循环海水养鱼系统中的氮循环通路毕业作品Word文档下载推荐.docx
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Breedingdensity
引言
循环水养殖(Recirculatingaquaculture)系统是把现代工程原理和方法应用到水产养殖工程上,它的兴起和发展只经历了短短的三十多年,有关的设计理论和方法还很不成熟,但不影响循环水养殖的发展[1]。
循环水养殖的主要特征是水体的循环利用,在相对封闭的空间内,利用曝气、沉淀、过滤等手段迅速除去养殖对象的代谢产物和饵料残渣,使水质得以净化以实现重复利用。
其与传统养殖模式相比有很多优点[2]:
(1)循环水养殖用水量少,只少量添加补充水的前提下实现水体重复利用率达90%以上。
特别对沿海地区地下水资源起到很好的保护作用。
(2)循环水养殖占地少,可以节约2/3左右的土地。
(3)养殖环境可控制,受外界环境因素的影响小,养殖生物生长速度快,养殖密度高,生产周期短,单位耗水养殖产量大.(4)饵料利用率高。
(5)基本能做到少排放或零排放,且能集中处理,对环境压力小或无压力。
(6)用物理消毒设备切断病源,养殖过程不用药物,可实现绿色安全养殖。
在自然界,氮元素以分子态(氮气)、无机结合氮和有机结合氮三种形式存在。
大气中含有大量的分子态氮。
但是绝大多数生物都不能够利用分子态的氮,只有象豆科植物的根瘤菌一类的细菌和某些蓝绿藻能够将大气中的氮气转变为硝态氮(硝酸盐)加以利用。
植物只能从土壤中吸收无机态的铵态氮(铵盐)和硝态氮(硝酸盐),用来合成氨基酸,再进一步合成各种蛋白质。
动物则只能直接或间接利用植物合成的有机氮(蛋白质),经分解为氨基酸后再合成自身的蛋白质。
在动物的代谢过程中,一部分蛋白质被分解为氨、尿酸和尿素等排出体外,最终进入土壤或水体。
动植物的残体中的有机氮则被微生物转化为无机氮(氨态氮和硝态氮),从而完成生态系统的氮循环[3]。
循环水系统中氮的循环大多数变化都是生物化学变化,而且在每一个步骤一般都伴随着氮的化合价的改变,从氨氮的-3价到硝酸盐氮的+5价[4]。
循环水养殖系统中各种形态氮之间的动态循环及转化如图1所示。
图1循环水系统中氮循环及流向
Fig.1Circulatingwatersystemandtheflowofthenitrogencycle
氮不仅是养殖生态系统中物质循环的重要元素,也是养殖水体内较常见的限制初级生产力的营养元素,其在水体中含量和比例往往会引起浮游植物群落结构和藻类生长的变化,也会导致沉积物营养盐的积累变化,最终影响生态系中能量的利用和转化,对于养殖水体来说,保持稳定的浮游植物群落结构和数量是提高养殖产量的重要内容和手段,所以了解养殖水体中氮的存在形态、迁移转化以及平衡,可为保持养殖生态环境的相对稳定提供依据。
同时氮也是作为水产养殖自身污染的重要指标。
有研究表明鱼类养殖池中90%以上的营养物质来自饵料的投入,而这些营养物质中仅有很少一部分被同化,其余均以可溶性或非可溶性状态留在养殖水体中。
大量营养物质的输入一旦超过水体的同化能力,便会造成养殖环境恶化,同时也会威胁鱼类生长[5]。
目前国内已有许多针对循环水氮利用及氮收支的研究。
如:
循环水养殖罗非鱼中的氮循环研究[6]、养殖密度对异育银鲫氮和能量收支的影响[7]、中国明对虾精养池塘氮收支[8]、凡纳滨对虾室内封闭式养殖水质变化与氮收支[9]、循环水养殖系统中小球藻对三态氮的吸收能力[10]、对虾养殖池塘氮磷收支[11]等。
本研究采用循环海水养殖石斑鱼,研究了不同饲养密度模式下的氮循环通路,为深入研究循环水养殖中的氮循环和氮平衡提供参考资料。
1材料与方法
1.1实验场所及实验材料
实验在宁海岳井洋渔业开发有限公司进行。
实验用点带石斑鱼(Epinepheluscoioides)取自公司养殖池,选择体色正常、健壮无伤、摄食正常的个体,体重8g~13g,共75尾用于实验,按实验设计要求随机分养于4个实验用循环养殖系统中适应驯化。
饲料为中山市统一企业有限公司生产的石斑鱼挤压沉性配合饵料,粒径5mm~7mm。
贝类滤清槽采用壳长规格0.3mm~0.5mm的毛蚶。
1.2实验设备及控制条件
实验用循环养殖系统由养鱼槽、贝类滤清槽和多级过滤桶三部分装置组成。
级子ong养殖密度高,生产周期短,单位耗水养殖产量大。
养鱼槽和贝类槽的规格为74cm×
54cm×
42cm,实际起始水量180L,两个水槽以塑料管连通,过滤桶的进水管连接贝类槽,出水管连接养鱼槽,通过过滤装置使两个水槽的水保持循环,循环次数为9次/h。
在养鱼水槽四周遮光处理,避免石斑鱼受惊干扰。
过滤桶容量25L,填装多级滤料,实际装水10L。
养殖系统中用电热棒维持水温24℃。
盐度1.019,pH7.43~7.95。
放入实验鱼前在循环水系统中加入海水复合硝化活菌素。
在每个养殖系统中置气头1个,不间断充气,保证水中溶氧充足。
1.3实验设计
本实验分4个实验组,分别放养不同尾数的石斑鱼。
1#实验组——养殖鱼水槽放养10尾石斑鱼
2#实验组——养殖鱼水槽放养15尾石斑鱼
3#实验组——养殖鱼水槽放养20尾石斑鱼
4#实验组——养殖鱼水槽放养25尾石斑鱼
实验周期进行14d。
期间不添水,不换水。
通过测定养殖前后水体中的无机氮、投喂的饵料含氮量、石斑鱼生长氮、毛蚶生长氮、结束时的颗粒有机氮(包括悬浮和沉淀的排泄物、饵料残渣、细菌菌团等),根据氮平衡公式确定循环海水养鱼系统中的氮元素通路及分配。
1.4实验方法与步骤
实验开始前称量每尾鱼体重,4个组鱼体重分别为108.4g、181.5g、208.4g和232.3g。
开启过滤器使循环系统运转,调节温度使各实验组养殖水槽达到实验要求,实验鱼放养于养殖槽中适应7d后开始进行实验。
实验期间,每天7:
00和下午16:
00投饵,1小时后捞出未吃完的剩余颗粒饵料,记录摄食数量。
同时每天记录水的pH值、温度、采集养殖鱼水槽内的水样,水样抽滤后滴加三氯甲烷固定,水样瓶密封储存在冰柜中待测定。
实验结束时称量鱼体重,收集水体中的颗粒有机物。
并抽取鱼样、毛蚶样和4个实验组的水样,待含氮量测定。
1.5各组分含氮量的测定
1.5.1蛋白质含氮量测定
将实验结束后所的饵料、鱼样、毛蚶及颗粒有机物样品烘干研磨,称取一定量的实验样品,各样品称量3份。
将各试样加入消化炉试管中,同时在试管中加入0.2g硫酸铜,2g硫酸钾,10mL浓硫酸,将试管放入硝化炉中消化。
消化炉温度自200℃开始,每半小时升高50℃,直至温度升至450℃。
当消化炉温度到达450℃时持续消化观察溶液变为澄清(澄清液为浅蓝色),同时管壁上无黑色油渍为止。
溶液澄清后继续消化半小时,以保证消化完全后关闭消化炉,将试管移出消化炉静置冷却。
在消化炉消化过程中,用电子天平称量200g氢氧化钠放入烧杯中,加1000mL水,配置成浓度为40%的氢氧化钠溶液以待消化试管冷却后供全自动定氮仪使用。
用1000mL的量筒接1000mL的蒸馏水,将8.3mL的浓盐酸加入蒸馏水中,稀释后的盐酸以待定氮后滴定溶液。
用从烘干箱中取出的干燥Na2CO3标定盐酸浓度,记录标定数据。
当消化试管冷却后依次将试管安放入全自动定氮仪定氮,定氮后的液体用盐酸滴定,记录滴定数据。
1.5.2水体中氨氮、亚硝酸盐、硝酸盐和总氮的测定
将每天采集的水样用全自动水质间断分析仪测定水中的氨氮、亚硝酸盐和硝酸盐含量,记录实验数据。
水样中的总氮测定使用等物质量过硫酸钾消解法[12]
1.6主要实验仪器
KDN-08C消化炉,ATN-300全自动定氮仪,全自动水质间断分析仪(EASYCHEMPLUS),EL104电子天平,酸式滴定管
1.7数据计算和统计
所有实验数据均采用Excel软件进行统计和分析。
滴点盐酸浓度按公式按公式
(1)计算
mx×
1000
C1=—————————————……………
(1)
(V1-V0)×
52.99-1/2Mx
式中mx——干燥碳酸钠的质量,单位为克(g)
V1——滴定使用盐酸的体积,单位为毫升(mL)
V0——空白盐酸的体积,单位为毫升(mL)
Mx——碳酸钠的物质的量
固体蛋白质含氮量按公式
(2)计算
C1×
V×
14
mN=——————————……………
(2)
m×
式中C1——滴定盐酸的浓度,单位为毫升(mL)
V——滴定使用盐酸的体积,单位为毫升(mL)
m——称取试样的质量,单位为克(g)
2结果
2.1各实验组的日摄食量变化
图2不同饲养密度下各实验组每日摄食量变化
Fig.2thedifferentstockingdensityofdailyfoodintakeineachexperimentalgroupchanges
实验期间实计各实验组日摄食量如图2所示。
由图2可见各实验组鱼在第1d摄食量为实验期间的最高,分别为1.38g、2.07g、2.62g和2.90g,随后从第2d~4d摄食量较少。
在第7d和第8d又出现一个摄食量高值,第9d后开始摄食量为0。
2.2各实验组pH的动态变化
实验期间实测各实验组水体中pH如图3所示。
由图3可见,
图3不同饲养密度下各养殖水体pH变化
Fig.3thedifferentstockingdensityofchangesinwaterpH
各实验组的初始pH值分别为10ind实验组7.88、15ind实验组7.8、20ind组7.76、25ind实验组7.72,实验期间各实验组的pH值都大致上呈现相同的变化趋势,在实验开始的前2d呈现出稍许的下降,降幅在10%左右,此后立即出现反弹,四组均超越初始值,第5d~7d呈现高位波动,此后各组的pH值均呈直线下降,并趋于一致。
在第13d达到低谷,第14d再次回升。
比较各实验组的pH值发现,10ind密度试验组的pH始终高于其他三组,而饲养密度最高的25ind组pH值最低。
2.3各实验组水体中的氨氮变化
在试验期间各实验组水体中氨氮变化情况见图4。
由图4观察可见,在试验期间各实验
图4不同饲养密度下养殖水体的氨氮变化
Fig.4thedifferentstockingdensityofchangesinwaterammonia
组氨氮变化都有很大的波动,大体上出现2d~4d一个波动。
其中10ind实验组变化波动最为明显,在变化波动过程中各实验组达到最大值的天数都不相同。
各组变化中都在第10d和第11d这两天达到实验期间的最高值,且从第7d开始氨氮浓度高位波动值均高于前期。
结合图3还可见,从第7d开始,pH开始下降,氨氮平均高位波动值上升。
而第13d开始pH值开始回升后,氨氮值趋于下降。
2.4各实验组亚硝酸盐的变化
在试验期间各实验组水体中硝酸盐变化情况如图5所示,由图5观察可见,除了20ind
图5不同饲养密度下水体亚硝酸盐变化
Fig.5thedifferentstockingdensityofchangesinwaterNitrite
实验组出现异常高峰外,各实验组亚硝酸盐变化波动很小,与图3比较可见亚硝酸盐浓度几乎也是2~4d出现一个高峰值,当氨氮浓度在低峰值时,亚硝酸盐出现高峰值。
20ind实验组起始值高于其余各组,从第0d下降,到第3d达到试验期间最低值。
第4d升高后又下降到平稳值,从第8d后开始上升,到第10d达到试验期间的最高值后下降,第12d后再次上升第13d上升到和第4d差别不大的值。
10ind、15ind和25ind实验组波动相对很小,在40ppd范围内,其中25ind实验组起始值较其他两组高,10ind实验组在第5d达到试验期间小波动的最高值,15ind实验组在第9d达到试验期间小波动的最高值。
在第14d时3个实验组亚硝酸浓度的高低分别为25ind实验组、15ind实验组和10ind实验组。
2.5各实验组硝酸盐变化
根据试验所得数据处理在试验期间各实验组水体中硝酸盐变化情况如图6所示。
图6不同饲养密度下水体硝酸盐变化
Fig.6thedifferentstockingdensityofchangesinwaterNitrate
由图6观察可见,各实验组在试验期间起始值都低于2000ppb,在第0d~第3d开始上升,10ind实验组和20ind实验组在第4d~6d基本持平,15ind实验组和25ind实验组分别在第4d和第5d出现一个下降,变动在1200ppb~1500ppb范围。
各实验组在第8d都出现上升,上升大小分别为25ind>20ind>15ind>10ind,其中25ind实验组上升了4500ppb上升范围最大,各实验组在第9d都达到实验期间的最高值,其后开始出现下降,25ind实验组下降幅度同样最明显,在第8d后出现的波动中10ind实验组波动值范围最小。
各实验组试验期间总体硝酸盐浓度<10mg/L,实验结束后小于5mg/L。
2.6各组的三态总氮变化
根据实验所得数据处理在实验期间各实验组水体三态氮变化如图7所示。
由图7观察
图7不同饲养密度下水体三态氮变化
Fig.7thedifferentstockingdensityofchangesinwaterthethreenitrogen
可见各实验组实验期间三态氮浓度在0d~11d基本上都呈不断上升态势,由1170.1ppb~6465.2ppb、最高上升至6465.2ppb。
各组三态氮浓度与饲养密度大致成正相关,即密度越高水体中每日的三态氮也越高。
结合图6可以发现,由于三态氮中硝酸盐占主导地位,因此硝酸盐浓度变化直接左右着三态总氨的变动,当硝酸盐浓度大范围变动时,三态氮浓度也随之出现相同变动。
2.7系统氮输入量
各实验组实验期间根据测定鱼类总摄食量计算得到总氮输入见表1。
根据表1可见,
表1不同饲养密度总摄食量及总输入氮
Tab.1thedifferentStockingdensityoffishthetotalfoodconsumptionandthetotalinputofnitrogen
实验组
总摄食量(干重)/g
单位体重摄食量/g
总氮输入/g
1#
4.48
0.041
0.405
2#
5.85
0.032
0.528
3#
8.91
0.804
4#
9.98
0.901
随着养殖密度的增加,总摄食量也随着提高,循环系统中总氮输入量随之升高,各实验组单位体重摄食量为0.041。
结合图2、图3、图4可见,水中三态氮总量也同样升高。
2.8系统氮输出各分量
2.8.1鱼体N增值量
各实验组实验期间鱼体总增重及氮含量见表2。
表中结果显示,鱼体同化氮以10ind组
表2不同饲养密度鱼体增重及含氮量
Tab.2thedifferentStockingdensityoffishweightandnitrogencontent
鱼体总增重(干重)/g
总氮含量/g
占体系比例
1.97
0.116
28.6%
1.98
0.117
22.2%
3.81
0.225
28.0%
4.34
0.257
28.5%
最高,为28.6%,随着养殖密度继续增加,鱼类同化氮反而下降为28.5%。
2.8.2贝类N增值量
各实验组实验期间贝类总增重及氮含量见表3。
由表3可见,贝类的同化氮只占系统氮组成的5.9%~13.5%,且鱼类的养殖密度与毛蚶的同化氮之间无显著相关。
表3不同饲养密度贝类总增重及含氮
贝类总增重
(含壳干重)/g
1.87
0.024
5.9%
5.62
0.071
13.5%
3.94
0.050
6.2%
8.08
0.103
11.4%
Tab.3thedifferentStockingdensityofshellfishtotalweightgainandnitrogen
2.8.3水体中的颗粒有机氮
各实验组实验期间水中颗粒有机氮的含氮量测定结果见表4。
实验结束时系统中的颗粒有机氮包含悬浮颗粒和沉淀的有机颗粒,约占体系的40%~45%。
表中结果显示随着饲养密度的提高,摄食量增加,水体中的悬浮颗粒也呈上升趋势。
表4不同饲养密度水中颗粒有机氮的含氮量
Tab.4thedifferentStockingdensityofthenitrogencontentofparticulateorganicnitrogeninwater
沉淀的颗粒/g
悬浮的颗粒/g
0.110
0.063
42.7%
0.129
0.082
40.0%
0.138
0.226
45.3%
0.124
0.235
39.8%
2.8.4水中溶解性无机氮
各实验组实验期间水中溶解性无机氮含氮量测定结果见表5。
由表5可见水体无机
表5不同饲养密度水中溶解性无机氮的含氮量
Tab.5thedifferentStockingdensityofthenitrogencontentofdissolvedinorganicnitrogeninwater
水中初始含氮量/g
水中最终含氮量/g
最终含氮量占比例/%
0.007
0.099
22.7%
0.009
24.4%
0.011
0.176
20.5%
0.013
0.195
20.2%
氮存量是氮循环系统中的重要输出之一,约占体系氮组成的1/4左右。
2.9氮通路通式及实际氮收支
各实验组中氮通路平衡模型为:
CN=GN+DN+ON+LN
其中:
CN——为饵料中的总氮
GN——为鱼体和贝类同化的氮
DN——为水中溶解的氮
ON——为系统中颗粒有机物氮
综合表1~表5可以得到如下的实际氮收支式:
10ind组氮循环通路为:
100CN=28.64G1N+5.93G2N+42.72ON+22.72D1N
15ind组氮循环通路为:
100CN=22.16G1N+13.45G2N+39.96ON+24.43D1N
20ind组氮循环通路为:
100CN=27.99G1N+6.22G2N+45.27ON+20.52D1N
25ind组氮循环通路为:
100CN=28.52G1N+11.43G2N+39.84ON+20.20D1N
3讨论
3.1循环水养殖系统中的pH变化及其调控技术
氢离子浓度一向被认为是养鱼水质的一个重要因素,分析养鱼用水的水质时通常都要测定pH值。
这是因为氢离子浓度从多个方面影响到鱼和鱼的生产[13],通过测定pH的高低可以判断这个水体硬度是否合适,充氧是否足够。
同时在氮的循环中pH值也起重大作用,硝化作用固氮作用都以弱碱pH值7.0~8.5最适宜,遇到酸性或碱性条件都会受到抑制。
通过图2测定数据显示,不同饲养密度下水体pH值的变化情况是相同的,总体来看各实验组pH在7.43~7.95之间,这个范围是鱼体适应范围。
前7d中pH趋于稳定的形式,说明水体变化不是很明显,说明水体中各因素变化不大,鱼类生长正常。
在第7d天以后,pH值出现下降,因为长时间投饵,水中颗粒有机物增加和鱼类呼吸及微生物生长使pH降低。
由于一般水体缓冲能力比较弱,pH很容易发生改变,水中的残留饵料、呼吸作用产生的CO2和微生物生长都能降低水体的pH值。
在实验期间通过不停的曝气可以稳定pH值,在实验前7d可以看见其效果,但如果pH下降,根据pH降低的大小可以适量加入碳酸氢钠(小苏打)将pH调高,要降低pH可以使用碳酸二氢钠,这是现代养鱼常用的方法。
3.2循环养殖系统内的三态氮平衡
养殖系统中随着养殖时间的增加,残饵等有机物累积,细菌的氨化作用往往会使水体中氨氮浓度增加。
氨氮浓度高对鱼体有很大的危害[15]。
此时亚硝化菌的存在就是至关重要的,亚硝酸菌属细菌,一般被称为"
氨的氧化者"
,因其所维生的食物来源是氨,氨和氧化合所生成的化学能足以使其生存。
可是当氨氮被转化为亚硝酸盐时,又会对鱼类的生长产生新的威胁,因为亚硝酸盐含量增高同样会对鱼类产生危害[15],因此还需硝化菌将亚硝酸盐转化为硝酸盐。
硝化菌是将亚硝酸分子氧化再转化为硝酸分子的一类细菌。
一般被称为"
亚硝酸的氧化者"
,因其所维生的食物主要来源是亚硝酸,但其他有机物亦可利用,它和氧化合可产生硝酸,所生成的化学能足以使其生存。
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