第七章体液蛋白质检验.ppt
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1第七章第七章体液蛋白质检验体液蛋白质检验人人类白蛋白分子类白蛋白分子2n本章内容概要:
本章内容概要:
第二节第二节体液蛋白质测定体液蛋白质测定第一节第一节概述概述311、掌握掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类;个别血浆蛋白质血浆蛋白质的组成、功能及分类;个别血浆蛋白质(前白蛋白、白蛋白)的来源和生理功能;血清总蛋白和白(前白蛋白、白蛋白)的来源和生理功能;血清总蛋白和白蛋白的测定方法和原理。
蛋白的测定方法和原理。
22、熟悉熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类;血清球蛋白和纤急性时相反应蛋白的概念和种类;血清球蛋白和纤维蛋白原的测定方法。
维蛋白原的测定方法。
33、了解了解其他蛋白质的来源和生理功能;尿液蛋白和脑脊液其他蛋白质的来源和生理功能;尿液蛋白和脑脊液蛋白的检测蛋白的检测。
n本章教学要求:
本章教学要求:
第一节第一节概述概述一、血浆蛋白质的分类和功能二、血清蛋白质电泳组分的临床分析三、血浆蛋白质及其异常四、其他体液蛋白质4一、血浆蛋白质的分类和功能一、血浆蛋白质的分类和功能n组成:
组成:
种类:
种类:
1000种种500种种200种种含量:
含量:
gmgg来源:
肝脏是蛋白质主要的加工厂来源:
肝脏是蛋白质主要的加工厂
(一)血浆蛋白质的组成、功能及分类
(一)血浆蛋白质的组成、功能及分类6vv营养作用,修补组织蛋白营养作用,修补组织蛋白营养作用,修补组织蛋白营养作用,修补组织蛋白;vv维持血浆胶体渗透压:
维持血浆胶体渗透压:
维持血浆胶体渗透压:
维持血浆胶体渗透压:
主要是主要是主要是主要是白蛋白;白蛋白;白蛋白;白蛋白;vv作为作为作为作为PHPH缓冲系统的一部分:
缓冲系统的一部分:
缓冲系统的一部分:
缓冲系统的一部分:
酸性或碱性蛋白质;酸性或碱性蛋白质;酸性或碱性蛋白质;酸性或碱性蛋白质;vv运输作用:
运输作用:
运输作用:
运输作用:
作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体;药物等的载体;药物等的载体;药物等的载体;vv体液免疫防御系统:
体液免疫防御系统:
体液免疫防御系统:
体液免疫防御系统:
作为免疫球蛋白与补体等免疫分子;作为免疫球蛋白与补体等免疫分子;作为免疫球蛋白与补体等免疫分子;作为免疫球蛋白与补体等免疫分子;vv催化作用:
催化作用:
催化作用:
催化作用:
酶的本质;酶的本质;酶的本质;酶的本质;vv代谢调控作用;代谢调控作用;代谢调控作用;代谢调控作用;作为底物,酶或中间产物抑制或激活组织作为底物,酶或中间产物抑制或激活组织作为底物,酶或中间产物抑制或激活组织作为底物,酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶;蛋白酶;蛋白酶;蛋白酶;vv参与凝血与纤维蛋白溶解;:
参与凝血与纤维蛋白溶解;:
参与凝血与纤维蛋白溶解;:
参与凝血与纤维蛋白溶解;:
除除除除因子外均可。
因子外均可。
因子外均可。
因子外均可。
血浆蛋白质血浆蛋白质的功能的功能血浆蛋白质血浆蛋白质的分类的分类77分离方法分离方法盐析法:
白蛋白盐析法:
白蛋白/球蛋白球蛋白(pH7.0半饱和的硫酸铵溶液)半饱和的硫酸铵溶液)电泳法:
电泳法:
醋酸纤维素薄膜电泳:
醋酸纤维素薄膜电泳:
6种种琼脂糖凝胶电泳:
琼脂糖凝胶电泳:
13种种聚丙烯酰胺凝胶电泳:
聚丙烯酰胺凝胶电泳:
30种种SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳:
聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳:
300种种分分辨辨率率增增高高-+纤维蛋白原纤维蛋白原醋酸纤维素薄膜醋酸纤维素薄膜醋纤膜电泳或琼脂糖电泳:
5个成分清蛋白1球蛋白2球蛋白球蛋白球蛋白分辨率高时:
可有7个成分有1和22中也可有两条聚丙烯酰胺凝胶电泳:
可以分出30多种蛋白质醋纤膜电泳或琼脂糖电泳:
5个成分清蛋白1球蛋白2球蛋白球蛋白球蛋白2.电泳分类法电泳分类法是临床实验室常是临床实验室常用的血浆蛋白质用的血浆蛋白质电泳方法电泳方法分辨率高时:
可有7个成分有1和22中也可有两条聚丙烯酰胺凝胶电泳:
可以分出30多种蛋白质93.功能分类法功能分类法
(1)运输载体类u血浆脂蛋白:
包括血浆脂蛋白:
包括CMCM、VLDLVLDL、LDLLDL、HDLHDL等等u前清蛋白与清蛋白前清蛋白与清蛋白u甲状腺素结合球蛋白甲状腺素结合球蛋白u皮质素结合球蛋白皮质素结合球蛋白u类固醇激素结合球蛋白类固醇激素结合球蛋白u视黄醛结合蛋白视黄醛结合蛋白u转铁蛋白转铁蛋白u触珠蛋白触珠蛋白u血色素结合蛋白血色素结合蛋白u铜蓝蛋白铜蓝蛋白
(2)蛋白酶抑制物:
包括1-抗胰蛋白酶、1-抗糜蛋白酶、2-巨球蛋白等6种以上(3)血清酶类:
血浆固有酶如LCAT等组织细胞少量释放的细胞内酶细胞破裂而进入血循环的细胞内酶(4)蛋白类激素:
胰岛素、胰高血糖素、生长激素等(5)凝血蛋白类(6)免疫球蛋白类(7)补体蛋白类
(2)蛋白酶抑制物:
包括1-抗胰蛋白酶、1-抗糜蛋白酶、2-巨球蛋白等6种以上(3)血清酶类:
血浆固有酶如LCAT等组织细胞少量释放的细胞内酶细胞破裂而进入血循环的细胞内酶(4)蛋白类激素:
胰岛素、胰高血糖素、生长激素等(5)凝血蛋白类(6)免疫球蛋白类(7)补体蛋白类还有许多种类的蛋白质未被认识还有许多种类的蛋白质未被认识2.功能分类法功能分类法11.作为运载蛋白作为运载蛋白22.组织蛋白酶抑制物组织蛋白酶抑制物33.在血浆中起催化作用的酶在血浆中起催化作用的酶44.参与代谢调控作用的蛋白质和肽类激素参与代谢调控作用的蛋白质和肽类激素55.参与凝血与纤维蛋白溶解参与凝血与纤维蛋白溶解66.组成体液免疫防御系统(组成体液免疫防御系统(IgIg与补体与补体)所有血浆蛋白质能所有血浆蛋白质能维持血浆胶体渗透压维持血浆胶体渗透压组成血液组成血液pHpH缓冲系统缓冲系统
(二)血浆蛋白质的功能
(二)血浆蛋白质的功能生物生物化学化学急性时相反应(acutephasereaction,APR):
血浆蛋白质对急性炎症和组织损伤的非特异性反应。
此时许多蛋白质:
如1-抗胰蛋白酶、1-酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、C4、C3、纤维蛋白原和C-反应蛋白等浓度显著升高或升高,而少数蛋白质如前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白则出现相应下降。
急性时相反应蛋白(acutephasereactiveprotein,APP):
对急性炎症和组织损伤起非特异反应从而出现浓度变化的血浆蛋白质。
增加的蛋白质称为正向APP下降的蛋白质称为负向APP121.急性时相反应(三)影响血浆蛋白质浓度的因素(三)影响血浆蛋白质浓度的因素机体哪些情况会出现急性时相反应?
急性细菌性感染如急性肺炎、链球菌感染性肾炎急性非特异性炎症如风湿性关节炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病等急性心肌梗死恶性肿瘤手术、创伤13APR的机制的机制v炎症损伤部位释放的细胞因子,包括白介素、炎症损伤部位释放的细胞因子,包括白介素、肿瘤坏死肿瘤坏死因子因子和和、干扰素以及血小板活化因子等,、干扰素以及血小板活化因子等,引发肝细引发肝细胞中上述蛋白质合成量的改变胞中上述蛋白质合成量的改变。
v正向正向APPAPP是机体防御机制的一个部分,如:
是机体防御机制的一个部分,如:
增加的蛋白酶抑制剂控制组织中的酶活性增加的蛋白酶抑制剂控制组织中的酶活性触珠蛋白保护从破坏红细胞中释放的触珠蛋白保护从破坏红细胞中释放的HbHbCC反应蛋白等可活化反应蛋白等可活化补体补体v负向负向APPAPP多作为营养蛋白,此时合成减少,可为多作为营养蛋白,此时合成减少,可为合成正向合成正向APPsAPPs提供更多的氨基酸原料。
提供更多的氨基酸原料。
14APR的时相的时相vC-C-反应蛋白:
首先升高反应蛋白:
首先升高v1-1-酸性糖蛋白:
酸性糖蛋白:
1212小时内也升高小时内也升高v1-1-抗胰蛋白酶、触珠蛋白、抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4C4和纤维蛋白原然后升和纤维蛋白原然后升高高vC3C3和铜蓝蛋白:
最后是升高和铜蓝蛋白:
最后是升高v通常在通常在2255天内这些天内这些APPsAPPs达到最高值达到最高值15测定测定APP的临床意义的临床意义帮助帮助监测炎症的发生、变化和观察治疗监测炎症的发生、变化和观察治疗反应,反应,尤其尤其是那些升高最早和最多的蛋白质是那些升高最早和最多的蛋白质1630二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析血浆蛋白质和血清蛋白质有何不同?
血浆:
为生理状况血清:
为常用检测标本血浆蛋白质和血清蛋白质有何不同?
血浆:
为生理状况血清:
为常用检测标本31
(一)血清蛋白质电泳的正常组分及其含量
(一)血清蛋白质电泳的正常组分及其含量清蛋白:
57681球蛋白:
1.05.72球蛋白:
4.911.2球蛋白:
713球蛋白:
9.818.2醋纤膜电泳正常百分含量清蛋白:
57681球蛋白:
1.05.72球蛋白:
4.911.2球蛋白:
713球蛋白:
9.818.2醋纤膜或琼脂糖电泳正常区带区带图谱区带图谱扫描图谱扫描图谱kk1.肾病综合征2.肝硬化肝硬化正常图谱典型的典型的-桥桥不典型不典型-桥桥IgG型IgA型3.多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤2典型的异常电泳图谱及其扫描曲线典型的异常电泳图谱及其扫描曲线(四)(四)球蛋白增多与球蛋白增多与M蛋白蛋白Ig多克隆性增多:
区带呈弥散性升高见于反复或慢性感染、自身免疫性疾病、肝细胞疾病或寄生虫感染。
Ig单克隆性增多M蛋白:
区带局部有深染窄带浆细胞病、尤其恶性浆细胞病时,异常浆细胞单克隆增殖,产生大量单克隆Ig或轻链或重链片段,病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白Ig多克隆性增多:
区带呈弥散性升高见于反复或慢性感染、自身免疫性疾病、肝细胞疾病或寄生虫感染。
Ig单克隆性增多M蛋白:
区带局部有深染窄带浆细胞病、尤其恶性浆细胞病时,异常浆细胞单克隆增殖,产生大量单克隆Ig或轻链或重链片段,病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白2223二、血浆蛋白质二、血浆蛋白质
(一)前白蛋白
(一)前白蛋白(PAPA)
(二)白蛋白
(二)白蛋白(ALBALB)(三)(三)1-1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白(AAGAAG)(四)甲胎蛋白(四)甲胎蛋白(AFP)(AFP)(五)结合珠蛋白(五)结合珠蛋白(Hp)(Hp)(六)(六)2-2-巨球蛋白巨球蛋白(AMG)(AMG)(七)铜蓝蛋白(七)铜蓝蛋白(CER/CP)(CER/CP)(八)转铁蛋白(八)转铁蛋白(TRF)(TRF)(九)(九)22微球蛋白微球蛋白(BMG)(BMG)(十)(十)C-C-反应蛋白质反应蛋白质(CRP)(CRP)24n结构:
结构:
MW=54000MW=54000,四个相同亚基构成的四聚体。
,四个相同亚基构成的四聚体。
n理化性质:
理化性质:
pp4.74.7,肝细胞合成,肝细胞合成,半寿期半寿期1212小时小时。
n测定方法:
测定方法:
免疫比浊法免疫比浊法免疫扩散技术免疫扩散技术。
25n功能:
功能:
营养指标,载体功能(甲状腺素维生素)。
营养指标,载体功能(甲状腺素维生素)。
n临床意义临床意义:
1.1.作为营养不良的早期指标;作为营养不良的早期指标;2.2.作为肝功能不全的指标,比作为肝功能不全的指标,比AlbAlb更灵敏;更灵敏;3.3.负性急性时相反应蛋白,负性急性时相反应蛋白,急性炎症,恶性肿瘤,急性炎症,恶性肿瘤,肝硬化肝硬化及肾炎等情况下,及肾炎等情况下,PAPA迅速降低。
迅速降低。
n参考值参考值:
0.180.180.45g/L0.45g/L。
26急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白272829n结构结构:
585585个个aaaa残基构成的单链多肽,残基构成的单链多肽,MW=66458MW=66458,含,含17个个二硫二硫键。
键。
n理化性质理化性质:
pI=4pI=45.85.8,肝细胞合成但不储存,半衰期为,肝细胞合成但不储存,半衰期为15-1915-19天,占总蛋白的天,占总蛋白的40%40%60%60%,pp7.47.4时带负电。
时带负电。
n测定方法测定方法:
色素结合法:
色素结合法:
溴甲酚绿(溴甲酚绿(BCGBCG),溴甲酚紫()
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- 关 键 词:
- 第七 体液 蛋白质 检验