0.5g

0.01g

30g

1L

0.1万单位

A.依物理性质划分，该培养基属于液体培养基

B.依用途划分，该培养基属于选择培养基

C.培养基中的唯一碳源是（CH20），唯一氮源是NaN03

D.若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH20）,再添加纤维素

【解析】分析表格信息可知，因配方中没有凝固剂琼脂，所以依物理性质划分，该培养基属于液体培养基，A项正确；

因配方中有青霉素，所以依用途划分，该培养基属于选择培养基，B项正确；

培养基中的唯一碳源是（CH20），唯一氮源是NaN03，C项正确；

若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH20）和青霉素，再添加纤维素，D项错误。

【点睛】本题以“微生物的培养基配方”为情境，综合考查学生对微生物的营养、培养基的分类和应用等相关知识的识记和理解能力。

正确解答此题，需以“培养基的成分”为切入点，从中抽提出有效信息：

该配方中有青霉素、但没有凝固剂琼脂、含碳元素的物质只有（CH20）、含氮元素的物质只有NaN03、将其与“所学相关知识”有效地联系起来，进行知识的整合和迁移，并与分离纤维素分解菌的知识建立联系。

9．下列有关微生物培养与应用的说法正确的是

A．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源

B．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化大肠杆菌两个阶段

C．微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的单个细菌

D．接种前需要对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行消毒处理

【答案】B

【解析】A.分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源，尿素和葡萄糖是碳源；

错误。

B.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化大肠杆菌两个阶段；

正确。

C.微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的菌落；

D.接种前需要对培养基、培养皿、接种环进行灭菌，实验操作者的双手等进行消毒处理；

【考点定位】微生物的利用

【名师点睛】选择培养基的制作方法

（1）在培养基全部营养成分具备的前提下，加入物质：

依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长，如培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；

而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌。

（2）通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：

培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；

培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。

（3）利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：

如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。

（4）通过某些特殊环境分离微生物：

如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；

在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。

10．MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。

为了研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如右表，下列说法不正确的是…………………………………………………………（）

A．细菌的死亡不能通过光学显微镜观察其细胞的有无来确定

B．第2、3组对比表明，使用低浓度的青霉素可杀死MRSA菌

C．实验还需设计有2μg/mL青霉素做处理的对照组

D．此实验设计不能揭示蛋白质H的作用机理

细菌是原核细胞，无细胞核，因而不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定，A正确；

第2组和第3组对比说明使用低浓度青霉素和高浓度蛋白H混合物可杀死MRSA菌，B错误；

由于第2组的青霉素是20μg/mL，而第3组的青霉素是2ug/mL，所以实验还需设计有2μg/mL青霉素做处理的对照组，C正确；

此实验设计只发现低浓度青霉素和高浓度蛋白H混合物可杀死MRSA菌，但不能揭示蛋白质H的作用机理，D正确；

答案是B。

本题考查培养基对微生物的选择作用的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。

11．培养基配制需要运用灭菌和消毒技术，但两者消灭的微生物种类和数量是不同的，下列哪一项能正确表示消毒结果和灭菌结果之间的关系（　　）

A.

B.

C.

D.

【解析】灭菌是指杀灭或者去除物体上所有微生物，包括抵抗力极强的细菌芽孢在内。

注意微生物不仅包括细菌，还有病毒，真菌，支原体，衣原体等等。

消毒是指杀死物体上的部分微生物，也可能是致病的微生物，细菌芽孢和非病原微生物可能还是存活的。

所以，一般来说，灭菌的结果应包含消毒的结果，选B。

【点睛】比较消毒和灭菌

项目

消毒

灭菌

条件

使用较为温和的理化方法

使用强烈的理化因素

结果

杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）

杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子

适用

实验操作的空间、操作者的衣着和手

微生物的培养器皿、接种用具和培养基等

常用方法

煮沸消毒法（如100℃，5～6min），巴氏消毒法（80℃，15min），酒精、氯气、石碳酸等化学药剂消毒法

灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌

12．下表是不同筛选的方法或结果，完全正确的一组是（ 

）

A.①B.②C.③D.④

【解析】筛选耐盐的杨树品种，用不同浓度的NaCl液处理不同品种杨树幼苗，应以幼苗成活率为观察测量的指标，A项错误；

培养基应以尿素为唯一氮源，只有能分解尿素的细菌能存活，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。

酚红指示剂在pH升高后将变红，这样可以准确鉴定该种细菌能够分解尿素，B项正确；

抗生素抗性基因只是基因工程中用作载体的质粒应含有的标记基因的一种，C项错误；

筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞，通常是将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞板上进行筛选，D项错误。

【点睛】

本题考查筛选方法的相关知识，解题的关键是要求考生对平时所学知识进行归纳和总结，并结合题意进行灵活运用。

13．培养基的配制需要运用灭菌技术。

下列关于灭菌的叙述中，正确的是

A．杀死一定环境中的所有细菌B．杀死一定环境中的所有的有害细菌

C．杀死一定环境中的所有微生物

D．杀死一定环境中的所有微生物的细胞、芽孢和孢子

14．下列有关生物技术的说法，正确的是

A.DNA粗提取时，用体积分数为95%的冷却酒精进一步纯化DNA

B.制作果醋时应避免通

入空气以保证有关菌种正常代谢

C.制作果酒时应反复冲洗葡萄以避免杂菌的影响

D.测定土壤中能分解尿素的细菌数目，应采用平板划线法

【答案】A

【解析】DNA粗提取时，用体积分数为95%的冷却酒精进一步纯化DNA，醋酸菌是好氧菌，果酒制作应反复冲洗葡萄去除污物，测定土壤中能分解尿素的细菌数目，应采用稀释涂布平板法。

所以A选项正确。

15．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是（）

A．采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数

C．平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌，但前者不能用来计数

A、采用平板计数法获得的菌落有可能是由多个细菌形成的,所以往往少于实际的活菌数,A不正确;

B、当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落,B正确;

C、平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌，但前者不能用来计数,C正确;

D、在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果以减小实验误差,D正确．

菌落数目的统计

16．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是

A.都只能用于固体培养基接种B.都能用于微生物的计数

C.接种培养后均可获得单菌落D.接种工具使用后需要灭菌

微生物接种到固体培养基常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法接种可以形成单菌落，所以常用来进行微生物的计数．

解：

A、将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；

B、稀释涂布平板法接种可以形成单菌落，所以常用来进行微生物的计数，平板划线法常用来筛选分离微生物，B错误；

C、两种接种方法在培养基中形成单个菌落，C正确；

D、为防止杂菌污染．接种工具需要灭菌后使用，D正确；

故选：

B．

微生物的分离和培养；

测定某种微生物的数量．

17．在甲、乙、丙、丁四组相同培养基上分别接种正常的R型菌、正常的S型菌、加热杀死的S型菌、加热杀死的S型菌和正常的R型菌。

培养一段时间后，观察菌落的生长情况，下列有关叙述中正确的是

A．从S型活菌中提取的DNA与R型活菌混合，培养基中只有S型一种菌落

B．利用培养的细菌在小鼠体内转化时，R型菌先上升后下降

C．将加热杀死的S型菌和正常的R型菌混合培养，可证明促使R型菌转化为S型菌的物质是S型菌的DNA

D．甲、乙、丙三组可作为丁的对照组

S型活菌的DNA仅能使部分R型活菌转化为S型活菌，故培养基中有R型和S型两种菌落，A错误；

利用培养的细菌在小鼠体内转化时，R型菌先下降后上升，B错误；

将加热杀死的S型菌和正常的R型菌混合培养，可证明S型菌体内存在着某种转化因子，但无法证明转化因子就是S型菌的DNA，C错误；

甲、乙、丙三组可作为丁的对照组，D正确。

本题考查肺炎双球菌转化实验的过程。

18．对分解尿素细菌的初步筛选中，加入酚红指示剂的目的是

A．指示剂变蓝能认定该菌能分解尿素

B．对菌种进一步鉴定

C．筛选分解尿素的细菌

D．培养基中缺乏酚红作营养物质

在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。

酚红指示剂在pH升高后将变红，这样可以准确鉴定该种细菌能够分解尿素。

考查酚红指示剂的目的。

点评：

难度较小，理解酚红指示剂在pH升高时会变红的原理。

19．需要在火焰旁操作的有

①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养

A．①②④B．①④⑤C．②③⑤D．②③④

在土壤中尿素分解菌的分离与计数中，取样用的小铁铲和信封需要灭菌，所取的土壤样品不能灭菌，称取土壤样品时和进行梯度稀释及涂布平板时需要在酒精灯火焰旁进行，所以②③④操作需要在火焰旁进行。

本题主要考查无菌操作的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。

20．下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是（）

A．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数

B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落

C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌

D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少

稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数，在稀释涂布平板法计数时，选择“菌落数在30-300的实验组平板进行计数”以减少实验误差，A错误；

接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落，B正确；

尿素分解菌的氮源是尿素，其他不能利用尿素的菌就不能生长，所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌，尿素分解菌可以将尿素分解为氨，可以使酚红指示剂变红，故C正确；

大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少，D正确．

微生物的利用

【名师点睛】1．微生物的分离

①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”，专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖．这些物质主要是一些特殊的碳源、氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物．

②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势．如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖．

2、接种方法

平板划线法和稀释涂布平板法

3、计数方法

显微镜直接计数和稀释涂布平板法

二、非选择题

21．已知微生物A可以产生脂肪酶，微生物B可以产生油脂。

这两种物质可用于生物柴油的生产。

回答有关问题：

（1）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物六单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以油脂为____________的固体培养基进行培养。

（2）显微观察时，微生物B菌体中的油脂通常可用____________染色。

微生物B产生的油脂易挥发，可选用____________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（3）若要测定培养液中微生物A的菌体数，可在显微镜下用____________直接计数；

若要测定其活菌数量，可选用____________法进行计数。

（4）加酶洗衣粉是含有酶制剂的洗衣粉，除脂肪酶之外，常用的酶制剂还有____________等。

（至少写出两种）

【答案】碳源苏丹Ⅲ（或者苏丹Ⅳ）水蒸气蒸馏法血细胞计数板稀释涂布平板蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶

【解析】【试题分析】

本题考查微生物的分离和培养、从生物材料中提取某些特定的成分的相关知识。

需要考生根据题意梳理并回忆相关知识点，然后对各小题进行分析作答。

（1）筛选能产生脂肪酶的微生物A时，应该使用只有目的菌能够生存的，而其他微生物不能生存的选择培养基，所以培养基中应该添加油脂作为唯一碳源。

（2）油脂通常可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）；

由于微生物B产生的油脂易挥发，所以可选用水蒸气蒸馏法从菌体中提取。

（3）若要测定培养液中微生物A的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数（该种方法测定的菌体包括活菌和死菌）；

若要测定其活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数。

（4）加酶洗衣粉中除脂肪酶之外，常用的酶制剂还有蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶等。

22．（7分,每空1分）尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用。

生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

（1）此培养基能否用于植物组织培养？

，理由是。

（2）培养基中氮源是，这种培养基在功能上属于培养基,目的是只允许能合成的微生物生长，其他微生物均不能生长。

（3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用法进行接种。

（4）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入，使指示剂变红

【答案】

（1）不能缺少植物激素

（2）尿素选择脲酶

（3）稀释涂布法或平板划线

（4）酚红

（1）该培养基的成分中没有植物激素，因此不能用于植物组织培养。

（2）该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中加入尿素的目的是细菌能够产生脲酶能高效降解尿素的细菌（目的菌），不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖，因此从功能上看，该培养基属于选择培养基。

（3）从土壤中分离获取上述特定微生物，常采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种．

（4）鉴定尿素分解菌常采用酚红指示剂染色，使指示剂变红色。

本题主要考查微生物的分离的相关知识，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。

23．炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。

对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。

（1）细菌培养：

采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。

（2）细菌鉴定：

实验流程如下图所示

①对配制的液体培养基需采取方法灭菌；

实验所用液体培养基的碳源为（填“无机碳”或“有机碳”）。

在提供主要营养物质的基础上，培养基还需要满足炭疽杆菌生长对、以及特殊营养物质的要求。

②挑选可疑菌落制片后，用观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。

③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是，对照组试管中应加入，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；

反之则排除。

④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。

与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有、。

【答案】①高压蒸汽有机碳pH、氧气

②显微镜

③细菌大量繁殖等量生理盐水浑浊度

④吞噬细胞、浆细胞

（1）液体培养基灭菌应采用高压蒸汽灭菌法。

炭疽杆菌是异养生物，所以液体培养基中的碳源应是有机碳。

培养基除了提供营养物质外还要满足微生物对pH、氧气及特殊营养物质的要求。

（2）要观察细菌的形态需要用显微镜。

（3）液体培养基变浑浊，原因是因为细菌大量繁殖，对照组应遵循单一变量原则应加入的是等量的生理盐水。

如果实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，说明可能是被炭疽杆菌感染。

因为4小时时浑浊度较高，而6小时后变清，噬菌体是专门寄生在炭疽杆菌体内的，大量繁殖后能将该菌体裂解，浑浊度下降，说明之前繁殖的细菌是炭疽杆菌。

（4）产生抗体的是体液免疫，参与体液免疫的有吞噬细胞、T细胞、B细胞，记忆B细胞和浆细胞，因此还应有吞噬细胞和产生抗体的浆细胞。

本题考查微生物的培养相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

24．如图是以鲜葡萄汁为原料，制作葡萄酒和葡萄醋的过程，回答下列问题：

（1）甲过程结束后，葡萄酒制作是否成功，可用_________溶液来鉴定。

乙过程中使用的微生物是醋酸菌，制作葡萄醋需要向发酵罐提供__________________。

（2）若直接用洗净的红葡萄制作果酒，最后得到的葡萄酒呈红色，这是由于_________造成的，发酵过程中每天搅拌2〜3次的目的是______