凝胶渗透色谱净化结合气相色谱三重四极杆质谱法测定植物油中多Word文档格式.docx

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均购自德国Dr.EhrenstorferGmbH公司，先分别用正己烷或丙酮配制成1000mg/L的单标，然后稀释成5mg/L的混合标准溶液待用；

乙酸乙酯、环己烷、正己烷：

色谱纯，美国Fisher公司；

菜籽油、玉米油、和大豆油：

市售。

1.2仪器与设备

TSQ8000气相色谱-三重四极杆质谱仪：

美国ThermoFisherScientific公司；

PrepLincGPC&

AccuVap凝胶渗透色谱在线真空浓缩仪：

美国J2Scientific公司；

BSA224S-CW电子天平：

德国赛多利斯集团；

QL-902旋涡混合器：

海门其林贝尔仪器制造有限公司。

1.3样品前处理

称取1.0g样品于10mL玻璃管中，用乙酸乙酯-环己烷（1:

1,V/V）溶液定容至10mL，充分涡旋混匀1min。

凝胶渗透色谱仪带紫外检测器，波长为254nm，流动相为乙酸乙酯-环己烷（1:

1,V/V），流速为5.0mL/min，进样量5mL，收集时间段为7~20min，在线真空浓缩仪将收集的组分使用液位近干的方式进行浓缩，在线使用正己烷溶液将样品定容至1mL，最后自动转移至进样瓶中供气相色谱-三重四极杆质谱仪分析测定。

1.4仪器条件

色谱柱：

TG-5ms（30m×

0.25mm×

0.25μm）；

程序升温：

70℃保持2min，以25℃/min升温至150℃，再以5℃/min的速率升温至280℃保持4min，最后以5℃/min的速率升温至300℃保持8min；

进样口温度：

220℃；

载气：

高纯氦气；

载气流速：

1mL/min；

不分流进样；

进样量：

1μL。

质谱电离方式：

电子轰击电离源（EI）；

电离能量：

70eV；

传输线温度：

300℃；

离子源温度为：

280℃；

碰撞气：

高纯氩气；

质谱检测方式：

选择反应监测（SRM）模式。

2结果与讨论

2.1质谱条件优化

使用气相色谱三重四极杆质谱，可以实现有机磷、有机氯、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯、三唑类等多种农药的同时检测，这些不同种类的目标物经色谱柱分离后进入质谱检测器，选定特征母离子后进行碰撞裂解，选择灵敏度和质荷比合适的子离子进行定性和定量分析。

这种多级离子的方式可以分开气相色谱上不容易分离的农药种类，与单级质谱相比，可以有效消除基质干扰[19-21]。

在进行子离子扫描时，通过全扫描被挑选出来的母离子经过碰撞池碎裂，然后进行碰撞裂解，并且扫描所有产生的子离子。

虽然所形成的子离子TIC强度远小于母离子TIC强度，但由于背景噪声的减小反而提高了信噪比。

图1中相同浓度的腐霉利标准溶液，当使用选择离子扫描（SIM）时，m/z285作为其定量离子信噪比只有621，当在SRM模式下，m/z285>

53作为其定量离子对时具有高达1468的信噪比。

选择反应监测扫描模式由于只监测有限的几个离子，这样提高了抗干扰能力，选择性更高，因而灵敏度也最高，这种检测方式用最小的信号损失换取了最大的噪音降低。

35种农药及其代谢物的质谱条件具体见表1。

图1腐霉利的选择离子扫描（a）和选择反应监测模式（b）谱图

表135种农药及其相关代谢物的保留时间、离子对、碰撞能量

序号

农药名称

保留时间/min

定量离子对

定性离子对1

定性离子对2

碰撞能量/V

1

2,4,6-三氯苯酚

7.84

195.9>

97.0

131.9>

132.0

281016

2

氟乐灵

12.24

306.1>

264.1

264.0>

160.1

206.1

10146

3

久效磷

12.41

127.0>

109.1

95.0

192.0>

127.1

121610

4

乐果

13.30

87.0>

42.1

45.7

93.0>

63.0

10168

5

噻节因

13.59

54.2>

39.0

118.0>

43.0

58.0

6168

6

五氯硝基苯

14.07

294.9>

236.9

236.8>

119.0

143.0

142222

7

甲基对硫磷

16.09

263.0>

109.0>

79.0

1288

8

七氯

16.36

99.9>

65.1

271.8>

237.0

235.1

121412

9

环氧七氯

17.00

352.8>

262.9

262.9>

192.9

354.7>

264.9

163012

10

腐霉利

17.21

285.0>

53.0

96.0>

53.1

67.1

101610

11

毒死蜱

17.81

198.8>

171.0

109.0

257.8>

166.0

123422

12

对硫磷

17.97

291.1>

155.0>

125.1

81.0

12832

13

顺氯丹

19.61

372.8>

266.0

301.0

142.9

201020

14

多效唑

20.06

236.1>

125.0

167.1

125.0>

89.0

101018

15

反氯丹

20.55

301.1

236.7>

201022

16

丙溴磷

21.16

338.9>

269.0

207.8>

99.0

17

氟硅唑

21.55

233.1>

165.1

151.6

206.1>

137.0

361024

18

醚菌酯

21.70

116.0>

206.0>

116.1

131.0

151518

19

乙硫磷

22.84

153.0>

231.0>

129.0

175.0

102212

20

炔螨特

24.62/24.67

135.1>

107.1

173.1>

117.1

130.2

121010

21

增效醚

24.84

176.1>

131.1

148.9>

103.0

152525

22

三氯杀螨醇

25.92

139.0>

111.0

75.1

250.0>

139.1

122612

23

联苯菊酯

26.06

181.0>

166.2

141.2

153.1

10188

24

甲氰菊酯

26.14

97.1>

55.1

126.8

151.9

82822

25

伏杀硫磷

27.21

182.0>

111.1

138.1

14308

26

吡丙醚

27.39

136.1>

78.0

226.1>

77.1

96.1

203010

27

双甲脒

27.64

120.8>

106.1

162.2>

105.9

132.1

102010

28

高效氯氟氰菊酯

27.86

180.9>

152.0

197.0>

161.2

208.0>

20630

29

丙硫克百威

28.53

163.0>

135.0

190.2>

102.0

61410

30

氯菊酯

29.24/29.62

183.1>

168.0

91.1

153.0

101212

31

咪鲜胺

29.91

180.1>

308.0>

70.0

69.2

101516

32

氯氰菊酯

31.13/31.3231.47/31.54

152.1

61220

33

氟氰戊菊酯

31.42/31.94

199.1>

157.1

107.0

157.0>

102012

34

氰戊菊酯

32.90/33.56

167.0>

225.1>

119.1

147.1

81610

35

氟胺氰菊酯

33.54/33.72

250.1>

55.2

200.1

208.1

181820

2.2GPC条件优化

GPC净化方法是一种分离大分子类干扰物的方法，能把农药从植物油的复杂基质中分离出来，因此首先要确定植物油基质和农药混合标准溶液的分离时间。

将1.0g植物油样品溶解于10mL乙酸乙酯-环己烷（1:

1，V/V）中，按照1.3步骤进行处理，然后使用乙酸乙酯-环己烷（1:

1，V/V）将农药混合标准溶液稀释成一定浓度后，同样按照1.3步骤进行处理，即确定收集时间为7~20min。

全自动凝胶渗透色谱仪可以进行在线真空浓缩样品，包括完全蒸干和液位传感两种到达浓缩终点的模式。

浓缩条件的设定包括温度和真空度，可以影响对温度不稳定的农药加标回收率。

当收集的馏分完全蒸干再复溶时，久效磷和咪鲜胺的回收率不足60%（如图2所示）。

液位近干模式时大部分农药的加标回收率大于60%，此时加热温度和真空度的选择是关键。

当温度为52℃、真空度为29.3kPa时（图2中液位近干1），久效磷的回收率还是不足60%，当温度为47℃、真空度为26.7kPa时（图2中液位近干2）目标农药的回收率均大于70%。

图2不同凝胶渗透色谱条件下农药加标回收率

2.3线性范围和检出限

使用正己烷溶剂将5mg/L的混合标准储备液逐级稀释，配制成不同浓度的混合标准溶液，按照1.4的实验条件进行测定，以35种农药及相关代谢物的峰面积对相应的质量浓度绘制标准曲线，求得线性方程及相关系数。

以S/N=3计算检出限（LOD），以S/N=10计算定量限（LOQ），线性范围、线性相关系数及检出限、定量限见表2，35种农药及相关代谢物混合标准溶液的总离子流图（TIC）见图3。

表235种农药及其相关代谢物的线性范围、相关系数、检出限、定量限

线性范围/mg/L

线性方程

相关系数

检出限/mg/kg

定量限/mg/kg

0.01~0.2

Y=3.737e4X

0.9920

0.002

0.006

Y=7.736e4X

0.9952

0.02~0.2

Y=1.66e4X

0.9919

0.01

0.03

Y=2.21e4X

0.9936

Y=1.526e4X

0.9909

Y=1.906e4X

Y=1.427e4X

Y=4.659e4X

0.9918

Y=3.85e2X

0.9916

0.005

0.015

Y=5.198e4X

0.9921

Y=1.854e4X

0.9942

Y=1.541e5X

0.9950

Y=2.196e4X

0.9967

0.003

0.010

Y=7.948e4X

0.9944

Y=1.846e4X

0.9966

Y=8.309e3X

0.9915

Y=2.445e4X

Y=1.335e5X

0.9906

Y=7.104e4X

0.9971

Y=7.383e4X

0.9965

Y=1.804e5X

0.9911

Y=3.167e5X

Y=1.52e5X

Y=4.584e4X

Y=2.037e4X

0.9910

Y=1.986e4X

Y=2.705e4X

0.9905

Y=2.727e4X

0.9908

Y=1.763e4X

0.9934

Y=1.302e4X

0.9914

Y=1.191e3X

0.9943