马立克氏病防治技术规范农业部文档格式.docx
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病鸡和带毒鸡是最主要的传染源。
呼吸道是主要的感染途径,羽毛囊上皮细胞中成熟型病毒可随着羽毛和脱落皮屑散毒。
病毒对外界抵抗力很强,在室温下传染性可保持4~8个月。
2.2临床症状
本规范规定本病的潜伏期为4个月。
根据临床症状分为4个型,即神经型、内脏型、眼型和皮肤型。
神经型:
最早症状为运动障碍。
常见腿和翅膀完全或不完全麻痹,表现为“劈叉”式、翅膀下垂;
嗉囊因麻痹而扩大。
内脏型:
常表现极度沉郁,有时不表现任何症状而突然死亡。
有的病鸡表现厌食、消瘦和昏迷,最后衰竭而死。
眼型:
视力减退或消失。
虹膜失去正常色素,呈同心环状或斑点状。
瞳孔边缘不整,严重阶段瞳孔只剩下一个针尖大小的孔。
皮肤型:
全身皮肤毛囊肿大,以大腿外侧、翅膀、腹部尤为明显。
本病的病程一般为数周至数月。
因感染的毒株、易感鸡品种(系)和日龄不同,死亡率表现为2%~70%。
2.3病理剖检变化
常在翅神经丛、坐骨神经丛、坐骨神经、腰荐神经和颈部迷走神经等处发生病变,病变神经可比正常神经粗2~3倍,横纹消失,呈灰白色或淡黄色。
有时可见神经淋巴瘤。
在肝、脾、胰、睾丸、卵巢、肾、肺、腺胃和心脏等脏器出现广泛的结节性或弥漫性肿瘤。
常见毛囊肿大,大小不等,融合在一起,形成淡白色结节,在拔除羽毛后尸体尤为明显。
2.4实验室诊断
2.4.1病原分离鉴定(见附件1)
2.4.2病理组织学诊断
主要以淋巴母细胞、大、中、小淋巴细胞及巨嗜细胞的增生浸润为主,同时可见小淋巴细胞和浆细胞的浸润和雪旺氏细胞增生。
2.4.3免疫学诊断
免疫琼脂扩散试验(见GB/T18643)。
2.5鉴别诊断
内脏型马立克氏病的病理变化易与禽白血病(LL)和网状内皮增生症(RE)相混淆,一般需要通过流行病学和病理组织学进行鉴别诊断。
2.5.1与禽白血病(LL)的鉴别诊断
2.5.1.1流行病学比较
禽白血病(LL)一般发生于16周龄以上的鸡,并多发生于24~40周龄之间;
且发病率较低,一般不超过5%。
MD的死亡高峰一般发生在10~20周龄之间,发病率较高。
2.5.1.2病理组织学变化
禽白血病(LL)肿瘤病理组织学变化主要表现为大小一致的淋巴母细胞增生浸润。
MD肿瘤细胞主要表现为大小不一的淋巴细胞。
2.5.2与网状内皮增生症(RE)的鉴别诊断
网状内皮增生症(RE)在不同鸡群感染率差异较大,一般发病率较低。
其病理组织学特点是:
肿瘤细胞多以未分化的大型细胞为主,肿瘤细胞细胞质较多、核淡染。
有些病例也表现为大小不一的淋巴细胞。
现场常见MDV和REV共感染形成的混合型肿瘤,需做病原分离鉴定。
2.6结果判定
2.6.1临床诊断为疑似马立克氏病
符合流行病学2.1、临床症状2.2和剖检病变2.3的。
2.6.2确诊
符合结果判定2.6.1,且符合实验室诊断2.4.1;
或符合2.4.2和2.4.3的。
3疫情报告
3.1任何单位和个人发现患有本病或疑似本病的禽类,应立即向当地动物防疫监督机构报告。
3.2当地动物防疫监督机构接到疫情报告后,按国家动物疫情报告管理的有关规定执行。
4疫情处理
根据流行病学特点、临床症状、剖检病变,结合病原分离鉴定、组织病理学和免疫学检测做出的诊断结果可作为疫情处理的依据。
4.1发现疑似马立克病疫情时,养殖户应立即将发病禽群隔离,并限制其移动。
当地动物防疫监督机构要及时派员到现场进行调查核实,包括流行病学调查、临床症状检查、病理解剖、采集病料、实验室诊断等,根据诊断结果采取相应措施。
4.2当疫情呈散发时,须对病禽及同群禽进行扑杀和无害化处理(按照GB16548进行)。
同时,对禽舍和周围环境进行消毒,对受威胁禽群进行观察。
4.3当疫情呈暴发流行时按照以下要求处理
4.3.1划定疫点、疫区、受威胁区
由所在地县级以上(含县级)兽医主管部门划定疫点、疫区、受威胁区。
疫点:
指患病禽类所在的地点。
一般是指患病禽类所在的禽场(户)或其它有关屠宰、经营单位;
如为农村散养,应将自然村划为疫点。
疫区:
指疫点外延3公里范围内区域。
疫区划分时,应注意考虑当地的饲养环境和天然屏障(如河流、山脉等)。
受威胁区:
指疫区外延5公里范围内的区域。
4.3.2处置要求
在动物防疫监督机构的监督指导下,扑杀发病禽及同群禽,并对被扑杀禽和病死禽只进行无害化处理;
对环境和设施进行消毒;
对粪便及其它可能被污染的物品,按照GB16548进行无害化处理;
禁止疫区内易感动物移动、交易。
禽类尸体需要运送时,应使用防漏容器,并在动物防疫监督机构的监督下实施。
4.3.3进行疫源分析和流行病学调查
4.3.4处理记录
对处理疫情的全过程必须做好完整的详细记录,以备检查。
5预防与控制
实行“以免疫为主”的综合性防治措施。
5.1加强饲养管理,提高环境控制水平
饲养、生产、经营等场所必须符合《动物防疫条件审核管理办法》(农业部15号令)的要求,并须取得动物防疫合格证。
饲养场实行全进全出饲养方式,控制人员出入,严格执行清洁和消毒程序。
5.2加强消毒管理,做好基础防疫工作
各饲养场、屠宰厂(场)、动物防疫监督检查站等要建立严格的卫生(消毒)管理制度。
5.3免疫
应于雏鸡出壳24小时内进行免疫。
所用疫苗必须是经国务院兽医主管部门批准使用的疫苗。
5.4监测
养禽场应做好死亡鸡肿瘤发生情况的记录,并接受动物防疫监督机构监督。
5.5引种检疫
国内异地引入种禽时,应经引入地动物防疫监督机构审核批准,并取得原产地动物防疫监督机构的免疫接种证明和检疫合格证明。
附件1
马立克氏病病原分离
1用细胞作为MDV分离和诊断的材料
1.1细胞来源
应来自病鸡全血(抗凝血)的白细胞层或刚死亡鸡脾脏细胞。
1.2方法
1.2.1将白细胞或脾脏细胞制成含有106~107个活细胞/ml的细胞悬液。
1.2.2将0.5ml样品,分别接种2瓶(大小25㎝2)用SPF鸡胚制备的成纤维细胞。
另取1瓶做空白对照。
1.2.3将接种病料的和未接种病料的对照细胞培养瓶均置于含有5%CO2的37.5°
C的二氧化碳培养箱内。
1.2.4每隔3天,换一次培养液。
1.2.5观察有无细胞病变(CPE),即蚀斑,一般可在3~4天内出现。
若没有,可按上述方法盲传1~2代。
2用羽髓作为MDV分离和诊断的材料
这种方法所分离的病毒为非细胞性的,但不常用。
2.1取长约5mm的羽髓或含有皮肤组织的羽髓,放入SPGA-EDTA缓冲液〔0.2180M蔗糖(7.462g);
0.0038M磷酸二氢钾(0.052g);
0.0072M磷酸二氢钠(0.125g);
0.0049ML-谷氨酰胺(0.083g)、1.0%血清白蛋白(1g)和0.2%乙二胺四乙酸钠(0.2g),蒸馏水100ml,过滤除菌,调节pH值到6.3〕中。
2.2病毒的分离与滴定方法
上述悬浮液经超声波处理,通过0.45μm微孔滤膜过滤后,接种于培养24小时的鸡肾细胞上,吸附40分钟后加入培养液,并按上述方法培养7天。
3上述方法可以用于1型和2型MDV的分离
所分离的病毒如果是免疫禽群,也可以分离到疫苗毒。
有经验的工作人员可根据蚀斑出现的时间、发展速度和形态,即可对各型病毒引起的蚀斑作出准确鉴别。
HVT蚀斑出现较早,而且比1型的要大,而2型的蚀斑出现晚,比1型的小。
附件2
消毒
1消毒前的准备
1.1消毒前必须清除有机物、污物、粪便、饲料、垫料等;
1.2必须选用对马立克氏病病毒有效的消毒药品,如烧碱、醛类、氧化剂类、酚制剂类、氯制剂类、双季胺盐类等。
1.3备有喷雾器、火焰喷射枪、消毒车辆、消毒防护用具(如口罩、手套、防护靴等)、消毒容器等。
1.4注意消毒剂不可混用.
2消毒范围
禽舍地面及内外墙壁,舍外环境;
饲养、饮水等用具,运输等设施设备以及其它一切可能被污染的场所和设施设备。
3消毒方法
3.1金属设施设备的消毒,可采取火焰、熏蒸等方法消毒;
3.2圈舍、场地、车辆等,可采用消毒液清洗、喷洒等方法消毒;
3.3养禽场的饲料、垫料等,可采取深埋发酵处理或焚烧处理等方法消毒;
3.4粪便等可采取堆积密封发酵或焚烧处理等方法消毒;
3.5饲养、管理等人员可采取淋浴等方法消毒;
3.6衣帽鞋等可能被污染的物品,可采取浸泡、高压灭菌等方法消毒;
3.7疫区范围内办公、饲养人员的宿舍、公共食堂等场所,可采用喷洒的方法消毒;
3.8屠宰加工、贮藏等场所以及区域内池塘等水域的消毒可采取相应的方法进行,并避免造成有害物质的污染。
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