合肥一中高中生物实验Word文档下载推荐.docx
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(1)斐林试剂与双缩脲试剂的比较:
斐林试剂
双缩脲试剂
成分
甲液0.1g/mlNaOH溶液、乙液0.05g/mlCuSO4溶液
A液0.1g/mlNaOH溶液、B液0.01g/mlCuSO4溶液
鉴定物质
还原糖
蛋白质
添加顺序
甲乙两液等量混匀后立即使用
先加A液1ml,摇匀,再加入B液4滴,摇匀
反应条件
50。
C~65。
C温水浴加热
不需加热,摇匀即可
反应现象
深蓝色→棕色→砖红色沉淀
浅蓝色→紫色
(2)还原糖、脂肪、蛋白质、淀粉检测的实验材料用具:
实验
材料
仪器
试剂
还原糖的检测
苹果或梨匀浆
烧杯、酒精灯等
脂肪的检测
花生种子、花生种子匀浆
显微镜、双面刀片等
苏丹III或苏丹IV染液、体积分数为50%的酒精溶液等
蛋白质的检测
豆浆、鲜肝研磨液
试管、滴管等
淀粉的检测
马铃薯匀浆
碘液等
㈠还原糖的检测和观察:
(1)向试管内注入2ml待测组织样液
(2)向试管内注入1ml斐林试剂(甲液和乙液等量混合均匀后再注入)
(3)将试管放入盛有50。
C温水的大烧杯中加热约2min
(4)观察试管中出现的颜色变化
㈡脂肪的检测和观察:
方法一:
向待测组织样液中滴加苏丹III染液,观察样液被染色的情况
方法二:
制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况(以花生为例)
(1)取材:
取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮
(2)切片:
用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用
(3)制片:
从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央;
在花生子叶薄片上滴2~3滴苏丹III染液,染色3min(若用苏丹IV染液,则染色1min);
用吸水纸吸去染液,再滴加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色;
用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片
(4)观察:
在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移到视野中央,将物像调节清楚,换高倍显微镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见
㈢蛋白质的检测和观察:
(1)向试管中内注入2ml待测组织样液
(2)向试管内注入双缩脲试剂A液1ml,摇匀
(3)向试管内注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀
(4)观察试管中的颜色变化
㈣淀粉的检测和观察:
(2)向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化
还原糖、脂肪、蛋白质鉴定比较
材料选取
含糖量高,颜色为白色或近于白色的植物组织
富含脂肪
富含蛋白质
材料处理
去皮、研磨
浸泡
---
试剂使用
甲液、乙液混合均匀后使用
染色和洗浮色时间不宜过长
先加A液再滴加B液
反应本质
新制的Cu(OH)2溶液与—CHO(还原糖的醛基)反应
碱性条件下Cu2+与肽键反应
实验关键
①植物组织的合适选取
②斐林试剂不稳定,一般配成甲液、乙液保存,检测时将甲液、乙液等量混合均匀后再加入到样液中
①切片要尽可能薄
②染色后一定要洗去浮色
③观察时找最薄处,最好只有1~2层细胞
①使用双缩脲试剂时应先加A液造成碱性环境,再加B液
②若使用蛋清,必须按要求稀释,待测组织样液要留出一份作为对照
3.观察DNA和RNA在细胞中的分布
(1)DNA主要分布在细胞核内,RNA大部分存在于细胞质中
(2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色,用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可显示DNA和RNA在细胞中的分布
(3)盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合
(4)吡罗红甲基绿染色剂的制备:
取A液20ml、B液80ml配成染色剂,使用时现配(A液:
取吡罗红甲基绿粉1g,加入100ml蒸馏水中溶解,放入棕色瓶中备用;
B液:
取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000ml,取乙酸12ml,用蒸馏水稀释至1000ml,取稀释的乙酸钠溶液30ml和乙酸20ml,加蒸馏水50ml,配成pH为4.8的溶液)
掌握观察DNA和RNA在细胞中的分布的方法
实验材料:
人的口腔上皮细胞(或洋葱鳞片叶内表皮细胞)
大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜
质量分数为0.9%的NaCl溶液、质量分数为8%的盐酸、吡罗红甲基绿染色剂、蒸馏水
(1)取口腔上皮细胞制片
①在洁净的载玻片上,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液(保持细胞正常形态)
②用消毒牙签在漱净的口腔(防止混杂食物碎屑)内侧壁上轻轻刮几下,把牙签附有碎屑的一端放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下
③点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干(在酒精灯火焰上来回移动,防止载玻片受热不均匀炸裂,最终使将细胞固定在载玻片上)
(2)水解
①在小烧杯中加入30ml质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中
②在大烧杯中加入30。
C温水
③将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min
(3)冲洗涂片
用蒸馏水(冲洗载玻片上的盐酸)的缓水流(防止细胞被水流冲走)冲洗载玻片10s
(4)染色
①用吸水纸吸去载玻片上的水分
②将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载玻片上,染色5min
③吸去多余染色剂(不洗浮色),盖上盖玻片
(5)观察
①用低倍显微镜观察:
选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰
②换用高倍显微镜观察:
调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况
实验现象及结论:
现象
结论
绿色明显、集中且接近细胞中央
DNA主要分布在细胞核中
细胞质中红色范围较广
RNA主要分布在细胞质中
(1)材料的选择:
①若选用植物细胞,应选用无色的,不宜用叶肉细胞,动物细胞不宜选用血细胞,以免颜色影响观察
②人和哺乳动物成熟的红细胞因其没有细胞核而不能选作实验材料
③常用观察材料:
人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(不可选用紫色表皮细胞)
(2)安全要点:
①酒精灯烘干载玻片时应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂
②烘烤后的载玻片应先自然冷却1min,在再放入盛有稀盐酸的烧杯中
③烘干的目的:
a.固定细胞,防止细胞进入盐酸溶液中;
b.迅速破坏细胞内酶的活性,防止核酸被水解
4.体验制备细胞膜的方法
(1)选材标准:
无细胞壁、无细胞核、无复杂的具膜细胞器
(2)实例:
哺乳动物成熟的红细胞
(3)制备方法:
先用清水处理使其吸水涨破,再用差速离心的方法制备
体验用哺乳动物红细胞制备细胞膜的方法和过程
猪(或牛、羊、人)的新鲜的红细胞稀释液(血液加适量的生理盐水)
蒸馏水、滴管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜
(1)用滴管吸取少量红细胞稀释液,滴一小滴在载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片
(2)在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸小心吸引(注意不要把细胞吸跑)(上述操作均在载物台上进行),持续观察细胞的变化
近水部分红细胞发生变化:
凹陷消失,细胞体积增大,很快细胞破裂,内容物流出
实验关键:
(1)选材:
哺乳动物成熟的红细胞(原因:
①无细胞壁,不用考虑去壁,且无细胞壁的支持和保护,细胞易吸水涨破②无细胞核和具膜细胞器,易用离心法得到纯净的细胞膜③材料容易获得)
(2)稀释红细胞:
取得红细胞后应选用适量的生理盐水稀释(目的:
①使红细胞分散开,不易凝集成块②使红细胞暂时维持原有形态)
5.用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体
(1)叶肉细胞中的叶绿体,散布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形,可以在高倍显微镜观察到叶绿体
(2)线粒体普遍存在于植物细胞和动物细胞中,线粒体形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等
(3)健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色,线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时,通过染色,可以在高倍显微镜下观察到线粒体
(4)健那绿染液的配制:
使用高倍显微镜观察叶绿体、线粒体的形态、分布
新鲜的藓类的叶(单层细胞)
显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签
新配制的质量分数为1%的健那绿染液
㈠观察叶绿体
(1)制作藓类叶片临时装片:
在洁净的载玻片中央滴一滴清水,用镊子取一片藓类的小叶,或取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮,放入水滴中,盖上盖玻片(注意保持临时装片的有水状态)
(2)观察叶绿体:
将叶片临时装片放在低倍显微镜下观察,找到叶片细胞后,换用高倍显微镜,观察叶片细胞内叶绿体的形态和、分布情况
㈡观察人口腔上皮细胞:
(1)制作人的口腔上皮细胞临时装片:
在洁净的载玻片中央滴一滴健那绿染液,用消毒牙签在漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在染液中涂抹几下,盖上盖玻片
(2)观察线粒体:
在高倍显微镜下观察经过染色的人的口腔上皮细胞临时装片,可以看到蓝绿色的线粒体,细胞质接近无色
㈠观察叶绿体:
叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色,扁平的椭球形或球形
6.植物细胞的吸水和失水
探究植物细胞原生质层是否相当于一层半透膜
紫色的洋葱鳞片叶
刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜
质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液、清水
(1)制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片
(2)用低倍显微镜观察洋葱鳞片叶外表皮细胞中紫色的中央液泡的大小,以及原生质层的位置
(3)从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液,在盖玻片另一侧滴入蔗糖溶液,重复几次,使盖玻片下面的洋葱鳞片叶表皮浸润在蔗糖溶液
(4)用低倍显微镜观察细胞中央液泡是否逐渐变小,原生质层在什么位置,细胞大小是否变化
(5)在盖玻片的一侧滴入清水,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引,重复几次,使洋葱鳞片叶表皮浸润在清水中
(6)用低倍显微镜观察中央液泡是否逐渐变大,原生质层位置是否变化,细胞大小有没有变化
中央液泡变化
原生质层位置变化
细胞大小
0.3g/ml蔗糖溶液
变小,颜色加深
脱离细胞壁
基本不变
清水
逐渐恢复原来大小颜色变浅
恢复原位
(1)蔗糖溶液浓度不宜过高,否则会引起细胞过度失水而死亡
(2)若用葡萄糖、NaCl、KNO3、尿素、乙二醇等做实验,则发生质壁分离后会自动复原(上述物质均可转运到细胞内,致使细胞液浓度升高,外界浓度降低,从而重新吸水而复原)
7.比较过氧化氢在不同条件下的分解
新鲜肝脏中有较多的过氧化氢酶,每滴质量分数为3.5%的FeCl3溶液中Fe3+数,大约是每滴质量分数为20%的肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍
通过比较过氧化氢在不同条件下分解的快慢,了解过氧化氢酶的作用和意义
实验用具:
新鲜的质量分数为20%的肝脏(如猪肝、鸡肝)研磨液
量筒、试管、滴管、试管架、卫生香、火柴、酒精灯、试管夹、大烧杯、三脚架、石棉网、温度计
新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液、质量分数为3.5%的FeCl3溶液
(1)取4支洁净的试管,分别编上序号1、2、3、4,向各试管内分别加入2ml过氧化氢溶液,按序号依次放置在试管架上
(2)将2号试管内放在90。
C左右的水浴中加热,观察气泡冒出的情况,并与1号试管作比较
(3)向3号试管内滴入2滴FeCl3溶液,向4号试管内滴入2滴肝脏研磨液,观察哪支试管产生的气泡多
(4)2~3min后,将点燃的卫生香分别放入3号、4号试管内液面的上方,观察哪支试管中效率的卫生香燃烧猛烈
试管编号
实验现象
实验结论
1
无明显气泡放出,无助燃性
过氧化氢的自然分解缓慢
2
有少量气泡放出,有助燃性
加热能促进过氧化氢的分解
3
有较多气体放出,助燃性强
Fe3+能催化过氧化氢分解
4
有大量气泡放出,助燃性更强
过氧化氢酶也有催化过氧化氢的作用,且效率比Fe3+好
8.影响酶活性的条件
(1)细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的,酶对化学反应的催化效率称为酶活性
(2)唾液淀粉酶、胃蛋白酶等消化酶均在消化道中起作用,不同部位消化液的pH不一样,唾液的pH为6.2~7.4,胃液的pH为0.9~1.5,小肠液的pH为7.6,唾液淀粉酶会随唾液流入胃,胃蛋白酶会随食糜进入小肠
质量分数为2%的新配制的淀粉酶溶液、新鲜的质量分数为20%的肝脏(如猪肝、鸡肝)研磨液
试管、量筒、小烧杯、大烧杯、滴管、试管夹、酒精灯、三脚架、石棉网、pH试纸、火柴
质量分数为3%的可溶性淀粉溶液、体积分数为3%的过氧化氢溶液、质量分数为5%的盐酸、质量分数为5%的NaOH溶液、热水、蒸馏水、冰块、碘液、斐林试剂
9.探究酵母菌细胞呼吸的方式
(1)酵母菌是一种单细胞真菌,在有氧和无氧条件下都能生存,属于兼性厌氧菌
(2)CO2可使澄清石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄,根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况
(3)橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇发生化学反应,变成灰绿色
(1)酵母菌培养液的配制:
取20g新鲜的食用酵母菌,分成两等份,分别放入锥形瓶A(500ml)和锥形瓶B(500ml)中,分别向瓶中注入240ml质量分数为5%的葡萄糖溶液
(2)检测CO2的产生:
用锥形瓶和其他材料用具组装好实验装置,并连通橡皮球(或气泵),让空气间歇性地依次通过3个锥形瓶(约50min),然后将实验装置放到25。
C~35。
C的环境中培养8~10h
(3)检测酒精的产生:
各取2ml酵母菌培养液的滤液,分别注入2支干净的试管中,向试管中分别滴加0.5ml溶有0.1g重铬酸钾的浓硫酸(体积分数为95%~97%)并轻轻振荡,使它们混合均匀,观察试管中溶液的颜色变化
10.绿叶中色素的提取和分离
(1)绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中,因此可用无水乙醇提取绿叶中的色素
(2)绿叶中的色素不止一种,它们都能溶解在层析液中,但其在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度高低的随层析液在滤纸上扩散得慢,则几分钟后绿叶中的色素随着层析液在滤纸上的扩散而分离开
(3)层析液的制备
(1)进行绿叶中色素的提取和分离
(2)探究绿叶中含有色素种类
新鲜的绿叶(如菠菜的绿叶)
干燥的定性滤纸、试管、棉塞、试管架、研钵、玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、药勺、量筒(10ml)、天平
无水乙醇(若没有无水乙醇,可用体积分数为95%的乙醇,但要加入适量的无水碳酸钠,以除去乙醇中的水分)、层析液、二氧化硅、碳酸钙
(1)提取绿叶中的色素
①称取5g的绿叶,剪碎,放入研钵中
②向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入10ml无水乙醇,进行迅速(防止无水乙醇挥发)、充分的研磨(二氧化硅有助于研磨得充分,碳酸钙可防止研磨中色素被破坏)
③将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一块单层尼龙布)中进行过滤,将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严
(2)制备滤纸条:
将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条,将滤纸条的一端剪去两角,并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线
(3)画滤液细线:
用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀地画出一条细线,待滤液干后,再画一两次(可多积累色素)
(4)分离绿叶中的色素:
将适量的层析液倒入试管中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中,随后用棉塞塞紧试管口(注意:
不能让滤液细线触及层析液);
可以用小烧杯代替试管,用培养皿盖住小烧杯
(5)观察与记录:
观察试管内滤纸条上出现了几条色素带,以及每条色素带的颜色,记录观察结果
11.环境因素对光合作用强度的影响
(1)空气中CO2的浓度、土壤中水分的多少、光照的长短与强弱、光的成分以及温度的高低等,都是影响光合作用强度的外界因素
(2)光合作用的强度可以通过测定一定时间内原料消耗或产物生成的数量来定量地表示
绿叶(如菠菜叶片)
打孔器、注射器、40W台灯、烧杯
(1)取生长旺盛的绿叶,用直径为1cm的打孔器打出小圆形叶片30片(注意避开大的叶脉)
(2)将小圆形叶片置于注射器内,并让注射器吸入清水,待排出注射器内残留的空气后,用手堵住注射器前端的小孔并缓缓拉动活塞,使小圆形叶片内的气体逸出,重复该步骤几次
(3)将内部气体逸出的小圆形叶片,放入黑暗处盛有清水的烧杯中待用,因细胞间隙充满了水,故全部沉到水底
(4)取3只小烧杯,分别倒入20ml富含CO2的清水
(5)分别向3只小烧杯中各放入10片小圆形叶片,然后分别对3个实验装置进行强、中、弱三种光照(3盏40W台灯分别向3个实验装置照射,光照强弱可通过调节台灯与实验装置间的距离决定)
(6)观察并记录同一时间段各实验装置中小圆形叶片浮起的数量
12.细胞大小与物质运输的关系
NaOH和酚酞相遇,呈紫红色
通过探究细胞大小,即细胞的表面积与体积之比,与物质运输效率之间的关系,探究细胞不能无限长大的原因
3cm×
6cm的含酚酞的琼脂块
塑料餐刀、防护手套、毫米尺、塑料勺、纸巾、烧杯
质量分数为0.1%的NaOH溶液
(1)用塑料餐刀将琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体
(2)将3块琼脂块放在烧杯内,加入NaOH溶液,将琼脂块淹没,浸泡10min,用塑料勺不时翻动琼脂块(注意不要用勺子将琼脂块切开或挖动其表面
(3)戴上手套,用塑料勺将琼脂块从NaOH溶液中取出来,用纸巾把它们吸干,用塑料刀把琼脂块切成两半,观察切面,测量每一块上NaOH扩散的深度,记录测量结果(每两次操作之间必须把刀擦干)
(4)根据测量结果进行计算,并填写下表
13.观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
(1)高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞,由于每个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一分生组织中可看到处于不同分裂时期的细胞,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体的存在状态,便可判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程
(2)染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色
(3)龙胆紫溶液的配制
洋葱(可用葱、蒜代替)、洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片
显微镜、载玻片、盖玻片、玻璃皿、剪子、镊子、滴管
质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液或醋酸洋红液
(1)洋葱根尖的培养:
取洋葱1个放在广口瓶上培养3~4d,瓶内装满清水,让洋葱的底部接触到瓶内的水面,将其装置置于温暖处培养,待根长约5cm时,取生长健壮的根尖制成临时装片观察
(2)装片的制作:
制作流程为解离→漂洗→染色→制片
(3)洋葱根尖细胞有丝分裂的观察:
①把制成的装片先放在低倍显微镜下观察,扫视整个装片,找到分生区细胞(分生区细胞呈正方形,排列紧密),再换成高倍显微镜仔细观察,首先找出分裂中期的细胞,然后再找前期、后期、末期的细胞(注意观察各时期细胞内染色体形态和分布的特点),最后观察分裂间期的细胞
②若自制装片效果不理想,可观察洋葱根尖固定装片
③调节放大镜的放大倍数,使在视野里能够同时看到约50个细胞,统计视野中处于各时期的细胞数,记录在记录表“样本1”中,把视野移动到分生区一个新的区域再统计,记录在记录表“样本2”中,对数据进行处理,填入表中
(4)绘图:
绘制出植物细胞有丝分裂中期简图
14.性状分离比的模拟
通过模拟实验,认识和理解遗传因子的分离和配子的随机结合与性状之间的数量关系,体验孟德尔的假说
(1)用具:
小桶2个(分别标记甲、乙)、两种不同颜色的彩球20个(一种标记D、另一种标记d)、记录用的纸笔
(1)在甲、乙两个小桶中放入两种彩球各10个
(2)摇动两个小桶,使小桶内的彩球充分混合
(3)分别从两个桶内随机抓取一个小球,组合在一起,记下两个彩球的字母组合
(4)将抓取的彩球放回原来的小桶内,摇匀,按步骤(3)重复做50~100次
15.观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片
通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、位置和数目,加深对减数分裂过程的理解
蝗虫精母细胞减数分裂固定装片
显微镜
(1)在低倍显微镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞
(2)先在低倍镜下依次找到减数第一
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