饲料添加剂木聚糖酶Word文档格式.docx
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菌种
最小酶活
分析方法
酶活单位
饲料中最少添加量U/kg
厂家
REGULATION(EU)
含有内切-1,4-β-木聚糖酶的复合酶
Talaromycesversatilissp.nov.IMICC378536;
DSM26702
异变踝节菌
固体酶:
22000VU/g
液体酶:
5500VU/ml
粘度法
1VU:
在30°
C、pH5.5的条件下,每分钟降低小麦阿拉伯糖基木聚糖液体粘度,从而引起1个液体相对流动性改变所需的酶量。
1100VU
760VU
AdisseoFranceS.A.S.
2017/210
内切-1,4-β-木聚糖酶
BacillussubtilisLMG-S15136
枯草芽孢杆菌
固体酶、液体酶
400IU/g
比色法
1IU:
在pH4.5、30°
C条件下,每分钟从桦木木聚糖中释放1mmol还原糖(木糖等价物)所需的酶量。
10IU
Beldem,divisionofPuratosNV.
2017/211
Trichodermaviride(NIBHFERMBP4842)
绿色木霉
210000U/g
比色法
1U:
在pH5.3、50°
C条件下,每分钟从桦木木聚糖中释放0.0067mmol还原糖(木糖等价物)所需的酶量。
10500U
KeminEuropaNV
2017/429
Aspergillus
Niger(CBS109.713)
黑曲霉
固体和液体酶:
5600TXU/g
1TXU:
在pH3.5、55°
C条件下,每分钟从小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放5mmol还原糖(木糖等价物)所需的酶量。
280TXU
560TXU
BASFSE
2017/950
Trichodermaviride(NIBHFERMBP4842)
固体酶
35000U/g
在pH5.3、50°
8750U
2017/963
Aspergillusoryzae(DSM26372)米曲霉
1000FXU/g液体酶:
650FXU/ml
1FXU:
在pH6.0、50°
C条件下,每分钟从天青交联小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放7.8mmol还原糖(木糖等价物)所需的酶量。
100FXU
200FXU
DSMNutritionalProductsLtd
2017/1006
Trichodermareesei(ATCCPTA5588)
里氏木霉
固体酶、液体酶:
12200U/g
在pH4.2、50°
C条件下,每分钟从天青交联小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放0.48μmol还原糖所需的酶量。
1220U
610U
Danisco(UK)Ltd
2016/997
TrichodermacitrinovirideBisset(IMSD135)
桔绿木霉
6000EPU/g
1EPU:
在pH4.7、50°
C条件下,每分钟从燕麦木聚糖中释放0.0083μmol还原糖所需的酶量。
1050EPU
1500EPU
HuvepharmaNV
2015/1043
Trichodermareesei(ATCC74444)
2700U/ml或g
在pH5.0、40°
C条件下,每分钟从小麦阿拉伯糖基木聚糖中释放1mmol还原糖所需的酶量。
135U
216U
270U
DSMNutritionalProducts
2013/403
3主要工作过程
2011年3月,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、武汉新华扬生物股份有限公司和广东溢多利生物科技股份有限公司接到制标任务后,系统查阅分析了国内外有关标准资料、产品类型和主要生产企业的情况,组织召开了标准制定方案研讨会,参会人员经认真分析研究,初步拟定了标准的使用范围、要求等内容,并对有关试验工作与制标起草工作做了具体分工与安排。
2011年12月,在资料汇总、调研和实验室检测的基础上,提出了国家标准《饲料添加剂木聚糖酶》征求意见初稿,通过发送Email征求意见,发函单位16个(其中包括1个政府部门,4个科研单位,2个大专院校,8个饲料企业,1个饲料检测部门),回函单位16个,未回函单位0个。
其中,提出意见单位16个,无意见单位0个,共提出意见42条,起草小组采纳意见37条,部分采纳或未采纳意见5条,意见内容及处理情况见征求意见稿意见汇总处理表。
在此基础上,起草小组根据意见对本标准文本和编制说明进行了修改和补充,形成了《饲料添加剂木聚糖酶》征求意见稿。
2012年9月,召开了标准预审会。
在预审会专家意见的基础上,扩大了采样范围和样本量,进一步完善和规范了标准文本,于2017年4月形成了国家标准《饲料添加剂木聚糖酶》送审稿。
2017年4月10日,全国饲料工业标准化技术委员会组织专家对本标准送审稿进行了审查,根据与会专家意见,起草小组进一步采集样品,补充测定了饲料添加剂木聚糖酶样品中玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素B1和T2-毒素的含量,并对国内外饲料添加剂木聚糖酶的生产和质量标准情况进行了调查研究。
在此基础上,修改后形成本标准送审稿,并于2018年2月7日报送全国饲料工业标准化技术委员会秘书处。
2018年03月27日,全国饲料工业标准化技术委员会组织专家对国家标准《饲料添加剂木聚糖酶》送审稿进行了再次审查,与会专家提出修改标准范围、要求中补充载体的规定、卫生指标中增加“汞”、编制说明中增加固体剂型水分和粒度的实测值等意见。
起草小组根据审查意见,对标准文本和编制说明进行了修改和完善,形成了国家标准《饲料添加剂木聚糖酶》报批稿,报送全国饲料工业标准化技术委员会秘书处。
4编制原则及主要技术内容确定的依据
4.1本标准制定过程中遵循的基本原则
4.1.1以保护消费者利益,促进对外贸易,促进技术进步,规范产品质量为目的;
4.1.2市场调研和试验室抽检相结合,确定相关技术指标,保证标准的科学性和可操作性;
4.1.3查阅和研究国外相关法律法规和标准资料,结合我国实际情况,保证标准的先进性、衔接性和协调性;
4.1.4充分考虑标准的科学性和可操作性,使实验方法快速方便且易于推广执行;
4.1.5在标准编写的过程中,把木聚糖酶产品的技术指标、木聚糖酶酶活的检测方法和产品保质期的确定作为本标准的重点部分,保证其在规范饲料添加剂木聚糖酶产品质量中起到重要作用。
4.2主要技术内容确定的依据
4.2.1范围的确定
根据2018年3月27日的专家组审查意见,本标准适用于通过毕赤酵母液体发酵生产的液体或经干燥生产的固体饲料添加剂木聚糖酶。
4.2.2要求项目的确定
通过相关检索,未查到国外的同类产品标准,国内外的饲料生产过程中又比较普遍使用了木聚糖酶产品。
因此,本标准在制定过程中主要参考了国内相关或类似标准内容,针对饲料添加剂木聚糖酶在生产和应用中的特点,在与生产企业反复研究讨论和对产品实际检测的基础上制定本标准。
酶活是衡量产品质量的关键指标,是饲料用酶制剂的核心内容。
卫生指标是衡量产品是否安全、无毒的重要依据。
所以,根据饲料添加剂木聚糖酶的产品特点,在市场调研的基础上把产品的感官指标、酶活、卫生指标、固体剂型水分和粒度、液体剂型pH值确定为本标准的要求项目。
另外,饲料添加剂木聚糖酶产品在实际应用中有液体和固体两种剂型,各生产厂家的产品有其独特的形状、色泽、气味和包装。
因此,本标准对产品的外观和包装未做统一的规定。
饲料添加剂木聚糖酶的剂型不同,使用方法也随之不同;
发酵后吸附载体的比例不同,在饲料中的添加比例也会不同,因此,对产品的使用剂量、使用方法未做统一的规定。
4.2.3要求参数的确定
4.2.3.1感官指标的确定
根据市场调研和采样结果,确定固体产品的感官指标粒度均匀,流散性好,无发霉变质。
无异味,有特殊发酵气味。
液体产品的感官指标为允许有少量絮状物。
4.3.3.2固体剂型水分和粒度的确定
现场采集了4个公司的37个固体产品,产品的覆盖率约为90%以上。
实际检测其水分含量在6.0%至9.5%之间(表2)。
考虑到产品储存过程中可能出现吸潮现象,确定了本标准中固体产品的含水量为≤12%。
现场采集了4个公司37个样品,产品的覆盖率约为90%以上,实测结果见表2。
结合专家意见“由于各个商家所用载体不同,粒度差异会较大,并且有些产品进行了包被或微细颗粒工艺,同时考虑饲料颗粒分布及与酶制剂的兼容性,建议适当放宽上限,如1400µ
m”,确定了本标准中固体产品的粒度参数为:
至少80%通过1.4mm孔径分析筛。
表2固体剂型木聚糖酶产品水分和粒度的检测结果
样品编号
水分(%)
粒度(0.42mm标准筛通过率%)
1
6.2
100
2
6.4
3
6.9
4
6.3
5
6.1
6
6.5
7
7.1
86.0
8
6.8
87.5
9
7.5
87.2
10
86.1
11
7.3
87.0
12
13
89.1
14
88.4
15
7.2
89.2
16
7.4
88.7
17
89.4
18
19
9.1
95.5
20
9.4
96.2
21
7.8
96.8
22
8.8
96.7
23
8.7
98.2
24
97.6
25
9.5
96.6
26
97.2
27
8.0
98.0
28
97.0
29
7.6
30
96.5
31
8.2
32
7.7
97.1
33
7.9
97.3
34
8.6
35
97.5
36
37
4.2.3.3液体产品pH值的确定
根据专家对液体产品pH值参数的建议“1、关于液体酶pH值5.0-6.0:
酶的pH值对酶的贮存及稳定性有一定影响,同样,由于产品浓度不同及对稳定性要求不同,各厂家产品的pH值不同,以不影响酶的活性和生物学效价为基准,建议将下限下调,如4.5-6.0。
”2、建议把液体酶pH值范围放宽,“5.0-6.0”改成“4.0-6.0”。
3、这一项是否可以不要,它跟产品质量没有关系。
如果要的话,现在市场上经常看到有的是4.5,是否就定4~7。
”,同时结合市场采样实测结果(见表3),确定了本标准中液体剂型的pH值为4.5-6.5。
表3液体木聚糖酶pH值抽样检测结果
编号
pH值
20110812-104
4.7
20120816-222
5.6
20150213-51
2016HY026-14
5.0
2016HY026-H2
5.1
注:
市面上单一液体木聚糖酶较少,多以复合酶的形式销售,因此样品较少。
4.2.3.4木聚糖酶酶活力的确定
在研制和起草本标准征求意见稿的过程中,编制小组对市场上销售的3家公司的饲料添加剂木聚糖酶固体产品(4个样品)进行了抽样检测,产品标示酶活为10000U/g或20000U/g。
检测方法为GB/T23874《饲料添加剂木聚糖酶活力的测定分光光度法》,检测结果表明4个产品的实测酶活都高于其标示值(见表4)。
在此基础上,根据专家对征求意见稿的反馈意见,进一步扩大了采样范围和样本量,对15家公司的17个产品进行了抽样检测,其中固体剂型13个,液体剂型4个。
检测方法为GB/T23874《饲料添加剂木聚糖酶活力的测定分光光度法》,检测结果见表5。
其中,13个固体产品中,酶活小于10000U/g的样品2个,酶活大于10000U/g的样品11个;
4个液体产品中,酶活小于10000U/g的样品0个,酶活大于10000U/g的样品4个。
另外,国内主要生产厂家新华扬生物股份有限公司、广东溢多利生物科技股份有限公司、北京昕大洋科技发展有限公司、北京挑战生物技术有限公司、宁夏夏盛实业集团有限公司生产的饲用木聚糖酶单酶制剂酶活单位都在10000U/g(mL)以上。
所以,本标准中规定饲用木聚糖酶固体产品的酶活≥10000U/g,液体产品的酶活≥10000U/mL。
表4第一次饲料添加剂木聚糖酶产品抽样检测结果
样品剂型
标示酶活U/g
实测酶活U/g
固体
10000
11000
10246
20000
21080
11761
表5第二次饲料添加剂木聚糖酶产品抽样检测结果
剂型
实测酶活U/g或U/mL
9040
9878
18914
19792
26621
37948
41223
83754
85517
88373
89068
108145
115525
液体
12444
38378
38438
50532
4.2.3.5卫生指标的确定
本标准在(第一次送审稿)中参照《NY/T722饲料用酶制剂通则》规定了饲料添加剂木聚糖酶产品中总砷、铅、镉、沙门氏菌、黄曲霉毒素B1、大肠菌群等6项指标的限量值。
具体指标值和《NY/T722饲料用酶制剂通则》(表6)中卫生指标的规定一致。
在2017年4月10日召开的标准审查会后,补充测定了15个样品中的6项卫生指标值,检测结果(见表7)表明:
15个样品中6项卫生指标均低于本标准(第一次送审稿)中规定的指标值。
所以,在本标准(第二次送审稿)中对总砷、铅、镉、沙门氏菌、黄曲霉毒素B1、大肠菌群等6项指标的限量值保持不变。
在2017年4月10日召开的标准审查会上专家组提出:
鉴于饲料添加剂木聚糖酶在生产过程中涉及植物性辅料或载体,本标准中卫生指标中需增加玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素)两项指标。
在此基础上,本标准起草组分3次采集样品,进行抽检。
第一批采集了13个样品(10个固体样品,3个液体样品),委托中国农业科学院农业质量与检测技术研究所检测了样品中玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、黄曲霉毒素B1和T-2毒素的含量(检测结果见表8),其中2个固体产品中检测结果为阳性。
样品1中检出黄曲霉毒素B1(4.08μg/kg),样品8中检出玉米赤霉烯酮(1.30mg/kg)和呕吐毒素(404μg/kg)。
第二批采集了4个饲料添加剂木聚糖酶样品,委托湖北省饲料质量监督检验站进行检测样品中玉米赤霉烯酮的含量(检测结果见表9),4个样品中玉米赤霉烯酮含量范围为7.8-13.1μg/kg。
第三批采集了3个饲料添加剂木聚糖酶产品,委托湖北省饲料质量监督检验站进行检测样品中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的含量(检测结果见表10),其中玉米赤霉烯酮含量范围为6.6-9.1μg/kg,呕吐毒素含量范围为0.3-0.5mg/kg。
根据抽检结果,同时考虑到木聚糖酶制剂中载体含量达到90%以上,所以,我们参照GB13078《饲料卫生标准》(表11)确定了本标准中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的限量值。
本标准中玉米赤霉烯酮的限量值(见表12)和《饲料卫生标准》中其他植物性饲料原料产品中玉米赤霉烯酮的限量值一致,本标准中呕吐毒素的限量值(见表12)和《饲料卫生标准》中关于植物性饲料原料中呕吐毒素的限量值一致。
根据2018年3月27日专家组意见(1、卫生指标中增加汞项目,其限量值与《饲料卫生标准》一致;
2、修改总砷和镉的限量值,与饲料卫生标准一致;
3、对毒素指标适用范围做限制“此类指标仅适用于植物性载体生产的产品”,对卫生指标做了修改(见表12)。
表6《NY/T722饲料用酶制剂通则》中卫生指标的规定
项目
指标
总砷mg/kg
≤3.0
铅mg/kg
≤10.0
镉mg/kg
≤0.5
沙门氏菌
不得检出
黄曲霉毒素B1μg/kg
≤10
大肠菌群MPN/100g
≤3.0×
103
若试样是液体剂型,砷、铅、镉的计算结果以毫克每升(mg/L)表示;
大肠菌群的计算结果以MPN每100毫升(MPN/100mL)表示;
黄曲霉毒素B1的计算结果以微克每升(μg/L)表示。
表7饲料添加剂木聚糖酶卫生指标测定结果
序号
酶活U/g
总砷mg/kg
铅mg/kg
镉mg/kg
黄曲霉毒素B1mg/kg
粉状木聚糖酶
12156
1.0
1.5
<
0.05
未检出
300
12868
1.2
2.2
200
12658
0.8
2.4
0.20
350
12038
0.5
3.0
400
11989
0.1
250
颗粒状木聚糖酶
12354
0.10
90
12756
11854
12396
0.15
11786
60
液体木聚糖酶
120
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