植物检疫东北农业大学植物科学与技术试验教学示范中心Word文档格式.docx

植物检疫东北农业大学植物科学与技术试验教学示范中心Word文档格式.docx

《植物检疫东北农业大学植物科学与技术试验教学示范中心Word文档格式.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《植物检疫东北农业大学植物科学与技术试验教学示范中心Word文档格式.docx（12页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

农产品检验技术是按照粮油食品的行业标准，通过实验的手段来检测农产品的合格程度，它是农学专业学生必修的重要专业基础课。

该课程采用实验的方式，主要是锻炼学生的动手操作能力，主要操作内容为粮油食品卫生检验和品质分析两大部分，讲授转基因产品的基本检测。

三、实验教学目标及基本要求

通过实验教学，使学生掌握农产品感官指标、理化指标、卫生指标检验检测的基本方法和手段，为将来从事农产品检验工作奠定基础。

四、教材及主要参考书

1.顾炳刚主编，粮油食品卫生检验，中国财政经济出版社，2002

2.粮油食品品质分析，中国财政经济出版社，2002

3.张蕊主编，2004食品卫生检验新技术标准规程手册（上、中、下），光明日报出版社，2004

4.中华人民共和国农业行业标准无公害食品（第二批）种植业部分2002—07—25发布中华人民共和国农业部

5.张洪程，高辉，严宏生等，农业标准化原理与方法，中国农业出版社2002

6.于冷，农业标准化，上海教育出版社　2004

五、考核办法

本实验考核采用百分制。

（1）预习报告，占10%。

（2）实验态度，占10%。

（3）课堂提问，占10%。

（4）动手能力，占40%。

（5）作业完成情况，占30%。

大纲主撰人：

马春梅

（一）实验项目1马拉硫磷残留量的测定

1、实验特点

实验类型：

综合实验实验类别：

专业基础计划学时：

6学时

每组人数：

6人首开日期：

第5学期

2、实验目的与要求

（1）.学会使用分液漏斗，掌握分液操作技术；

（2）熟练掌握分光光度计的使用方法；

（3）掌握铜络合物比色法测定马拉硫磷的操作技能和技术要求。

3、主要仪器设备

序号

主要仪器设备名称

型号规格

数量（个/班）

1

分光光度计

2

电动振荡器

3

分液漏斗

36

4

粉碎机

具塞锥形瓶

6

酸式滴定管

7

微量移液器

12

4、实验内容提要

选择适当的粮食品种作为检测对象，按操作方法认真准备，分组分步进行。

要认真观察实验现象，掌握实验要领，做好记录，并按时完成实验报告。

5、实验操作要点

（1）样品提取液制备

称取20.0g粉碎并全部通过20目筛的样品，置于200ml具塞锥形瓶中，加40.00ml四氯化碳，盖紧瓶塞，于振荡器上振荡2h，静置，过滤。

吸取20.00ml滤液于125ml分液漏斗中，加0.20ml的二硫化碳一四氯化碳的混合液，加10.0ml酸性硫酸钠溶液，振摇1min，静置分层，将四氯化碳层转入另一分液漏斗中，弃去水层。

（2）标准系列的制备

精密吸收0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50ml马拉硫磷标准使用液（相当于含马拉硫磷0、50、100、150、200、250μg），分别置于125ml分液漏斗中，加四氯化碳至20.00ml，再各加0.20ml的二硫化碳一四氯化碳混合液。

（3）显色与比色

于样品溶液及马拉硫磷标准系列溶液中各加5ml无水乙醇，加0.40ml6mol／L氢氧化钠溶液准确剧烈振摇lmin，立即加入10.0ml4.5％的硫酸钠溶液，混匀，加1滴酚酞指示剂，加6mol／L盐酸反应至酚酞将褪色，再用lmol／L盐酸调至pH为3－4（用小块pH试纸检查），再加0.5Iml5％三氯化铁溶液，振摇1min，静置分层（如乳化可离心分离），弃去四氯化碳层，用2ml四氯化碳洗涤水层，振摇1min，静置分层后弃去四氯化碳层，如四氯化碳层带黄色，再用四氯化碳洗涤水层，直至无色，然后，在水层中准确加入8.00ml四氯化碳，0.50ml3.5％硫酸铜溶液，准确振摇1min。

静置分层后将四氯化碳层通过脱脂棉滤入2厘米比色皿，以四氯化碳调节零点，在20min内于波长415nm处测吸光度，绘制标准曲线，比较定量。

6、注意事项

二硫化碳具有易燃易爆性，使用时要注意安全，用毕应储于低温库中。

加二硫化碳的目的是除去样品中可能存在的铜离子，以防止分解马拉硫磷。

（二）实验项目2小麦粉中过氧化苯甲酰的测定方法

4学时

第6学期

小麦粉中的过氧化苯甲酰在酸性条件下被还原，生成苯甲酸，以溶剂提取并用气相色谱法测定。

通过实验，使学生掌握气相色谱仪的操作方法。

气相色谱仪

磁力搅拌器

电子天平

微量移液器（套）

过氧化苯甲酰是食品中常用的一种添加剂，通过气相色谱法检验小麦粉中过氧化苯甲酰的含量，使学生熟悉实验方法，掌握气相色谱仪的操作方法。

（1）测定液的制备

准确称取试样5.00g，置于100ml具塞锥形瓶中，加30ml酸性石油醚和搅拌块，以磁力搅拌器将试样分散（也可直接用手工操作，将试样旋荡分散），于30℃恒温放置，并每隔15min搅拌或旋荡一次。

4h后样品溶液经滤纸过滤，收集滤液于50ml容量瓶中。

分数次用酸性石油醚将锥形瓶中残余试样尽量洗入过滤漏斗，收集滤液于容量瓶中。

最后以少许酸性石油醚淋洗过滤漏斗中的试样残渣定容至50ml，作为试样测定液。

（2）标准曲线的制作

以微量注射器依次取不同浓度的苯甲酸标准溶液2.0μl，注入气相色谱仪，以其苯甲酸峰面积为纵坐标，苯甲酸浓度为横坐标，绘制标谁曲线。

（3）测定

色谱条件：

内径3mm，长2m的玻璃柱，填装涂布5％（m／m）DEGS十1％磷酸固定液的ChmmosorhW／AWDMCS（60目～80目），调节载气（氮气）流速，使苯甲酸于（5-10）min出峰，柱温为160℃，恒温10min后，以10℃／min的升温速率程序升温至190℃，并保持恒温至32min，完成测试。

检测器和进样口温度为250℃。

不同型号仪器调整为最佳工作条件。

进样：

以10μL微量注射器吸取2.0μL测定液，注入气相色谱仪，取试样的苯甲酸峰面积与标准曲线比较定量。

同学可集中讨论实验内容，但每人报告内容不应完全相同。

（三）实验项目3甜菜含糖率的测定

验证实验实验类别：

通过实验，使学生掌握甜菜含糖率的测定方法和手段，巩固所学的理论知识。

WZZ-2AB自动旋光仪

WYT－I型手持糖量计

4

容量瓶

30

旋光法测糖的原理是基于糖类分子具有不对称碳原子，可使通过的光的偏振面旋转。

当光的波长、温度和液层厚度一定时，溶液中蔗糖的浓度与偏振光面旋转角度成正比。

甜菜块根中主要为蔗糖，因此，可用旋光仪测定甜菜块根的含糖率。

5.1　WYT－I型手持糖量计

　选择代表性甜菜块根，以取样器直接取样，压汁器压取汁液，滴入折光棱镜表面，目视读数。

5.2　WZZ-2AB自动旋光仪

　　5.2.1蔗糖标准系列溶液的配制

称取26.0g蔗糖，制成100ml溶液，即为100糖分度的标准蔗糖溶液。

分别稀释成0、5、10、15、20、25糖分度的蔗糖标准系列溶液。

5.2.2测定

（1）将仪器电源插头插入220v交流电源，（要求使用交流电子稳压器1KVA），并将接地线可靠接地。

（2）向上打开电源开关（右侧面），这时钠光灯在交流工作状态下起辉，经5min钠光灯激活后，钠光灯才发光稳定。

（3）向上打开光源开关（右侧面），仪器预热20min（若光源开并板上后，钠光灯熄灭，则再将光源开关上下重复扳动1到2次，使钠光灯在直流下点亮，为正常）。

（4）按“测量”键，这时液晶屏应有数字显示。

注意：

开机后“测量”键只需按一次，如果误按该键，则仪器停止测量，液晶屏无显示。

用户可再次按“测量”键，液晶重新显示，此时需重新校零。

（若液晶屏已有数字显示，则不需按“测量”键）。

（5）将装有蒸馏水或其它空白溶剂的试管放入样品室，盖上箱盖，待示数稳定后，按“清零”键。

试管中若有气泡，应先让气泡浮在凸颈处；

通光面两端的雾状水滴，应用软布揩干试管螺帽不宜旋得过紧，以免产生应力，影响读数。

试管安放时应注意标记的位置和方向。

（6）取出试管。

将标准样品和待测样品分别注入试管，按相同的位置和方向放入样品室内，盖好箱盖，仪器将显示出该样品的旋光度，此时指示灯“1”点亮。

（7）按“复测”键一次，指示灯“2”点亮，表示仪器显示第一次复测结果，再次按“复测”键，指示灯“3”点亮，表示仪器显示第二次复测结果。

按“123”键，可切换显示各次测量的旋光度值。

按“平均”键，显示平均值，指示灯“AV”点亮。

（8）如样品超过测量范围，仪器在±

45°

处来回振荡。

此时，取出试管，仪器即自动转回零位。

此时可将试液稀释一倍再测。

（9）仪器使用完毕后，应依次关闭光源、电源开关。

5.2.3绘制标准曲线

以横轴为浓度，纵轴为旋光度，绘成旋光曲线。

5.2.4计算

测出样品的旋光度，根据旋光度从旋光曲线上查出该样品的浓度。

（四）实验项目4农药残留的检测

通过实验，使学生明确和掌握农药残留的速测方法和手段，巩固所学的理论知识。

723P农药残留速测仪

培养箱

空气浴振荡器

在一定条件下，有机磷和和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酶正常功能有抑制作用其抑制率与农药的浓度成正比。

（1）样品处理

叶菜类称取2克（非叶菜菜称取4克，切碎），置于150ml锥形瓶中，加入20ml提取试剂，震荡1-2分钟，倒出上清液，静置3分钟，取一平底试管，加入50μl酶、3ml样本提取液、50μl显色剂，把配制好的样品放入37-38℃培养箱中培养30分钟，取出培养好的样品，加入50μl底物，倒入比色皿，立即进行723P仪器测定。

（2）对照处理

于平底试管中加入50μl酶、50μl显色剂、3ml提取试剂，把配制好的对照组放入37-38℃培养箱中培养30分钟，加入50μl底物，倒入比色皿，立即进行723P仪器测定。

（五）实验项目5大豆籽粒中氨态氮含量的测定

本实验采用茚三酮比色法测定，要求学生进一步掌握分光光度计的操作方法。

恒温水浴锅

大豆植株各营养器官流转的氮源，以营养体蛋白水解产生的氮素化合物为主体，含有大量的各种氨基酸，因此，大豆植株各营养器官的氨态氮水平，将反映出大豆的生长发育和氮素流转特性，代表大豆籽粒的品质状况。

（1）称样:

准确称取不同基因型大豆籽粒粉碎样品0.1克。

（2）处理:

将所称样品放入100ml锥形瓶中,准确加入10ml3％的乙酸,浸泡5小时后，准确加入50ml蒸馏水，振荡30分钟，过滤到100ml三角瓶中。

（3）测定:

吸取滤液0.5ml于具塞试管中（每个样重复一次），补加1.5ml0.5％乙酸后加入3ml茚三酮试剂和0.1ml1％抗坏血酸,摇匀,盖上球形盖,放入沸水中加热15min，同时将盛有对照液（2ml0.5％冰醋酸+3ml茚三酮试剂+0.1ml1％抗坏血酸）的试管加热，取出搅拌冷却15min，以分光光度计于580nm比色，以对照调节零点。

（六）实验项目6小麦粉面筋含量及面筋质量的测定

2、实验目的与要求

JMC－III型面筋仪是用来测定面粉中面筋含量及面筋质量的专用仪器，面筋指数用来评价面筋筋力的强弱，本实验要求掌握此仪器的操作方法，并测定商用小麦粉的面筋含量及质量。

JMC－III型面筋仪

旋风式粉碎磨

面筋主要是由麦胶蛋白和麦谷蛋白组成，其中还含有少量的淀粉、脂肪、糖类、纤维素、灰分及其他蛋白质等。

面筋的含量和性质，是小麦和小麦粉品质好次和经济价值的重要依据。

面筋的延伸性和弹性都不好的小麦粉，则做不成疏松多孔的馒头和面包及韧性较好的拉面，制挂面也易使湿断头和熟断头率增加。

通常加工精度高的小麦粉，其面筋质优，反之，面筋质就差。

面筋含量和性质也是给小麦粉加工提供原料搭配的科学依据。

1.样品制备

商品小麦粉：

从平均样品分取约100g备用。

2.称样

称取10.00±

0.01g面粉。

.

3、测定

（1）将洗涤筛网装入洗涤杯中，用少量氯化钠缓冲液湿润筛网，形成毛细管水桥，接着将称取的样品倒入洗涤杯中，轻轻摇动使粉层平整，然后在中间弄个小凹形，将氯化钠缓冲液5.0ml注入凹形处，使氯化钠缓冲液不外溢，同时也使面粉不流失。

（2）将软管一头接入进液口，另一头放入自制的氯化钠溶液水桶内。

（3）将涤杯杯安装到托架上，放好接液杯。

打开电源，数码管显示“0：

20”，此为系统默认状态。

表示默认和面时间为20秒。

按“和面”键进行和面操作。

（4）完成和面后仪器自动转换成洗涤准备状态，默认时间为2分钟，按“洗涤”键进行洗涤。

2分钟后，仪器处于3分钟等待状态，按下“洗涤”键后继续洗涤，3分钟后，整个洗涤完成。

（5）仪器停止工作后，取下洗涤杯，用镊子取下面筋。

（6）上述洗出的面筋，再在自来水水流下洗涤2分钟以上，洗涤样品达到要求。

⑺将洗出的样品分成等量的两份，分别置于离心机两筛板中，合上离心盖板，按动“离心”键，转盘开始转动。

1min后离心电机自动停止，等完全停止后打开离心盖板，取下筛板，用不锈钢刮板小心刮取通过筛板下的面筋，在0.01g感量天平上称重，再将没有通过筛板的面筋用镊子取出，也放入天平上与通过筛板的面筋一起称重，得到面筋总重量。

（8）计算后可得到湿面筋的含量和面筋指数。

（9）接通烘干仪电源，预热约10min后，打开盖子，把湿面筋放在烘干板上，合上盖子，工作6min后，取出立即称重，可计算出干面筋含量及面筋持水率。

（10）测定结束后，用自来水代替氯化钠溶液对仪器中的供水系统清洗5min。

（七）实验项目7无公害农产品上市前的检验流程设计

创新性实验实验类别：

2学时

通过实验，使学生明确和掌握某一无公害农产品检验的方法和手段，巩固所学的理论知识。

通过设计，使学生能结合具体的无公害农产品检验方法，运用所学到的知识，进行综合设计，以便能深入地体会无公害农产品检验的流程。

茎秆切割器

8

黄曲霉素测定仪

紫外分光光度计

火焰光度计

高速离心机

9

纯水仪

10

匀浆机

11

恒温磁力搅拌器

针对课程的性质和任务，在学生掌握无公害农产品检验的基本原理后，开设无公害农产品上市前的检验流程设计，包括感官指标（气味、色泽、组织形态、杂质等）、理化指标（水分、淀粉、蛋白质、溶水干物质等）、卫生指标（砷、铅、汞、铬等重金属残留，农药残留量、黄曲霉素、大肠杆菌等）的检验检测，在检验报告中应能总结出无公害农产品上市前的最优检验方法和最快检测手段。

（1）无公害农产品感官品质检验的设计。

包括气味、色泽、组织形态、杂质。

（2）无公害农产品理化指标检验的设计。

包括水分、淀粉、蛋白质、溶水干物质等。

（3）无公害农产品卫生指标检验的设计。

包括砷、铅、汞、铬等重金属残留，农药残留量、黄曲霉素、大肠杆菌等指标。

（4）、撰写综合设计报告。

根据检验报告，为上市无公害农产品做出最优检验方法和最快检测手段的设计，以电子文稿形式上交。