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生物技术
一、名词解释
1.生物技术:
(广义)以生物有机体为原料,生产产品的技术。
(狭义)利用经DNA重组技术修饰过的有机体或其产品技术
指以现代生命科学原理为基础,结合基础科学的原理与先进技术手段,改造生物体或加工生物原料,生产人类所需产品,或达到某种目的综合性的学科
2.基因工程:
(DNA重组技术)应用人工方法在体外切割、拼接和重组生物的遗传物质,并将重组后的遗传物质导入新的个体,从而改变生物遗传或者获得特殊产物的系统技术。
3.细胞工程:
在体外条件下对单个细胞进行培养、繁殖或者人工诱导细胞变异,从而达到改良、创造生物个体,加速个体繁育和获得有用物质的系统技术。
4.发酵工程:
利用微生物的快速生长、具有特殊代谢能力等特点,在适宜条件下生产有用物质的系统技术。
5.酶工程:
利用天然的或经修饰的酶、细胞器和细胞所具有的特殊催化作用,通过生物反应器和工艺过程生产有用产品的系统技术。
6.蛋白质工程:
通过对基因的人工改造或蛋白质的特殊修饰,结合计算机辅助设计、蛋白质构象学、蛋白质结晶学和蛋白质化学,从而获得新型蛋白质的系统技术。
7.引物酶:
一种RNA聚合酶,在模板的复制起始部位催化互补碱基的聚合,行程短片段RNA
8.转录:
生物体以DNA为模板合成RNA的过程
9.RNA剪接:
除去内含子外显子连接起来,产生成熟的有功能的mRNA分子的过程
10.加帽:
在5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸。
mRNA5’端这种结构称为帽子
11.加尾:
大多数真核生物的mRNA3’末端都有由100-200个A组成的Poly(A)尾巴
12.翻译:
把核酸中四种碱基组成的遗传码翻译方式转变为蛋白质中20种氨基酸的排列顺序。
13.基因:
是遗传的最基本的物理和功能单位。
它是坐落在染色体特定位点上的、编码特殊功能产物的、控制生物特定性状并能够遗传的DNA片段。
24.核酸酶:
通过切割相邻的两个核苷酸之间的磷酸二酯键从而导致核酸分子降解的酶。
DNA酶:
专门从3’或5’末端水解DNA单链或者双链为单核苷酸或寡聚核苷酸小片端核酸酶。
(作用:
去除RNA中的DNA)
RNA酶:
核酸酶中专门降解RNA单链的酶降解产物为单核苷酸或寡聚核苷酸片段(作用:
去除DNA样品中的RNA)
25.限制酶的星活性:
非适条件下,酶识别的序列和切割都发生变化的现象。
26.DNA连接酶:
催化DNA片段连接的酶。
27.聚合酶:
催化生物体内核酸生物合成的酶。
28.逆转录酶:
以RNA为模板,合成互补单链DNA的酶。
29.末端转移酶:
添加同聚物尾巴到双链或单链DNA分子的3’末端的酶。
30.碱性磷酸酶:
催化从DNA两端或一端去除磷酸的酶。
31.载体:
能够携带外源DNA片段进入受体生物细胞并进行复制表达的特殊DNA片段。
A.克隆载体主要用于外源DNA片段体外复制的载体
表达载体:
除具有克隆载体的作用外,同时可以使外源DNA片段上基因得到表达的载体
32.质粒载体:
由原核生物中的质粒加工改造而成的载体。
33.噬菌体载体:
由病毒DNA或RNA加工改造成的载体
34.柯斯质粒载体:
由噬菌体中的柯斯位点和细菌质粒组合改造形成的载体。
35.质粒:
原核生物中核染色质以外的,能自主复制的双链环状DNA分子。
36.PCR聚合酶链式反应:
根据生物体内DNA复制原理,利用目标DNA片段两侧的两个短的单链引物,在体外快速扩增特定DNA片段的技术。
A.RT-PCR:
反转录PCR,先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增
37.电泳:
带电荷的物质在电场中的趋向运动。
38.核酸电泳:
核酸分子由于带负电荷,在电场中向阳极定向移动。
39.分子杂交:
通过生物大分子内或生物大分子之间的特异结合,鉴定生物大分子的方法。
A.核酸分子杂交:
指非同一分子来源但具有互补序列的两条多核苷酸链,通过碱基互补配对原则形成稳定的双链分子的过程。
B.探针:
指经过特殊化合物标记的、特定的、已知的核苷酸序列。
40.DNA杂交(Southern):
某种DNA片段如果与已知序列DNA(探针)之间存在碱基连续互补,则在解链后复性过程中来源于不同分子的单链在该区段形成稳定双链DNA的过程。
41.RNA杂交(Northern杂交):
某种RNA片段如果与已知序列DNA(探针)之间存在碱基连续互补,则在解链后复性过程中来源于不同分子的单链在该区段就能形成RNA—DNA双链区的过程
42.蛋白质杂交(Western杂交):
利用抗原与抗体特异结合的原理来进行检测的
43.筛选:
从大量受体中筛选出可能具有目的基因的个体或细胞挑选出来。
44.上游技术:
基因片段的获得、验证和表达载体构建为体外DNA重组,一般认为是基因工程的上游技术
45.下游技术:
转化和转化体筛选主要是进行目的基因向目标生物体内的转移、体内重组和重组体筛选鉴定,成为基因工程的下游技术
46.目的基因:
基因工程中用来改造生物个体或用于生产某种产物的有用基因
A.标记基因:
克隆载体中含有的供选择转化子的基因。
47.基因克隆:
将目的基因片段连接到克隆载体上并进行大量复制的过程。
48.平末端连接:
平末端酶酶切获得的或粘末端经补平后的片段的连接
粘末端连接:
粘末端酶酶切后获得的片段的连接
T/A克隆:
经常规PCR反应获得的片段的连接
49.重组克隆筛选:
将已经连接外源基因的载体(DNA)向受体生物细胞中导入,从大量的受体中筛选出成功导入目的基因克隆载体的个体。
50.表达载体的构建:
把目的基因的阅读框架(编码序列)插入适宜的表达载体(空)的启动子、终止子中间、形成表达框架的过程。
51.一元载体系统:
所有基因转移、基因表达元件位于同一质粒上。
52.双元载体系统:
由微型Ti质粒和辅助Ti质粒两个独立质粒构成。
53.转化:
把外源DNA导入生物体,是生物体发生某种变化的过程
转导:
以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程
54.基因转移:
把一种生物的基因导入到另外一种生物体内的过程
55.受体:
用于接受外源基因片段的生物个体、细胞或组织
56.分子标记:
(广义)指可以穿的与生物的表性性状连锁的可检测的DNA序列或蛋白质
(狭义)指DNA标记
A.形态标记:
指那些能够明确显示遗传多样性的外部形态特征。
B.细胞学标记:
细胞有丝分裂的中期和早后期染色体的核型和染色体显带技术
C.生化标记:
指利用植物代谢过程中的具有特殊意义的生化成分或产物进行遗传多样性标记的技术。
57.发酵工程下游处理:
指在发酵结束后,对发酵液或生物细胞进行分离和提取精制,将发酵产物制成合乎要求的成品。
58.生物信息学:
综合计算机科学、信息技术和数学的理论和方法来研究生物信息的交叉学科
59.生物信息数据库:
用于收集、整理、储存、加工、发布和检索数据的系统
60.遗传标记:
指可追踪染色体、染色体某一节段或者某个基因座在家系中传递的任何一种遗传特性。
61.遗传多样性(遗传变异)遗传信息的总和,种内不同群体之间或者一个群体内不同个体的遗传变异总和。
62.分子标记辅助选择:
借助分子标记达到对目标性状基因型选择的方法
63.分子遗传图谱:
通过遗传重组交换结果进行连锁分析所得到的基因在染色体上相对位置的排列图
64.转座子:
一类可移动的遗传因子。
65.转座:
一段DNA顺序可以从原位上单独复制或断裂下来,然后插入基因组另一位点,并对其后的基因起调控作用的过程
66.长末端重复序列:
反转录转座子的两端各有一个长末端重复序列,不编码蛋白质,但含有启动子、增强子等调控元件。
67.多态性:
个体之间DNA的核苷酸序列存在差异
A.单核苷酸多态性(SNP)由单个碱基变异引起的DNA序列多态性
B.限制性片段长度多态性(RFLP)由于多态性,而改变了限制性内切酶的酶切位点择可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化。
C.随机引物扩增多态性DNA(RAPD)在PCR技术的基础上,以一系列不同的随机排列的寡聚核苷酸单链为引物,与变性后的模板链退火,在DNA聚合酶的作用下合成一段新的互补DNA链
D.扩增片段长度多态性(AFLP)在随机扩增多态性和限制性片段长度多态性技术上发展起来的DNA多态性检测技术
68.植物细胞悬浮培养:
将游离的植物细胞按一定密度在液体培养基中进行悬浮培养的技术
69.单细胞培养:
指单个细胞的培养
70.原生质体:
植物细胞除去细胞壁后的部分,是一个质膜包围的“裸露细胞”
71.体细胞杂交:
两种异源原生质体,在诱导剂诱发下相互接触,从而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成杂种细胞,进一步发育成杂种植物体
73.cDNA:
以mRNA为模板,由逆转录酶催化形成的互补DNA
74.报告基因:
其编码产物能够被快速的测定,通过它的表达来标定目的基因是否导入到受体细胞、组织或器官中的一类特殊用途的基因,起到报告作用
二、填空题
A.改造Ti质粒:
取代致瘤和不必要基因
B.报告基因类型:
β-葡萄糖醛酸乙酰转移酶基因(gus)、胭脂碱合成酶(nos)章鱼碱合成酶基因(ocs)荧光素酶基因(luc),绿色荧光蛋白基因(GFP)
1.生物技术分类:
根据发展史:
传统生物技术、现代生物技术;根据应用领域:
农业、工业、食品、化工、能源、医药、环境、军用生物技术;根据研究对象:
动物、植物、微生物生物技术;根据操作对象和研究技术:
基因工程、细胞工程、发酵工程、蛋白质工程、酶工程
(基因、细胞、微生物、生物蛋白质、生物酶)
2.生物技术理论基础:
生物科学(生物学、生理学、遗传学)物理学、化学、微电子、数学
3.生物技术研究技术:
物理学技术、化学技术、计算机技术。
生物技术应用范围(应用领域)
4.生物技术特征:
高效益、高智力、高竞争、高投入、高风险、高势能
5.DNA化学组成:
C、H、O、N、P基本构成单元:
脱氧核苷酸(dNTP:
dATP/dTTP/dGTP/dCTP)
一级结构:
脱氧核苷酸排列顺序;二级结构:
双链螺旋空间结构;三级结构:
超螺旋结构
6戊糖:
核糖与脱氧核糖
7.RNA一级结构:
碱基排列顺序;二级结构:
单链螺旋结构;三级结构:
超螺旋结构
8.DNA复制模板:
半保留复制;底物:
核苷酸链的直接底物:
dNTP
DNA复制酶包括:
DNA聚合酶、引物酶、解链酶、拓扑异构酶
9.转录后加工:
剪接、加帽、加尾
10.中心法则:
11.基因的结构元件:
启动子、外显子、内含子、终止子
12.基因工程的工具:
生物酶系统、载体和方法系统
13.基因工具酶:
核酸酶(DNA酶、RNA酶)限制性内切酶、DNA连接酶、聚合酶、逆转录酶、末端转移酶、碱性磷酸酶
14.限制性内切酶命名原则:
属名+种名+株名
15.限制酶识别序列特征:
大部分限制性核酸内切酶识别DNA序列具有回文结构特征,切断的双链DNA都产生5’磷酸基和3’羟基末端
限制性核酸内切酶产生末端类型:
3’突出粘性末端、5’突出粘性末端、平末端
16.影响限制性内切酶活性的因素:
DNA纯度、反应温度、反应体系(Mg2+,PH=7.4,酶量不超过10%、Tris-Cl稳定中性PH)
17.诱发星活性的因素:
高甘油含量、酶用量过多、低离子强度、高PH值、有机溶剂、其它二价阳离子
18.DNA连接酶分为平末端连接酶和粘性末端连接酶(T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶)
19.聚合酶分为DNA聚合酶(催化DNA合成的)和RNA聚合酶(催化RNA合成的)
20.载体分类:
根据应用目的:
克隆载体、表达载体;
根据载体来源:
质粒载体、噬菌体载体、柯斯质粒载体
21.核酸电泳根据介质可分为琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳
22.常用DNA染色法:
溴化乙锭染色法、银染法
23.分子杂交:
DNA杂交、RNA杂交、蛋白质杂交
24.基因工程操作步骤:
目的基因获得、目的基因复制与验证、目的基因表达载体构建、转化、
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