Dwdsdzu双语医学寄生虫学实验指导供医学专业本科生使用Word文档下载推荐.docx
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三.爱护显微镜、标本及各种实验器材,不慎发生损
害时,应立即报告带教老师并按规定照价赔偿。
四.仔细操作,认真观察标本,培养实事求是的作风。
提高独立思考、分析问题和解决问题的能力。
五.遵守课堂纪律,保持安静、爱护卫生、轮流作好值日,离开实验室前必须关好门窗、水电。
本科寄生虫学教学进度表
周次(week)
理论(lecture)
实验(labclass)
学时(academichour)
内容(contents)
一
2
总论(introduction)
溶组织内阿米巴
(Entamoebahistolytica)、
阴道毛滴虫
(Trichomonasvaginalis)
原虫(protozoa)概论、
(Entamoebahistolytica)
自学:
阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)
二
疟原虫(Plasmodium)
(一)
疟原虫(Plasmodium)
(二)、弓形虫(Toxoplasmagondii)
三
吸虫(trematoda)概论、
并殖吸虫(Paragonimus)
姜片吸虫(Fasciolopsisbuski)、
华支睾吸虫
(Clonorchissinensis)
疟原虫(Plasmodium)
(二)、
弓形虫(Toxoplasmagondii)
血吸虫(Schistosome)
(一)
四
血吸虫(Schistosome)
(二)
绦虫(cestode)概论、包生绦虫(Echinococcusgranulosus)
五
猪、牛带绦虫、亚洲带绦虫(Taeniaspp)
六
卡氏肺孢子虫(Pneumocystiscarinii)、隐孢子虫(Cryptosporidium)
七
线虫(nematode)概论、
蛔虫(Ascarislumbricoides)
自学:
结膜吸吮线虫(Thelaziacallipaeda)
包生绦虫
(Echinococcusgranulosus)、
猪、牛带绦虫(Taeniaspp)
钩虫(hookworm)
八
旋毛虫(Trichinellaspiralis)、鞭虫(Trichuristrichiura)
蛔虫(Ascarislumbricoides)、钩虫(hookworm)
旋毛虫(Trichinellaspiralis)、
鞭虫(Trichuristrichiura)、
蛲虫(Enterobiusvermicularis)
九
医学节肢动物(arthropod)概论、蝇(fly)
蝇(fly)、蚊(mosquito)
蚊(mosquito)
十
蜱(ticks)、螨(mites)
蜱(ticks)、螨(mites)、混合虫卵复习
十一
实验考试(test)
实验一溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)
阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)
一、实验目的要求
1.掌握溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)滋养体(trophozoite)和包囊(cyst)的形态。
2.熟悉溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)的生活史(lifecycle)。
3.掌握阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)滋养体(trophozoite)的形态及诊断方法。
4.了解阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)的生活史(lifecycle)及其感染方式。
二、实验内容
㈠示教标本
溶组织内阿米巴滋养体染色标本:
在油镜下,经铁苏木素染色后的虫体,体积较大,细胞质呈灰蓝色,外质(ectoplasm)明显,内质(endoplasm)中吞噬的红细胞呈黑兰色。
细胞核(nucleus)一个,呈圆形,核仁(nucleolus)常位于中心,核膜内缘有一圈大小相等、排列整齐,染色较深的核周染色质粒(chromatingranules)。
核膜与核仁之间有核丝相连。
㈡自看标本
1.包囊(cyst):
经铁苏木素染色后,包囊呈圆球形。
细胞质呈灰蓝色,内含1-4个细胞核,分别称单核包囊,双核包囊和四核包囊,核的结构同滋养体,未成熟包囊内的空泡为糖原泡(glycogenvacuole),极少数未成熟包囊内可见到棒状的拟染色体(chromatoidbody);
成熟包囊内有四个核。
2.阴道毛滴虫滋养体染色标本:
用油镜观察,虫体呈梨形或圆形,前端有四根前鞭毛(anteriorflagellum)和一根后鞭毛(recurrentflagellum),后鞭毛(recurrentflagellum)在虫体的一侧与波动膜(undulatingmembrane)外缘相连,细胞核大呈紫红色椭圆形,细胞质呈淡蓝色,轴柱(axostyle)从前向后纵贯虫体,并伸出体后。
三、作业
绘阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)滋养体(trophozoite)染色形态图及溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)包囊(cyst)形态图。
四、思考题
1.造成阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)感染的因素有哪些?
怎样才能降低感染率?
2.怎样发现和确诊滴虫性阴道炎患者?
3.检查溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)滋养体(trophozoite)和包囊(cyst)时,在操作上和形态鉴别上应注意哪些问题?
4.阿米巴痢疾病人和带虫者(cystcarrier)在本病的传播上是否都同样重要?
为什么?
实验二疟原虫(Plasmodium)㈠
掌握间日疟原虫(Plasmodiumvivax)红细胞内期形态特征及被寄生的红细胞变化。
自看标本
间日疟原虫(Plasmodiumvivax)薄血片姬氏染色标本:
先在低倍镜下观察,在红细胞涂布均匀的部分加镜油一滴,在油镜下仔细按顺序观察。
红细胞被染成桔红色,疟原虫胞质被染成天蓝色,核染成紫红色。
但并非任何一个红色或蓝块即为疟原虫。
因为有可能是染料沉渣或其他异物。
区别异物主要是调节显微镜的细调节器,通过它的上下移动,若蓝、红颜色块与红细胞在同一平面,而且具有一定的结构并具有疟色素(malarialpigment)者是疟原虫(Plasmodium)。
反之,则是异物。
当确定为疟原虫(Plasmodium)后,再进一步辨认它为红细胞内期的哪个发育阶段。
被寄生的红细胞有胀大和褪色。
在薄血片中还常见到各种白细胞,应加以区别。
绘间日疟原虫(Plasmodiumvivax)环状体(ringform)、大滋养体(trophozoite)、未成熟裂殖体(immatureschizont)、成熟裂殖体(matureschizont)和雌、雄配子体(femaleandmalegametocyte)形态图。
1.简述间日疟原虫(Plasmodiumvivax)在人体内的发育过程。
2.疟疾(malaria)的症状发作(paroxysm)与疟原虫生活史(lifecycle)有何关系?
3.以间日疟原虫(Plasmodiumvivax)为例,比较输血和被蚊子叮咬引发的疟疾(malaria)有何不同?
4.疟疾贫血的原因有哪些?
实验三疟原虫(Plasmodium)㈡
刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)
1.掌握恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)红内期(erythrocyticstage)环状体(ringform)和配子体(gametocyte)的形态特征。
2.掌握弓形虫滋养体(thetrophozoiteofToxoplasmagondii)的形态特征。
3.了解三日疟原虫(Plasmodiummalariae)和卵形疟原虫(Plasmodiumovale)红细胞内期(erythrocyticstage)的主要形态特征。
㈠示教标本
1.三日疟原虫(Plasmodiummalariae)带状滋养体是三日疟原虫的大滋养体,被寄生的红细胞不胀大,疟原虫的细胞质呈圆形或带状。
滋养体横跨红细胞,细胞质呈蓝色。
细胞核一个,呈紫红色,疟色素(malarialpigment)为深褐色的粗大颗粒。
常沿胞质边缘分布。
2.卵形疟原虫(Plasmodiumovale):
基本形态似间日疟原虫(Plasmodiumvivax)。
被卵形疟原虫寄生的红细胞略胀大,有的细胞变长,边缘成锯齿状;
薛氏点(Schuffner’sdots)较间日疟原虫(Plasmodiumvivax)的粗大,而且出现早,在环状体期(ringform)即出现。
1.恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)环状体(ringform)染色标本:
观察方法同间日疟原虫(Plasmodiumvivax),被恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)寄生的红细胞不胀大、不褪色;
环状体(ringform)小(其直径相当于红细胞直径的1/5),环状体(ringform)常位于红细胞边缘,一个红细胞内常可见到两个以上的环状体(ringform)寄生(重复感染)、环状体(ringform)的环纤细,具有两个核的环状体较常见。
2.恶性疟原虫配子体(gametocyte)染色标本:
配子体寄生的红细胞已被胀破,所以通常见到的配子体(gametocyte)是游离在红细胞之外或旁边仅有红细胞的遗迹。
⑴雄配子体(malegametocyte):
蜡肠形,两端钝圆,细胞质呈蓝色而略带红色,核疏松呈淡红色,位于细胞质中央,疟色素呈黄棕色小杆状,在核的周围分布较多。
⑵雌配子体(femalegametocyte):
新月形、两端尖、细胞质呈蓝色,核结实较小呈深红色,疟色素多位于核的周围。
3.刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)滋养体(trophozoite)染色标本:
油镜下观察虫体呈香蕉形或半月形,一端较尖,另一端较钝圆;
一边较扁平,另一边较弯曲。
细胞核位于虫体中央,呈红色。
绘恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)环状体和雌、雄配子体(femaleandmalegametocyte)及弓形虫滋养体(thetrophozoiteofToxoplasmagondii)形态图。
1.确诊疟疾(malaria)常用什么方法?
采血时间何时最好?
为什么恶性疟原虫(Plasmodiumfalciparum)在末梢血液中只能查到环状体(ringform)和配子体(gametocyte)?
2.疟疾(malaria)流行有何特点?
3.常用的抗疟药物有哪些?
4.弓形虫(Toxoplasmagondii)发育的全过程可分为哪几个阶段?
实验四并殖吸虫(Paragonimus)
【(肺吸虫)(lungfluke)】
1.掌握并殖吸虫卵(theeggofParagonimus)形态。
2.掌握并殖吸虫的生活史(lifecycleofParagonimus)并了解其各发育阶段的基本形态。
二、实验内容
1.肺吸虫成虫(adultParagonimus)瓶装标本(未染色):
肉眼可见虫体肥厚呈短椭圆形,腹面扁平,背面隆起,形似半粒花生,色深灰。
2.肺吸虫尾蚴(cercariaofParagonimus)染色标本:
低倍镜下观察,注意虫体末端似连非连的小圆球形尾部,故称微尾型尾蚴。
3.肺吸虫囊蚴(metacercariaofParagonimus)染色标本:
低倍镜下观察,囊蚴(metacercaria)呈圆形、囊壁一般有两层,但外壁在制片过程中已脱落。
囊腔内被卷曲的蚴虫所占据。
蚴虫中部黑色的囊状体为排泻囊(excretorybladder)。
排泻囊(excretorybladder)两侧弯曲透明的为肠管,有时还可见到腹吸盘(ventralsucker)。
4.肺吸虫第一中间宿主(thefirstintermediatehost)——川卷螺(Semisulcospira)或拟钉螺(Triculahumida)。
肉眼观察,注意其大小,色泽及螺壳的形态特征。
5.肺吸虫第二中间宿主(thesecondintermediatehost)——溪蟹(freshwatercrab)和虫刺蛄(crayfish)。
6.肺吸虫(Paragonimuswestermani)所致肺部(lung)病变大体标本:
肉眼可见肺(lung)表面有蚕豆大小的球状囊肿。
㈡自看标本
1.低倍或高倍镜下观察并殖吸虫卵(theeggofParagonimus)的涂片:
详见附录。
2.低倍镜下观察并殖吸虫成虫(theadultofParagonimus)染色标本:
虫体前端有一圆形具放射状肌纤维的口吸盘(oralsucker),口吸盘(oralsucker)中央之开口为口腔,口腔之后为膨大的咽,食道细短。
肠分二支,沿虫体两侧向后端延伸,末端为盲管。
生殖系统最明显的特征是两个睾丸(testis)左右并列于体后端;
卵巢(ovary)与子宫(uterus)左右并列于虫体中部的腹吸盘(ventralsucker)后缘。
子宫(uterus)内充满金黄色的虫卵(egg)、卵黄腺(vitellinegland)甚发达。
绘肺吸虫卵(theeggofParagonimus)的形态图。
1.肺吸虫病(paragonimiasis)的病原学诊断(diagnosis)方法有哪些?
应如何取材?
2.肺吸虫(Paragonimus)的预防措施(themainmethodsofprevention)中哪个环节最重要?
3.何谓转续宿主(paratenichost或transporthost)。
实验五日本血吸虫(日本裂体吸虫)
(Schistosomajaponicum)㈠
1.重点掌握血吸虫生活史(lifecycleofSchistosomajaponicum)及成熟虫卵(matureegg)的形态结构。
2.了解血吸虫成虫(adultofSchistosomajaponicum)及尾蚴(cercaria)的形态结构。
1.肉眼观察血吸虫成虫(adultofSchistosomajaponicum)寄生于兔肠系膜静脉血管内的大体标本。
2.肉眼观察未染色的日本血吸虫成虫(adultofSchistosomajaponicum)标本:
⑴雄虫:
虫体短粗,向腹面弯曲,呈乳白色。
⑵雌虫:
前端纤细、后端较粗,呈灰褐色。
⑶雌雄合抱虫体(copulatingschistosome):
雌虫有部分嵌于雄虫抱雌沟(gynecophoralcanal)中。
3.显微镜下观察血吸虫尾蚴(thecercariaofSchistosomajaponicum)标本,尾蚴(cercaria)分体部和尾部,尾部细长、末端分叉,故名叉尾型尾蚴(cercaria)。
㈡自看标本
1.低倍镜下观察血吸虫雄虫染色标本:
在虫体前端可见口、腹吸盘(oralsucker,ventralsucker),自腹吸盘(ventralsucker)后虫体两侧向腹面弯曲形成沟状,称为抱雌沟(gynecophoralcanal)。
消化系统开口于口吸盘(oralsucker)中央,食道周围有食道腺,肠管在腹吸盘(ventralsucker)附近分为二支,伸向体后,约在体后1/3处又汇合为单一盲管。
在腹吸盘(ventralsucker)的背后方有5-8个红染的睾丸(testis),生殖孔开口于腹吸盘(ventralsucker)的后缘。
2.低倍镜下观察血吸虫雌虫染色标本:
虫体前端纤细,体后半部则较粗。
虫体中部可见一椭圆形、色深染细长的卵巢(ovary),子宫(uterus)位于虫体前端,内含虫卵(egg)。
其两旁可见分支的肠管,肠支在卵巢(ovary)后汇合,肠管内是宿主红细胞被消化后剩余的色素,常使虫体后部呈灰褐色或黑色。
在体后部的肠管周围可见排列成串的卵黄腺(vitellinegland)。
3.低倍镜下观察雌雄合抱的血吸虫(copulatingschistosome)染色标本:
可见雌虫体有部分位于雄虫的抱雌沟(gynecophoralcanal)内,并可见到雌雄两虫的结构同时存在。
4.低倍镜或高倍镜下观察日本血吸虫成熟虫卵(matureeggofSchistosomajaponicum)形态:
(详见附录)。
绘日本血吸虫成熟虫卵(thematureeggofSchistosomajaponicum)图,并简述形态特征。
实验六日本血吸虫(日本裂体吸虫)
(Schistosomajaponicum)㈡
1.掌握血吸虫病(schistosomiasis)的病原学诊断方法及原理(themethodandrationaleofdiagnosis)。
2.了解光壳钉螺(0ncomelaniahupensis)、肋壳钉螺的外部结构与拟钉螺(Triculahumida)的区别点。
1.观察粪便重力沉淀法(自然沉淀法)和毛蚴孵化法的用具器皿和操作程序。
2.肉眼观察光壳钉螺、肋壳钉螺、拟钉螺的螺壳,注意三者的个体大小,螺壳的厚薄及螺旋表面有无纵肋和螺口外侧缘有无唇嵴。
光壳钉螺
肋壳钉壳
拟钉螺
成螺高度
6mm
8-10mm
<5mm
壳厚薄
稍薄
厚
薄
体螺旋
明显膨大
膨大不明显
纵肋
无
有
唇嵴
栖息
水、陆
水
三、课堂讨论题
1.日本血吸虫(Schistosomajaponicum)的发育经历了哪几个阶期?
其中哪几个时期致病?
何期致病最重?
2.血吸虫成虫寄生在终宿主的门静脉、肠系膜下静脉,为何虫卵可随宿主粪便排出体外?
3.简述日本血吸虫虫卵肉芽肿对宿主机体有何利弊?
4.血吸虫病(schistosomiasis)的实验诊断(laboratorydiagnosis)(病原学诊断和免疫学诊断)方法有哪些?
目前对这些诊断方法的评价如何?
5.我国血吸虫病(schistosomiasis)流行区(epidemicarea)的类型及其特征是什么?
6.为什么防治血吸虫病(schistosomiasis)要采取综合性防治措施?
其内容主要包括哪些?
实验七链状带绦虫(猪带绦虫)(Taeniasolium)
肥胖带绦虫(牛带绦虫)(Taeniasaginata)
细粒棘球绦虫(包生绦虫)(Echinococcusgranulosus)
1.掌握三种带绦虫的生活史(lifecycle)及带绦虫卵(egg)的形态。
2.掌握猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium)、牛囊尾蚴(cysticercusofTaeniasaginata)和棘球蚴(hydatidcyst)的形态。
3.了解三种带绦虫所致四种疾病的实验诊断(diagnosis)。
㈠自看标本
1.牛带绦虫(Taeniasaginata)成熟节片(matureproglottid)染色标本:
其形态结构与猪带绦虫(Taeniasolium)的成熟节片(matureproglottid)基本相似,但卵巢(ovary)只分两叶,无中央小叶。
2.猪带绦虫(Taeniasolium)和牛带绦虫(Taeniasaginata)妊娠节片(gravidproglottid)染色标本:
用肉眼或放大镜或低倍镜观察,在妊娠节片(gravidproglottid)内仅见到充满虫卵(egg)的高度分支的子宫(uterus),其他生殖器官退化。
这两种绦虫的妊娠节片(gravidproglottid)鉴别特点为每一侧子宫(uterus)分支数不同,猪带绦虫为7-13支,牛带绦虫为15-30支。
3.头节翻出的猪囊尾蚴(cysticercusofTaeniasolium)压片染色标本:
头节(scolex)呈球形,其上有四个吸盘(suckers)、顶突(rostellum)和小钩(hooklets)。
4.带绦虫卵(egg)形态:
猪、牛带绦虫卵和包生绦虫卵形态相似,在光学显微镜下不易区别。
呈圆球形,棕黄色,卵壳已脱落之虫卵,仅见厚而具放射状条纹的胚膜,卵内含有一具三对小钩的六钩蚴(onchosphere),大小31-43μm。
5.棘球蚴砂(hydatidsand)染色标本:
棘球蚴砂(hydatidsand)包括游离于囊液中的原头蚴(protoscolex)、生发囊(broodcapsule)、小的子囊(daughtercyst)及囊壁碎片。
而染色片于低倍镜下观察以原头蚴(protoscolex)为主,呈椭圆形,具有四个吸盘(suckers),数十个小钩(hooklets)和顶突(rostellum)。
由于吸盘重叠,常仅能见到2个。
㈡示教标本
1.成虫(adult)标本
⑴
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