植物组织培养复习资料付答案仅供参考Word文件下载.docx

植物组织培养复习资料付答案仅供参考Word文件下载.docx

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1.基本实验室

（1）准备室

（2）接种室（3）培养室

2.辅助实验室

（1）细胞学实验室

（2）摄影室及暗室（3）生化分析室（无菌操作室、化学实验室、培养室、细胞学观察室、暗室）。

17、植物种质：

物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质，植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。

18、玻璃化现象：

指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。

其苗称为玻璃化苗。

19、基本培养基：

包括大量元素和微量元素（无机盐类）、维生素和氨基酸，还有糖和水等。

20、完全培养基：

在基本培养基基础上，根据各种不同试验要求，添加各种植物生长调节物质以及其他复杂有机附加物，包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。

21、外植体褐变：

在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。

22、微体快繁：

利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法。

23、微体嫁接：

把极小（小于0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生木上，然后将嫁接后的砧木接种到新培养基上培养。

24、敏感植物：

有些植物对病毒极为敏感，一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特殊的病斑，如马铃薯病毒—千日红、黄烟花、心烟叶、毛叶蔓陀罗。

菊花病毒—矮牵牛。

25、固相化的方法：

凝胶包埋、表面吸附、网格及泡沫固定、膜固定。

26、悬浮细胞培养:

将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。

27、固相化细胞培养：

把细胞固定在一种惰性基质，如琼脂、藻盐酸、聚丙烯酰胺、纤维或膜上面或里面，细胞不能运动，而营养液可以在细胞间流动，供应其营养。

28、条件培养：

在选用的培养基中，加入一定量以生长过组织或细胞的培养液（离心去除组织或细胞）称条件培养液。

用条件培养液培养细胞，即使接种的细胞密度低于最低有效密度，这些细胞也能生长和分裂。

30、再分化培养：

31、液体培养：

指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。

32、细胞培养：

指从植物体中分离了单细胞，无人工条件下进行培养，使其生长增殖，甚至发育成完整植株的技术。

33、无病毒苗：

指不含该种植物主要危害病毒的苗木。

34、原生质体融合：

指使分离下来的不同亲本的原生质体，在人工控制的条件下，像性细胞受精作用那样互相融合成一体，又称体细胞杂交。

35、胚状体：

体细胞在一定条件下所诱导形成的胚称为体细胞胚，即胚状体

36、原生质体：

指去掉细胞壁的由质膜包裹有生命活力的裸细胞。

37、单倍体植株：

只含有配子体染色体组数的植株。

38人工种子：

指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。

39、离体授粉：

将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来,进行无菌培养,并以一定的方式授以无菌花粉,使之在试管内实现受精的技术,又称为离体受精或试管受精

40、植物生长调节剂：

植物中调节生长及其他功能的激素类物质。

主要分为三类：

植物生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类。

41、器官培养：

指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。

42、植物胚胎培养：

指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。

二、不定项选择（每题2分，共10分）

１、下列不属于生长素类的植物激素是___AD______。

AKt；

BIAA；

CNAA；

DZT

２、影响培养基凝固程度因素有__ABCD____。

A琼脂的质量好坏；

B高压灭菌的时间；

C高压灭菌的温度；

D培养基的PH

３、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是：

B

AMorel；

BHaberland；

C 

Schleiden；

DWhite

４、下列不属于大量元素的盐是___C______。

ANH4NO3；

BKNO3；

CZn 

SO4.7HO2；

DMgSO4.7HO2

５、下列实验中可能获得单倍体植株的是___BCD_____。

A小麦的茎尖培养；

B番茄花药培养；

C玉米胚乳培养；

D玉米花粉培养

6、活性炭在组织培养中的作用有__ABC____。

A吸附有毒物质；

B减少褐变，防止玻璃化；

C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；

D增加培养基中的养分

7、下列具有细胞全能性的细胞是：

_ABCD___。

A成熟的老细胞；

B幼嫩的组织细胞；

C愈伤组织细胞D番茄的受精合子

8、下列培养基中____C___无机盐的浓度最低。

AMS培养基；

BB培养基；

CWhite培养基；

DN6培养基

9、从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历___ACD__三个时期。

A诱导期；

B潜伏期；

C分化期；

D分裂期

10、植物组织培养的特点是_ABCD__：

A培养条件可人为控制；

B生长周期短，繁殖率高；

C管理方便；

D取材少

11、高温易被破坏分解的植物激素是___ABD___。

AIAA；

BGA；

CNAA；

DZt

12、同一植株下列___B___部位病毒的含量最低。

A叶片细胞；

B茎尖生长点细胞；

C茎节细胞；

D根尖生长点细胞

13、在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是--A---：

A稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用

C提供营养 

D调节PH值

14、下列实验中不可能获得单倍体植株的是__AC_____。

A水稻茎尖培养；

B草莓花药培养；

C玉米叶片培养；

D棉花胚乳培养

15、适合花粉培养的最适时期是---B--：

A单核早期B单核靠边期C二核期D三核期

16、IAA需要用___C____法灭菌。

A灼烧灭菌；

B干热灭菌；

C过滤灭菌D高压湿热灭菌

17、能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是---AB----：

AGA；

BIAA；

DZT

18、下列实验中可能获得单倍体植株的是__BCD____。

19、下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD____。

A细胞分裂加快 

B正在分裂的细胞体积小，内无液泡

C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少，而DNA含量保持不变

20、赤霉素（GA）需要用____C_____法灭菌。

21、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是___B_____：

AMorel；

BHaberland；

CSchleiden；

DWhite

22下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒AC

①茎段培养；

②微茎尖培养；

③愈伤组织的继代培养；

④珠心胚培养

23．适合外植体材料表面消毒的方法是B

①高压蒸汽；

②适宜浓度的消毒剂浸泡；

③紫外线消毒；

④熏蒸消毒

24、经高温灭菌后。

培养基的pH会A

A降低B升高C不变D不能确定

25、在植物组织培养中，培养基的PH值一般为B

A低于5.0B5.5—5.8C6.0—7.0D高于7.0

26、下列有关细胞全能性的含义，正确的是C

A每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能

B生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能

C生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能

D生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程

27、下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒（AC）

A茎段培养；

B微茎尖培养。

C愈伤组织的继代培养；

D珠心胚培养。

28、下列不属于生长素类的植物激素是___A______。

A6-BA；

DIBA

三、填空题（每空1分，共20分）

1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。

2、原生质体的融合可实现__体细胞___的杂交，其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱导融合_两类。

3、在组织培养中，非洲菊是靠__丛生芽____的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__原球茎增殖_的方式进行快繁的。

4、单细胞培养的方法主要有--看护培养--、---微室培养---及---平板培养----。

5、在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以

__0.3—0.5___mm、带__1—2__个叶原基为好。

6、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为___光___培养和___暗__培养。

7、细胞的再分化有----器官发生---和---体胚发生----两种形式。

8、连续培养有----浊度恒定法----和----化学恒定法----两种方法。

9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中，切取茎尖的大小与其成活率成__正比__，而与脱毒效果成_反比__。

10、一个已停止分裂的成熟细胞转变为_____未分化_____状态，并形成__未分化的愈伤组织___的现象称为"

脱分化"

。

11、植物的胚胎培养，包括____胚__培养、___胚乳____培养、____胚珠___培养、子房培养以及离体授粉的。

12、在组织培养中，IAA、ZT和GA必须用____过滤灭菌__法灭菌，而接种室空间采用___紫外线照射_或__甲醛熏蒸__法灭菌。

13、幼胚培养时，其发育过程有____早熟萌发__、__呸性发育____、___形成愈伤___三种方式。

14、原生质体的分离有___机械法___和__酶降解法____两种方法。

15、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖培养__培养和__茎尖分生组织__培养两种类型。

16、花药培养是___器官__培养，花粉培养属于__细胞___培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成_单倍体植株_。

17、不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生

___ClO-_______来杀菌的；

升汞是靠__重金属________来达到灭菌目的。

18、一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生__状态，并形成_未分化的愈伤组织__的现象称为"

19、White培养基___无机盐____浓度低，适合生根培养。

20、在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_____正比_____，而与脱毒效果成____反比_____。

21、由胚乳培养可以获得___单___倍体植株，经秋水仙素处理可以获得___二_倍体植株。

22、使单倍体植株染色体加倍的途径主要有---自然加倍--、----人工加倍----和---通过愈伤组织再生加倍。

23、细胞悬浮培养有----成批培养---和----连续培养------两种类型。

24、通过植物组织培养获得无病毒苗的方法主要有----茎尖分生组织培养---、---愈伤组织培养-----、---珠心胚培养----及----花药培养----。

25、植物组织培养按培养对象分为-----器官培养----、---组织或愈伤组织培养-----、----细胞培养-----、------植株培养----_等几种类型。

26、1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物细胞全能性的理论概念；

1943

年White提出植物细胞“__全能性___”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植

物组织培养成为一门新兴的学科。

27、细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的---全部遗传信息-----_和---发育成完整植株---的潜在的能力。

28、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进___根____的生长，这

时___脱分化____占主导地位；

比值高促进____芽____的生长，这时___再分化_____占主导地位。

29、在组织培养中，不耐热的物质用___过滤灭菌__法灭菌，而培养基常用_湿热灭菌_法灭菌。

30、组织培养中有三大不易解决的问题，它们分别是__污染____、____褐变____、__玻璃化_。

31、愈伤组织的形态发生有_器官形态建成_和_胚形态建成__两种情况。

33、在组织培养中，IAA和GA必须用____过滤____法灭菌，而接种室空间采用_70%的酒精_或_2%新洁尔灭喷雾或甲醛熏蒸__法灭菌。

36、根据培养的材料，植物组织培养分：

___愈伤组织培养__、 

___器官培养__、 

__细胞培养___、 

__原生质培养___ 

等类型。

37、组织培养植株再生的途径：

__直接产生不定芽___和_通过愈伤组织形成不定芽____。

38、植物组织培养的发展分为三个阶段：

___萌芽阶段__、__奠基阶段___和_快速发展和应用阶段____阶段。

40、外植体污染原因从病源分面主要有 

真菌 

和 

细菌 

两大类

41、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的 

碳源 

，而且还能维持 

培养基渗透压 

42、外植体灭菌一般先用 

酒精 

，再用 

升汞 

浸泡

43、由愈伤组织后成大致经历诱导期、分裂期、分化期、三个时期。

由愈伤组织再生植株有两条途径 

45、常用的生长素有 

IAA 

、 

2，4-D 

、IBANAA 

等，常用的细胞分裂素 

KT 

ZT 

6-BA 

46、防褐变的措施：

选取适宜的外植体和培养条件 

剪切时尽量减少伤口面积 

剪切口尽量平整 

连续转移（继代培养） 

加入抗氧化剂 

47、植物常用脱毒方法：

热处理脱毒原理 

茎尖培养脱毒原理 

化学药剂处理 

冷处理原理 

原生质体，愈伤组织培养法、花药培养、株心胚培养脱毒 

48、实验室必须满足三个基本的需要：

___试验准备__、___无菌操作__、__控制培养___。

49植物组织培养的难题是褐变、玻璃化和污染及变异现象

50植物组培获得单倍体植株的方法是进行,而获得三倍体的方法是进行

52、生长素与细胞分裂素比值高有利根生长，比值低有利芽生长，比例合适诱导愈伤组织

53、植物组织培养按培养基的物理状态分为__固体_____培养和____液体___培养半固体培养基

四、判断题（对的画“√”；

错题画“×

”。

每题1分，共5分）

１、2，4—D可用0．1mol／L的HCl助溶，再加蒸馏水定容。

（x）

２、幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。

（√）

３、在MS的培养基成分中，MgSO4·

7HO属于微量元素。

（x）

4、一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，光照强度较弱幼苗生长粗壮。

５、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。

6、一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过。

7、由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。

8、用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好。

9、经过花药培养所获得的植株都是单倍体。

10、幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。

11、通过子房的培养，即可能等到单倍体植株，也有可能得到二倍体植株。

12、兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁，非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁。

13、单细胞培养可以采用发酵罐进行培养。

１4、6-BA可用0.1mol／L的HCl助溶，再加蒸馏水定容。

（√）

15、环境的相对湿度过低易使培养基丧失大量水分，湿度过高时，则易造成污染。

16、一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。

17、环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80％-90％的相对湿度。

18、通过花药培养，即可能等到单倍体植株，也有可能得到二倍体、三倍体甚至更多倍体植株。

19、单体细胞比二倍倍体细胞容易诱导愈伤组织。

（x）

20、固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。

21、2，4-D可用0．1mol／L的NaOH或KOH助溶，而后加无菌水定容。

22．某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗（√）

23．细胞分裂素/生长素的比值较高时，利于愈伤组织和芽的诱导X

24．细胞的全能性，可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过程体现√

25．铁盐，常用乙二胺四乙酸铁螯合物，以防被氧化为不溶的氢氧化铁.√

26.用茎尖分生组织脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成反比。

X

30对于含有琼脂糖的培养基而言，在pH值高于6.5时，培养基不能很好地凝固；

低于5.0时，培养基会变硬.X

31由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚X

五、简答题（每题5分，共15分）

1、培养基一般包括哪些基本成分?

答：

培养基的成份有：

（1）无机营养：

包括：

氧（O）、碳（C）、氢（H）、氮（N）、钾（K）、磷（P）、镁（Mg）、硫（S）和钙（Ca）等大量元素；

铁（Fe）、铜（Cu）、锌（Zn）、锰（Mn）、钼（Mo）、硼（B）、碘（I）、钴（Co）、氯（Cl）、钠（Na）等微量元素

（2）有机营养：

氨基酸、天然提取物、维生素、糖类（3）植物生长调节物质：

主要包括生长素类和细胞分裂素类。

（4）其他：

包括水、活性炭、琼脂等。

2、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?

培养基一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解，则可采用过滤灭菌.培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。

植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：

（1）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。

（2）用70%的酒精浸润材料30s左右。

（3）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌

过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。

（4）植物材料用无菌水冲洗3--5次，以除去灭菌剂。

3、提高商品化生产效率：

1.节约能源2.减少劳务开支3.扩大生产规模4.节约生产材料补：

降低商业化生产成本提高经济效益：

4、针对试管苗生产所需的费用，应采取相应措施降低生产成本，增强产品竞争力，提高试管苗经济效益。

5、诱导体胚的条件:

1．外植体：

①产生部位：

尤其胚、下胚轴、幼根、花序轴组织、未成熟的子房等；

②生理状态：

采用外植体增殖能力较强时候的状态；

③基因型。

2.培养基：

特别重要的是培养基中的生长素和N源。

N源：

还原态氮/硝态氮适宜比值。

3.生长调节剂：

①生长素：

所有生长素中，2,4-D被证明是极有效的。

体胚发生2个阶段：

胚的分化，胚性细胞的形成（需2,4-D）；

胚状体的发育（低或去除2,4-D）。

2,4-D会诱导乙烯的产生，导致纤维素酶等活性升高，引起胚性细胞团的破坏。

②细胞分裂素：

细胞分裂素与生长素配合促进诱导体胚形成。

③赤霉素和脱落酸：

GA、ABA抑制体胚形成，但ABA可促进胚状体的正常发育，防止畸形胚的产生，尤其是对体胚成熟特别重要。

细胞再分化：

是指脱分化的分生细胞重新恢复分省能力，沿着正常的发育途径形成具有特定结构和功能的细胞。

6、组培实验室的组成，基本设备和功能

组织培养实验室基本组成：

（1）无菌操作室

（2）化学实验室（3）培养室（4）细胞学观察室（5）暗室（6）驯化移栽室；

无菌操作室基本设备有超净工作台、紫外灯、小搁架。

无菌操作用的器具，主要进行无菌操作；

化学实验室基本设备有干燥箱、电子天平、量筒、吸管、烧杯、高压灭菌装置等，主要用于配置好培养基；

培养室设备有固定式培养架、旋转式培养架、转床、摇床、控温、控光设备，是将接种到试管等的培养材料进行培养生长的场所。

细胞学观察室有显微镜、解剖镜、及照相设备，用于观察，记录培养材料的生长情况及结果；

暗室用于实验室材料的摄影记录，有放大机