常用培养基及添加剂的配制Word文档下载推荐.docx
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旈基乙醇酸钠0.03g
葡萄糖1.0g
琼脂1.8-2.0g
刃天青(0.1%)0.5g
4.Rogosa乳杆菌选择培养基(LS)
胰蛋白水解物(或胰蛋白胨)2.0g
酵母提取物1.0g
琼脂4g
葡萄糖4.0g(储存液)
磷酸二氢钾1.2g12g
枸橼酸三铵0.4g4g
硫酸镁(MgSo47H2O)1.0g10g
硫酸锰(MnSo44H2O)0.4g4g
硫酸亚铁(FeSo47H2O)0.08g0.8g
醋酸钠(CH3COONa3H2O)(乙酸钠)5g50g
冰乙酸(99.5%)0.264mL2.64mL
聚山梨酯-800.2g2g
DH2O200mL200mL(每100mL培养基加10mL)
5.TPY培养基
胰蛋白胨3.0g
酵母提取物0.8g
葡萄糖2.0g
磷酸二氢钾1.2g
K2HPO43H2O0.4g
NaCO30.4g
NaCl0.4g
DH2O200mL
琼脂2.5g/200mL
6.普通血琼脂培养基(BA)
牛肉浸膏(0.5-1.0)g
蛋白胨1.0g
NaCl0.5g
K2HPO42.0g
琼脂1.8g
7.轻唾培养基(MS)
示胨0.5g
蔗糖3-5g(可根据需要将蔗糖量增至20g)
葡萄糖0.1g
K2HPO43H2O0.53g
0.1%曲利本蓝7.5mL
0.1%结晶紫0.8mL
8.轻唾-杆菌肽琼脂(MSB)
MS琼脂(蔗糖含量为20%)100mL
杆菌肽溶液(200U/mL)0.1mL
灭菌MS琼脂50℃左右时加入杆菌肽溶液,混匀倒板
9.轻唾-磺胺二甲嘧啶琼脂(MS磺胺琼脂)
MS琼脂100mL
*磺胺二甲嘧啶(5%)1.0mL
*1%的亚碲酸钾溶液0.28mL
灭菌MS琼脂冷却至25℃时加入*
10.TYCSB琼脂
胰蛋白酶水解物1.0g
盐酸半胱氨酸溶液0.4g
蔗糖20g
琼脂2g
DH2O100mL
灭菌后冷却至50-55℃时加入杆菌肽溶液(200U/mL)0.1mL,混匀倒板
11.Rogosa乳杆菌选择培养基(LS)
胰蛋白水解物(或胰蛋白胨)1.0g
磷酸二氢钾0.6g
枸橼酸三铵0.2g
葡萄糖2.0g
硫酸镁(MgSo47H2O)0.5g
硫酸锰(MnSo44H2O)0.2g
硫酸亚铁(FeSo47H2O)0.04g
醋酸钠(CH3COONa3H2O)(乙酸钠)2.5g
冰乙酸(99.5%)0.132mL
聚山梨酯-800.1g
DH2O100mL
LS盐溶液的组成:
MgSo47H2O5.57g
MnSo42H2O1.20g
FeSo47H2O0.34g
DH2O50mL
混合上述成分并加热使之溶解。
高压(121℃)灭菌15分钟备用。
100mL乳杆菌选择培养集中加入0.5mLLS盐溶液即可
12.放线菌分离和富集培养基:
1)Beigheor-CoIman培养基:
(FC)
BHI基础培养基100mL
聚乙烯吡咯烷酮1.0g
灭菌冷却至50℃左右加入无菌氟化钠溶液(25g/L)1mL,硫酸粘菌素溶液(1g/L)0.5mL,无菌马血清5mL,混匀倒板
2)明胶-甲硝唑-硫酸铬选择培养基(GMS)
营养明胶琼脂100mL
硫酸铬(CdSO48H2O)溶液(2g/l)1.0mL
甲硝唑(1g/l)1.0mL
将上述成分(除甲硝唑外)混合并加热使之溶解,高压(121℃)灭菌15min,待冷却至50℃左右加入无菌甲硝唑溶液1mL,混合均匀后倾注于平板。
3)Tarozzi肉汤培养基
牛肉浸汁50mL
蛋白胨1.2g
NacL0.3g
K2HPO40.2g
混合上述成分并补充蒸馏水(加热至80℃左右)至100mL,煮沸10min,冷却后校正PH值为7.5,用罗素暗管(15mm*150mm分装,每管8mL,然后加入0.1%的硫基乙醇酸钠溶液2mL和新鲜的豚鼠或牛肝切割片(2cm1cm1cm大小并经盐水洗净)。
最后将装有上述物质的螺旋管高压(121℃)灭菌15min后备用
13.韦荣球菌选择琼脂:
(VS)
胰蛋白酶水解物0.5g
酵母提取物0.1g
硫基乙醇酸钠0.075g
50%的乳酸钠溶液(2.0-2.5)mL
聚山梨酯-800.1g
混合上述成分并加热使之溶解,待冷却后调PH为7.8,115℃20min或121℃15min高压灭菌。
待冷却至50-55℃时,加入万古霉素溶液(7.5mg/L)1mL和脱纤维兔血或马血5mL混合均匀并倾注平板备用
说明:
1)不含万古霉素和琼脂的乳酸盐培养基可作为韦荣球菌的富集培养基
2)用新霉素(100mg/l)代替万古霉素加入乳酸盐琼脂中,组成韦荣球菌-新霉素琼脂,可用于分离韦荣球菌。
但要注意,其它两种革兰氏阴性厌氧球菌(发酵氨基酸球菌和艾氏巨球菌)均可在此培养基上生长
14.拟杆菌选择琼脂(KVB琼脂)
BHI琼脂100mL
氯化血红素-维生素K1溶液1.0mL
卡那霉素储存液1.0mL
万古霉素储存液1.0mL
无菌脱纤维动物血5mL
将BHI琼脂融化并冷却至50℃左右,加入其它几种成分混匀后倾注于平板备用
1)KVB琼脂还可用TS琼脂或布氏菌血琼脂作基础,配制方法同上
2)用冻融血代替脱纤维马血或兔血配制成卡那霉素-万古霉素溶血琼脂(KVL-BA),这种拟杆菌选择培养基也可用于普雷沃菌和卟啉单胞菌,并有利于产黑色素细菌落的形成
3)在KVBA琼脂和KVLBA琼脂上,除拟杆菌属细菌可生长外,二氧化碳噬纤维菌也可生长
15.拟杆菌胆汁七叶苷琼脂(BBE)
TS琼脂或BHI琼脂100mL
牛胆盐2g
七叶咁0.1g
*枸盐酸铁胺0.05g
*Hemein(5mg/mL)0.2mL
*庆大霉素溶液(40mg/mL)0.25mL
*消毒后冷却至50℃左右加入
16.梭杆菌培养基
1)梭杆菌选择琼脂(FS)
BHI琼脂培养基100mL
FS添加液1.0mL
将BHI琼脂100mL加热使之融化,待冷却至55℃左右加入FS添加液混匀并倾注于平板
FS添加液的配制:
35mg结晶紫溶于越40mL蒸馏水中并加热煮沸灭菌,待冷却至50℃左右加入硫酸新霉素150mg,,万古霉素25mg.混匀后置冰箱内保存
2)梭杆菌选择培养基(CVE)
酵母提取物0.2g
NaCL0.5g
K2HPO43H2O5g
可溶性淀粉2.0g
盐酸半胱氨酸0.05g
结晶紫溶液(5mg/mL)0.1mL
17.颊纤毛菌分离鉴定培养基
1)结晶紫红霉素琼脂(CVEA)
葡萄糖0.2g
色氨酸0.02g
结晶紫溶液(5g/l)0.1mL
高压灭菌冷却至50-55℃,加入红霉素溶液(4g/L)0.1mL和脱纤维兔血5mL,混合后倾倒平板
2)Kasai培养基
K2HPO43H2O5.0g
18.WFF琼脂培养基(沃林菌属鉴别培养基)
胰蛋白酶水解物(BBL)1.5g
丙酮酸钠0.2g
甲酸钠0.15g
琥珀酸钠0.01g
延胡索酸纳0.015g
NacL0.5g
Hemein(500mg/mL)1.0mL
19.伴放线放线杆菌选择琼脂
1)TSBV琼脂
TS琼脂100mL
*马血清10mL
*杆菌肽溶液(7.5g/L)1.0mL
*万古霉素溶液(0.5g/L)1.0mL
*TS琼脂高压灭菌后冷却至50-55℃左右加入杆菌肽溶液,万古霉素溶液和无菌马血清,混合均匀后倾注于平板
2)TSMB琼脂
*孔雀石绿溶液(8g/L)0.1mL
*杆菌肽溶液(12.8gL)1.0mL
*脱纤维羊血(或马,兔血)5.0mL
*将TS琼脂高压灭菌后冷却至50-55℃左右加入孔雀石绿溶液,杆菌肽溶液和脱纤维血,混合后倾注平板
20.克林霉素-硝酸盐(CKA)
KNO3溶液(200g/L)1.0mL
克林霉素溶液(50mg/L)1.0mL
Henein(500mg/L)1.0mL
注意:
将BHI琼脂加热并使之融化后立即加入KNO3溶液和氯化血红素溶液混匀,待冷却至50℃左右时加入克林霉素溶液混匀倾注于平板
21.TPY培养基(双歧杆菌分离选择培养基)
植物胨0.5g
葡萄糖0.5g
酵母提取物0.25g
聚山梨酯-800.1mL
MgCl26H2O0.05g
ZnSO47H2O0.025g
CaCl20.015g
Fecl3微量
琼脂1.5-1.8g
注意:
混合上述溶液高压灭菌,PH6.5,待冷却至50-55℃时加入卡那霉素,新霉素和草履虫霉素
22.改良双歧杆菌选择琼脂(BSA)
番茄汁20mL
蛋白胨1.5g
酵母浸膏0.6g
可溶性淀粉0.05g
DH2O80mL
混合上述溶液高压灭菌,PH6.8,待冷却至50℃时加入BS添加液5mL.(PB配方见附录培养基常用溶液。
添加液及抗生素药物溶液的配置)
23.优杆菌选择培养基:
(改良ES)
ES溶液5.0mL
将已经高压灭菌的BHI琼脂加热融化,冷却至50℃左右加入ES溶液(ES配方见附录)
24.PSS培养基(消化链球菌分离培养基)
酵母提取物1.0g
蔗糖0.1g
VPI盐溶液5..0mL
盐酸半胱氨酸溶液(0.kg/L)0.4mL
混合上述成分并加热使之溶解,调PH至7.6左右,115℃高压灭菌15minl冷却至50℃左右加入马血清5.0mL,A液(0.45%叠氮纳,30%谷氨酸钠,100℃20min灭菌)2mL及B液(吖啶橙0.01%,j结晶紫0.0065%,硫酸铵1.65%,用灭菌蒸馏水配置)2mL,混合后加入平板
25.沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂(SA)
葡萄糖4.0g
将SA中的葡萄糖改为麦芽糖(2%),并加入氯霉素或庆大霉素40g/L-50g/L或防线线菌酮0.5g/L可作为选择琼脂
26.Hayflick培养基(支原体选择培养基)
牛心浸出液100mL
琼脂1.5g
混合上述成分并加热使之溶解,校正PH7.8-8.0,高压灭菌,冷却至80℃左右加入小牛血清或马血清2mL,25%的鲜酵母浸出液1mL,1%的乙酸砣0.25mL,青霉素甲盐溶液(200000U/mL)0.05mL及20%的葡萄糖溶液0.5mL(注意无菌操作),混合均匀后倾注于平板
Hayflick不加琼脂即可配成液体培养基,如加入酚红水溶液(0.002%)可指示支原体是否生长,支原体利用葡萄糖产酸,其培养液变黄
27.PYG液体培养基
(主要用于细菌代谢酸产物分析,也可作为增菌的富集培养基)
VPI盐溶液4.0mL
如用于厌氧菌培养物需加入盐酸半胱氨酸溶液(0.5kg/L)0.1mL和0.1%刃天青溶液0.25mL
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- 常用 培养基 添加剂 配制