常用显色剂配制方法.docx

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常用显色剂配制方法

碘：

不饱和或者芳香族化合物

配制方法

在100ml广口瓶中，放入张滤纸，少许碘粒

或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅胶

紫外灯

含共轭基团的化合物，芳香化合物

硫酸铈：

生物碱

配制方法

10%硫酸铈（IV）+15%硫酸的水溶液

氯化铁

苯酚类化合物

配制方法

1%FeCI3+50%乙醇水溶液.

桑色素（羟基黄酮）

广谱，有荧光活性

配制方法

0.1%桑色素+甲醇

茚三酮

氨基酸

配制方法

1.5g茚三酮+100mLof正丁醇+3.0mL醋酸

二硝基苯肼（DNP）

醛和酮

配制方法

12g二硝基苯肼+60mL浓硫酸+80mL水+200mL乙醇

香草醛（香兰素）

广谱

配制方法

15g香草醛+250mL乙醇+2.5mL浓硫酸

高锰酸钾

含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛

配制方法

1.5gKMnO4+10gK2CO3+1.25mL10%NaOH+200mL水.使用期3月溴甲酚绿

羧酸，pKa<=5.0

配制方法

在100ml乙醇中，加入0.04g溴甲酚绿，缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液，刚好出现蓝色即至。

钼酸铈

广谱

配制方法

235mL水+12g钼酸氨+0.5g钼酸铈氨+15mL浓硫酸

茴香醛（对甲氧基苯甲醛）1

广谱

配制方法

135乙醇+5mL浓硫酸+1.5mLof冰醋酸+3.7mL茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.

茴香醛（对甲氧基苯甲醛）2

萜烯，桉树脑（cineoles）,withanolides,出油柑碱（aeronycine）

配制方法

茴香醛:

HCIO4:

丙酮:

水（1:

10:

20:

80）

磷钼酸（PMA）

广谱

配制方法

10gof磷钼酸+100mL乙醇

常用显色剂配制

一、通用显色剂

1•碘，检查一般有机物。

碘蒸气对很多化合物显黄棕色。

在一个密闭的玻璃缸内予先放入碘片，使缸内空气被碘蒸气饱和，将薄层或纸层放入缸内数分钟即可显色。

有时在缸内放一盛水的小杯，增加缸内的湿度，可以提高显色的灵敏度。

2.硫酸：

通用。

浓硫酸：

水（1:

10），或10%硫酸的乙醇溶液。

3.四唑兰试剂：

还原性物质在室温或微加热时显紫色。

溶液1:

0.5%四唑兰甲醇溶液

溶液II:

6N氢氧化钠溶液

临用前溶液I和溶液II等量混合。

4.铁氰化钾一三氯化铁试剂：

还原性物质显蓝色，再喷2N盐酸溶液，则蓝

色更深。

二、生物碱显色剂

1.改良碘化铋钾试剂：

生物碱和某些含氮化合物显橙红色。

取7.3克碘化铋钾，冰醋酸10毫升，加水60毫升。

2.碘一碘化钾试剂：

生物碱显棕褐色。

碘1克和碘化钾10克溶于50毫升水中，加热，加冰乙醇2毫升，用水黧到

100毫升。

3•硅钨酸试剂（沉淀试剂）

5克硅钨酸溶于100毫升水中，加盐酸至PH2左右。

4•苦味酸试剂（沉淀试剂）

1克苦味酸溶于100毫升水中。

5•鞣质试剂（沉淀试剂）

1克鞣酸加乙醇1毫升溶解后，再加水至10毫升。

6.王水浓盐酸：

硝酸（1:

3）

三、甙类显色剂

1.糖的检出试剂

（1）苯胺一邻苯二甲酸试剂：

喷后105~110C烤10分钟，糖显红棕色（检测还原糖）

［注］苯胺一邻苯二甲酸试剂的制备：

苯胺0.93克，邻苯二甲酸1.66克，溶于水饱和正丁醇100ml中。

（2）a—萘酚一硫酸试剂：

喷后100C烤3—6分钟，多数糖呈蓝色，鼠李糖呈橙色。

［注］试剂制备：

15%a—萘酚乙醇溶液21ml，浓硫酸13ml，乙醇87ml及水

8ml混合后使用。

（3）Fehing试剂：

本品分甲液与乙液，应用时取等量混合，检查还原糖。

甲液：

结晶硫酸铜6.23克，加水至100毫升。

乙液：

酒石酸钾钠34.6克及氢氧化钠10克，加水至100毫升。

（4）百里酚硫酚剂：

喷后120C烤15—20分钟，多数糖在灰白色背景上显暗红色，继续加热则变成浅紫色。

百里酚0.5克及浓硫酸与毫升溶于乙醇95毫升。

2•酚类

（1）三氯化铁试剂：

喷后呈溶绿色或棕红色。

5%三氯化铁水溶液或乙醇溶液。

（2）三氯化铁一铁氰化钾试剂：

酚性物质呈黄色斑点。

溶液1:

2%三氯化铁水溶液。

溶液II:

1%铁氰化钾水溶液。

应用时溶液I和溶液II等体积混合。

（3）4—氨基安比林一铁氰化钾试剂

溶液1:

2%氨基安替比林乙醇溶液

溶液II:

8%铁氰化钾水溶液

使用时先喷溶液I，再喷溶液II即呈色，或再放入装有25%氢氧化铵的密闭缸中，即产生橙红一深红色。

3.蒽醌类

蒽醌及其甙本身在日光下显黄色，在紫外下则显黄红、橙色荧光，在薄层上用氨薰或喷氢氧化钾等碱溶液，则颜色变深或变色。

（1）氨气：

薰后颜色加强。

（2）10%氢氧化钾甲醇溶液。

（3）3%氢氧化钠溶液或面料酸钠溶液。

（4）1%硼酸水溶液。

（5）0.5%乙酸镁甲醇溶液：

喷后90C烤5分钟呈橙红色到紫蓝色。

4•内酯、香豆素类

（1）0.5%碘一碘化钾溶液：

香豆素显各种颜色，很多其他类型化合物也显色。

（2）稀氢氧化钠溶液：

喷前喷后在短波长的紫光下观察荧光。

5•黄酮类

黄酮类成分在紫外光下大多数显不同颜色，用氨熏，喷三氯化铝溶液或喷氢氧人钠等碱性溶液，则颜色变深或变色。

（1）氨气

（2）10%氢氧化钠（钾）溶液

（3）1%或3%三氯化铝溶液

（4）2%乙酸镁甲醇溶液

（5）饱和的三氯化锑的氯仿溶液：

100C烤5分钟

（6）锆一构橼酸试剂

溶液1:

2%氧氯化锆甲醇溶液

溶液II:

2%铁氰化钾溶液

（8）罗丹明一氨试剂

溶液1:

0.1%罗丹明B的4%盐酸溶液

溶液II:

浓氨溶液

（9）对氨基苯碘盐溶液

溶液1:

0.3%对氨基苯磺酸溶液

溶液II:

5%亚硝酸钠溶液

（10）硼酸一柠檬酸试剂

溶液I:

饱和硼酸的丙酮溶液

溶液II:

柠檬酸丙酮溶液

先喷溶液I，再喷溶液II。

6•强心甙类

（1）碱性苦味酸试剂：

显橙色或橙红色

1%苦味酸乙醇溶液与5%氢氧化钠水溶液用等量混合

（2）乙酐浓硫酸反应

乙酐：

浓硫酸（2:

3）加入几滴，反应液显黄—红—蓝—紫—绿反反应。

（3）三氯乙酸一氯胺T试剂

溶液1:

25%三氯乙酸乙醇溶液

溶液II:

3%氯胺T溶液

临用前取溶液I与溶液II按1:

4混合，喷后110C烤10分钟，紫外灯下观察荧光。

（4）20%三氯化锑试剂：

喷后100C烤5分钟，日光及紫外光下观察。

7•皂甙类

（1）溶血试验：

2%红血球生理盐水混悬液

（2）三氯化锑氯仿溶液：

喷后90C烤15分钟，显不同颜色。

（3）三氯乙酸一乙酸（1:

2）溶液：

喷后100C烤20分钟，皆显黄色。

四、萜类、甾体类显色剂

1•香草醛一浓硫酸试剂：

5%香草醛浓硫酸溶液。

2.三氯化锑试剂：

25.0克三氯化锑溶于15克氯仿中。

五、挥发油显色剂

1.4—氨基安替比林一铁氰化钾试剂：

酚性物质显橙红至深红色。

溶液1:

2%4—氨基安替比林乙醇溶液

溶液II:

8%铁氰化钾溶液

2•碘化钾一冰乙酸一淀粉试剂：

斑点显蓝色则为过氧化物。

溶液1:

4%碘化钾溶液10毫升与冰乙酸40毫升混合，再加锌粉一小匙过滤。

溶液II:

新鲜配制后1%淀粉溶液。

先喷溶液1,5分钟后大量喷溶液II，直喷到薄层透明为止。

六、有机酸显色剂

1•溴酚蓝指示剂：

显黄色

0.04%溴酚兰乙醇溶液，用0.1N氢氧化钠溶液调至微碱性

2•溴甲酚紫一柠檬酸试剂

溴甲酚紫25毫克及柠檬酸100毫克溶于丙酮：

水（9:

1）混合液100毫升

七、氨基酸、多肽、蛋白质显色剂

1.茚三酮试剂：

用于氨基酸、氨及氨基糖喷后110°C加热至显出颜色。

试剂I:

茚三酮0.3克溶于正丁醇100毫升中，加冰乙酸3毫升。

试剂II:

茚三酮0.2克溶于乙醇100毫升中。

2.双缩脲试剂：

溶液1:

1%硫酸铜溶液。

溶液II:

40%氢氧化钠溶液

应用前溶液I与溶液II等量混合。