实验诊断学期末复习资料Word下载.docx
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(3.5~5.0)X1012/L
新生儿:
(6.0~7.0)X1012/L
3、临床意义
(1)增多:
A、生理性增多:
新生儿、高原生活、剧烈运动、精神因素等
(2)减少:
生理性减少:
儿童、孕妇、老年人
病理性减少:
贫血(anemia)
A、骨髓造血功能低下如再障B、造血原料缺乏如缺铁贫、巨幼贫
C、红细胞破坏增加如溶贫D、红细胞丢失过多
(三)红细胞形态学检查
大小异常、染色异常、形态异常、结构异常
大小异常:
染色异常:
低色素:
中央淡染区扩大,甚至中间不着色
形态异常:
水滴型红细胞、刺毛红细胞、椭圆形红细胞、口红型红细胞、球型红细胞、靶型红细胞
结构异常:
嗜碱性点彩红细胞、染色质小体、卡-波环、有核红细胞
四、血红蛋白测定(hemoglobinHb)
(一)、方法:
1、手工法:
氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)2、血细胞分析仪法
(二)参考值:
成年男性:
120~160g/L成年女性:
110~150g/L新生儿:
170~200g/L
(三)、临床意义
与红细胞测定之间的关系:
大多数情况下平行。
在某些疾病时,红细胞内血红蛋白浓度发生改变。
(两个实验需同时测定)例:
缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血
五、白细胞(whitebloodcell,leucocyte)的检验
(一)白细胞计数:
成人:
(4-10)×
109/L新生儿:
(15-20)×
109/L
6个月-2岁:
(11-12)×
109/L
(二)白细胞分类计数
1、方法:
显微镜血涂片染色分类血细胞分析仪:
三分群、五分群
将血液制成涂片,经染色后在油镜下进行分类,求得各种类型白细胞的比值(百分率)
百分比
绝对值(×
109/L)
中性杆状核粒细胞(Nst)
0.01-0.05
0.04-0.5
中性分叶核粒细胞(Nsg)
0.50-0.70
2-7
嗜酸性粒细胞(E)
0.005-0.05
0.02-0.5
嗜碱性粒细胞(B)
0-0.01
0-0.1
淋巴细胞(L)
0.20-0.40
0.8-4
单核细胞(M)
0.03-0.08
0.12-0.8
(1)中性粒细胞
A、病理性增多:
(A)急性感染:
化脓性球菌(B)严重的组织损伤或大量的血细胞破坏(C)急性大出血(D)急性中毒(E)肿瘤性增多
B、病理性减少:
(A)感染:
革兰阴性杆菌、病毒(B)某些血液病
(C)慢性理化损伤(D)自身免疫性疾病(E)脾功能亢进
(2)嗜酸性粒细胞
生理变化:
劳动、饥饿、寒冷、精神刺激
病理性增多:
A、过敏性疾患B、寄生虫疾病C、某些传染病
D、某些血液病E、某些恶性肿瘤F、皮肤病
A、伤寒、副伤寒、大手术后
B、应用肾上腺皮质激素、促肾上腺皮质激素
(3)嗜碱性粒细胞
A、增多:
慢性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症
B、减少:
无临床意义
(4)淋巴细胞
A、增多:
生理性:
病理性:
感染性疾病、淋巴细胞性白血病、自身免疫性疾病、相对性增多:
再障
放射线、应用肾上腺皮质激素
(三)形态学观察
1、中性粒细胞的核象变化:
原始粒细胞--早幼--中幼--晚幼--杆状--分叶核
成熟
幼稚
(1)核象左移:
外周血中杆状核超过5%和/或出现杆状核以前的细胞,为核左移。
见于急性感染、急性中毒、急性溶血。
(2)核象右移:
一般外周血中的中性粒细胞以3叶为主,如果5叶以上超过3%,为核右移。
大多数由于缺乏造血物质,如恶性贫血、巨幼细胞性贫血。
2、异常淋巴细胞:
在传染性单核细胞增多征、病毒性肺炎、病毒性肝炎等病毒感染时或过敏原的刺激下,可使得淋巴细胞增生,并出现形态学的变化。
分为空泡型(浆细胞型)、不规则型(单核细胞型)和幼稚型
六血小板(platelet。
PLT)检测
血小板是从骨髓成熟巨核细胞胞质分离来的,通过血小板所含的各种因子和它所具有的粘附、聚集、释放等多种功能,其在凝血、止血过程中有很重要的作用。
血小板计数的参考值范围:
(100-300)×
血小板低于30×
109/L,提示可能有自发性的出血倾向。
七、网织红细胞计数(reticulocyte)
【参考值】百分数成人0.005-0.015(0.5%-1.5%,平均1%)
绝对值(24-84)×
109/L(2.4万-8.4万/mm3)
【临床意义】
●反映骨髓的造血功能●疗效判断和治疗性试验的观察指标●作为病情观察的指标
八、红细胞比积测定(hematocrit,Hct)
又叫红细胞体积分数,指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。
【参考值】男性:
0.40-0.50L/L(40-50容积%),平均0.45L/L
女性:
0.37-0.48L/L(37-48容积%),平均0.40L/L
【临床意义】●红细胞比积增高:
相对性增多(血液浓缩)
绝对性增高(真性红细胞增多症)
●红细胞比积减少:
见于各种贫血
九、红细胞平均值的计算
●平均红细胞容积(meancorpuscularvolume,MCV)
MCV=每升血液中红细胞比积/每升血液中红细胞数=PCV(L/L)*10^15/RBC(/L)
Fl
[参考值]80~95fl(80~95μm3)
●平均红细胞血红蛋白量(meancorpuscularhemoglobin,MCH)
MCH=每升血液中红细胞比积/每升血液中红细胞数=Hb(g/L)*10^12/RBC(/L)pg
[参考值]27~31pg
●平均红细胞血红蛋白浓度(meancopuscularhemoglobinconcentration,MCHC)
MCHC=每升血液中血红蛋白量/每升血液中血红蛋白量=PCV(L/L)/Hb(g/L)g/L
【参考值】:
320~360g/L(32%~36%)
【临床意义】:
根据上述三项红细胞平均值可进行贫血的形态学分类.
●红细胞体积分布宽度(RDW)
(1)定义:
是反映周围血红细胞间体积差异的参数,通过变异系数定量的表示红细胞体积分布的离散程度。
(2)原理:
血细胞自动分析仪通过电阻的改变,产生脉冲信号的强弱。
(3)正常参考值:
≤15.0%新生儿:
男≤15.9%女≤16.2%
(4)临床意义:
a.与MCV联合应用于贫血的形态学分类b.用于缺铁性贫血的筛选诊断
c.用于缺铁性贫血与轻型珠蛋白生成障碍性贫血鉴别诊断。
十、红细胞沉降率(ESR)
红细胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,ESR)是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言,简称血沉。
在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内。
在许多病理情况下血沉可明显加快。
血沉是一个非特异性的指标。
【原理】红细胞下沉力与血浆的阻遏力,影响因素有:
红细胞聚集、大分子蛋白质、白蛋白、脂类物质
【影响因素】
(一)血浆因素
在正常情况下,红细胞膜表面的唾液酸带有负电荷形成zeta电位,使红细胞互相排斥,与血浆接触面积大,阻力大,而保持悬浮稳定性,沉降很慢。
1、带正电荷的大分子蛋白质:
如纤维蛋白原,球蛋白,血沉加快。
2、带负电荷的蛋白质:
如白蛋白,血沉减慢。
3、脂类:
胆固醇,甘油三脂,利于红细胞聚集,血沉加快。
卵磷脂使血沉减慢。
4、分子多聚体药物:
使红细胞聚集,如葡萄糖,白明胶等。
(二)红细胞因素
1、红细胞数量:
数量越少,阻力越小,血沉加快。
2、红细胞形态:
直径大,厚度薄,红细胞易形成缗钱状,血沉加快。
球型红细胞,血沉减慢。
(三)技术因素1、血沉管的位置:
倾斜,血沉加快。
2、温度:
温度越高,血沉加快。
3、抗凝剂的使用
【参考值】男0-15mm/ln女0-20mm/ln
【临床意义】
1.生理性加快:
妇女月经期血沉略有增快;
妊娠3月以上由于生理性贫血及血浆纤维蛋白原增加使血沉增快,老年人,特别是70岁以上的高龄者,多因纤维蛋白原增高而血沉增快。
2.病理性加快:
1).各种炎症:
常见原因,急性细菌性炎症致血沉加快;
炎症的活动期,血沉也加快,如结核病,风湿热等活动期。
2).组织损伤及坏死:
组织损伤或手术后常增快,如肺梗死、心肌梗死2-3天可见血沉增快,并持续1-3周,而心绞痛时多正常。
3).恶性肿瘤:
可能与恶性肿瘤所致的组织坏死,继发感染、贫血及巨球蛋白、纤维蛋白原增高有关。
4).高球蛋白血症:
多种因素所致的免疫球蛋白增高可致血沉加快,如SLE、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、淋巴瘤、肝硬化等等。
5).贫血:
严重贫血可表现血沉加快,遗传性球形红细胞及镰形红细胞性贫血,有时血沉加快不明显。
6).高胆固醇血症:
如动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合征等。
【参考价值】:
1.动态观察病情2.良、恶性肿瘤鉴别3.高球蛋白血症疾病
(三)减慢:
一般临床意义较小。
十、血细胞分析仪:
见ppt
粪便检查
一、消化吸收的过程及粪便的形成
人体的消化道:
口腔、咽喉、食道、胃、十二指肠、小肠、结肠(包括盲肠、升结肠、横结肠、降结肠、乙状结肠)和直肠
消化生理过程
消化系统从口腔延续到肛门,负责摄入食物、将食物粉碎成为营养素(这一过程称为消化)、吸收营养素进入血液,以及将食物的未消化部分排出体外。
消化道还包括一些位于消化道外的器官:
胰腺、肝脏和胆囊。
食物在口腔内经咀嚼与唾液混合形成食团,经食管蠕动推送入胃腔,经过胃酸和蛋白酶的消化与胃窦的研磨形成酸性食糜。
胃在消化过程中不断蠕动,通过幽门,有节制地把食糜送入十二指肠和小肠。
小肠是消化吸收食物的重要场所。
消化作用主要靠胰液消化酶来完成,肠液中的各种消化酶起消化补充的作用。
此外,胆汁参与脂肪的消化和吸收。
食物中的蛋白质、脂肪、糖类以及其他营养物质(维生素、水、电解质、矿物)经过消化后在空肠和回肠被吸收,食物残渣则通过回盲瓣间歇进入大肠。
每天大约有500-1000ml食糜残渣进入结肠,水分和电解质大部分在结肠上半段被吸收,只有50-200ml的液体由粪便排出。
粪便组成:
3/4是水,1/4是固体物质
二、粪便检查的主要目的
1.了解消化道以及通向肠道的肝、胆、胰腺等器官是否有炎症、出血和寄生虫感染等情况。
2.用粪便隐血试验检查作为消化道肿瘤的过筛试验。
3.根据粪便的性状和组成,了解消化吸收功能。
4.检查粪便中有无致病菌,协助诊断肠道寄生虫病。
三、标本采集和处理
1、容器:
干净,标志明显,大小适宜,盛便后不漏不溢,不吸收水份,最好是一次性的塑料盒。
2、标本的要求:
标本务必新鲜,不可混人尿液。
采集标本时应用干净竹签挑取粪便含有粘液或脓血部分,外观无异常的粪便应从不同部位浅、深处粪便多处取材。
一般检查留取少量粪便即可(至少有5克大小),稀便2ml,
浓集卵时至少要取鸡蛋大小粪便。
3、及时检查:
标本采集后应在1h内检查完毕,否则因pH及消化酶等影导致有形成分破坏。
4、特殊检查标本应按规定进行
检查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即送检,
寒冷季节时标本送验及检查时应需保温。
口腔、咽喉、食道、胃、十二指肠、小肠、结肠(包括盲肠、升结肠、横结肠、降结肠、乙状结肠)和直肠
5、标本检查后的处理
将纸类、塑料等容器投入焚化炉中烧毁。
搪瓷容器、载玻片等应浸泡于消毒液中(如0.5%过氧化乙酸、新洁尔灭等)24h,弃消毒液,再煮沸后流水冲洗凉干或烘干备用。
四、粪便的检查
一般性状、显微镜检查、化学检查、微生物学检查
(一)一般性状检查
1.颜色:
健康成人粪便应为黄褐色,婴儿为金黄色。
为粪胆素导致。
各种生理性因素和病理性变化可以使其颜色发生变化。
①鲜红色:
见于直肠癌、肛裂、痔疮等下消化道出血。
②黑色或柏油色:
见于上消化道出血、服用铁剂、食用猪血等。
红细胞破坏,血红蛋白在细菌作用下被分解,降解为血红素、铁、卟啉。
铁与肠道分解生成的硫化氢形成黑色的硫化铁。
③白陶土色:
见于阻塞性黄疸、胆道梗阻,食用脂肪过量、钡餐后。
④绿色:
见于婴儿腹泻、由于肠蠕动过快,胆绿素由粪便排出而形成,或食用大量菠菜等。
⑤果酱色:
见于阿米巴痢疾、细菌性痢疾等。
2、性状:
健康成人为成形软便,便秘者为球形硬块。
婴儿为糊状。
(1)粘液便(mucousstool):
正常粪便含有少量粘液,因与粪便均匀混合不易看见。
粘液增多提示肠道炎症或受刺激,常见于各种肠炎、细菌性痢疾及阿米巴痢疾、急性血吸虫病等。
小肠炎症时,增多的粘液均匀混合于粪便中;
大肠炎症时,粪便已经逐渐形成而附着于粪便表面。
(2)脓血便(stoolwithbloodandpus):
见于细菌性痢疾、阿米巴痢疾、急性血吸虫病、溃疡性结肠炎或直肠癌。
其中细菌性痢疾以脓及粘液为主,脓中带血;
阿米巴痢疾以血为主,血中带脓,呈果酱样。
(3)鲜血便(bloodystool):
见于结肠癌、直肠息肉、肛裂及痔疮等。
(4)柏油样便(tarryandblackstool):
呈褐色或黑色,质软、富有光泽,隐血试验阳性。
见于上消化道出血,上消化道出血量超过50ml以上时,可见到柏油样便。
(5)米泔样便(ricewaterstool):
呈乳白色淘米水样,内含粘液片块,多见于霍乱、副霍乱。
(6)溏便(semiliquidstool):
粪便呈粥样但内含物粗糙,见于消化不良,慢性胃炎等。
(7)胨状便(peptonestool):
见于过敏性肠炎、慢性菌痢、肠易激综合征。
病人常于腹部绞痛后排出粘胨状、膜状或纽带状粪便。
(8)稀糊状或稀汁样便:
见于各种感染性或非感染性腹泻,尤其是急性胃肠炎。
若遇见大量黄绿色稀汁样便并伴有膜状物应考虑为假膜性肠炎。
爱滋病并发隐孢子虫感染时也可排出大量稀汁样便。
(9)乳凝块状便(laxexcoagulumstool):
粪便中有黄白色乳凝块或蛋花样便,见于消化不良,婴儿腹泻。
(10)蛋青样便:
白色念珠菌性肠道感染。
3、寄生虫:
粪便中肉眼可以发现虫体较大的肠道寄生虫有蛔虫、蛲虫、绦虫节片,过筛冲洗后可发现钩虫、鞭虫等细小虫体。
4、结石
可见到胆石、粪石、肠结石、胰石等。
最重要且多见的是胆石。
应用排石药物或碎石后,肉眼可见到较大结石,而结石较小时,需要将粪便筛洗后仔细查找才能发现。
5、量:
健康成人每日粪便为100-300g。
粗粮或纤维丰富的,粪便量多。
细粮或肉类较多,粪便较少。
6、气味
由于细菌作用的产物吲哚、硫化氢等等使得粪便有一定臭味。
消化吸收不良,胰腺疾病、消化道大出血时,为腐败臭味。
脂肪或糖类消化不良,酸臭味。
阿米巴痢疾时,鱼腥味。
7、pH
变化范围6.9-7.2。
细菌性痢疾、血吸虫病时碱性,8.0左右。
阿米巴痢疾、病毒性肠炎为酸性,6.1-6.6左右。
(二)显微镜检查—手工盐水涂片镜检
操作方法:
取一清洁玻片,滴加2滴生理盐水,用竹签挑取粪便中的异常部份,与盐水均匀混合制成薄涂片,盖上盖片,其涂抹厚度以透过标本看清字迹为宜。
先用低倍观察虫卵、原虫和其它异物,再用高倍镜仔细观察各种异常成分。
细胞计数时,至少应检查10个以上的高倍视野。
1.细胞
(1)白细胞:
正常不见或偶见。
白细胞数量多少与炎症轻重及部位有关。
肠炎时,白细胞数量不多、分散存在,一般少于15个/HP;
细菌性痢疾、溃疡性结肠炎时,白细胞大量出现或成堆出现脓细胞,可发现吞噬细胞;
过敏性肠炎、肠道寄生虫病可见到嗜酸性粒细胞。
(2)红细胞:
正常粪便中无红细胞,下消化道炎症、肿瘤和其他原因引起的出血可见到数量不等红细胞。
细菌性痢疾时红细胞少于白细胞,分散存在,形态多正常;
阿米巴痢疾红细胞多于白细胞,成堆存在,并有残碎现象。
(3)吞噬细胞(macrophage):
也称大吞噬细胞,胞质里吞噬颗粒、细胞碎片、细菌等的单核细胞。
是诊断急性细菌性痢疾的依据,也可见于急性出血性肠炎,偶见于溃疡性结肠炎。
(4)上皮细胞:
粪便中的上皮细胞为肠粘膜上皮细胞,在生理情况下,少量脱落的上皮细胞大多被破坏,正常粪便中不易发现。
上皮细胞(柱状上皮)增多可见于结肠炎、伪膜性肠炎。
(5)肿瘤细胞:
结肠癌、直肠癌病人的粪便中可以见到成堆的癌细胞。
2.寄生虫虫卵及原虫
在粪便中检查到寄生虫卵是诊断肠道寄生虫感染最直接的依据。
粪便显微镜下可见到寄生虫的虫卵、包囊和滋养体等。
3.真菌
粪便中可见到的真菌有普通酵母菌、人体酵母菌、念珠菌。
4.食物残渣(foodresidue)
(1)脂肪:
其中脂肪小滴在显微镜下呈大小不一、圆形折光性强的小球状,苏丹III染成橘红色。
正常粪便中很少见到脂肪,如镜检脂肪小滴>6个/HP,视为脂肪排泄增多,若24h粪便中总量超过6g时,称为脂肪泻(steatorrhea)。
脂肪小滴明显增多见于:
①胰腺外分泌功能不全如急慢性胰腺炎、胰头癌、吸收不良综合征及小儿腹泻。
②阻塞性黄疸:
因肠道中胆汁缺乏,脂肪吸收障碍,粪便中可出现大量脂肪小滴。
(2)淀粉颗粒(starchgranule):
正常粪便中少见,如增多,提示糖类消化功能障碍,多见于慢性胰腺炎,胰腺功能不全,常伴随有脂肪小滴和肌肉纤维。
(3)其他:
少量的结缔组织、肌纤维、植物纤维及植物细胞等也可见于正常粪便中。
5.结晶
正常粪便中可见到磷酸钙、草酸钙、胆固醇、碳酸钙等结晶,一般无临床意义。
病理性结晶有:
①夏科-莱登结晶(Charcot-Leydencrystal):
见于阿米巴痢疾、钩虫病、过敏性肠炎粪便中,并常与嗜酸性粒细胞同时存在。
②血晶:
为棕黄色斜方形结晶,不溶于氢氧化钾溶液,溶于酸,呈青色,见于胃肠道出血粪便中。
(三)化学检查
1、隐血试验
隐血是指消化道出血量少(每日出血量<5ml),红细胞被消化破坏,肉眼见不到粪便颜色改变,显微镜下也不能证实出血,这种肉眼及显微镜均不能证明的微量血液称为隐血。
隐血试验(occultbloodtest,OBT)是指用化学或免疫学的方法证实微量血液的试验。
(1)化学法 根据色原物质不同分为:
邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、联苯胺法、无色孔雀绿法、愈创木酯法、还原酚酞法等;
根据反应试剂状态或试剂载体不同又分为湿化学和干化学试纸法。
其实验设计原理基本相同,此类方法简便易行,成本低廉,目前实验室常用。
①灵敏度:
邻联甲苯胺、邻甲苯胺、还原酚酞法最灵敏,可检出0.2~1.0mg/L的血红蛋白,只要消化道有1~5ml出血就可检出;
其中邻联甲苯胺法是在1983年中华医学会全国临床检验方法学学术讨论会推荐的方法,但易出现假阳性;
还原酚酞法由于试剂极不稳定而被淘汰;
中度灵敏的试验有联苯胺法、匹拉抗米酮法及无色孔雀绿法,可检出1~5mg/L的血红蛋白,消化道有5~10ml出血即为阳性。
无色孔雀绿法在未加入异喹啉时灵敏度较差(20mg/L血红蛋白),试剂的配制和来源不如匹拉米酮法方便。
联苯胺法由于有致癌性而被淘汰。
愈创木酯法灵敏度差,需6~10mg/L血红蛋白才能检出,此时消化道出血可达20ml,但愈创木酯法没有禁食的要求。
为了减少假阳性和假阴性,临床上易采用中度灵敏方法。
②特异性和准确性:
受食物、药物、试剂等多种因素影响,容易出现假阳性或假阴性。
如外源性食物中含有血红蛋白、肌红蛋白等;
大量生食用蔬菜,因含有高浓度的过氧化物酶而出现假阳性;
服用维生素C等还原性药物,抑制化学反应等。
(2)免疫学法免疫学法常用的方法有ELISA和胶体金等方法,此类方法所使用的抗体为抗人血红蛋白单克隆抗体。
免疫法操作简便、快速、灵敏度高(一般血红蛋白为0.2mg/L即可获阳性结果)、特异性强,饮食和药物等均对结果无影响,目前被认为是大肠癌普查最适用试验。
但免疫学方法也存在一些问题①假阳性:
灵敏度过高,引起假阳性,使一些胃肠道生理性失血(<2ml/24h),或服用刺激胃肠道的药物引起的消化道出血(2~5ml/24h)也可为阳性。
②假阴性:
当上消化道出血,血红蛋白被消化酶及细菌充分分解后使免疫原性减弱、消失或改变,可出现假阴性,故免疫学法主要用于下消化道出血检查,40%~50%上消化道出血不能检出;
当消化道大量出血时,血红蛋白(抗原)浓度过高造成的抗原抗体不匹配,即前带现象,也可出现假阴性。
(3)血红蛋白荧光定量法 采用卟啉荧光定量血红蛋白试验(hemoquanttest,HOT),该试验用热草酸溶液使血红素转变为原卟啉进行荧光检测。
除可测定粪便中血红蛋白外,还可测定血红蛋白衍生物卟啉,从而克服血红蛋白受消化液消化和细菌分解的影响,对上、下消化道出血同样灵敏,但仍受外源性动物血红蛋白、肌红蛋白和卟啉类物质干扰,且方法复杂,推广使用受到限制。
临床意义
(1)对消化道出血有诊断价值
(2)为消化道溃疡与肿瘤出血的鉴别提供依据
(3)可作为消化道恶性肿瘤普查的1个筛选指标
2、粪胆色素检查
包括胆红素、粪胆原、粪胆素。
正常人胆汁中的胆红素在回肠末端和结肠被细菌分解为粪胆原,其部分被肠道重吸收进入肠肝循环外,大部分在结肠被氧化为粪胆素,并随粪便排出体外。
粪胆素
能与汞结合成红色化合物,红色深浅与粪胆素含量成正比。
正常粪便呈阳性反应(红色)
溶血性贫血时,胆汁生成过多而呈强阳性;
胆总管梗阻时呈阴性反应。
粪胆原:
75~350mg/100g粪便
临床意义
(1)增加:
溶血性黄疸,阵发性睡眠性血红蛋白尿症、恶性贫血、地中海贫血、再生障碍性贫血、组织内出血等红细胞破坏显著者。
(2)减少。
梗阻性黄疸。
(3)肝细胞性黄疸时粪胆原则可增加也可减少,视肝内梗阻情况而定。
粪胆原检验对于黄疸类型的鉴别具有一定价值。
粪胆红素
参考值:
阴性
临床意义:
(1)
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