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本科生毕业论文

本科生毕业论文

题目

中药筛选

学院

动物医学院

专业

动物医学

班级

1031

姓名

王某

学号

01

指导教师

职称

年月日

辽宁医学院教务处制

目录

摘要………………………………………………………………………………1Abstract…………………………………………………………………………2

前言……………………………………………………………………………3

1材料与方法……………………………………………………………………2

1.1试验材料…………………………………………………………………2

1.2试验方法…………………………………………………………………2

2结果……………………………………………………………………3

2.1卵黄抗体对ETEC体外细胞粘附的抑制作用……………………………3

2.2卵黄抗体对断奶仔猪腹泻情况的影响………………………………………………4

3讨论……………………………………………………………………………4

3.1卵黄抗体对ETEC体外粘附细胞的抑制作用……………………………4

3.2卵黄抗体粉对断奶仔猪生产性能的影响…………………………………4

3.3卵黄抗体粉的应用前景………………………………………………………………4

4结论……………………………………………………………………………4

参考文献……………………………………………………………………………5

致谢………………………………………………………………………6

附录…………………………………………………………………………………7

中文题目

摘要

通过体外细胞粘附试验和饲养试验研究卵黄抗体作用机制及卵黄抗体粉预防断奶仔猪腹泻和改善生产性能的作用。

90头30±2日龄断奶仔猪，按血缘、体重、胎次、日龄和性别随机分成4组，每组分3栏饲养。

对照组饲喂玉米—豆粕型基础日粮；分别在基础日粮中添加0.5%、1%、2%的喷雾干燥卵黄抗体粉形成试验一组、二组和三组。

关键词：

卵黄抗体；粘附；腹泻；断奶仔猪

1

英文题目

Abstract

Theactivemechanismandefficiencyofeggyolkantibodieswasevaluatedbyinvivoandvitroexperiments.9028-32-days-oldpiglets（weaning）wereselectedandallottedtofourgroups.AlldietswereformulatedtomeetNRCre-quirement.Thecontrolgroupwerefedthecom-soybeandiet,experimentalgroup1,2and3werefedrespectivelyadietwith0.5%,1%and2%egg-yolkantibodiespowders.

Keywords:

eggyolk；adhesion；diarrhea；weanedpiglet

2

前言

随着规模化养猪业的迅速发展和生产管理的高度集约化，断奶仔猪腹泻是困扰现代养猪业的主要难题之一。

从ETEC超免母鸡的蛋黄中获得卵黄抗体（1gY）不仅在理论上切实可行而且与从其它哺乳动物（如鼠、兔、猪、马、牛等）血液中获得抗体相比，卵黄抗体具有产量高，化学性质稳定等优越性。

近年来用ETEC黏附素免疫蛋鸡获得抗黏附素卵黄抗体具有效价高、特异性强等优点而受到大量研究。

其作用机制一般认为卵黄抗体通过与ETEC粘附素发生特异性的结合，从而阻止了ETEC与粘膜的粘附，防止ETEC感染性腹泻的发生。

本试验旨在通过体外细胞黏附试验研究卵黄抗体对细胞黏附的抑制作用机制；并通过在断奶仔猪饲料中添加抗ETECK88ac黏附素卵黄抗体粉，研究卵黄抗体粉对控制仔猪腹泻、改善生长性能的作用。

实验部分（实验部分另起1页；黑体三号，居中）

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1菌株C83901（08：

K88ac）株购自中国农科院兽医药品监察所；卵黄抗体粉由华中农业大学猪遗传育种农业部重点实验室自行研制。

1.1.2试验动物90头（30±2）日龄断奶仔猪选自湖北省粮油进出口公司长流畜牧公司出口二厂。

1.1.3试剂

生理盐水：

0.9gNaCl溶于90ml蒸馏水中，定容至l00ml，于121℃高压灭菌15min备用。

pH7.4柠檬酸钠：

NaCl96mM，KCl1.5mM，KH2P048mM，Na2HP045.6mM，柠檬酸钠27mM，于121℃高压灭菌15min备用。

1.1.4主要仪器

高速冷冻离心机（德国Beckman公司）

SHZ—88式水浴恒温振荡器（江苏太仓实验设备厂）

YJ—1450型无菌操作台（苏州安泰空气技术有限公司）

ZXCZ生物显微镜（上海光学仪器五厂）

1.2试验方法

1.2.1体外细胞黏附试验

1.2.1.1空肠上皮细胞分离

2

空肠粘膜上皮细胞的分离采用调整后的Weiser法，断奶仔猪屠宰后30min内取大约50cm长的空肠，在38℃下温育10min，再用pH7.4的EDTA溶液在38℃下温育15min将收集的细胞以2000r/min离心5min使细胞沉淀。

说明:

一级和二级标题单独占一行。

三级以上标题不另起行，内容和标题之间用两个半角空格。

如果三级标题下有四级标题，三级标题也可占一行。

四级以下不设标题（不设五级标题）。

1.2.1.2ETECK88ac培养物的制备按常规方法进行ETECK88ac的培养，培养物离心沉淀，用PBS洗涤2次，去除上清液，收集菌体悬浮于PBS中，血球计数板计数，用PBS调整菌液浓度为50亿菌/ml，采MRHA检查黏附素表达情况，MRHA效价达26以上为合格，然后调整菌体浓度约为109个/ml。

1.2.2断奶仔猪饲养试验

1.2.2.1试猪的选择和分组选择30±2日龄断奶仔猪90头，按血缘、体重、胎次、日龄和性别等相对一致的原则随机分成4组，每组分3栏饲养。

1.2.2.2试验设计和试验日粮组成试验采用单因子设计。

对照组日粮见基础配方（见表1），在基础配方中分别添加0.5%、1%、2%喷雾干燥卵黄粉形成试验一组、试验二组和三组试验日粮。

表1饲粮组成与配方

日粮成分

配比（%）

营养水平[2]

乳清粉

玉米

鱼粉

豆粕

大豆磷脂

赖氨酸盐酸盐

食盐

石粉

磷酸氢钙

预混料[1]

8.00

58.80

5.00

23.50

1.00

0.15

0.30

1.40

1.35

0.50

消化能（Mcal/kg）

粗蛋白，%

钙，%

总磷，%

有效磷，%

赖氨酸，%

蛋氨酸，%

蛋氨酸+胱氨酸，%

苏氨酸，%

3.34

19.72

0.80

0.73

0.35

1.28

0.40

0.69

0.79

2结果与分析

2.1卵黄抗体对ETEC体外细胞粘附的抑制作用

在3次重复试验，每组共观察的60个上皮细胞中，无抗体的对照组平均每个上皮细胞粘附16.4±9.6个K88ac；抗体效价分别为1：

640和1：

1280的卵黄抗体较对照组均极显著抑制了K88ac对肠上皮细胞的粘附作用，平均每个上皮细胞分别仅粘附8.5±5.7和2.4±1.1个细菌（P＜0.01），二者之间也存在极显著差异（P＜0.01）。

抗体效价为1：

320的抗体组相对对照组有一定抑制细菌粘附作用（如表2），但差异不显著（P＞0.05）。

表2卵黄抗对ETEC体外细胞黏附的影响

抗K88ac抗体效价

黏附细菌数

0（对照）

320

640

1280

16.4±9.6a

13.7±7.4a

8.5±5.7bb

2.4±1.1d

注：

相同字母表示差异不显著，相邻字母者表示差异显著，相隔字母者表示差异极显著

3

2.2卵黄抗体对断奶仔猪腹泻情况的影响

从表3可以看出，试验二组和试验三组腹泻头数和头次数低于对照组和试验一组；相对照组和试验一组，试验二和试验三组的腹泻率极显著降低（P＜0.01）,对照组和试验一组，试验二组和试验三组之间腹泻率差异不显著（P＞0.05）。

表3试验期各组腹泻

组别

猪数量

腹泻头次

腹泻率

对照组

1

2

3

22

24

22

22

54（22[3]）

48（21）

20（14）

26（14）

13.8%a

12.2%a

5.1%c

6.7%c

3讨论

3.1卵黄抗体对ETEC体外粘附细胞的抑制作用

ETEC通过粘附素粘附于宿主肠粘膜之后，通过释放肠毒素引起肠道分泌性腹泻（Nataro和Kaper，1998）。

黏附素受体在宿主肠道各段的分布是不均一的，具有位置效应。

Cox和Houvenaghel（1993）用体外粘附实验表明相对十二指肠，K88更多地粘附在空肠上皮绒毛上[6]。

许多研究证实抗黏附素抗体可以与黏附素特异性结合，进而封闭其与上皮细胞受体的结合位点，从而阻止菌体与宿主细胞的粘附。

3.2卵黄抗体粉对断奶仔猪生产性能的影响

本试验中，试验二组日增重较其它组有一定改善作用；随着卵黄抗体粉添加量的增加，采食量有逐渐减少的趋势；各试验组间日增重和采食量无显著差异（P>0.05）；这与Marquardt等（1997）的试验结果基本一致。

3.3卵黄抗体粉的应用前景

由于卵黄抗体有很大的专一性，通常不同地方引起仔猪腹泻的主要ETEC不尽相同，只有与这些抗原相对的特异性抗体才可起治疗作用。

因此，对如何提高卵黄抗体的治疗效果和降低生产成本还需进行更深入的研究。

4结论

……

4

参考文献

[1]杨正时.动物病原性大肠杆菌与大肠杆菌病[J].中国兽医科技,1987,（6）：

25～29

[2]Yokoyama,Tomical,Xinbao,etal．Passiveprotectiveeffectofchickenegg-yolkimmunoglobulinsagainstexperimentalenterotoxigenicEscherichiacoilinfectioninneonatalpigslnfectlmmun[J].JClinMicrobiol,1992,60：

998～1000

[3]AlexanderTJ.Neonataldiarrheainpigs．In：

Cyles．C．L（ed），Escherichiacoilindomesticanimalsandhumans[J].CABIntemationalWallingfordUkpp.,1994,1：

51～170

[4]Sodefiind0，etal.VirulencefactorsinEscherichiacoilstrainsisolatedfromSwedishpigswithdiarrhea[J].JClinMicrobiol,1988,26：

879~880

[5]王炯,龚春梅.鸡卵黄抗体理化特性的研究[J].中国生物制品学,1997,10（3）：

140～143

[6]龙中儿,钟青萍,刘活林等.家畜传染病学（第三版）[M].北京：

中国农业出版社,2005：

218～220

[7]郭立君,李春晖,赵锋等.抗轮状病毒IgY的研制[J].中国生物制品学杂志,2001,14

（1）：

24～26

[8]范节才.大肠杆菌987P抗原的提纯及部分特性鉴定[J].中国畜禽传染病,1987,35（4）：

53～56

[9]房海.大肠埃希氏菌[M].石家庄：

科学技术出版社,1997：

409～429

注：

此篇范文为格式规范要求，内容上进行了删减，故参考文献的序列内容可能与文章有一定出入，望谅解，

[10]肖恩.鸡抗猪大肠埃希氏菌卵黄抗体的研究与应用[A].北京：

中国农业出版社,1998,28（4）：

21～25

致谢

××××××××××××××××××

附录

××××××

一、毕业论文撰写格式要求

1、毕业论文一律打印，采取A4纸张，页边距一律采取：

上、下2.5cm，左3cm,右1.5cm，行间距取多倍行距（设置值为1.25）；字符间距为默认值（缩放100%，间距：

标准），封面采用教务处统一规定的封面。

2、字体要求

论文所用字体要求为宋体。

3、字号

第一层次题序和标题用四号黑体字；第二层次题序和标题用小四号黑体字；第三层次题序和标题用小四号黑体，第四层及以下次题序和标题用小四宋体字，正文用小四号宋体。

4、页眉及页码

毕业论文各页均加页眉，采用宋体五号宋体居中，打印“辽宁医学院XXXX届本科生毕业论文”。

页码从正文开始在页脚按阿拉伯数字（宋体小五号）连续编排，居右书写。

5、摘要及关键词

中文摘要及关键词：

“摘要”二字采用三号字黑体、居中书写，“摘”与“要”之间空两格，内容采用小四号宋体。

“关键词”三字采用小四号字黑体，顶格书写，一般为3—5个。

英文摘要应与中文摘要相对应，字体为小四号TimesNewRoman。

6、目录

“目录”二字采用三号字黑体、居中书写，“目”与“录”之间空两格，第一级层次采用四号宋体字，其他级层次题目采用小四号宋体字。

7、正文

正文的全部标题层次应整齐清晰，相同的层次应采用统一的字体表示。

第一级为“1”、“2”、“3”、等，第二级为“1.1”、“1.2”、“1.3”等，第三级为“1.1.1”、“1.1.2”等，具体格式要求详见模板（模板从教务处主页下载专区下载）。

8、参考文献

参考文献要另起一页，一律放在正文后，在文中要有引用标注。

在毕业论文末尾要列出在论文中参考过的专著、论文及其他资料（5篇以上），所列参考文献应按论文参考或引证的先后顺序排列。

注明引用文献的方式通常有两种，即文中注：

正文中在引用的地方用括号说明文献的出处，如×××[1]；脚注：

正文中只在引用地方写一个脚注标号，在当页最下方以脚注方式按标号顺序说明文献出处，如注：

[1]、[2]。

。

。

。

。

。

然后在全文末单设“参考文献”一节，按标号顺序一一说明文献出处。

不同学科可能有不同要求，但都要按国标著录。

附件2辽宁医学院本科生毕业论文装订格式

用于装订的学生毕业论文是指学生提交的用于论文评阅和答辩的终稿论文，是指几经修改、论文内容、格式、排版等符合要求的论文稿。

学生毕业论文一式四份输出，其中三份分别装订后用于论文评阅和答辩，一份用于二级学院论文装订、存档。

按以下顺序装订毕业论文：

1．封面

2．任务书

3．开题报告

4．目录

5．中文摘要（含关键词）

6．英文摘要（含关键词）

7．正文

8．参考文献

9．致谢

10．注释

11．附录

12．毕业论文成绩评定表

7

涉及毕业设计（论文）格式的部分参考标准

摘要（ZY）

一、……。

摘要应具有独立性和自含性，不应出现图表、冗长的数学公式和非公知公用的符号、缩略语。

   二、中文摘要编写应执行GB6447规定，篇幅在100～300字。

   三、英文摘要应与中文摘要相对应。

   四、中文摘要前加“摘要：

”或“［摘要］”作为标识。

       英文摘要前加  “Abstract:

”作为标识。

关键词（JC）

一、关键词是反映文章最主要内容的术语，对文献检索有重要作用。

……，有英文摘要者应同时给出英文关键词。

一般每篇文章可选3～8个关键词，……；未被词表收录的新学科、新技术中的重要术语以及文章题名中的人名、地名也可作为关键词标出。

   二、多个关键词之间应用分号“；”分隔，以便于计算机自动切分。

   三、中、英文关键词应一一对应. 中文关键词前应冠以“关键词：

”或“［关键词］”.

       英文关键词前冠以“Keywords：

”作为标识。

例：

   关键词：

汽油机；燃爆控制；电子点火；模糊逻辑

   Keywords：

gasolineengines；knockcontrol；electronicignition；fuzzylogic

参考文献（WX）

一、参考文献是对期刊论文引文进行统计和分析的重要信息源之一，在本规范中采用GB7714推荐的顺序编码制编排。

二、参考文献著录项目

   a.主要责任者（专著作者、论文集主编、学位申报人、专利申请人、报告撰写人、期刊文章作者、析出文章作者）。

多个责任者之间以“，”分隔，注意在本项数据中不得出现缩写点“.”。

主要责任者只列姓名，其后不加“著”、“编”、“主编”、“合编”等责任说明。

 b.文献题名及版本（初版省略）。

   c.文献类型及载体类型标识。

   d.出版项（出版地、出版者、出版年）。

   e.文献出处或电子文献的可获得地址。

   f.文献起止页码。

   g.文献标准编号（标准号、专利号……）。

三、参考文献类型及其标识  

   1、根据GB3469规定，以单字母方式标识以下各种参考文献类型：

参考文献类型

专著

论文集

报纸文章

期刊文章

学位论文

报告

标准

专利

文献类型标识

M

C

N

J

D

R

S

P

2、对于专著、论文集中的析出文献，其文献类型标识建议采用单字母“A”；对于其他未说明的文献类型，建议采用单字母“Z”。

   3、对于数据库（database）、计算机程序（computerprogram）及电子公告（electronicbulletinboard）等电子文献类型的参考文献，建议以下列双字母作为标识：

电子参考文献类型

数据库

计算机程序

电子公告

电子文献类型标识

DB

CP

EB

4、电子文献的载体类型及其标识

   对于非纸张型载体的电子文献，当被引用为参考文献时需要在参考文献类型标识中同时标明其载体类型。

本规范建议采用双字母表示电子文献载体类型：

磁带（magnetictape）——MT，磁盘（disk）——DK，光盘（CD-ROM）——CD，联机网络（online）——OL，并以下列格式表示包括了文献载体类型的参考文献类型标识：

   ［文献类型标识/载体类型标识］ 

  如：

［DB/OL］——联机网上数据库（databaseonline）

        ［DB/MT］——磁带数据库（databaseonmagnetictape）

        ［M/CD］——光盘图书（monographonCD-ROM）

        ［CP/DK］——磁盘软件（computerprogramondisk）

        ［J/OL］——网上期刊（serialonline）

        ［EB/OL］——网上电子公告（electronicbulletinboardonline）

   以纸张为载体的传统文献在引作参考文献时不必注明其载体类型。

   四、文后参考文献表编排格式

参考文献按在正文中出现的先后次序列表于文后；表上以“参考文献：

”（左顶格）或“［参考文献］”（居中）作为标识；参考文献的序号左顶格，并用数字加方括号表示，如［1］、［2］、…，以与正文中的指示序号格式一致。

参照ISO690及ISO690-2，每一参考文献条目的最后均以“.”结束。

各类参考文献条目的编排格式及示例如下：

   a.专著、论文集、学位论文、报告

［序号］主要责任者.文献题名［文献类型标识］.出版地：

出版者，出版年.起止页码（任选）.

[1]刘国钧，陈绍业，王凤翥.图书馆目录［M］.北京：

高等教育出版社，1957.15-18.

[2]辛希孟.信息技术与信息服务国际研讨会论文集：

A集［C］.北京：

中国社会科学出版社，1994.

[3]张筑生.微分半动力系统的不变集［D］.北京：

北京大学数学系数学研究所，1983.

[4]冯西桥.核反应堆压力管道与压力容器的LBB分析［R］.北京：

清华大学核能技术设计研究院，1997.

   b.期刊文章

［序号］主要责任者.文献题名［J］.刊名，年，卷（期）：

起止页码.

[5]何龄修.读顾城《南明史》［J］.中国史研究，1998，（3）：

167-173.

[6]金显贺，王昌长，王忠东，等.一种用于在线检测局部放电的数字滤波技术［J］.清华大学学报（自然科学版），1993，33（4）：

62-67.                  

c.论文集中的析出文献

［序号］析出文献主要责任者.析出文献题名［A］.原文献主要责任者（任选）.原文献题名［C］.出版地：

出版者，出版年.析出文献起止页码. 

[7]钟文发.非线性规划在可燃毒物配置中的应用［A］.赵玮.运筹学的理论与应用——中国运筹学会第五届大会论文集［C］.西安：

西安电子科技大学出版社，1996.468-471.

   d.报纸文章

［序号］主要责任者.文献题名［N］.报纸名，出版日期（版次）.

[8]谢希德.创造学习的新思路［N］.人民日报，1998-12-25（10）.

e.国际、国家标准

［序号］标准编号，标准名称［S］.

[9]GB/T16159-1996，汉语拼音正词法基本规则［S］.

   f.专利

［序号］专利所有者.专利题名［P］.专利国别：

专利号，出版日期.

[10]姜锡洲.一种温热外敷药制备方案［P］.中国专利：

881056073，1989-07-26.

   g.电子文献

［序号］主要责任者.电子文献题名［电子文献及载体类型标识］.电子文献的出处或可获得地址，发表或更新日期/引用日期（任选）. 

[11]王明亮.关于中国学术期刊标准化数据库系统工程的进展［EB/OL］.http:

//www.1998-08-16/1998-10-04.

[12]万锦坤.中国大学学报论文文摘（1983-1993）.英文版［DB/CD］.北京:

中国大百科全书出版社，1996. 

   h.各种未定义类型的文献

［序号］主要责任者.文献题名［Z］.出版地：

出版者，出版年. 

   五、参考文献与注释的区别

   参考文献是作者写作论著时所参考的文献书目，一般集中列表于文