维生素B2检验操作规程Word下载.docx
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批准
批准日期
颁发部门
GMP、公室
颁发日期
执行部门
质量部
执行日期
取代
共印
4份
分发部门
质量部、生产部、物流部
1感官要求
取10g被测样品,置丁洁净的白瓷盘中,用肉眼在自然光线下观察其色泽、组织形态、杂质,品尝其滋味,嗅其气味。
2一般规定
本标准所用试剂除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682-2008中规定的三级水。
未指明的溶液为水溶液。
试验中所用标准滴定溶液和其他所需溶液,在未注明其他要求时,均按GB/T601、GB/T602、GB/T603之规定制备。
3鉴别试验
3.1荧光试验
3.1.1方法原理
维生素B2(核黄素)具芳香环和杂环,有长共轴结构的兀t兀*跃迁,具有荧光性,在酸、碱性条件下及加入各种还原剂均会使维生素B2(核黄素)转变为无荧光的物质。
3.1.2试剂和材料
3.1.2.1盐酸溶液:
1+2。
3.1.2.2氢氧化钠溶液:
40g/L。
3.1.2.3连二业硫酸钠。
3.1.3分析步骤
取约1mg实验室样品,加100mL水溶解后,溶液在透射光下显淡黄绿色并有强烈的黄绿色荧
光;
分成二份:
一份中加盐酸溶液或氢氧化钠溶液,荧光即消失;
另一份中加连
二业硫酸钠少许,摇匀后,黄色即消褪,荧光亦消失。
3.2紫外-可见吸收光谱鉴别
3.2.1方法原理
维生素B2(核黄素)具苯环结构,有多个共轴双键,其紫外-可见吸收光谱中有三个吸收峰(444nm375nm与267nn^,用A444nm/A267nm及A375nm/A267nm的比值来鉴别维生素B2(核黄素)。
3.2.2试剂和材料
3.2.2.1冰乙酸。
3.2.2.2乙酸车内溶液:
14g/L。
3.2.2.3实验室样品溶液:
避光操作。
取约0.075g实验室样品,精确至0.001
g,置烧杯中,加1mL冰乙酸与75mL水,加热溶解后,加水稀释,冷却至室温,移置500mL棕色容量瓶中,再加水稀释至刻度,摇匀;
精密量取10mL,
置100mL棕色容量瓶中,加7mL乙酸钠溶液,并用水稀释至刻度,摇匀。
3.2.3仪器和设备
3.2.3.1紫外-可见分光光度仪。
3.2.3.2石英池(1cm)。
3.2.4分析步骤
取实验室样品溶液扫描,在波长444nm土1nm、375nm土1nm与267nm土1nm处有最大吸收,并测定吸光度(A),计算A375nm/A267nm的比值为0.31〜0.33和A444nm/A267nm勺比值为0.36〜0.39。
3.3红外光吸收图谱鉴别
3.3.1
试剂和材料
漠化钾:
光谱纯,十燥品。
3.3.2
分析步骤
在红外灯下进行,以防止吸潮。
将实验室样品和漠化钾粉末置入玛瑙乳钵中研匀,装入压片模具制备样片并
4维生素B2的测定
4.1方法原理
维生素B2(核黄素)具苯环结构,有多个共钥双键,在波长444nm处有最大吸收,将样品溶1腺丁该波长处测定吸光度,以白分吸光系数(E1cm)计算即得其质量分数。
4.2试剂和材料
4.2.1冰乙酸。
4.2.2乙酸钠溶液:
4.3
仪器和设备
同3.2.3。
4.4分析步骤
取实验室样品溶液(3.2.2.3),在波长444nm土1nm处,以水为空白对照,测定吸光度(A)。
4.5结果计算
5000A
维生素B2(核黄素)的质量分数w1,数值以球示,按公式(A.1)计算:
W1='
.100%
323m(1-w2)100
式中:
维生素B2(核黄素)具苯环结构,有多个共钥双键,在波长444nm处有最大吸收,将样品溶1腺于该波长处测定吸光度,以白分吸光系数(E1cm)计算即得其质量分数。
5000Asee,
W1100%
323m(1w2)100
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