线粒体dna鉴定Word文档格式.docx
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实验表明,植物细胞中的所有线粒体都会参与植物本身的一系列新陈代谢的全过程。
植物体内的所有的线粒体通过自身的功能可以把细胞所吸收和合成的糖类、脂肪等所有的储藏能量经过进一步地氧化而生成了co2和h2o,最后通过特定的方式将其释放出去,同时它还能将所存储的一些太阳能经过一系列的转换生成了细胞用以维持自身的生理功能的具体能量-ATp分子。
正是由于植物细胞中的线粒体少于动物体内的线粒体,从而制约了能量的来源,因此植物就不可能出现和动物一样的自由活动和快速增长。
由于线粒体DnA(mtDnA)相对比较小,所以它仅能决定本身最基本的一些特征,缺少多余的编码结构,因此就难以产生有效的修复功能。
实验表明,只要线粒体DnA受到了不同程度的损伤,哪怕只是一个极其微小的变化,都会直接导致和引发线粒体的正常的功能,这种效应还具有一定的累加性,变异的幅度会随着损害程度的变化而不断地加大,最后就会产生连细胞核都无法具备的一些独特功能。
2线粒体DnA的提取方法
鹿科动物的线粒体DnA的常见的提取方法有:
碱变性法;
柱层析法;
氯化铯密度梯度离心法;
Dnase法柱层析法;
改良碱变性法等几种。
碱裂解法是借鉴质粒快速提取法所建立,在差速离心获得线粒体后。
通过高
篇二:
DnA个体识别鉴定书
鉴定机构全称
(英文标题)
(DnA个体识别)×
×
鉴定书
()公()鉴()字[20]号
一、绪论
(一)委托单位:
(二)委托人:
(三)委托时间:
200年月日(四)案情摘要:
(五)检材和样本:
(以下内容为例举)
1、标记“×
”字样物证包装袋一个,内装(现场提取或为受害人的)白色棉内裤一条,裆部可疑斑迹,剪取少许标记为1号检材。
2、嫌疑人张×
的白色的确良衬衫一件,其左胸部、右衣襟处分别可见3cm×
2.1cm和2cm×
2cm面积的褐色斑迹,剪取少许依次标记为2、3号检材。
3、嫌疑人张×
的血样纱布一块,剪取少许标记为4号检材。
(六)鉴定要求:
地址:
邮编:
单位名称:
电话:
第页共页
对上述检材进行DnA检验及同一认定。
二、检验
(以下内容为例举)
(一)检验过程
1、预实验:
取1号检材少许,经酸性磷酸酶检验为阳性。
取2、3号检材少许,经孔雀绿检验为阳性。
2、确证实验:
取1号检材少许,经抗人精试验检验,结果为阳性。
取2、3号检材少许,经抗人hb试验检验,结果为阳性。
3、DnA提取:
按行标gA/T383-20XX中差异裂解法分离1号检材,经消化后,收集上清溶液(备用),取沉淀少许涂片,he染色镜检,高倍镜下可检见精子,应用xxx法提取精子DnA。
按行标gA/T383-20XX中chelex法提取2-4号检材DnA。
4、DnA质和量的检测:
采用xxx系统扩增1-4号检材DnA,经AbI-7500型定量pcR仪分析,确定1-4号检材DnA的质量。
5、sTR多态性检验:
取适量的1-4号检材DnA,应用Identifiler系统,经pcR复合扩增sTR基因座;
扩增产物经AbI-3100型DnA序列分析仪电泳分离和激光扫描分析,得到上述检材的sTR分型结果。
6、线粒体DnA序列分析检验:
取适量2-4号检材的DnA,扩增mtDnAhVI区16091-16418区间片段,扩增产物经纯化后采用big-Dye试剂盒进行测序反应,测序反应产物在AbI377型DnA序列分析仪上进行电泳分离和序列分析,得到2-4号检材的序列结果。
第页共页
7、Y染色体sTR检验:
取适量1-4号检材的DnA,使用Y-xxx系统进行pcR复合扩增,扩增产物Ab-3100型DnA序列分析仪电泳分离和激光扫描分析,得到上述检材的Y-sTR分型结果。
(二)检验结果
1、DnA质和量的检验结果:
2、sTR多态性检验结果:
3、线粒体DnA序列分析检验结果:
2-4号检材在mtDnAhVI区(16091-16418区间)的检测序列与Anderson标准序列比较,碱基变异位置如下:
2号:
16093c,16223A,16362c3号:
16129A,16223A
4号:
16129A,16223A4、Y染色体sTR检验结果:
5、数据库比对过程和复核:
将1号检材sTR分型结果输入中国法庭科学DnA数据库中,经比对查询,与国家数据库中编号为s3*******020XX071956979的样本在xx系统的15个基因座分型结果相同。
经双方实验室再次进行DnA检验分析,sTR结果在xx系统的15个基因座与原分型结果一致。
三、论证
(以下内容为例举)
1、人类染色体的D3s1358、VwA、FgA、D21s11、D18s51、D5s818、D13s317、D7s820、D16s539、D8s1179、Th01、Tpox、csF1po、D2s1338、D19s433等基因座均是人类遗传标记,联合应用可以进行同一认定,其累积个体识别概率为1-1.8×
10。
1、4号检材在D3s1358等15个基因座检测结果相同,采用中国汉族sTR群体数据资料计算似然比率为7.51×
3号检材在D2s1338和FgA没有获得分型结果,3号检材在D3s1358等13个基因座的检测结果与4号检材相同,采用中国汉族sTR群体数据资料计算似然比率为5.72×
1、3、4号检材与2号检材在D3s1358等13个基因座检测结果不相同。
2、人类线粒体DnA(mtDnA)呈母系遗传,同一母系的不同个体mtDnA序列应相同。
当mtDnA序列相同时,不排除母系遗传关系。
3、
9
12
-18
列不同。
3、Y染色体呈父系遗传,同一父系不同男性个体的Y-sTR分型结果应相同。
当Y-sTR分型结果相同,不排除父系遗传关系。
1、3、4号检材在DYs19等8个基因座单倍型相同。
四、鉴定意见(以下内容为例举)
1、在送检的白色棉内裤裆部可疑斑迹中检出人精斑,经n个sTR分型未排除张×
,支持该精斑为张×
所留,不支持为其他随机个体所留。
在送检的白色的确良衬衫左胸部3cm×
2.1cm面积的褐色斑迹中检出女性人血,不是张×
所留。
在送检的白色的确良衬衫右衣襟处2cm×
2cm面积的褐色斑迹中检出人血,经n个sTR分型未排除张×
,支持该血痕为张×
2、在送检的白色的确良衬衫右衣襟处2cm×
2cm面积褐色斑迹中检出人血,该人血与张×
血样的mtDnAhVI区序列范围内一致,不排除两者来自同一母系。
3、在送检的白色的确良衬衫右衣襟处2cm×
血样的8个Y染色体sTR基因座分型一致,不排除两者来自同一父系。
篇三:
DnA亲子鉴定是怎么回事
DnA亲子鉴定是怎么回事
1、DnA的鉴定原理是什么?
如今DnA亲子鉴定技术已经发展到一个比较成熟的阶段,也逐渐被大众所熟知,DnA检测成为了确定人与人之间是否存在血缘关系的最简单最实用的方法。
在DnA检测中,亲子鉴定又比较常见,其鉴定的原理和依据如下:
人体是由约60亿兆个细胞组成,而细胞是由细胞膜、细胞质、细胞核三个基本部分组成。
染色体位于细胞的细胞核中,染色体是细胞核DnA的载体,sTR是细胞核DnA中一些特定的片段。
线粒体位于细胞核外的细胞器中,线粒体DnA的结构数量与细胞核DnA有很大不同。
目前国际上通用的DnA检测标记主要是细胞核sTR分型检测和线粒体DnA高变区测序。
对于一个特定的个体,他染色体上某个特定位置的重复序列的重复次数是固定的,而对于不同的个体在同一位置处的重复次数可能不同,这就构成了人群中这些重复序列的多态性。
由于人类基因组中这种重复序列非常多,通过对这种多态性的检测,就可以明确区分个体与个体的不同,确定父母子的亲缘关系。
核DnA-sTR遗传,完全遵循孟德尔遗传定律,即父母各把自己一半的DnA遗传给孩子,孩子分别带有一半父亲的DnA,一半母亲的DnA,孩子不可能带有父母没有的DnA。
使用核sTR这种标记,可以直接鉴定二代以内直系血亲,比如已知父母,鉴定子女;
或者已知子女,鉴定父母,通过核sTR的鉴定,准确率可高达99.99%以上,这样的准确率达到了可以直接认定亲子关系的程度。
2、DnA亲子鉴定的程序是什么?
DnA是从几滴血,腮细胞或培养的组织纤内提取而来。
用畴素将DnA样本切成小段,放进喱胶内,用电泳槽推动DnA小块使之分离——最细的在最远,最大的最近。
之后,分离开的基因放在尼龙薄膜上,使用特别的DnA探针去寻找基因,,相同的基因会凝聚于一。
然后,利用特别的染料在x光的环境下,便显示由DnA探针凝聚于一的黑色条码。
小孩这种肉眼可见的条码很特别——一半与母亲的吻合,一半与父亲的吻合。
这过程重覆几次,每一种探针用于寻找DnA的不同部位并影成独特的条码,用几组不同的探针,可得到超过99.9%的父系或然率或分辨率。
3、DnA亲子鉴定有多准确?
DnA亲子鉴定是目前亲子测试中最准确的一种。
如果小孩和测试男子的DnA模式在一个或多个的DnA探针上不吻合,那么被测试男子便被100%排除,即他是0%可能是亲生父亲。
他不可能是孩子的生父,如果是母亲,孩子和被测试父亲的DnA模式完全吻合,那么可以计算出99.9%或更大的或然率。
这个结果证明他是实则完全证实小孩的亲生父亲。
大部分的美国法庭接受90%或然率作为生父证明的证据。
4、孩子要到某一年龄才可接受DnA亲子鉴定测试吗?
DnA亲子鉴定测试是无年龄限制.传统的血型测试,要小孩至少6个月。
还有,要大量的血液样本,通常是要两大茶匙以上。
这种方法应用于小孩身上较困难。
相反,DnA亲子鉴定只是要很少几滴的血液(约1/4或1/2茶匙),或是口腔抹擦所得的腮细胞,这种用少量的血液或口腔测试,使DnA测试甚至可以在新生婴或小孩身上进行。
由于DnA是形成于结合期,测试甚至可以在小孩末出世之前,使用(chorionicvillisampling/cVs)胎盘素或抽羊水(amniocentesis)方法来进行。
亲子鉴定可以在已逝世的人的由殡仪馆工人收集的样本上进行。
当一个人已辞世或失踪,还可以在其有血缘关系的亲属上重新编排他或她的DnA组织。
5、亲子鉴定可以在没有母亲参与情况下进行吗?
可以。
DnA亲子鉴定是非常有效,即使在母亲不在的情形下依然有效。
在母亲参
与或不参与的情况下,而孩子和被测试男子的DnA组织排列不吻合,那么被测试者便100%排除为亲生父亲。
如果组织排列吻合,那么我们可计算出99%或更大的生父或然率。
个人如带未成年小孩测试,携带身份文件并签署一份有关他/她在法律上有权带小孩来测试的表格。
6、口腔(腮)抹试准确吗?
测试血液的另一变通办法是一种叫腮抹试(buccalswab)的样本收集方法,由于DnA存在于身体内每个细胞之中,使用抹试方法收集的样本而得出的试验结果的准确性和血液样本一样。
收集样本时用棉签在小孩口内轻轻抹试,DnA便可以从此抽取,这种程序是不强制和无痛,最适宜于小孩。
由于用这种方法提取DnA,更多的步骤可以在大人身上取血而用口腔擦试在小孩上取得样本,大人也可选择使用口腔抹擦测试。
7、被测试的人分布在不同的城市可以吗?
完全无问题。
8、要医院证明或律师信才可以做DnA亲子鉴定吗?
不一定。
9、亲子鉴定可以在小孩出世前做吗?
可以,用DnA鉴定,亲子测试可以在小孩未出世前进行。
DnA测试可通过cVb胎盘素,常在怀胎10到13个星期,或用抽羊水方法在怀孕14到24星期内进行。
任何一种手术要由一位ob/gYn医生实施。
10、可否请解释亲子鉴定测试的结果?
孩子会有一条纹与亲生母亲相同而另一条码与待证实父亲1号(AF1)相同,此人是生父;
被排除的男子(AF2),则与小孩并无相同的条码。
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- 线粒体 dna 鉴定