血栓弹力图标准操作规程Word下载.docx
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2、R时间因使用抗凝剂或凝血因子缺乏而延长,因血液呈高凝状态而缩短。
3、R延长能通过注射FFP(新鲜的冰冻血浆)而纠正。
(FFP含有丰富的凝血蛋白)
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K时间(从R时间终点至描记图幅度达20mm所需的时间):
1、评估血凝块强度达到某一水平的速率(20mm幅度);
2、通过高纤维蛋白原水平和较小程度地通过血小板功能来缩短K,而影
响血小板功能及纤维蛋白原的抗凝剂能延长K;
3、K时间延长通过注射cryo(冷沉淀)与FFP来纠正;
Alpha角度(从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角):
1、血凝块动力学特性;
2、影响Alpha角度的因素与K时间相同(见上);
3、参数Alpha角度与K时间密切相关,两者都是反映血凝块聚合的速率。
但两者之间又存在区别,在凝血处于极其低凝状态时,血凝块强度的最终强度是幅
度达不到20mm,此时K不能被定义。
因此,Alpha角度比K时间更全面、更易理解。
4、6个单位的cryo使a曾加9.4°
最大幅度MA(描记图上的最大幅度,即最大切应力系数):
1、MA反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度及血凝块形成的稳定性;
MA主要受纤维蛋白原及血小板两个因素的影响,其中血
2小板的作用要
、
比纤维蛋白原大,血小板质量或数量的异常都会影响到MA值;
3、10个单位血小板可使血小板计数增加40,200±
31,400/mm3,MA增加了
13.2mm。
A(任一时刻描记图曲线两点间的距离):
1、用来监测任一时刻曲线两点间的扫描宽度,是血凝块强度或弹性函数,A值用单位mm来计量;
2、MA值在确定前与A值相等;
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3、MA值确定后A值测量血凝块溶解的信息。
TMA时间(从凝血开始至MA值确定所需用的时间):
1、TMA=TimeToMA,血凝块动力学特性的综合测量;
2、TMA包含血凝块的形成速率,评估形成稳定血凝块所需用的时间。
G(血凝块强度,即最大切应力强度):
1、将A值进行转换使其能实际测量血凝块强度(G),用单位d/sc来计量;
2、G值在MA值确定后的同时也被确定。
3、G=5000A/(100-A),描述Clotfirmness.
EPL(预测在MA值确定后30分钟内血凝块将要溶解的百分比)
1、EPL=EstimatePercentLysis;
2、EPL=100(MA-A30)/MA;
CL30(测量在MA值确定后30分钟内血凝块溶解剩余的百分比):
1、CL30V85%意示处于高纤溶状态,即纤溶亢进;
应使用抗纤溶药来纠正。
2、CL30=100X(A30/MA)
LY30(测量在MA值确定后30分钟内血凝块幅度减少速率)
1、LY30>
7.5%意示处于高纤溶状态.即纤溶亢进;
应使用抗纤溶药
来纠正。
Cl(凝血综合指数)
V-3低凝-3V正常V+3>
+3高凝
E(弹性常数)
1、E是标准化的G,作为一个弹性常数;
2、EMX是最大振幅时的E;
EMX=(100XMA)/(100-MA);
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TPI(血小板动力学指数)
1、TPI=EMX/K
2、TPI=ThrombodynamicPotentialIndex,血凝块动力潜能指数;
6v正常v15
>
15咼
CLT时间(测量从MA值确定后
A值达到2mm的时间)
1、CLT=Clotlysistime
(也称为TTL=Timetolysis)血块溶解时间。
LTE时间(CLT的估计值)
LTE=Lysistimeestimate
估计的血块溶解时间(CLT)。
在MA出现后30秒电脑开始计算LTE,并不断更新直到MA出现后60分钟。
如果血块在60分钟之前已溶解,此时LTE为实际血块最终溶解时间。
如果LTE大于3小时,该值显示“>
3hrs”LTE是根据弹力图的斜率并外推到振幅为2mm计算得到。
AA%INHIBITION
判断血小板血栓素受体抑制剂对血小板抑制的百分比,如阿司匹林等.
ADP%INHIBITION
判断血小板ADP受体抑制剂对血小板抑制的百分比,如氯吡格雷等
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二方法确认可
(包括线性、不精密度、检出限、灵敏度和特异性)
准确度
为求证TEG的测量准确度,Haemoscope公司进行了一项评估,将TEG5000型分析仪和TEG3000型分析仪的测量性能表现进行对照。
准备40种冷冻干血样。
每种血样被分为两份,同时装载到一校准后的5000型分析仪和3000型TEG仪上。
然后在37摄氏度下,按本手册介绍的检测步骤,用相同的TEG软件同时对两份血样进行测试。
以下四参数就是经这种标准检测测定的。
R(mm)
-从血凝开始的距离(时间,以2mm/分钟的速度)
K(mm)
=从标准血凝块强度的距离(时间,以2mm/分钟的速度)(20mm振幅)
MA(mm)
=血凝块强度最大值(振幅,单位mm)
Angle(deg):
=血凝块增长率的斜率
用t测试对检测得到的数据进行分析,这是一种建立在两样本零差别假设基础上,将接受测试的两个相同样本的测试结果进行对照的统计学检验方法。
测验结果证明5000系列TEG的样本测量性能与3000系列分析仪一致。
分析显示,5000系列和3000系列结果在P<
0.05,TEG参数R,K,MA和角度没有实际的统计学意义。
并且,两相等血样间的绝对差(见下表)没有超出仪器精确程度允许的误差范围,土1个单位。
下表列出,两种型号仪器的两相等血样的测量结果及标准偏差,两相等血样的差别及标准偏差,t值和2-tail的概率。
第7页共33
参数测量对照同一型血样分成的两相等血样的测量结果对照(血样类型=40)
参数
Angle(deg)
5000型(血样1
量结果土标准偏)
11.5625±
1.178
2.1500±
0.379
73.9625±
2.382
30.6250±
1.036
3000型(血样2
测量结果土标准偏差)
11.7500±
.276
2.2750±
0.423
73.3750±
3.06
30.4010±
1.261
血样间差别(血样土标准
偏差)
0.1875±
0.354
0.1250±
0.090
0.5875±
0.613
0.2240±
1.498
T值
0.68
1.39
0.96
0.87
DF
「78
78
2-TAILP值
0.497
0.168
0.341
0.388
精准度为验证使用
本手册推荐的激活剂(Celite,组织因子,凝血酶,DAPTTIN,高岭土--由Haemoscpe公司提供)进行检测的测试精确度,Haemoscpe^司做了以下评估:
按照TEG用户手册介绍的步骤,从5位未发生凝血问题的健康人每人抽取10立方厘米血样。
将每份血样分为8份,使用4台TEG仪器,测试的时间跨度为两天;
对加入Haecomscop高岭土的血样,测试时间跨度5天。
对每种活化剂来说,需要被用来处理40个血样。
基于TEG测量数据,对不同活化剂处理的血样来说,TEG参数的精确度可以用变化系
数(CV)百分比表示如下:
硅颗粒(品牌名称:
Celite;
Haemoscop公司提供)
KANGMA
R
7.6%2.4%4.1%
8.7%
组织因子(品牌名称:
Hemolianee;
制造商:
Ortho)
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K
ANG
MA
13.1%
12.9%
2.3%
3.3%
凝血酶(品牌名称:
ThrombinSigma,制造商:
Sigma)
13.2%
13.4%
3.5%
3.8%
高岭土/Sulphatide磷脂混合物
(品牌名称:
DAPTTIN;
Immuno)
12.7%
17%
2.8%
5.0%
高岭土H/Sulphatide/磷脂混合物
Kaolin;
Haemoscope^司提供)
4.4%
6.3%
比较而言,TEG测量的参数CV值相对较小,而其他多数凝血测量仪器,CV值要高一些
正常值范围
Haemoscop在软件中提供了正常值范围参考,在下述表格里可以看到。
样本类型
样本量
Celite
10.0—
14.0
3.0—6.0
53.0—
67.0
59.0—68.0
132
Sodium
Clitrate+Celite
7.0—
13.0
3.0—5.0
61.0—
73.0
55.0—65.0
98
原血
31.0—
46.0
11.0—
21.0
22.0—
38.0
47.0—58.0
第9页共33
枸橼酸化原血
28.0—
49.0
49.0-
-59.0
组织因子
4.0—
2.0—
4.0
62.0—
61.0-
-69.0
178
(TF)
6.0
1.5—
-7.0
59.0—
53.0-
-65.0
41
Clitrate+TF
3.5
75.0
功能纤维蛋白原水平测试
有20位病人同意加入了这一项研究计划。
这20位病人年龄在22到62之间(平均年龄=34.9土11.9),其中,10位男性,10位女性。
他们的实验室纤维蛋白原水平在34.5和862毫克/分升之间。
这些研究对象不包括已知患有血凝因子不足或血凝缺陷,肝病,或需血液稀释或心肺支路的病患。
在静脉插入导管,将静脉血收集到两个含3.
8%柠檬酸纳的4.5cc硅化试管(BectonDickinson,Rutherford,NJ)
中。
在37摄氏度温度下将样本在TEG分析仪上运行45分钟。
从第一个试管中取出0.33立方厘米血样,混合20ul的.2MCaCb对其进行重新钙化,10uI的重组人体组织因子(加快获得MA参数)和4ul的ReoPro(2mg/ml)(EliLilly,Indianapolis,IN)成一个血样,进行MA测量。
重复进行这些分析,最终的MA值(以ReoPro表现的MAR)是多次分析结果的均值。
试管中血样剩余部分用于进行纤维蛋白原水平(使用克劳斯照片光学方法,纽约,长岛,医学实验室自动控制,MLAElectra1600c分析仪)的实验室检
测。
对第二个试管中的血样,连续进行两次通常的盐稀释,为的是获得更广范围的纤维蛋白原水平。
按前面描述的方法对稀释过的样本进行相同的样本准备和TEG测试,
随匹配样本送实验室分析纤维蛋白原。
线对应计算性回爲被用置定、间E当MA<
0值和测霞出的计学差蛋白原水平间的关系。
画出一条回归
目前研究证明,通过对经ReoPrc处理的血样MA值的测量,能提供对功能性纤维蛋白原的定量评估。
精确度
为证明TEG仪MA值的精确度,Haemoscope公司对经ReoPRo处理的血样MaR进行
了以下评估:
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按照TEG步骤,从5位未发生凝血问题的健康人每人抽取10立方厘米血样。
按前面介绍的程序,将每份血样分为8份,使用4台TEG仪器进行试验。
这样接收评估试验的ReoPrc处理血样共有40个。
基于TEG测量数据,平均值和标准差
TEG参数MaR精确度表示如下:
95%C丄及以变化系数(CV)百分比表示的
CV
4.5%
均值土标准差别95%C丄
22.8土1.121-25
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序号
检测项目
开单类型
取血种类
取血要求
采血管
采血量
1
普通检测
血栓弹力图实验
――高岭土
静脉或动脉
全血
安静环境,一
针见血
枸橼酸(蓝
盖)抗凝管
按刻度要求抽满
2
血小板图检测
安静环境,一针见血
枸橼酸(蓝盖)抗凝管肝素化(绿盖)抗凝管各一份
血栓弹力图实验氯吡格雷
血栓弹力图实验阿司匹林
三TEG?
实验检测取血要求
备注:
枸橼酸(蓝盖)抗凝管要求枸橼酸浓度3.2%,肝素化(绿盖)抗凝管要求肝素浓度>
14.5IU,每周
二、四上午抽血(不需要空腹)
TEG?
血栓弹力图实验血样准备描述1枸橼酸化全血血样程序:
备两个注射器,戴上手套,在安静环境下,用一根19G蝶形针,一针见血吸取样血,最初1ml弃用。
另外吸取足量血放在蓝瓶盖的聚丙烯试管内(含有浓度为3.2%的枸橼酸钠),待采血量达到试管要求的刻度时,停止吸取。
将试管封口后上下轻轻翻转3次
(切勿用力摇晃),使血与枸橼酸钠混合。
称为枸橼酸化的全血2肝素化化全血血样程序:
备两个注射器,戴上手套,在安静环境下,用一根19G蝶形针,一针见血吸取样血,最初1ml弃用。
另外吸取足量血放在绿瓶盖的聚丙烯试管内(含有肝素浓度>
14.5IU),待采血量达到试管要求的刻度时,停止吸取。
将试管封口后上下轻轻翻转3次(切勿用力摇晃),使血与肝素混合。
称为肝素化的全血
第12页共33
*cc*
四仪器和试剂
TEG检测需要TEG血1Om(20mf75Om+7l€€
口iooomr
3
di
TEG血栓弹力图仪结
图仪-5000,'
和配套的试剂(Kaolin,AA和ADP)的规格)
加样枪(需要
1.水平仪:
调平血栓弹力图仪的标准。
信号。
4.杯槽:
装载样品并进行加热。
2.电源按钮:
打开或关闭电源。
3.加温线:
传递温控模块的
5.水平调节支撑:
旋转以调平血栓弹力图仪。
6.马达按钮:
按压后马达运行,并有黄灯显示。
7.控制杆:
可移动到LOAD、TEST、EJECT三个位置。
8.杯架:
用来上下移动样品。
9.平台:
用来弹出样品。
第13页共33
五TEG?
质控检测操作流程
•调节水平仪
参照分析仪顶部的水平仪中水泡位置,调节分析仪底部的三个支撑脚(前面两个,后面一个),直到水泡居于中间。
水平仪(顶部)
温度读数一
lever杆在Load位置—
杯井—
杯架
水平调节支撑
第14页共33
.基线测试eTest
1)在主界面上点击“TEG”按钮,这是唯一能开始运行样品的界面。
如果这是一天中的第一个样品,一
个“Maintenancechecl”栏会随即出现,提示你以下要做的事情:
•调平•运行基线测试eTest-运行LevelI和LevelU质控品
2)点击“Checknow”,出现“Maintenance”对话框。
“Dailymaintenancd'
子菜单中会出现测出的基线值,可接受的范围为1800〜2300。
3)将Lever杆移到Test位置,选择通道,点击“eTest”。
可以选择所有的通道同时进行检测。
4)如果出现信息“Channelnotatequilibrium”或“eTestvalueoffcenter,则将Lever杆移到Load位置,待分析仪稳定后再进行测试。
5)一旦出现“eTestvalueOK'
后,将Lever杆移到Load位置。
如果不能出现该字样,请及时与销售商联系。
6)在TEG1分析仪电源打开的同时,进行其它几台TEG分析仪的基线测试。
7)点击“Done”,然后点击“OK”。
.运行质控
1对质控品【包括质控1(蓝瓶)和蒸馏水(绿瓶)】进行复温,保证十分钟以上温时间;
2打开电脑及TEG主机的“POWER键,电脑桌面上双击TEG图标进入TEG专用分析软件;
3下拉菜单中输入默认用户名SiteAdministrator,输入密码teg(小写),点击OK弹出选择操作者对
话框
4点击TemporaryOperator(选中变成蓝色),点击Logon,进入TEG主界面
a
5点击右上角TEG图标」1」,进入操作界面。
弹出对话框
Maintenancecheck
Pleaseperformthese日諭maintenanceprocedixes:
1Balanceanai^zerusiiglevefcngbubbleontop.
2RuneTest
3RunLevelIaidLevelIIcontrols.
Skiplest
第15页共33
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