烟叶中碳水化合物的测定Word格式文档下载.docx

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香料烟>

晒烟>

白肋烟和雪茄包皮

还原糖在产地间变化：

云南、福建等南方烟区大于河南、安徽等北方烟区。

二、烟叶中碳水化合物的测定意义

1、水溶性糖含量高，烟叶物理特性好，柔软，有弹性，色泽好

2、水溶性糖燃烧产生酸性反应，抑制烟气中部分碱性物质的形成，使吸味柔顺，烟气酸碱平衡。

3、水溶性糖含量高，烟气焦油释放量高，影响安全性。

4、水溶性糖在燃吸时会释放出许多香气物质。

伯川法测烟叶糖类的样品预处理

一、糖类提取方法

1、水浸提法：

以水作提取剂，使被测成分溶解在水中，然后过滤除去残渣，得到待测液。

特点：

可将水溶性糖，淀粉，糊精都提取出来，测总糖时适用此法，

注意：

淀粉不溶于水，但是可以从样品中进入到水中

2、乙醇浸提法：

以乙醇为浸提剂，使被测成分溶于乙醇，然后过滤除去残渣，再蒸去乙醇，以水定容，得到待测液。

可将水溶性糖提取出来，淀粉不被提取出来，适用于测水溶性糖。

法1和法2的共同点：

都含有干扰测定的物质（蛋白质，氨基酸等）

二、除去干扰物质

1、除去蛋白质：

用中性醋酸铅和蛋白质形成沉淀并过滤除去。

（蛋白质可以分为：

水溶性，醇溶性和脂溶性蛋白质）

作用可靠，不会把还原糖从溶液中沉淀出来，但脱色力差，有人建议用ZnSO4,Ba（OH）2除去蛋白质。

2、除去色素：

活性炭脱色

有人做过实验：

对于200mg糖/100ml水的糖溶液，用活性炭脱色，可以将其中6%的糖（12mg）吸附，使测定结果偏低。

3、除去胶体：

用铝乳Al（OH）3凝聚胶体，产生沉淀，过滤除去沉淀。

4、除去有机酸：

用CaCO3中和有机酸

注意：

青烟中胶体和有机酸含量较多需除去，烤后烟可以不除

三、转化：

将低聚糖和多糖转化成单糖

可以酶解也可以酸解

水溶性糖测定

烟叶水溶性糖主要包括:

葡萄糖，果糖，蔗糖和麦芽糖。

测定步骤包括：

1、乙醇提取，2、除去杂质，3、将蔗糖转化为葡萄糖和果糖，4、按照还原糖方法测定。

测定方法包括：

重量法，容量法，原子吸收法，分光光度法

一、伯川法――容量法，测烟叶还原糖（国家局制定的标准）：

（一）原理：

烟叶中水溶性糖用乙醇提取出来，将其中的蔗糖水解成单糖，利用单糖还原斐林试剂产生Cu2O的量来测定水溶性糖含量。

还原糖＋斐林试剂葡萄糖酸＋Cu2O

Cu2O＋Fe2（SO4）3H2SO42CuSO4+2FeSO4+H2O

10FeSO4+2KMnO4+8H2SO45Fe2（SO4）3+2MnSO4+K2SO4+H2O

CuFeSO41/5KMnO4

0.1mmol0.1mmol0.1mmol

0.1mol/L（1/5KMnO4）×

VKMnO4（ml）

Cu（mg）=0.1mol/L（1/5KMnO4）×

VKMnO4（ml）×

6.35

查表可由Cu的量求出对应的糖的量

（二）测定过程：

1、待测液制备

①、浸提：

2g样品（烤烟）置于250ml三角瓶中，加入80％或95％乙醇100ml，静置过夜，上清夜过滤入250ml平底烧瓶中，残渣留三角瓶内向三角瓶内加入80％或95％乙醇100ml，加

热回流提取30min上清夜过滤入上次的平底烧瓶内，并冲洗残渣。

②、回收乙醇：

将装有糖液的平底烧瓶置于水浴锅上加热回收乙醇，至近于干固（仅剩下糖），向烧瓶内加入100ml蒸馏水融解糖残渣，得到糖的水溶液。

③、除去干扰物质

青烟需要除去有机酸（过滤浸提时加入CaCO3）和色素，黄烟仅需要除去蛋白质。

2、蔗糖水解：

3、和斐林试剂反应：

4、获得纯净Cu2O沉淀：

5、和Fe2（SO4）3反应：

6、滴定：

向烧杯中加入邻菲吗琳指示剂2滴，用KMnO4滴定。

7、计算Cu的量：

CuFe1/5KMnO4

Cu（Mg）＝0.1mol/L（1/5KMnO4）×

VKMnO4（ml）×

8、查表求出糖量，并计算烟叶中糖含量

查出糖量（mg）×

分取倍数（10）×

100

水溶性总糖%＝

样品重（mg）×

（1-含水率）

（三）注意事项：

1、本法适合测定含糖量为20—80mg的糖液中糖的含量。

2g样品含水溶性糖400mg250ml待测液含400mg糖25m待测液含40mg糖

2、糖待测液必须是中性或微碱性的。

过酸蔗糖水解，过碱：

产生沉淀

3、PbAc必须是中性的，如果是碱性，会把糖沉淀下来。

4、加入PbAc的量应该是理论量的2倍，太多会使糖也沉淀下来，太少蛋白质沉淀不完全。

5、水解后，中和HCl的NaOH必须适量，NaOH过量会产生沉淀

6、糖和斐林试剂作用必须在4min内完成，并且保持沸腾2min

7、过滤得到的Cu2O不能长时间暴露在空气中，所以过滤时应保持砂芯漏斗中总有水层覆盖。

8、得到的Cu2O必须马上和Fe2（SO4）3反应，防止氧化。

9、砂芯漏斗型号：

G1,G2,G3,G4,筛孔依次减小

烟草中淀粉测定

1、测定原理，测水溶性糖的提取残渣用HCl水解，将其中的淀粉水解成还原糖，再用伯川法测定还原糖的量，并计算出烟叶淀粉含量。

2、计算淀粉含量

淀粉（mg）＝还原糖（mg）×

0.9

0.9：

淀粉系数

（C6H10O5）n＋nH2OnC6H12O6

162n180n

淀粉系数＝162n/180n＝0.9

烟草中总糖测定

烟草总糖包括：

水溶性糖，淀粉，糊精。

所以应该用水提取，也可以边提取边水解。

1、实验原理：

将烟叶中各种形态的糖经HCl水溶液边提取边水解，全部转化成单糖，与原有的还原糖一起用伯川法测定其含量。

淀粉H+葡萄糖；

糊精H+葡萄糖；

蔗糖H+葡萄糖＋果糖

2、测定过程：

苦味酸比色法测定还原糖

一、测定原理：

烟叶中的还原糖在Na2CO3溶液中加热，可以进行焦糖化反应，生成红棕色焦糖色素，苦味酸可以显著提高反应的灵敏度。

该红棕色物质对460nm波长的光有最大吸收，且在一定浓度范围内，符合郎莫－比尔定律。

二、测定步骤：

1、制备糖待测液：

50mg样品于刻度试管内，加入15ml沸水，在水浴锅上沸水浴5min，冷却，直接在试管内定容到20ml，然后用干滤纸过滤入另外一个干试管内，即得到糖待测液。

2、测定：

3、绘制标准曲线：

4、计算：

G×

20/0.5

还原糖％＝×

0.909×

W×

（1－水%）

G：

查表得0.5ml糖液中还原糖含量/mg

W：

样重/mg

三、注意事项：

1、该法比伯川法测定结果高，存在系统误差

2、苦味酸是炸药，市售苦味酸一般加有10％水，避免苦味酸接触空气。

应经常检查实验用苦味酸是否失水，及时加水，不可将苦味酸放在干燥器内；

避免苦味酸和金属接触。

3、本法是先定容后过滤，所用滤纸要干燥

4、Na2CO3溶液冬天易结晶，可用温水加热融解