超微量分光光度计推荐书Word下载.docx

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细菌的OD600值

具有常规紫外可见分光光度计的所有功能

2.1仪器的检测功能

Implen超微量分光光度计既可使用超微量比色皿（左图），也可使用常规比色皿（右图），一机多用。

仪器中内置的检测方法包括：

2.1.1核酸的定量

1）紫外法直接测量核酸的浓度和纯度，包括双链DNA（dsDNA）、单链DNA（ssDNA）、RNA、寡聚核苷酸（oligo）的浓度和纯度。

2）染色法测量核酸的浓度和纯度，以及染料结合率（FOI）。

紫外法测dsDNA结果界面染色法测dsDNA结果界面

吸光度比值被用来估算核酸的纯度：

A260/A280>

1.8纯DNA

2.0纯RNA

A260/A230>

2.0纯核酸

A230：

表示样品中一些污染物的吸光度，如碳水化合物、多肽、苯酚等。

A280：

表示蛋白质的吸光度。

A320：

为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子，该值应该接近0。

A260/A280是核酸纯度的指示值：

纯度好的DNA，在pH7-8.5下，其比值约在1.8（DNA）或者2.0（RNA）左右。

如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

A260/A230也是核酸纯度的指示值：

较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。

若比值小于2.0，表明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。

2.1.2蛋白质的定量

1）紫外法直接测定蛋白质的浓度和纯度。

2）染色法测定蛋白质的浓度和纯度，以及染料结合率（FOI）。

3）比色法测定蛋白质的浓度和纯度，包括BCA（二喹啉甲酸法）、Bradford（考马斯亮蓝法）、Lowry（酚试剂法）、Biuret（双缩尿法）。

2.1.3测量细胞溶液的浓度OD600

2.1.4具有常规超微量分光光度计的所有功能，能测量一般化学物质的吸光度

200nm-900nm全波长扫描只需3.5秒。

2.1.5其他的功能项目

单波长法、浓度测量、全波长法、动力学法、标准曲线、多波长法、吸光度比率。

2.2仪器的特点

2.2.1专利的样品压缩技术，保证了结果的准确性

NanophotometerTM利用两个光学平面镜将样品固定于上样孔（石英检测窗口和光学平面镜稀释盖）。

这种改变光程的技术不依赖样品的表面张力，同时在很大程度上减少了样品的蒸发，没有外界光线的干扰，保证了很好的重复性，尤其对溶于易挥发溶剂中的样品。

2.2.2上样量少

最小上样量只需0.3ul，是全球上样量最少的分光光度计。

2.2.3无需稀释样品，样品可回收

减少了人为误差，并减少手动稀释所浪费的时间，保证了样品的稳定性。

2.2.4终身免校正

密封的光路系统且无拆换部件，使得Implen超微量分光光度计具有很高的精度，且终身无需校正，免去了昂贵的校正费用，节省宝贵的时间。

2.2.5检测范围宽

由于缩短了光程，所以增大了浓度检测的范围。

所以NanophotometerTM的检测浓度范围测非常广阔：

dsDNA:

2-18750ng/ul;

ssDNA:

2-13875ng/ul;

RNA:

2-15000ug/ul;

Oligo:

2-12375ng/ul;

蛋白质:

0.08-543mg/ml。

因此，几乎所有样品都不需要稀释而直接可进行浓度测定（适合全波长扫描）。

2.2.6检测快速

全波长扫描时间（200—900nm）只需3.5s，每个样品所需要的时间不到5秒钟，快速的检测速度为大量的样品检测节省了宝贵时间。

2.2.7无需连接电脑，移动方便

2.2.8灵活的数据输出方式

NanophotometerTM的数据输出方式有内置打印机、U盘、USB线。

内置打印机可以方便的将实验结果马上打印，方便重要数据的保存和分析；

USB接口和U盘连接电脑，一些需要长久保留的数据可方便的储存到个人电脑中，实现灵活性与可移动性的统一。

2.2.9内置漩涡振荡器

检测前快速的混匀样品，使结果更精确。

2.3.0操作简单

3、仪器特点分析

客户的问题

ImplenNanophotometer的解决方案

客户的利益

样品珍贵，样品量大会造成浪费

最低上样量0.3ul

节省样品

数据测量的稳定性不好

光学部件固定无移动、样品无挥发、不受外界光线影响、不受表面张力影响

保证样品的稳定。

不依赖液体表面张力，高浓度蛋白质也可测

整体合一、无需拆封、保证终身光程无需校正

无机械磨损、数据精确无浮动

无需校正、无额外费用

有时需用常规比色皿测蛋白质或细菌的OD600

微量和常规比色皿都可使用

一机两用，测量浓度范围广（dsDNA：

2—18750ng/ul）

样品浓度大，测量时需要稀释，实验流程麻烦

通过改变光程，最广的检测范围（光度测量最大值为2.5Abs）（dsDNA:

2—18,750ng/ul）

无需稀释样品，简化实验流程，减少实验误差

实验时间太长

全波长扫描200—950nm只用3.5s

节省时间，并且减少因时间长带来的误差

很多仪器需要连接电脑、占空间

独立操作，无需连接个人电脑，小于4.5kg

容易搬动、易调整、设备便携

清洗比色皿很麻烦

可拆卸的微量比色皿容易清洗，惰性材料设计。

清洗简单，比色皿和稀释盖可用擦镜纸清洗

数据操作麻烦

独立的操作系统，通过内置热敏打印机、USB接口、SD卡或者蓝牙可轻松输出数据。

实验操作快捷、数据输出简单

样品不均匀

内置漩涡振荡器

上样均匀，结果准确

后期维护麻烦

光学部件固定物移动。

闪光氙灯寿命可用10年，只在检测时候打开终身无需校正，

无需个人电脑、终身无需校正、3年至少可节省1500欧元、维护简单

4、仪器的检测范围

核酸的检测范围

蛋白质的检测范围

5、Implen超微量分光光度计的配置清单

产品型号

配置

P-300

主机一台、无需连接电脑、蓝色屏显、软件一套、说明书一份、电源线3根、USB线一根、稀释盖一个：

0.2mm

P-330-31-10

主机一台、无需连接电脑、蓝色屏显、软件一套、说明书一份、电源线3根、USB线一根、漩涡混匀器、热敏打印机一台、稀释盖两个：

0.2mm，1mm

稀释盖

2mm、1mm、0.2mm、0.1mm、0.04mm

6、与Nanodrop的比较

Nanodrop2000/2000C超微量分光光度计，应用液体的表面张力特性，样品体积需要0.5~2ul，在检测台上，经上下臂的接触拉出固定的光径。

NanoDrop2000使用高能量氙灯（pulsedxenonflashlamp），提供190~840nm的全光谱检测。

搭配高感度CCDarray检测器，检测吸收值达300Abs（dsDNA浓度2~15000ng/ul）。

ImplenP-360Nanodrop2000/2000C

与Nanodrop相比，主要是原理上的差异：

Implen超微量分光光度计的技术原理是样品压缩技术，利用两个光学平面镜将样品固定于上样孔（石英检测窗口和光学平面镜稀释盖）。

这种改变光程的技术不依赖样品的表面张力，同时在很大程度上减少了样品的蒸发，没有外界光线的干扰，保证了很好的重复性，尤其适用于溶于易挥发溶剂中的样品，和浓度大的样品。

Implen超微量分光光度计的光路图

Nanodrop2000的技术原理是：

根据液体的表面张力，使所测样品在两条机械臂之间形成小的液体柱，通过机械臂的上下移动来改变光程（0.05mm-1mm）。

例如：

液体的表面张力使得待测样品在两个光纤之间形成1mm的液体薄膜，从而使样品的光程固定为1mm。

这样靠机械臂拉伸样品来改变光程，将样品拉成一个液柱，需要依赖样品的表面张力。

因为高浓度的蛋白质溶液不能提供足够的表面张力，所以像Nanodrop的这种依赖液体表面张力的技术，容易使液体柱断裂，产生错误的数据。

表面张力不够时，液柱被拉断了。

机械臂拉伸技术不适合多数蛋白质浓度的测定！

Nanodrop2000/2000C的检测步骤

Implen超微量分光光度计NanophotometerTM与Nanodrop的对比

项目

Implen

Nanodrop2000/2000C

ImplenNanophotometerTM的优势

常规比色皿应用

是

2000没有，只有2000C有

同时可常规比色皿，检测细菌OD600及其他实验，一机两用

微升量的蛋白质测量

是

否

不依赖液体表面张力，特别适用于浓度大的样品和蛋白质样品。

而Nanodrop依靠机械臂拉伸样品改变光程，需要依赖样品的表面张力，极易造成蛋白质样品的断裂

独立的操作系统

灵活易搬动，无需连接个人电脑

数据输出

内置打印机，USB，U盘

个人电脑

灵活的数据输出方法，便于记录打印

维修校正

不需要

每6月一次

无额外费用，终身无需校正

上样体积

0.3ul

0.5ul

上样量是全球最小

标准曲线

支持

只有ND2000c

可制作标准样品的标准曲线

波长范围

190—1100nm

190—840nm

测量波长范围宽

可稀释倍数

5,10,50,100,250

10,50,100,200

不同倍数的稀释可提高准确性，测量范围宽

倍数改变

手动

自动

手动改变稀释倍数保证了波长的精确性；

且自动的测距系统容易导致漂移从而影响数据的准确性

样品挥发

无

有

样品在密闭环境，无挥发，亦不会受到外界环境干扰

8、其它资料

目前国内外已有许多的研究单位应用Implen超微量分光光度计做各种研究，在此列出部分实验室发表的论文，标题如下：

乙酰肝素酶和SDF-1/CXCR4生物学轴在乳腺癌中的表达及临床意义

小鼠皮肤切创愈合过程中周围型大麻素受体的时间依赖性表达研究

肾上腺素能受体基因组Trp64ArgSNP与膀胱过度活动性的研究

DASH1在肺神经内分泌内分泌肿瘤中的表达及其临床意义

中国医科大学

西农萨能奶山羊脂肪酸合酶基因启动子的克隆及活性测定

西北农林科技大学动物科技学院/陕西省动物分子重点实验室

应用PCR_DGGE技术分析BKS-2型糖尿病模型小鼠盲肠内容物微生物菌群结构

东南大学学习研究中心（生物科学与医疗工程学院）

DB小鼠口腔微生物基因组SOLID高通量测序模板制备

南京庄晓学院生物化学与工程学院

IdentificationandGenomicSequenceofaGhrelinReceptor（GHS-R）-likeReceptorinthe

MozambiqueTilapia,Oreochromismossambicus.

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MiyazatoandKenjiKangawa.

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Dissertation,KarolinskaUniversityPress,StockholmSweden,ISBN91-7140-578-X