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是采用先进的血液回收设备,负压吸引手术视野中的血液,将其回收在过滤器中,在严格无菌技术操作的环境下,滤过血液中的组织碎块、血凝块、脂肪等,再经过抗凝、洗涤等处理,在手术中回输给患病动物。
预存式、术前稀释式和术中回收式自体输血,既可单一选择,又可联合使用。
在实施外科大手术中,根据具体情况,一般都采用预存式自体输血和术中回收式自体输血两种自体输血方式。
有的甚至同时采用预存式自体输血、术前稀释式自体输血和术中回收式自体输血3种联合自体输血方式。
术后血常规等各项血液指标,很快能恢复到术前水平。
自体输血是一种经济、合理、科学、安全、有效的输血方式。
这一输血方式节约了血液资源,降低了异体用血量,避免了异体输血传染病和输血反应的风险,更有利于为疑难配血患病动物提供手术用血,还可刺激造血功能,提高患病动物的免疫水平,有利于术后身体的恢复。
尤其是联合式自体输血,可相互取长补短。
术前稀释采集的血液,可使手术中出血有形成分丢失减少,术中机器回收的血液,可立刻提供与患病动物完全兼容的血液,完全符合患病动物的生理需要。
手术前凡手术预计出血量较多的病动物,患病动物条件符合自体输血要求的,均可作为自体输血的对象。
2.供应动物理想的供血动物,应该是成年、健康无病、营养良好、不肥胖、以前未曾输过血、按时注射疫苗和预防心丝虫感染,红细胞比容(犬>40%,猫>35%)和血红蛋白(犬>130g/L,猫>110g/L)正常、不贫血、凝血因子正常、无传染病。
另外还应知道血型。
①供血犬:
供血犬应温顺,颈部瘦易采血(大型犬前肢头静脉也可采血),如格力猎犬。
个体要大,体重25kg以上,年龄在2—6岁之间,这样的犬每隔4周可采血400mL,采血量不超过总血量的20%,也就是犬每公斤体重可采血15--20ml,这样可连续采血2年以上。
供血犬应无犬布氏杆菌病、犬心丝虫病、犬埃立体病、犬巴尔通氏体病、莱姆病、克氏锥虫病、巴贝斯虫病和(冯)维勒布兰德氏病(遗传性假血友病)。
②供血猫:
较好的供血猫也应温顺,长颈易采血,体重4kg以上,年龄在1—7岁,每隔4周,可采血10~15mL/kg体重。
供血猫应无猫白血病、猫免疫缺陷病、猫传染性腹膜炎、巴尔通氏体病、弓形虫病和无体内外寄生虫病,因为有的寄生虫是疾病的传递媒介。
二、采血和血液保存
1.血液抗凝剂和保存营养剂血液抗凝剂就是防止血液凝固之剂,以便有利于输血。
肝素和3.8%枸橼酸钠能抗凝血(表1),但无保存营养功能,采抗凝血后,需在8h内完成输血。
一般不提倡用肝素做抗凝剂,因为它抗凝时间短,对红细胞也无营养作用。
商品性动物血液库常用的抗凝和保存营养剂,即含有枸橼酸盐抗凝,又能为贮存的红细胞提供营养和起稳定红细胞作用。
枸橼酸盐葡萄糖(ACD)溶液是最早用于血液的抗凝保存营养剂,此溶液分A和B两种,ACD-B用于犬血液,在0~6℃能抗凝和保存营养21d,用于猫血液为30d(表17—1)。
表17—1.血液抗凝剂和保存剂
犬血液
名称抗凝和全血比例在0~6℃贮存时间
①抗凝剂
肝素625U/50mL(10mg/100ml血液)采血后立即输血
3.8%枸橼酸钠1mL/9mL血液采血后立即输血
②抗凝-保存营养剂
CPDA-1*1mL/7mL血液20~35d
ACD-B**1mL/4mL血液21d
累加溶液100mL/250mL浓缩红细胞37~42d
猫血液
肝素625U/50mL采血后立即输血
3.8%枸橼酸钠1mL/9mL血液采血后立即输血
ACD-B1mL/4mL血液30d
*CPDA-1配制:
枸橼酸钠2.63g、枸橼酸0.327g、磷酸二氢钠0.222g、葡萄糖3.19g、腺嘌呤0.0275g、注射用水或重蒸馏水100mL。
另外,也可用CPA抗凝。
**ACD-B配制:
枸橼酸钠1..33g、枸橼酸0.47g、葡萄糖3.0g、重蒸馏水100mL。
枸橼酸盐磷酸盐葡萄糖腺嘌呤(CPDA-1)是一种比较好的抗凝和保存营养剂,可用于犬的全血和浓缩红细胞,在0~6℃可贮存20~35d。
CPDA-1用于猫的红细胞是有变化的,可能贮存35d。
累加溶液(Additivesolution)是最新开发的以枸橼酸为基础的红细胞贮存的保存营养液,包括几种不同的液体,用于全血分离后的血浆和浓缩红细胞。
累加溶液加入浓缩红细胞,能为红细胞提供营养,延长其贮存时间。
此液只应用于犬,不适用于猫。
血液贮存时间长了,可能会发生溶血,使血液颜色变淡或变深,此时所贮存的血液便不能用了。
2.采血采血最好在封闭的环境进行,必须无菌操作,彻底消毒,以防细菌污染血液。
采血部位要剪毛,先用70%酒精消一下毒,然后再用2%碘酒消毒。
采血可利用重力或真空抽吸法,最好把血采入装有抗凝剂的专用塑料袋内或大号注射器内,这样可避免溶血过多。
现在多采用人医的采血袋,其抗凝和保存剂是CPDA-1。
(1)犬的采血:
给犬采血多选择在颈静脉或股动脉,大型犬可在前肢头静脉,一般不需要镇静,个别闹的犬需镇静后采血。
采血最好采入装有抗凝剂的专用采血袋内,袋上通常附有采血针头。
(2)猫的采血:
给猫采血多数需要先用镇静药物镇静,多选择颈静脉采血。
最简单方法是使用装有抗凝剂的大号注射器,一般可采血30~60mL。
采集的血液如果当时不用,在贮存前需标明是犬或猫血液、动物品种、血型、采血时间、保存到期时间等。
三、犬和猫红细胞血型
红细胞血型是指动物红细胞表面含有能抗特定抗体的抗原,它是一种遗传的性状。
由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系,称为血型系统,如犬有DEA(dogerythrocyte
Antigen)系统,猫有AB系统,另外还有白细胞抗原系统等。
未免疫或输血的动物,血浆中存在着先天性的同种抗体;
在输血致敏后,可产生后天性的其它同种抗体。
输血后引发的溶血或初生幼犬猫吃母奶后发生溶血,可能是这些同种抗体引发的。
同种抗体可通过交叉配血试验和血液分型来检验,凝血或溶血说明有同种抗体的存在。
1.犬红细胞血型犬至少有13种红细胞血型,但只有6个血型有意义,它们是DEA系统的DEA1.1、1.2、3、4、5、7血型。
DEA1血型有多个等位基因,包括DEA1.1、DEA1.2、DEA1.3和一个无效血型,DEA1.1抗原最重要,其次是DEA1.2。
如果供血犬是DEA1.1阳性,受血犬是DEA1.1阴性,初次输血将致敏,第二次输血,将很快或在12h内发生输血溶血反应,导致输入的红细胞崩解,甚至危机生命。
因此,不能用DEA1.1阳性犬给DEA1.1阴性犬作供血犬。
DEA1.1阳性公狗和DEA1.1阴性母狗交配,因母犬体内已带有了DEA1.1阳性抗体,生下的DEA1.1阳性幼狗,当幼狗吃了带DEA1.1抗体的母乳后,有可能发生溶血病,导致幼狗在短时间内死亡。
因此,最好不用DEA1.1阳性公狗和DEA1.1阴性母狗交配,以防幼犬吃母乳后发生溶血。
供血犬DEA1.2阳性,给受血犬DEA1.2阴性初次输血,也可致敏受血犬,如果第二次再输DEA1.2阳性血液,很快或在12~24h内也将发生输血后红细胞崩解反应。
犬DEA4阳性率为98%,阴性率为2%,不管犬DEA4为阳性或阴性,都可作为供血犬,故称“通适供血犬或万能供血犬”。
犬DEA7结构相似于普通细菌抗原,所以20%~50%的DEA7阴性犬自然产生的抗体,对抗DEA7阳性犬。
不过有人认为输给DEA7阳性犬红细胞时,那些抗体早已除去了,所以仍可选用DEA7阴性犬,作为供血犬。
犬血型DEA1.1和DEA1.2在输血中非常重要,现在已有这两种血型鉴定盒,鉴定出血型结果后,才有按图17—1可能输血,因DEA1.1阴性犬可给DEA1.1阴性犬、DEA1.1阳性犬和DEA1.2阳性犬输血,故也称为“通适供血犬或万能供血犬”。
图17—1.犬可输血血型
犬某一种血型阳性和阴性所占的比例,与其在的地区和品种有一定关系(表17—2)。
美国
Dmslaboratories公司生产的“犬血型检定卡”,可检定犬的DEA1.1阳性和DEA1.1阴性血型。
公司用磁卡检验145个血样,其中91个血样位DEA1.1阳性,54个血样为DEA1.1阴性。
表17—2.犬血型阳性和阴性所占比例
血型 阳性(%) 阴性(%)
DEA1
DEA1.133~4555~67
DEA1.27~1235~60
DEA35~1090~95
DEA487~982~13
DEA512~2278~88
DEA78~4555~92
实验证实:
(1)同血型即同阳性或同阴性犬,可以互相供血或受血。
(2)DEA1.1阴性犬只能接受DEA1.1阴性血液,不能接受DEA1.1阳性血液。
(3)DEA1.1阳性犬除能接受DEA1.1阳性血液外,也可以接受DEA1.1阴性血液。
(4)DEA1.2阳性犬可以接受DEA1.2阳性和DEA1.1阴性犬的血液。
(5)DEA7阴性犬可以作为供血犬。
(6)DEA4阳性或阴性犬,都可以作为供血犬,称为“通适供血犬或万能供血犬”
(7)临床上给未输过血的犬,初次输血时,很多大夫误解,可以不做交叉配血试验或检验血型。
但是,若初次输入了不相合的血型血液,输入血液红细胞的半衰期约30min到12h;
如果初次输入相合血型的血液时,输入血液红细胞的半衰期为21d。
所以初次给犬输血时,为了效果更好,鉴别血型或做交叉配血试验,根据血型或试验结果输血是很重要的。
临床上常见这样情况,不做血型鉴定或交叉配血实验,第一次给犬输血后,犬精神大有好转,但第二天病情更加严重,甚至死亡,这可能就是输入了不相配血液的原因。
因此,第一次给犬输血时,一定要做交叉配血试验或检验血型,两犬血型相合时,才可以进行输血。
2.猫红细胞血型猫仅有一个红细胞血型系统,包括血型A、B和AB三种,但这三种血型与人的血型无关。
猫没有“通适供血猫或万能供血猫”。
猫的血型因品种和所在地区不同而有变化,大多数美国猫是血型A(表17—3),血型AB极少见,少于1%。
美国Dmslaboratories公司生产的“猫血型检定卡”检验2116只猫的血型,其中2075只猫为A型血型,31只为B型血型,10只猫为AB型血型。
英国一份报告血型AB猫可占5%,血型AB猫仅在血型B猫群中才能发现。
所有的血型B猫,都自然具有抗血型A红细胞的同种抗体;
而所有血型A猫,都具有抗血型B红细胞的同种抗体,但抗血型B抗体一般较弱,当血型B猫输血给血型A猫时,一般只缩短输入红细胞寿命,其半衰期只有2d。
当血型A猫血液输给血型B猫时,输入的红细胞半衰期只有几分钟到几小时,因此将发生输血急性或亚急性溶血反应。
血型A公猫和血型B母猫交配,血型B母猫生的血型A或AB仔猫,在产后24h内采食含有抗体的初乳,有可能发生同族红细胞溶解的危险,在采食后最快便在10多小时死亡。
发生后表现为血红蛋白尿、血红蛋白血和黄疸,生后最多在2~3d便死亡。
通过做猫的血型,可避免以上问题发生,实现有计划的优生优育。
表17—3.美国猫血型所占比例
品种 血型A(%) 血型B(%)
阿比西尼亚猫8614
波曼猫8416
英国短毛猫604
缅甸猫1000
康瓦尔雷克斯猫6634
德文郡雷克斯猫5941
家养短毛猫(地区)
东北地区99.70.3
北部中心地区99.60.4
东南地区98.51.5
西南地区97.52.5
西海岸95.34.7
喜马拉雅猫937
日本短尾猫8416
缅因州浣熊猫982
挪威森林猫937
波斯猫8614
苏格兰折耳猫8218
泰国猫1000
索马里猫8317
斯芬克斯猫8119
东肯猫1000
东方短毛猫1000
美国短毛猫1000
现在市场上已有了快速鉴定猫血型试剂盒,检验结果如下表17—4。
猫相同血型相互输血,输入的红细胞半衰期可达30~38d。
如果使用猫血型卡鉴定血型,难以确定血型时,最好再做配血试验,然后再决定是否输血。
因为大多数猫对外来红细胞有自然产生的抗体,所以在猫输血前必须做交叉配血试验。
如果把A型血输给A型血的猫,红细胞的平均寿命为36天;
如果把B型血输给A型血的猫,红细胞的平均寿命只有2天;
如果把A型血输给B型血的猫,红细胞的平均寿命只有1小时。
犬猫的血型是终身不变的,它们只需检查一次血型,血型确定后,在以后或在紧急需要输血或供血时,就能及时输血或供血,挽救垂危犬猫生命。
表17—4.猫血型和输血前检验
供血猫血型
受血猫血型
项目
A
B
AB
O
×
注:
O表示可以输血;
表示不可以输血。
四、交叉配血试验和血型鉴定
交叉配血试验或血型鉴定是输血前检验输血是相合还是不相合,用以预防受血动物输血后发生输血反应。
什么情况下才做交叉配血试验或血型鉴定?
(1)因输血能诱导受血者产生新的抗体,因此犬两次输血时间间隔4d以上,第二次输血前还应再做交叉配血试验,以防新生同种抗体作用发生溶血。
犬紧急第二次输血,如果和第一次输血间隔不到4d,也可以不做交叉配血试验。
但输血开始后注意观察动物反应,一旦发现不良反应时,应立即停止输血。
(2)有过怀孕史的犬,犬怀孕时能自发地产生抗DEA1.1的同种抗体,如果给其输血,有可能发生输血反应。
(3)犬红细胞比容低于20%需要手术时,输血前除检验血型外,最好还做交叉配血试验,因为犬可自发地产生同种抗体,检验是为了避免发生输血反应。
有的研究认为犬猫血型是终身不变的,所以终身只需检定一次血型即可。
交叉配血试验有多种操作方法,现选用较多应用的一种方法,详述见表17—5。
表17—5.动物交叉配血试验
一.用EDTA抗凝,分别从受血者和供血者采血,或从供血袋内取血;
二.在1000转/min离心机里离心供血者和受血者血液5min;
三.用移液管吸取上面血浆,放入另外试管,并标记;
四.用磷酸盐缓冲盐水或生理盐水洗红细胞。
操作为加入洗涤液后,用手指轻弹试管底,使红细胞和洗涤液混合,再1000转/min离心5min,取上清液仍掉,如此重复3次;
五.然后用磷酸盐缓冲液或生理盐水制成含3%~5%的红细胞悬液;
六.主测配血试验:
取2滴受血者血浆和1滴供血者红细胞悬液,轻轻混合;
七.副测配血试验:
取2滴供血者血浆和1滴受血者红细胞悬液,轻轻混合;
八.受血者对照试验:
取2滴受血者血浆和1滴受血者红细胞悬液,轻轻混合;
九.在室温条件下放置15min;
十.1000转/min离心15秒,观察血浆有无溶血;
轻轻摇动试管,悬浮红细胞,观察红细胞有无凝集。
交叉配血试验判断标准如下:
0=无凝集。
1+=在自由红细胞中可见有多个小凝粒。
2+=存在有大凝块,并混有较小团块。
3+=许多大凝块。
4+=凝成一块,无自由红细胞。
交叉配血试验无凝集时才可以输血。
如果配血出现红细胞缗钱状时,犬可以试验输血,注意观察反应。
猫则不能输血。
犬主测配血试验是检验受血犬血清中是否有抗供血犬的红细胞抗体,如果有则不能输血。
副测配血试验是检验供血犬血清中是否有抗受血犬红细胞抗体,即使有也可以忽略,因为供血犬血液进入受血犬体内后很快被稀释了。
由于多数犬不存在自然产生的抗体(92%以上),因此从未输过血的初次交叉配血试验,一般是无凝集,但供血犬血液在不相合受血犬体内的半衰期约仅12h。
凡是曾经输过血的犬,在第二次输血前,即使用同一供血犬,也一定要做交叉配血试验。
猫能产生自然同种抗体,所以在猫输血前必须做交叉配血试验。
交叉配血试验还能鉴定血型,若主测配血试验不相合,受血猫可能为B型血,供血猫为A型血。
若副测配血试验不相合,受血猫可能为A型血,供血猫为B型血。
如果交叉配血试验相合,则供血猫和受血猫血型相同。
猫的血液最好在需要输血时,现采血现输血,不要长期贮存。
美国Dmslaboratories生产的“宠物交叉配血试剂盒”,可给宠物犬猫进行交叉配血试验,只需10分钟,即可完成一次交叉配血试验。
五、血液及其成分的输入
输血前应对血库血液或成分进行严格检查,血浆变成棕色可能细菌污染。
仔细观察标签上动物种类、品种、血型及有无交叉配血试验结果等,以防输错血,引起溶血反应。
输入血液或其成分中,通常不让加入其它药物或液体,因为加入低渗液体可引起溶血,如加入5%葡萄糖溶液;
加入含有钙的溶液,如复方氯化钠溶液,将引起凝血。
但为了稀释红细胞,减小黏稠度和加快输入速度,可加入0.9%氯化钠等渗溶液。
输血输入贮存全血时,一般不需要加温。
通常成年动物在输入全血或其成分时,它们能够利用体温来调节温度。
而幼年动物在输入较凉全血或其成分时,由于能引起体温降低,可能是危险的。
在输入贮存血液前,轻轻摇动,最好让温至室温。
血液加温易引起细菌过量繁殖或由于过热而溶血。
红细胞加温到37℃时,将迅速质变,如果不马上应用,应该废弃不用。
新鲜冰冻血浆在输入前应解冻。
盛血浆的塑料袋,在冰冻之前最好放在纸盒里,以防用手取时袋破裂。
从冰冻箱内取出纸盒后先加温,待塑料袋变温柔软时,才用手拿取,然后马上给动物输入。
解冻一般在>
37℃水浴箱内,不提倡用微波炉加温。
对所有的血液和其成分,在采血和贮存时,都应该通过一个过滤装置,其滤孔为170μm,用以除去凝块和碎片。
用注射器进行少量输血时,在国外输血注射器上附有18μm过滤器供用。
输血或其成分的途径,最常用的是静脉,在血管扁缩或幼小动物,难以输入时,可通过骨髓输入。
骨髓输血后5min,95%以上红细胞可进入血液循环。
临床上不提倡腹腔输血,以防引发腹膜炎。
新生动物腹腔输血,24h后输入的红细胞50%进入循环系统,2d后可达70%,但红细胞生命较短。
输血速度,因输入血液成分及动物状况不同,其速度也不完全相同。
全部输入量最迟也应在4h内输完,以便减少细菌的繁殖。
对于正常血容量的贫血动物,在输血开始的30min内,应以2.5mL/kg体重进行,观察有无反应,如果没有反应,输血速度可加快为5~10mL/kg/h;
在严重出血或休克,可最快为22mL/kg/h。
犬和猫因输血发生溶血性休克相当快,输血开始后,要密切注意呼吸、心博次数和体温。
给动物输入血浆可以适当加速,4~6mL/min。
输血或其成分时,有条件的医院,可用输血泵控制输入速度。
如果心脏或肾脏衰竭,输血速度不要超过4ml/kg/h。
血液及其成分的输入:
①全血输入:
全血分新鲜全血(Freshwholeblood)和贮存全血(Storedwholeblood)。
刚从供血动物采取加入抗凝剂的血液,称为新鲜全血。
新鲜全血含有红细胞、白细胞、白蛋白和球蛋白、血小板及凝血因子,新鲜全血多用于各种原因引起的急性大量血液丢失,引起的血容量迅速减少,估计失血量超过自身血容量的30%,并伴有缺氧或休克;
或者患病动物持续活动性出血,如炎症或凝血病(鼠药中毒、血友病、血小板减少症、弥散性血管内凝血、遗传性假血友病)和贫血。
多数动物医生在临床上习惯给动物输入新鲜全血。
在采血后6h内给动物输全血,可提高血液的携氧能力和增加凝血因子。
如果给没有贫血的动物,为了增多抗凝因子,可输入新鲜全血,但输入全血可导致医原性红细胞过多的危险,在临床上应特别注意。
新鲜全血贮存时间长了(在4~60C贮存超过35天),叫贮存全血。
贮存全血含有红细胞、白细胞、白蛋白、球蛋白及部分凝血因子,但缺乏血小板(只有3天存活性)、vWB、V和Ⅷ,。
贮存全血输血后只能提高血液携氧能力和部分凝血因子,贫血和大量失血动物适宜输入贮存全血。
输入贮存全血,因其缺乏血小板、vWB、V和Ⅷ,可引起受血动物这部分凝血因子减少。
全血贮存超过14天,就不适于给患有肝脏疾病动物输血了。
给动物输入全血量,一般为13~22mL/kg体重,计算方法:
患病犬猫需要输入血液量(ml)=2.2x受血者体重(kg)x40(猫为30)x[(目标HCT—病者HCT)÷
供血者HCT]
输入速度为贫血血容量正常动物是20mL/kg/24h,低血容量的贫血动物是20mL/kg/h,心脏衰弱的动物为4mL/kg/h。
有人曾给犬按50mL/kg体重输全血,输完血后不久,体重2kg多的犬,便发生口吐和腹泻鲜血,抢救无效而死亡。
因此,输血前一定要计算好输血量。
贫血血容量正常的动物,输入全血2.2mL/kg体重,能将红细胞比容(HCT)提高1%,根据此可计算出需要输血量,如贫血犬10kg体重,血液检验HCT为10%,供血犬HCT为40%,将贫血犬HCT提高到30%,需输多少全血?
计算:
因为全血2.2mL/kg体重全血能提高HCT1%,HCT由10%提高到30%。
每公斤体重需要44mL全血,10kg体重犬则需要440mL全血。
失血性休克在失血的前4h内,HCT和血浆总蛋白量能保持不变,此时可输入电解质溶液。
如果HCT在20%以上,
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