培养基适用性检查报告Word下载.docx
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菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数50〜100cfu的菌悬液。
菌液制备后若在室温下放置,应在2小时内使用;
若保存在2~8C,可在24小时内
使用。
黑曲霉孢子悬液可保存在2~8C,在验证过的贮存期内使用。
3.1.3.适应性检查3.1.3.1.细菌计数用培养基适应性检查
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌各1ml(50〜lOOcfu),
分别注入无菌平皿中,立即倾注营养琼脂培养基,每株试验菌平行制备2个平皿,混匀,凝固
,置33C培养48小时,计数。
用被检培养基和对照培养基(若无对照培养基可用其他厂家生产的培养基
)按上述方法进行试验,并记录。
试验结果报告见表1。
检测日期
报告日期
被检培养基
批
生产厂家
名称
对照培养基
号
菌落数:
单
大
金
枯
位(cfu)肠埃布困
黄色葡萄球菌
草芽抱杆菌
平
1
匸2
1“
匸212
均
平均菌落数
比值
菌落形态大
小
结果判定
备注
表1细菌计数用培养基适用性检查
检验人:
]复核人:
3.131.霉菌及酵母菌计数用培养基适应性检查
取白色念珠菌、黑曲霉各1ml(50〜100cfu),分别注入无菌平皿中,立即倾注玫瑰红钠琼脂培养基,每株试验菌平行制备2个平皿,混匀,凝固,置26C培养72小时,计
数。
用被检培养基和对照培养基(若无对照培养基可用其他厂家生产的培养基)按上
述方法进行试验,并记录。
3.1.4.结果判定
若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%
(或与其他厂家生产培养基上菌落平均数相互比值不小于70%,且菌落形态大小与对照培养基(或与其他厂家生产培养基)上的菌落一致,判该培养基的适用性检查符合规定。
试验结果报告见表|2。
表2霉菌及酵母菌计数用培养基适用性检查
报告
日期
生产被检培养基名称
厂家
对照培养基名称
生产批
厂家号
单位(
cfu)色念珠菌
白
曲霉
黑
八、、
平均菌落数比值
菌落形态大小
复核人:
32控制菌(大肠埃希菌)培养基的适用性检查
321.菌种:
大肠埃希菌[CMCC(B)44102]
金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]
3.2.2.菌液制备
接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂
培养基上,33C培养24小时,用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10~100cfu的菌悬液。
3.2.3.适用性检查
控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示能力的检查。
大肠埃希菌培养基的检测项目及所用菌株见表3。
表3大肠埃希菌检查用培养基的促生长能力、抑制能力及指示能力检查
培:
K甘养基
丿
特
试验
菌株
性
胆盐乳糖培养基
(
BL
)
促生长能力
大肠埃布困
抑制能力
金黄色葡萄球菌
4-
促生长能力■
+扌曰示
甲基伞形酮葡萄甘酸培养基
MUG
能力
曙红亚甲基监琼脂培养基
+指示
(E
2MB或麦康凯琼脂培养基
(MacC
与其他厂家生产培养基)比较,被检培养基管大肠埃希菌应生长良好。
⑵胆盐乳糖培养基(培养基抑制能力检查)
接种3ml(不少于100cfu)的金黄色葡萄球菌于100ml胆盐乳糖被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)中,33C培养24小时,金黄色葡萄球菌不得生长。
⑶4甲基伞形酮葡萄苷酸培养基(液体培养基促生长能力、指示能力检查)
分别接种0.2ml(不大于100cfu)的大肠埃希菌至5mlMU嗽检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)的试管内,33°
C培养,于5小时、24小时在366nm
紫外光下观察,被检培养基应与对照培养基管(或与其他厂家生产培养基)大肠埃希菌生长情况一致,并呈现荧光。
观察后,分别沿被检培养基与对照培养基(或与其他厂家生产培养基)的管壁加入数滴靛基质试液,液面均应呈玫瑰红色。
⑷曙红亚甲蓝琼脂培养基(固体培养基促生长能力、指示能力检查)
取大肠埃希菌各0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于曙红亚甲蓝琼脂被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)平板上,33C培养18小时,被检培
养基上大肠埃希菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基
(或与其他厂家生产培养基)一致。
在曙红亚甲蓝琼脂培养基上,大肠埃希菌的菌落特征:
紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,常有金属光泽。
⑸麦康凯琼脂培养基(固体培养基促生长能力、指示能力检查)
取大肠埃希菌各|0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于麦康凯琼脂被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)平板上,33C培养18小时,被检培养基
上大肠埃希菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基(或与其他厂家生产培养基)一致。
在麦康凯琼脂培养基上,大肠埃希菌的菌落特征:
鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深桃红色,圆形,扁平,边缘整齐,表面光滑,湿润。
表4大肠埃希菌检查用培养基适用性检查
培养基名称胆盐乳糖培养基特性
试验菌株
培养温度
培养时间
批号
生长情况
对照培养基厂家
特性促生长能力、指示能力
5小时观
24小时观察
察
靛基质指示
培养基名称MUG
被检培养基厂家
培养基名称曙红亚甲蓝琼脂培养基
生长情况菌落大小菌落形态
菌落大小菌落形态
培养基名称麦康凯琼脂培养基特性促生长能力、指示能力
试验困株
33控制菌(乙型副伤寒沙门菌)培养基的适用性检查
3.3.1.菌种:
乙型副伤寒沙门菌[CMCC(B)50094]
金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]
3.3.2.菌液制备
接种乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或
营养琼脂培养基上,33°
C培养24小时,用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为10~100cfu的菌悬液。
若保存在2~8C,可在24小时内使用。
3.3.3.适用性检查
控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示能力
的检查。
沙门菌培养基的检测项目及所用菌株见表50
表5沙门菌检查用培养基的促生长能力、抑制能力及指示能力检查
培养基
特性
营养肉汤培养基
四硫磺酸钠亮绿培养基
乙型副伤寒沙门促生长能力
菌
金黄色葡萄球
胆盐硫乳琼脂培养基或沙门、志贺菌属琼脂培养
促生长能力+指乙型副伤寒沙门
示能力菌
曙红亚甲基蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基
乙型副伤寒沙门三糖铁琼脂培养基指示能力
⑴营养肉汤培养基(液体培养基促生长能力检查)
分别接种1ml(不大于]100cfu)的乙型副伤寒沙门菌于.200ml营养肉汤被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)中,33C培养18小时,与对照培养基
管(或与其他厂家生产培养基)比较,被检培养基管沙门菌应生长良好。
⑵四硫磺酸钠亮绿培养基(液体培养基促生长能力检查)
分别接种1ml(不大于100cfu)的乙型副伤寒沙门菌于10ml四硫磺酸钠亮绿被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)中,33C培养18小时,与对照
培养基管(或与其他厂家生产培养基)比较,被检培养基管乙型副伤寒沙门菌应生长良好。
⑶四硫磺酸钠亮绿培养基(培养基抑制能力检查)
接种3ml(不少于100cfu)的金黄色葡萄球菌于100ml胆盐乳糖培养基被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)中,33E培养24小时,金黄色葡萄球菌不得生长。
⑷胆盐硫乳琼脂培养基(固体培养基促生长能力、指示能力检查)
取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于胆盐硫乳琼脂被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)平板上,33C培养18小时,被
检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基(或与其他厂家生产培养基)一致。
在胆盐硫乳琼脂培养基上,乙型副伤寒沙门菌的菌落特征:
无色至浅橙色,半透明,菌落中心带黑色或全部黑色或无黑色。
⑸沙门、志贺琼脂培养基(固体培养基促生长能力、指示能力检查)
取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于沙门、志贺琼脂被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)平板上,33C培养18小时,
被检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基(或与其他厂家生产培养基)一致。
在沙门、志贺琼脂培养基上,乙型副伤寒沙门菌的菌落特征:
无色至淡红色,半透明或不透明,菌落中心有时带黑褐色。
⑹曙红亚甲蓝琼脂培养基(固体培养基促生长能力、指示能力检查)
取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于曙红亚甲蓝琼脂被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)平板上,33C培养18小时,
在曙红亚甲蓝琼脂培养基上,乙型副伤寒沙门的菌落特征:
无色至浅橙色,透明或半透明,光滑湿润的圆形菌落。
⑺麦康凯琼脂培养基(固体培养基促生长能力、指示能力检查)
取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml(含菌数50~100cfu)分别涂布于麦康凯琼脂被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)平板上,33E培养18小时,被检
培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基(或与其他厂家生产培养基)一致。
在麦康凯琼脂培养基上,乙型副伤寒沙门的菌落特征:
无色至浅橙色,透明或半透明,菌落中心有时为暗色。
⑻三糖铁琼脂培养基(固体培养基指示能力检查)
取乙型副伤寒沙门菌各0.1ml(不大于100cfu)分别涂布于三糖铁被检培养基和对照培养基(或与其他厂家生产培养基)高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种,33C培养18小时,被检培养基上乙型副伤寒沙门菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基(或与其他厂家生产培养基)一致。
在三糖铁琼脂培养基斜面见红色、底层见黄色;
或斜面黄色、底层黑色。
表6乙型副伤寒沙门菌检查用培养基适用性检查
培养基名称
宫养肉汤培养基
四硫磺酸钠兄绿培养基
被检培养基厂家
培养基名称胆盐硫乳琼脂培养基
培养温度培养时间
特性促生长能力、指示能力
培养基名称沙门、志贺菌属琼脂培养基
培养基名称麦康凯琼脂培养基
二糖铁琼脂培养基
指示能力
菌落形态
指示剂反应
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