武汉大学 生科院 历年分 子生物学真题部分标答图文Word文件下载.docx
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三、问答题(50分)1说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。
(15分)2简述增强子的特点和性质及作用机制。
(10分)3简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分)4DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。
pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。
假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA片段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?
为什么?
(10分)2022年分子生物学真题科目名称:
935一填空:
(每空1分,共40分)1.测定蛋白分子量的主要方法是。
而要较准确测定DNA分子量的方法是根据66DNA分子量的大小而采取不同的方法,分子量510时用,分子量5-100106时用,分子量大于10010时用。
2.长度为20um的DNA分子,其长与宽的比是,该DNA分子含有碱基对。
3.细菌中,体内DNA重组需要RecA、RecB参加,RecA起作用,RecB起作用。
4.许多蛋白质能解开DNA双螺旋,32-prote重要性质和,所以能使DNA变性。
1514145.Meselson-Stahl实验中用的E.coli长时间在N中培养后转入N中。
转入N培养基中之151515141414后,1/2,1,世代时。
总DNA中NN,NN,NN的比例如下:
(此题共两分)世代1/211515NN1514NN1414NN6.原核生物转录程度的调控方式主要有和7.一个plasmid载体含有一个大肠杆菌Lac操纵子的promotor-operator和外源基因,那么这个基因的表达可以这样来控制,向培养基加入那么转录开始,要使转录停止,可以加入。
8.紫外线诱导的胸腺嘧啶二聚体的修复可以通过四种途径进行,它们是、和。
其中和是对模板进行修复,而修复引起突变。
9.在基因表达调控中,常常涉及顺式调控因子和反式调控因子,顺式调控因子是指,反式调控因子是指。
10.蛋白负责特定基因的开关。
在数百种来源于原核和真核的DNA-结合蛋白中发现以下几种结构花式(motif)。
它们是,和。
它们通常以和,深入到DNA双螺旋的大沟中与DNA互相作用。
11.逆转病毒即使本身并没有病毒癌基因,也可以致癌,当病毒cDNA整合于时病毒cDNA中能激活细胞的原癌基因的表达。
12.P53一种重要的抑癌蛋白,它的两个主要功能是
(1)
(2)。
P53的两个等位基因中只要其中一个变异就可能使癌发生,这是因为P53蛋白是的形式存在和行使功能的。
13.细胞快速适应高浓度胞外信号的途径是。
二、选择:
(每题2分,共20分)2.关于遗传密码的论述,哪些是正确的A、在通用密码中,AUG是唯一的兼职密码生B、生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度,从而进行翻译程度上的调控。
C、无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器,都共用一套遗传密码。
D、在体外无细胞合成系统中合成多肽,起始密码子不存在时也能合成多肽。
3.DNApolymerasel的哪个活性是使DNA复制保持忠实性的关链因素A、聚合活性B、5-3外切活性C、3-5外切活性D、逆转录酶活性4.一个phage感染它的溶源菌时,以下情况将发生A、进入正常的噬菌体循环产生50个左右的噬菌体粒子B、-DNA可以环化但不复制C、细菌细胞将被杀死D、原噬菌体将被割离E、-DNA将不能注入5.下面的部分二倍体中,哪些表型是组成型地合成-半乳糖苷酶+-+c+c-+-c-+AIozyBiozyCiozyDiozyEiozy+-+c+-+IozyIozyIozyIozyiozy6.关于真核基因表达调控特点的论述哪些是正确的A、真核基因组基因数目多、大多数含内含子、且与组蛋白及非组蛋白结合形成核小体及其超螺旋等结构影响基因活性B、转录在核内、翻译在细胞质中进行,绝大多数mRNA的形成要通过RNA是否被运输来控制基因表达C、真核mRNA寿命长,为翻译程度的调控提供了较大的余地D、真核基因表达调控可在DNA程度的调控(拷贝数、重排)、转录程度、转录后程度(RNA加工和运输)和翻译程度等多层次调控E、原核基因表达调控活动范围比真核更大7.人们为研究某一目的基因的结构,打算用基因工程的办法得此基因,请你在正面载体中选一最合适的载体A、表达载体B、分泌性载体C、克隆载体D、转移载体E、穿梭载体8.当培养基中不存在糖时,正面哪一种是galoperon上结合的蛋白质情况A、结合有CAP-cAMP和RNA聚合酶两种蛋白质B、不结合蛋白质C、结合有阻遇蛋白和CAP-cAMP蛋白9.正面关于真核生物启动子的表达,哪些是正确的?
A、真核生物有三种RNA聚合酶,它们利用同一种启动子B、DNApolymeraseII利用的启动子只有一种类型C、RNApolymeraseI利用的启动子分两部分:
40-+5和-165-4010.人们打算克隆并鉴定一个分子量为36-45kb的真核单拷贝基因,首先必须使用下边哪套系统,然后再进行鉴定。
A、用cosmid为载体建立基因文库B、用pBR322为载体建立基因文库C、用M13为载体建立基因文库D、用Charon4A为载体建立基因文库11.与细菌中发现的转录调控相比,真核细胞中的转录调控有以下区别,其中哪一项为哪一项错误的?
A、真核RNApolymerase单独不能起作用B、真核基因在转录前,需多种转录因子(generaltranscriptionfactors)先在启动了上装配成复合物C、起始复合物装配过程包括许多步骤,每个步骤都受到调控信号或调控因子的影响D、在真核中大多数基因调控蛋白不能在离开它们所影响的基因相当远的地方起作用三、问答:
1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分)2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分)3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?
可用什么术语来描述这一类基因家族(5分)4、你正在进行Southernblot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?
(5分)2022年分子生物学真题科目名称:
717注意:
所有的答题内容必须答在答题纸上,凡答在试题上的一律无效一、以下名词翻译成中文,并简要解释(共10小题,每题4分,共40分)1.Domainsandmotifs2.Alternativesplicing3.Reportergenes4.ThePCRcycle5.Restrictionmapping6.Multiplecloningsites7.DNAlibraries8.Proteomics9.Replicon10.Semi-conservativereplication二、简答题(共5题,每题8分,共40分)1,请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。
2,简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与互相关系。
3,简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymouscodon)及其在生物学上的重要性。
4,简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。
5,简述cDNA文库的构建过程。
三、论述题(共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分)1.人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么?
2.什么是操纵子(operon)?
试说明色氨酸操纵子(Trpoperon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。
3.请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的互相作用方式。
4.试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表如今哪些方面?
5.限制性核酸内切酶有哪几种类型?
哪一种类型的限制酶最合适于基因工程,为什么?
请简要说明其理由。
2022年分子生物学真题海豚2022-05-3020:
40:
492022年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷一,名词翻译与解释1,synonymouscodons2,RNAediting3,Spliceosome4,Microarray5,Plaquehybridization6,Openreadingframe7,Ribozyme8,RFLP9,Sitespecificrecombination10,RNAinterference二,简答题(共5小题,每题10分,共50分)1,简述真核生物rRNA基因,tRNA基因和mRNA基因的转录机制。
2,原核生物和真核生物中存在哪些类型的转座子?
其转座机制有那些?
3,简述真核生物DNA复制中,端粒复制与染色体其他部分DNA复制的异同和生物学意义。
4,原核生物的蛋白质合成可分为哪些阶段?
简述各阶段的主要事件。
5,列举4种可用来检测,鉴定转基因动,植物的分子生物学技术和方法,简述选择这些技术的理由。
三,论述题1,试述环境因素对DNA的损伤以及生物体中存在的DNA损伤修复系统。
假如DNA损伤没有被修复会造成什么后果?
2,试比较真核生物RNA聚合酶识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,各结构单元的功能是什么?
为什么原核生物一种RNA聚合酶能识别不同的结构基因?
3,在进行基因工程时,载体是携带靶DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具,请问一个载体应具有哪些基本特性和结构特点?
4,人类基因组计划基本完成说明:
人类基因组约有3乘10的9次方bp(而大肠杆菌的基因组约为4。
6乘10的6次方bp),其中仅有百分之一的基因组DNA直接编码蛋白质,约有百分之二十四的基因组DNA为内含子,而百分七十五的基因组DNA为其他非编码序列。
试从
(1)传代中遗传信息的保持;
(2)基因表达调空的角度来论述人类基因组如此排列的可能生物学意义。
492022分子试题一、名解(4/10)1Ubiquitin2ribosomalbindingsite3siRNAmiRNA4proteome5DNAfootprinting6singlenucleotidepolymorphism7chromosomewalking8haplotype9zooblot10transcriptionunit二、简答(5/10)1简述真核细胞rRNAtRNA和mRNA转录使用的聚合酶及各RNA前体(precursor)加工的基本过程?
2研究说明蛋白质组比基因组更复杂,蛋白质组中存在的蛋白质数目比基因组中存在的基因数目要多许多,这是如何造成的,你如何解释这种现象?
3简述原核与真核细胞染色体结构的差别4在分子生物学研究中经常用各种载体进行研究工作,试问有哪些不同大小类型的载体,各自的主要特点是什么?
5简述DNA损伤修复的机制,在什么情况下DNA损伤会引起DNA突变?
三、论述4/151蛋白质与核酸的互相作用存在于基因表达的各个程度上,请分别举例说明在基因复制RNA转录和蛋白质翻译过程中二者的互相作用。
2一个真核细胞的蛋白质编码基因有哪些结构元件(或组建)组成(包括各种调控元件)?
请画图表示,并说名各元件的功能与作用?
3请设计一组试验来
(1)克隆一个你所感兴趣的人类基因
(2)并对基因产物大量表达与纯化(3)然后研究该基因的生物学功能4生命科学的研究已进入后基因组时代,试从“分子生物学”的角度来谈谈你对后基因组时代的认识,并预测后基因组时代里“分子生物学”发展的将来2022年分子生物学一、名解4*101、DNAMicroarray2、Spliceosome3、Cosmidvector4、Proteasome5、Zincfingerdomain6、DNaseIhypersensitivity7、Insulator8、Post-transcriptionalgenesilencing9、ReversetranscriptionPCR10、Missensemutation二、简答题10*51、简述microRNA的基因调控功能与机制。
2、简述染色体端粒复制的问题,人正常细胞和癌细胞的端粒复制有何不同?
3、真核生物基因组中含有几种类型的DNA序列?
你如何设计实验来证明?
4、简述RNA编辑(RNAediting)的机制及其对基因表达的影响。
5、下面的DNA序列中含有一个假象基因,编码仅5个氨基酸。
请写出这些氨基酸的密码子以及终止密码子,并指出RNA转录的模版是哪条链?
启动子在该序列左侧还是右侧?
5-TCATGCTAGACACGTAATAGCATATGGGA-33-AGTACGATCTGTGCATTATCGTATACCCT-5三、论述题15*41、论述一个真核基因产生有功能的蛋白质需要经过哪些分子生物学工程(event)?
列出每个过程发生的细胞位置和参与的主要酶和蛋白因子。
2、有哪几种类型的遗传重组?
其重组的特点如何?
3、DNA的甲基化在遗传信息的传递、DNA复制和DNA损伤修复等过程中有什么重要意义?
请举例说明。
4、假如你进入实验室开始研究一个小鼠DNA结合蛋白的生物学功能:
(1)、请设计实验确定其编码基因在小鼠细胞内的表达程度?
(2)、请设计实验确定该蛋白的那个结构域具有DNA结合功能?
(3)、如何确定该蛋白在小鼠体内(invivo)的生物学功能。
2022年分子生物学真题2022年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目:
879一、名词翻译与解释(共10小题,每题4分,共40分)1.Missencemutation2.polysome3.Non-Watson-Crickbasepairing4.Tandemmassspectrometry5.Shine-Dalgarnosequence6.tmRNA7.allosteryactivation8.Blue-whitescreening9.Attenuator10.GroupIinton二、简答题(共5小题,每题10分,共50分)1、请描述两个经典实验证明遗传物质是DNA而不是蛋白质。
2、翻译过程中需要哪四种组分?
它们的功能是什么?
3、在遗传物质复制、转录和翻译过程中如何确保其准确性?
4、真核细胞转录和加工中哪些过程是相偶联的?
它们是如何偶联的?
5、酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的?
在科学研究中有什么作用?
三、论述题(共4小题,每题15分,共60分)1、在真核生物转录中,有哪三种序列构成核心启动子?
请说明型启动子中有哪些因子构成起始复合替,除了这些还有哪些是构成复合体所必须的?
它们各有什么功能?
2、人的基因组大概有2.53万个基因,但它们构成的生物体蛋白质种类却有20多万种。
人的基因组是怎样以有限的基因形成如此多的蛋白质的?
3、有一研究生想使他所感兴趣的一大肠杆菌的基因严格受碳源控制,在葡萄糖供应时,该基因不表达,当供应乳糖时,该基因大量表达?
你如何帮助他实现这种想法?
根据是什么?
4、miRNA在癌细胞中有的高程度表达,有的低程度表达。
请解释什么是miRNA?
并推测上面两种类型的miRNA各有什么生物学功能?
有一种miRNA-21在癌细胞中高程度表达,请设计实验得到该miRNA的生物学功能。
2022参考答案一、名词解释1.错义突变,引起编码一种特异的氨基酸的密码子变成编码另一种氨基酸的密码子称错义突变。
2.多聚核糖体,在蛋白质合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合,同时合成假设干条蛋白质多肽链,结合在同一条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体。
3.非Watson-Crick碱基配对,除正常的Watson-Crick配对之外还存在不寻常的碱基配对,有时A不是和U配对,G不是和C配对。
4.串联质谱,用电场和磁场将运动的离子(带电荷的原子、分子或分子碎片)按它们的质荷比分离后进行检测的方法。
测出了离子的准确质量,是蛋白质组学研究中的一种重要方法。
5.tmRNA是细菌中的一种小RNA。
它的结构独特,兼有tRNA和mRNA的双重功能,在细胞中参与一种特殊的翻译反应。
变构激活,6.SD序列,是核糖体小亚基16sRNA上的一段能与mRNA互补结合的序列,对翻译起到调控作用。
7.蓝-白斑挑选,含LacZ基因,该酶能分解生色底物X-gal产生蓝色,从而使菌株变蓝。
当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来挑选重组细菌。
8.I型内含子,是一类自剪接内含子,在没有任何蛋白质或其他RNA分子存在的情况下,内含子可以在试管内将自身从pre-RNAs中除去,比groupIIintrons小,有一个保守的二级结构,含有内在指导序列。
9.弱化子,在色氨酸操纵子中,当氨基酸合成到一定的程度,一个前成熟转录终止作用关闭了合成这一氨基酸的基因表达的操作子,这个起终止作用的发夹结构即弱化子。
10.变构激活,是生物系统中普遍的调控机制,由于配体与相应的蛋白质结合引起其构型发生改变,从而导致蛋白质的酶学活性打开的过程。
二、简答1.肺炎双球菌转化实验;
噬菌体侵染细菌实验。
具体步骤见课本。
2.mRNAs携带遗传信息,在蛋白质合成时充当模板的RNAtRNAs是密码子和氨基酸间的适配器,每个tRNA分子与一个特定的氨基酸结合并识别mRNA上的一个或几个特定的密码子.氨酰tRNA合成酶,催化氨基酸连接到tRNAs上核糖体,是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器3.复制中:
碱基配对原那么;
DNA聚合酶的校正作用;
修复系统转录中:
RNA聚合酶的校正翻译中:
密码子反密码子配对;
抑制突变等4.RNA的转录,延伸,加工是偶联的如,参与延伸的蛋白质和RNA加工所需要的蛋白质存着交替:
延伸因子hSPT5也募集和激发5加帽酶;
延伸因子TAT-SF1募集剪接机器的组分。
5.原理:
酵母双杂交技术是基于对真核生物调控转录因子的认识。
例如酵母转录因子GAL4,由DNA结合域BD和转录激活域AD组成。
这两个结合域将分开时仍分别具有功能,但不能激活转录,只有当被分开的两者通过适当的途径在空间上较为接近时,才能激活转录。
根据这个特性,将编码DNA-BD的基因与已知蛋白质A基因构建在同一个表达载体上,在酵母中表达两者的交融蛋白BD-A。
将编码AD的基因和靶基因B构建在另一个载体上,表达AD-B交融蛋白。
同时将上述两种载体转化改造后的酵母,当上述两种载体所表达的交融蛋白能够互相作用时,功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因,从而通过功能互补和显色反应挑选到阳性菌落。
用处:
主要用于研究在活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的互相作用三、论述1.构成真核生物核心启动子的三种序列:
转录起始位点或起始子,一般是A或G;
转录起始位点上游-25/-30bp处富含TA的典型元件TATA框;
上游启动子元件,如CAAT框;
I型启动子中有TATAbox,TFIIB识别元件(BRE),Initiator(Inr),下游启动子元件(DPE,DCE,MTE)这些因子构成起始复合体。
除了这些之外,还有RNApolII具延伸作用,TFIID结合TATAbox,TFIIB连接和TBP与RNAPolII,TFIIF稳定DNA-TBP-TFIIB复合体,TFIIE招募并调控TFIIH,TFIIH参与启动子的解旋和逃离。
2.主要通过选择性剪接,RNA编辑,翻译后修饰等。
3.将该基因置于lac启动子的控制之下。
原理是乳糖操纵子调控原理,见课本。
4.miRNAs是一类典型长度为2123核苷酸,产生于非蛋白编码基因转录的更大的前体(70-90nts),这些转录本含有形成茎环结构序列,这些结构是由Dicer加工而成的,miRNAs在植物及线虫中广泛存在,通过转录本产生的miRNA导致了与其有同源性的靶mRNA的破坏或转录抑制。
高程度表达的miRNA为癌基因,它们通过抑制抑癌基因或控制细胞分化或凋亡的基因此促进肿瘤的发展低程度标的的miRNA可能是一些抑癌基因。
基因敲除的方法证明。
20222022年分子生物学真题科目名称:
477一、解释概念(20分,每个4分)卫星DNA复制体逆转座子反式激活
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