板栗各指标测定Word格式.docx

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A—碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）相当于某种还原糖的质量，单位为毫克（mg）

5.3试样溶液预测

吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加人玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。

当样液中还原糖浓度过高时应适当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10mL左右。

当浓度过低时则采取直接加入10mL样品液，免去加水10mL，再用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10mL样液中所含还原糖的量。

5.4试样溶液测定

吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml，锥形瓶中加水10ml，加人玻璃珠2粒，从滴定管滴加比预测体积少1ml的试样溶液至锥形瓶中，使在2min内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。

同法平行操作三份，得出平均消耗体积。

6结果计算

试样中还原糖的含量（以某种还原糖计）按式

（1）进行计算

A

X=-------------------*100

m*V/250*1000

式中：

X---试样种还原糖的含量，单位为每百克（g/100g）

A---碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，单位为毫克（mg）

m---试样质量，单位为克（mg）

V---测定时平均消耗试样溶液体积，单位为毫升（ml）

山东板栗：

V1=14.85mlV2=14.55ml

V3=14.75mlV4=14.65ml

V平均=14.70ml

山东板栗还原糖含量：

X=1.89﹪

北京板栗：

V1=15.40mlV2=15.75ml

V3=16.10mlV4=15.90ml

V平均=15.79ml

北京板栗还原糖含量：

X=1.76﹪

本地迁西：

V1=17.40mlV2=18.10ml

V3=17.80mlV4=17.70ml

V平均=17.75ml

本地板栗还原糖含量：

X=1.56﹪

二总糖

1.原理

试样经除去蛋白质后，总糖经盐酸水解转化为还原糖，再按还原糖测定。

2.试剂

盐酸（1+1）：

量取50mL盐酸用水稀释至100mL

氢氧化钠溶液（200g/L）

甲基红指示液：

称取甲基红0.10g，用少量乙醇溶解后，并稀释至100mL,

其余试剂同还原糖的测定

3.仪器

同还原糖

4.样品

来自北京,山东,本地迁西三个不同产地的板栗

5.分析步骤

分别吸取20mL按还原糖5.1制备的三种试样处理液，置于100mL容量瓶中，各加5mL盐酸（1+1），在68-70℃水浴中加热15min，冷后加两滴甲基红指示液，用氢氧化钠溶液（200g/L）中和至中性，加水至刻度，混匀。

按测定还原糖方法中5.2,5.3和5.4的步骤分别测定还原糖含量，计算总糖

6.数据及计算结果

X=-------------------*100*5（稀释倍数）

V1=8.75mlV2=8.75ml

V3=8.60mlV4=8.70ml

V平均=8.70ml

山东板栗总糖含量：

X=15.95﹪

北京板栗总糖含量：

V1=9.50mlV2=9.20ml

V3=8.90mlV4=9.50ml

V平均=9.275ml

本地板栗总糖含量：

X=14.96﹪

三淀粉

1.实验原理

样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉。

2．试剂

2.10.5%淀粉酶溶液：

称取淀粉酶0.5g，加100mL水溶解，加入数滴甲苯或三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。

2.2碘溶液：

称取3.6g碘化钾溶于20mL水中，加入1.3g碘，溶解后加水稀释至100mL。

乙醚

2.385%乙醇

2.4其他试剂同总糖

3.仪器同上

5.1样品处理

精确称取2g样品（山东2.0262g北京2.0203g本地2.0282g）置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用50ml乙醚分次洗除脂肪，再用约100mL85%乙醇洗去可溶性糖类，将残留物移入250mL烧杯内，并用50mL水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20mL淀粉酶溶液，在55～60℃保温1h，并时时搅拌。

然后取1滴此液加1滴碘溶液，应不显现蓝色，若显蓝色，再加热糊化并加20mL淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显蓝色为止。

加热至沸，冷后移入250mL容量瓶中，并加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液。

取50mL滤液，置于250mL锥形瓶中，加5mL盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基红指示液，用20%氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入100mL容量瓶中，洗剂锥形瓶，洗液并入100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。

5.2测定

按食品中还原糖的测定方法操作。

同时量取50mL水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做试剂空白试验。

空白消耗体积微乎其微，忽略不计。

6.数据及计算结果

A

X=---------------------------*100*4（稀释倍数）

m*50/250*V/100*1000

V1=11.20mlV2=12.00ml

V3=11.10mlV4=11.65ml

V5=11.50ml

舍去最大及最小值

V平均=11.45

山东板栗淀粉含量：

V1=11.30mlV2=10.70ml

V3=10.10mlV4=10.60ml

V5=10.50ml

V平均=10.60ml

北京板栗淀粉含量：

X=51.68﹪

V1=11.20mlV2=11.35ml

V3=12.80mlV4=11.15ml

V5=11.15ml

V平均=11.23ml

本地板栗淀粉含量：

X=48.92﹪

四灰分

1.实验原理：

试样经干燥、炭化、灼烧、冷却后测定残留物的量。

2.材料、试剂与仪器

2.1试剂：

所用试剂均为分析纯；

水为蒸馏水或相当纯度的水。

（1+5）盐酸溶液：

1体积浓盐酸与5体积水混匀。

2.2仪器、设备：

分析天平（感量0.1mg）；

坩埚：

瓷质；

按试样体积选择坩埚容量；

电热板；

高温电炉：

温控550±

25℃；

组织捣碎机。

3．操作步骤

3.1试样的制备

将干燥后的固体样品，用研钵研细，混合均匀，置于玻璃容器内；

不易捣碎、研细的样品，用切碎机切成细粒，混合均匀，置于玻璃容器内。

3.2分析步骤

⑴坩埚的灼烧：

将坩埚浸没于（1+5）盐酸溶液中，视坩埚的洁污程度加热煮沸10~60min，洗净，烘干，在550±

25℃高温电炉中灼烧4h。

待炉温降至200℃时取出坩埚，移入干燥器中冷却至室温，称量（精确至0.001g）。

再次灼烧、冷却、称量，直至恒量（连续两次称量差不超过0.002g）。

⑵称样

山东5.0220g北京5.0948g本地5.0603g

⑶测定

将盛有试样的坩埚放在电热板上缓慢加热，待水分蒸干后置于电炉或煤气灯火焰上炭化至无烟。

移入高温电炉中，升温至550±

25℃，灼烧4h。

待炉温降至200℃时取出坩埚。

置干燥器中冷却至室温，迅速称量。

再将坩埚移入高温电炉中按上述温度灼烧1h，冷却，称量。

重复灼烧1h的操作，直至恒量（连续两次称量差不超过0.002g）。

若残渣中有明显炭粒时，向坩埚内滴入少许蒸馏水润湿残渣，使结块松散。

蒸干水分后再进行灰化，直至灰分中无碳粒。

4.结果计算

食品中灰分含量以质量百分率表示，按式计算：

m2-m1

x（%）=×

100

m

x------食品中灰分含量（质量百分率），%；

m1------坩埚与试样灼烧后的质量；

m2------坩埚的质量。

m------样品质量

山东：

m1=34.1138gm2=34.2386gx=2.49%

北京：

m1=33.1255gm2=33.2408gx=2.26%

本地：

m1=30.9276gm2=31.0249gx=1.92%

五测铁

在pH2~9的溶液中，二价铁离子能与邻二氮菲生成稳定的橙红色络合物，在510nm有最大吸收，其吸光度与铁的含量成正比，故可比色测定。

反应式如下：

pH﹤2时反应进行较慢，而酸度过低又会引起二价铁离子水解，故反应通常在pH＝５左右的微酸条件下进行。

同时样品制备液中铁元素常以三价离子形式存在，可用盐酸羟胺先还原成二价离子再作反应，反应式如下：

4Fe3++2NH2OH·

HCL4Fe2++4H++N2O+H2O+2CL-

本法选择性高，干扰少，显色稳定，灵敏度和精密度都较高。

3试剂

3.1盐酸（1mol/L）

3.210%盐酸羟胺（NH2OH·

HCL）溶液

3.30.12%邻二氮菲水溶液

3.410%醋酸钠

3.5铁标准溶液：

硫酸亚铁标准溶液（0.1mg/ml）

4.操作步骤

4.1样品处理：

将灰化后的样品各加入2mL1︰1盐酸，在水浴上蒸干，再加入5mL蒸馏水，加热煮沸后移入100mL容量瓶中，以水定容，混匀。

4.2标准曲线绘制：

吸取10µ

g/mL铁标准溶液（标准溶液吸取量可根据样品含铁量高低来确定）0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分别置于50mL容量瓶中，加1mol/L盐酸溶液1mL，10%盐酸羟胺1mL，0.12%邻二氮菲1mL，然后加入10%醋酸钠5mL，用水稀释至刻度，摇匀，以不加铁的试剂空白溶液作参比液，在510nm波长处，用1cm比色皿测吸光度，绘制标准曲线。

C=-0.018+5.563*Ar=0.999

4.3样品测定：

准确吸取样液10mL于100mL容量瓶中，以下按标准曲线绘制操作，测定吸光度，在标准曲线上查出相对应的铁含量（µ

g）。

山东:

0.301ug/ml北京：

0.281ug/ml本地：

0.076ug/ml

5.结果计算

x

Fe（ug/100g）=×

100

V1

m×

V2

x-------从标准曲线上查得测定用样液相当的铁含量，µ

g；

V1-------测定用样液体积，mL；

V2--------样液总体积，mL；

m--------样品质量，g。

山东59.94ug/100g北京55.15ug/100g本地15.02ug/100g

六测钙

1．原理

样品经灰化后，以酸性溶液中钙与草酸生成草酸钙，经硫酸溶解后，用高锰酸钾标准溶液滴定，计算出钙的含量。

2.仪器

2.1石英或瓷制坩埚，直径约60mm，体积不小于35mL，如果选用瓷制坩埚，则要求无裂釉、瓷面光滑、完全无裂纹。

2.2马福炉。

2.3多孔玻璃滤器G或与之相当的型号

2.4滴定管10mL。

2.5抽滤瓶500mL。

2.6锥形瓶250mL。

2.7烧杯400mL。

2.8容量瓶1000mL。

3.试剂

3.1硝酸优级纯。

3.2盐酸6mol/L取浓盐酸（d=1.18；

GB622）500mL加水500mL混匀。

3.30.5mol/L盐酸取80mL盐酸用水稀释至1000mL。

3.43%草酸溶液称取草酸3.9g（HC2O4·

2HO）溶于1000mL水中。

22

3.520%乙酸钠溶液称取乙酸钠33g溶于100mL水中。

3.61%溴甲酚绿指示剂称取溴甲酚绿1.0g溶于2～3mL10%氢氧化钠溶液中，加水至100mL。

3.70.01mol/L高锰酸钾标准溶液称取高锰酸钾1.58g，溶于1000mL水.（草酸钠滴定法，标定结果为0.0099mol/L）

4操作步骤

4.1样品制备

取灰化后的样品（山东20.6831g北京20.2752g本地20.2814g）

4.2测定

4.2.1取出已灰化好的样品，加入5mL0.5mol/L盐酸，从坩埚的上部冲洗四周壁，然后置于蒸汽浴或电热板上蒸发至近干。

4.2.2向坩埚中加入2.0mL6mol/L盐酸溶解残留物，加盖表面皿，置于蒸汽浴或电热板上加热5min。

4.2.3用水冲洗表面皿，然后将坩埚中溶解物定量地过滤于400mL烧杯中，稀释至约150mL。

4.2.4滴加溴甲酚绿指示剂8～10滴和中量的20%乙酸钠，使溶液呈蓝色（此时pH值为4.8～5.0）。

加盖表面皿于蒸汽浴或电热板上加热至沸腾。

4.2.5用滴管缓缓滴入3%草酸溶液呈绿色（此时pH值为4.4～4.6）。

如呈黄绿色或蓝色将不利于草酸钙沉淀，而使结果偏低。

4.2.6煮沸上述溶液，静置澄清4h以上。

静置时间过短不利于草酸钙结晶的形成，可使测定结果偏低。

4.2.7将上层清液用多孔玻璃滤器过滤，用洗涤沉淀并荡洗烧杯，重复2～3次，合并过滤，共约150mL。

4.2.8用已加热至80～90℃的硫酸-水混合液（5+125）洗涤多孔玻璃滤器。

4.3滴定

4.3.1用高锰酸钾标准溶液滴定至已预先加热至70～90℃的滤液至淡粉色并维持30s不褪色。

4.3.2取约150mL硫酸-水混合液（5+125）加热至70～90℃，用高锰酸钾标准溶液滴定至淡粉色并维持至30s不褪色，做为空白值。

5计算

样品含量以每克样品中含钙的毫克数表示。

（V－V0）×

M×

样品中的钙含量（mg/g）=---------------------

W

V——样品能耗高锰酸钾标准溶液的毫升数，mL。

V0——空白能耗高锰酸钾标准溶液的毫升数，mL。

M——高锰酸钾标准溶液的摩尔浓度，mol/L.

W——称样量，g.

100——1mol/L的高锰酸钾溶液相当于钙的毫克数。

V0=0.5ml

山东V=13.85ml北京V=10.95ml北京V=10.20ml

铁含量：

山东0.6390mg/g

北京0.5125mg/g

本地0.4735mg/g

七测定蛋白质

以硫酸铜为催化剂，用浓硫酸消化试样，使有机氮分解为氨，与硫酸生成硫酸铵。

然后加碱蒸馏使氨逸出，用硼酸溶液吸收，再用盐酸标准滴定溶液滴定。

根据盐酸标准滴定溶液的消耗量计算蛋白质的含量。

2.试剂和溶液

所有试剂均为分析纯；

水为蒸馏水或同等纯度的水。

硫酸铜硫酸钾硫酸

40%氢氧化钠溶液：

称取40g氢氧化钠溶于60mL蒸馏水中。

4%硼酸溶液：

称取4g硼酸溶于蒸馏水中稀释至100mL。

0.1mol/L盐酸标准滴定溶液：

按GB601规定的方法配制与标定。

标定浓度为0.083mol/L.

95%乙醇

甲基红-次甲基蓝混合指示液：

将次甲基蓝乙醇溶液（1g/L）与甲基红乙醇溶液（1g/L）按1+2体积比混合。

3.仪器、设备

消化装置可调式电炉量筒凯氏定氮仪粉碎机烘箱

4.分析步骤

4.1称样、处理

称取经烘干粉碎过的板栗（山东2.0304g北京2.0794g本地2.0857g）

4.2消化

向凯氏烧瓶中依次加入硫酸铜0.4g、硫酸钾10g、硫酸20mL及数粒玻璃珠。

将消化装置放在电炉上，缓慢加热。

当溶液呈蓝绿色透明时，继续加热0.5～1h。

冷却至约40℃，定容至100ml备用。

4.3测定

取10ml定容后的消化液，用凯氏定氮仪测定含氮量。

5.结果分析

（V-V0）*0.014*C

X=----------------*F*100

m*10/100

x——食品中蛋白质含量（质量百分率），%（m/m）或%（m/V）

V——滴定试样时消耗0.1mol/L盐酸标准滴定溶液的体积，mL

V——空白试验时消耗0.1mol/L盐酸标准滴定溶液的体积，mL

c——盐酸标准滴定溶液的摩尔浓度，mol/L

0.014——1mL1mol/L盐酸标准滴定溶液相当于氮的质量，g

m——试样的质量，g；

F——氮换算为蛋白质的系数,板栗F为5.30

对照V=0ml

V=2.640mlX=7.8259%

V=2.788mlX=8.2393%

V=4.468mlX=13.567%

八多酚类物质总量的测定

过量酒石酸铁在茶多酚溶液中与茶多酚反应生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中茶多酚的含量成正比。

因此可通过比色法定量测定茶多酚。

2.仪器和试剂

2.1试剂

酒石酸铁溶液：

称取硫酸亚铁（FeSO4·

7H2O）1g和含4个结晶水的酒石酸钾钠（C4H4O6NaK·

4H2O）5g，混合后加蒸馏水溶解，定容到1000mL。

pH值7.5的磷酸盐缓冲液：

称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·

12H2O）60.2g和磷酸二氢钠（NaH2PO4·

2H2O）5.00g，混合后加蒸馏水溶解，定容到1000mL。

2.2仪器

UV-2800H紫外分光光度计（上海尤尼柯），长风HW-sk2电热恒温水浴锅，安捷伦1200高效液相色谱仪，BS214D型电子天平,普通烘箱,移液枪。

3.试验材料

经烘干粉碎的板栗粉，鲜板栗

4.1样品试液制备：

准确称取板栗处理2g样品于200mL三角瓶中，加入80mL80%乙醇溶液，在沸水浴中保温浸提30min，然后过滤﹑洗涤，滤液和洗涤液合并转入100mL容量瓶中，冷却后加蒸馏水定容。

4.2测定：

吸取样品试液1mL放在25mL容量瓶中，加入蒸馏水４mL和酒石酸铁溶液5mL，摇匀，再加入pH值7.5的磷酸盐缓冲液稀释至刻度，以蒸馏水代替样品试液，加入同样的试剂作空白，选择540nm波长和10mm的比色杯测定吸光度。

A×

1.957×

2×

T

茶多酚含量　＝　─────────×

100%

1000×

V×

m

A为样品试液的吸光度；

T为样品试液的总量，mL

V为测定时吸取的样品试液量，mL

m为称取板栗样品的质量，g。

1.957用10mm比色杯，当吸光度等于0.50时,每毫升处理样品中含多酚相当于1.957mg,

板栗种仁鲜样：

干物比（%）质量（g）吸光值多酚含量（%）

山东65.962.04640.0090.2610

北京65.622.04540.0020.0583

本地59.522.08210.0050.1580

种仁干样：

质量（g）吸光值多酚含量（%）

山东2.05690.0480.9134

北京2.02580.0470.9081

本地2.00440.0460.8982

板栗囊衣中总多酚的测定方法中，样品试液的制备中采用80ml沸水萃取，其它步骤同上。

板栗囊衣鲜样：

山东89.231.02050.25210.789

北京91.851.01230.1958.2086

本地90.991.01530.2319.7866

囊衣干样：

山东1.01300.2188.3844

北京1.04600.2579.5792

本地1.02820.30111.458

综述:

干物比:

山东（46.51）>

本地（46.31）>

北京（46.28）

还原糖:

山东>

北京>

本地

总糖:

淀粉:

本地>

山东

蛋白质:

铁:

钙:

多酚:

板栗种仁干样与鲜样多酚含量比较来看，有误差，样品试液制备时未能排除其它物质的干扰，如可溶性糖

板栗囊衣干样与鲜样多酚含量比较，差