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我认为,缺乏维生素D的雨由生长不良弓鳟鱼,嗜睡,厌食症,临床表现手足搐搦无低钙血症,和胴体组成的变化。
缺乏维生素D的鱼不受骨和血矿物的影响。
这项工作它的出现是用于进行分析的基础上最合乎逻辑的发展。
本研究利用作为生物的主要指标的增长响应,因此作出日粮的相对生物效应胆和钙化醇。
此外,一些生化参数进行监测,以确定任何两种化合物之间的功能差异。
与此同时,越来越多研究数据目的与确定维生素D的要求的鳟鱼。
材料和方法
实验动物和维护
在实验中使用一式三份的110,13周龄鱼种,虹鳟鱼的初始体为301.1±
6.2克/100鱼的重量(安大略部的NAT乌拉尔资源,诺曼戴尔孵化场),且蛋白质含量到达他们保持在40%首席人事官等人的实际控制饮食。
在实验开始前(约5周),找一个没有窗户的室内设计用于实验的24,60升罐,每天允许提供12小时的光冷白荧光灯管。
它没有被发现的光的波长范围在270—300纳米,即,穿过玻璃的荧光灯管为吸收光谱为7的脱氢胆固醇。
连续在约340nm的排放下降到零。
在任何文献没有证据的情况下,提示胆的光化学合成在鱼的7-脱氢胆固醇钙化醇。
此外,其配备了含有小洞在水表面的光强度只有50力士的黑色塑料盖等;
同时在这些波长通道鱼会有效采用圭尔夫市水的屏障的水和尺度的在流通过系统的水源,作为再生剂是部分软化与沸石交换柱采用氯化钠,然后通过活性炭过滤器保持氯在不超过0.02ppm水平。
水每周两次的被分析了含有30ppm钙,0.01ppm的磷,111ppm的钠,和11ppm的镁,溶解的牛氧的pH值,并在总氨氮水进行了监测。
水的温度保持在15°
±
0.5,pH值在7.6±
0.2,溶解的牛氧含量在8.7±
1.2ppm,和总的氨在0.48±
0.12ppm。
在每28天内鱼结束体重。
在开始时每日三次将鱼喂饱喂足,然后每天两次喂所有的饲料;
几乎立刻消耗所有进入的水,在每个罐的28天的基础上和每周饲料的摄入量进行定量。
因此水的损失和钙化醇还通过使用稳定的最小化维生素的形式。
饮食和实验设计
半精制基础日粮表1实验采用。
VID补充剂是在稀释α—纤维素预混合,加入到干燥的成分饮食的,然后与大豆油混合。
颗粒饲料通过使用加利福尼亚球团厂(Crawfordsville,在无蒸汽的热量)实验室规模;
由于摩擦力足以在提供饮食颗粒熔化凝胶形成时加入7.5%的水。
粒料然后在强迫通风干燥烘箱至37±
0.2°
。
实验的目的是使用饮食治疗。
日粮配方提供200,400和800路/公斤维生素D为胆钙化醇或麦角钙化醇。
两个额外的处理,一个没有添加维生素D和1600路/公斤的另胆也包括在内。
这生长试验六组进行累计28天期。
发生手足搐搦
观察手足搐搦临床症状曾表现在一些鱼和整个鱼细震颤。
在大多数情况下,这种现象是潜在的存在在自然界中,即,只有在压力下鱼将显示强直症状。
因此,从水中取出设计确定每个个体发生手足搐搦个体的鱼,放置在网内大约30秒,在这段时间被记录为目前手足搐搦或无。
复制的研究一个随机的方式,由同一个人每时间和没有知识的处理。
值则被表示为每罐一个百分比的鱼有手足搐搦。
血浆和组织分析
在实验五的结论中随机采取每罐样本鱼的血液。
微量离心是由血细胞比容与血红蛋白的利用(unopette的氰化高铁法测试5859,Becton,狄金森有限公司,密西沙加,安大略省。
)汇集的血浆山姆样品进行荧光阻止测定钙(康宁钙配套940,康宁医疗和科研,康宁类作品,康宁,纽约);
血浆通过原子吸收测定镁吸附法(12),碱性比色法测定碱性磷酸酶(13),和用AOAC无机磷(14)程序修改微量的元素。
肾脏和肝脏切除的IM间接冷冻;
随后的分析肾钙和进行了镁含量的原子吸收分光光度法的镁,磷的比色法15。
测定肝脏总脂由布莱和Dyer法(16)。
切除脊柱,放在微波炉1分钟,并分析了骨灰干骨(14),钙原子吸收,磷色度量(15)。
表1
半纯化饲料组合物
成分%
无维生素酪蛋白44
明胶5
糊精20
结晶葡萄糖7
维生素premix12
矿产premix24
蛋氨酸0.25
L-精氨酸0.5
纤维素5.25
羧甲基纤维素2
大豆油(精制)10
白色的骨骼肌标本分析了上述钙和磷的方法和总由布莱和Dyer法的脂质(16)。
每治疗组的一个独立的样本的死亡鱼,冻结在液氮,冷冻干燥地面。
然后,进行分析干物质和氮值描述采用AOAC(14)。
总脂质被布莱和Dyer法阻止开采(16),钙的原子吸收光谱测光,磷colorimetri卡利(15)。
统计分析
这数据进行线性回归方程方差或分析,并在适当的采用正交对比为德性描述的科克伦和Cox(17),治疗差异的决定在0.01或0.05的水平的影响。
生长数据通过使用感的胆囊和麦角钙化醇芬尼的分析方法(18)被用来确定的相对效率。
结果
生长,饲料,手足搐搦增益,和发病率
随着水平的补充,无论是胆囊或麦角钙化醇改善总增重和饲料:
收益率(表2。
然而,为胆钙化醇的生长反应显著(P<0.01)更大的比获得为麦角钙化醇(图1。
日志的剂量反应比较曲线(图2),因此,胆钙化醇200和800之间的值骨化醇ID/公斤的饮食被证明为PAR是显着的等位性。
统计分析表明,首席人事官lecalciferol3.27倍作为强有力的ERgocalciferol与2.33的置信限为4.58。
1600IU舍尔补充骨化醇每公斤的进一步改进在800IU得到体重增加饲料维生素D3每公斤;
然而,生长曲线的外观(图1)显示效果的补充开始高于原来1600IU首席人事官每公斤日粮水平。
饲料效率效率也以线性方式增加在胆囊增大和ER水平gocalciferol(P<0.05)(表2)。
连续28天期间喂养虹鳟鱼D的饮食中缺乏维生素,则显示肌肉搐搦症的发病率为56%(表2)。
用于手足搐搦日志剂量反应比较,胆囊和麦角钙化醇补充显著(P<0.01)下降率在一个线性地依赖。
胆钙化醇显著(P<0.01)优于二在降低发病率的手足搐搦。
胴体组成的变化和肝
胴体干物质增加(P<0.05)在维生素D缺乏的鱼(表3)。
维生素D3显著(P<0.05)更多在降低胴体干物质有效非麦角钙化醇。
干物质维生素D3增刊实施产生一个线性减少(P<0.05)的比例;
以前,虽然也观察到出现了被干物质的水平降低的效果但维生素的补充没有达到统计学意义(P<0.05)。
但它仍是感兴趣的,最小的胴体干物质为800IU达到每公斤饲料胆。
与先前的结果一致实验
(1),胴体脂肪明显(P<0.01)中的维生素d增加虹鳟鱼(表3)。
基于日志的剂量反应,胆囊和麦角钙化醇显示在降低脂质积累线性效应方法。
维生素D3显著(P<
0.05)比麦角钙化醇更有效降低胴体脂肪。
可以说,最大的降脂作用的首席人事官在胴体和肝进行通过与800IUD/kg。
维生素D3补充水平多达800路D/kg饮食往往较低的肝脂肪含量;
然而,肝脏脂质水平非常高的在200和400IU因此每公斤饲料骨化醇进行(表3。
这些鱼的水平明显(P<0.01)高于那些产生的维生素D3类似水平。
其他生理生化参数
统计学上未发现存在任何显著差异的TA参数。
表4。
讨论
对于知识,在鱼的麦角钙化醇中不同的增长差异的产生为麦角钙化醇补充维生素D3虹鳟鱼提供了第一个明确的电动汽车生物的歧视的证据。
因此,彩虹鳟鱼表现出类似的歧视。
一个公平的数据仅在可以计算功效比值且在这些参数的体重增益的基础上而作为骨灰,和血浆钙磷,这并没有显着的影响通过在虹鳟的维生素D而在肌肉痉挛发生。
增长数据的陈波仕曼提出(6)对28日龄雏鸡表明胆钙化醇是约10倍作为强大的麦角钙化醇。
该在3.27鱼麦角钙化醇比结果表明,这种歧视的程度的确是虹鳟鱼少。
表2
生长性能和虹鳟鱼的手足搐搦症发病率
(鳟gairdneri)SII28天期后
饮食NO.维生素D3,IU/kgdiet钙化醇,IU/kgdiet
维他命D2004008001600200400800
增益公斤/100鱼3.604.985.656.297.123.834.285.26
真:
增益1.501.261.251.191.071.431.351.24
发生手足搐搦,%55.719.04.30052.033.79.5
维生素D2与D3效价的鳟鱼
活
体
重
(g/100fish)
维他命D(I.U/kgdiet)
图1的生长反应胆与麦角钙化醇六连续28天期后。
目前琼斯等人对麦角钙化醇代谢歧视的根源仍是未知的。
(19)他们列出了几个的可能性。
鲜为人知的是,维生素D在鱼的代谢,直到这进一步研究,维生素D的异常函数将仍然是一个谜。
缺乏维生素D被认为是在鱼喂食的饮食抽搐的发生的,大约56%。
有趣的是,400IU每公斤导致麦角钙化醇发病率高(34%)手足搐搦,400IUPro分为胆钙化醇几乎完全消除这一障碍但很足够且最大增长。
维生素D3水平是前范围,在这个实验中,这是显而易见的,他要求是多余的胆800路D/kg饲料。
1600路每公斤的水平维生素D3的饮食提供比800IU/公斤显着更好的增长;
然而,它不能被确定这些数据是否1600IU每公斤维生素D3的饮食的足够的最大生长。
虽然没有任何确定的信道和确切的要求的猫鱼和虹鳟鱼,但似乎有可能后者的物种有一个相当高的要求。
活
体
重
x=剂量metameter
图2线性剂量反应回归为胆钙化醇与麦角钙化醇的测定。
洛弗尔和Li
(2)表明,鱼可能有维生素D降低饮食的要求且比温血动物因通过对钙的吸收效率高(20,21)。
本实验结果方法将倾向于怀疑这一逻辑,作为饮食中维生素D的再推广用于启动和生长鸡的要求200路/千克的饮食(22),生长猪220-125路/公斤(23),和大鼠1000路/千克的饮食(24)。
在以前的实验
(1)和胴体肝脏脂质的积累又被看作是在水平的增加而下降维生素D。
然而,有趣的是800IU每公斤维生素D3有伟大的降脂效果为一级1600IU。
这表明,首席人事官水平补充要求最大的增长大于Re有关的最大的降脂作用为胴体和肝。
电子显微镜(25)研究证实在细胞内增加在不同的维生素白肌脂肪鳟鱼。
维生素D2与D3效价鳟鱼
表3
在胴体和虹鳟(Oncorhynchusmykiss)的肝脏组成的变化
接收的实验diets1
胴体干物质%32.131.630.829.930.432.031.430.0
屠体脂%14.413.112.111.211.813.713.012.1
肝脏脂质%3.703.513.463.353.644.213.733.59
3混合样品的1means3-5鱼
胴体总灰分和骨灰都没有在显著高于的饮食比且没有加入800IU每公斤维生素D3维生素D,和1600IU每公斤维生素D3,他并没有比800更大的价值IU水平。
这些结果是一致的。
最近的一项研究
(1)表明在一个影响饮食缺乏喂养维生素D的虹鳟鱼观察到降低胴体灰分,钙饮食中的维生素D缺乏磷斑点叉尾鮰。
在没有矿减少目前或以前的虹鳟鱼中研究观察到这样
(1),其中骨和胴体灰,和骨钙和磷的水平,是不受饮食影响且缺乏维生素D的。
然而,洛弗尔和Li
(2)使用水源提供了钙15ppm,而在本研究中,水的控制高钙含量30。
因此,当它可以作为优先满足生理钙要求(20,21),在钙的可用性过程中使用差鱼可能是重要,。
同时,以前的研究,在基础日粮中使用洛弗尔和李包含了一个令人惊讶的低0.05%的钙和0.36对比,1.1%
(1)和1.1%目前的基础日粮。
此外,在陆地骨的吸附哺乳动物的出现是维生素D缺乏症由于增强的甲状旁腺激素在等离子体还原诱导合成钙水平。
在本研究中观察到的是,血浆中的钙没有减少。
也许如果维生素D的研究对虹鳟鱼通过重复使用一个水源一个较低的钙浓度,降低随之而来的骨血浆钙吸附能观察到。
另一方面,鱼没有甲状旁腺甲状腺或甲状旁腺激素。
这个问题出现了是否骨结构鲶鱼(斑点叉尾的矿化过程毛虫)和虹鳟鱼(虹鳟鱼}彼此不同。
它是展示出了SPE鱼的硬骨鱼之间的差异的已知的骨结构。
两者的鲶鱼和虹鳟鱼具有细胞骨,即,骨具有骨细胞(26)。
莫斯(26)已被联合国阐明能够使用任何种类的差异硬骨骨矿物质平衡尽管大多数的硬骨鱼有脱细胞骨。
表4
生理参数的测量和统计不变
六后28天时间对试验日粮
饮食NO.维生素D3,IU/kgdiet钙化醇,IU/kgdiet
维他命D2008001600200800
血浆中的钙,镁/100ml9.299.089.488.759.428.86
血浆磷,毫克/毫升17.214.818.416.914.415.7
血浆碱性磷酸酶,西格玛单位/毫升1.441.171.791.591.601.44
血红蛋白,g/100ml7.77.87.76.88.28.5
红细胞压积,%28.429.730.326.928.629.7
胴体总灰分,%干燥组织7.297.687.937.437.347.43
骨灰%51.351.353.252.151.451.7
骨,总钙,%20.117.417.617.518.319.2
骨,全磷含量,%9.718.268.219.1410.0210.56
白肌脂肪,%的湿纸巾3.883.293.083.353.503.44
肾,总钙,镁/100g湿纸巾16.621.520.218.017.615.0
肾,总磷,毫克/克湿组织257248253250222250
肾,总镁,镁/100g湿纸巾15.014.616.514.612.614.8
这些研究均对虹鳟鱼提供证据表明,维生素D是所需的白肌正常运作。
电子显微镜的研究表明:
(25)白肌纤维,构成上肌肉组织,而不是红色的纤维,是维生素D缺乏降雨产生不利影响的鳟鱼,损害的表现通过UL肌肉和变化性手足搐搦超微结构。
另外,它也被观察到
(1),两个肌肉类型并没有改变钙磷含量,这和有没有改变这些矿物质的含量有关膳食钙和维生素D,尽管维生素D的缺乏导致了显着的我肌肉功能的损伤。
这个建议这并不造成损害在肌肉中总钙的变化,但而在离子的可用性的变化钙的Ca2+结合的中断在白肌纤维的也可能影响细胞的通透性,在这些研究中可能出现在增加白肌细胞内发现脂。
一个“前凸”发病率高在虹鳟鱼美联储的下垂的尾综合征饮食中缺乏维生素D(27)被认为你将在轴上的弱点造成的由于X光照片显示肌肉无脊柱畸形。
维生素D对虹鳟鱼生长标记的影响,在缺乏对骨形成的影响,不应该太吃惊,当它实现64周岁的彩虹的重量鳟鱼是由食用肉类(28),几乎全是白肌,这是严重的维生素D受损缺乏的功能。
Leatherland等人(29)还观察到,虹鳟鱼日粮中缺乏维生素D表明血浆三碘甲状腺原氨酸增加(T3)浓度。
维生素D对血浆T3水平不足的影响的出现是可逆的,当补充维生素D一段时间后,维生素D缺乏对T3水平影响低。
因而,VI是D彩虹几个不同的角色鲑鱼,其中与一些陆地哺乳动物不同。
看来不可能从钙的吸收水的鱼是具有维生素D依赖性。
是否需要钙,维生素从进料的吸收都有待研究开展,在伟大的效率观了解该元素可以吸收的水。
致谢
在这份手稿的准备中,对Dr.H.H.德雷珀提出宝贵意见表示感谢。
我们要感谢Dr.J.L.通过荧光发射光谱管寻找提供波长。
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