乙肝血清标志物检测.ppt
- 文档编号:1993126
- 上传时间:2022-10-25
- 格式:PPT
- 页数:50
- 大小:2.88MB
乙肝血清标志物检测.ppt
《乙肝血清标志物检测.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《乙肝血清标志物检测.ppt(50页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
乙肝血清学标志物乙肝血清学标志物检测及意义检测及意义山西医科大学第二医院检验科山西医科大学第二医院检验科郭先锋郭先锋要点要点n简介简介n抗原组成抗原组成n传染源传染源n传播途径传播途径n病原学诊断病原学诊断n血清学模式及临床意义血清学模式及临床意义End前前言言n病毒性肝炎在我国各类传染病中发病率病毒性肝炎在我国各类传染病中发病率最高最高n乙型病毒性肝炎在我国危害极大乙型病毒性肝炎在我国危害极大n我国乙型肝炎患者近我国乙型肝炎患者近3千万千万n病毒性肝炎,一般特指由嗜肝病毒感染病毒性肝炎,一般特指由嗜肝病毒感染所引起的肝炎。
所引起的肝炎。
nHBV-属嗜肝属嗜肝DNA病毒病毒A病毒性肝炎病毒性肝炎HepatitisVirus肠道传播肠道传播肠道外传播肠道外传播F,TTV?
其它其它ENANBNANBBDC病毒性肝炎病毒性肝炎-背景背景传染源粪便血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液粪便传播途径粪-口经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜粪-口慢性感染否是是是否病毒性肝炎类型病毒性肝炎类型ABCDE基因组类型ssRNAdsDNAssRNAssRNAssRNAHepatitisBVirusn乙型肝炎的病原体乙型肝炎的病原体n乙型病毒性肝炎乙型病毒性肝炎1是由乙肝病毒(是由乙肝病毒(HBV)引起的、以)引起的、以肝脏炎性病变为主并可引起多器官损害的一种传染病。
肝脏炎性病变为主并可引起多器官损害的一种传染病。
本病广泛流行于世界各国,主要侵犯儿童及青壮年,本病广泛流行于世界各国,主要侵犯儿童及青壮年,少数患者可转化为少数患者可转化为肝硬化肝硬化或或肝癌肝癌。
因此,它已成为严。
因此,它已成为严重威胁人类健康的世界性疾病,也是我国当前流行最重威胁人类健康的世界性疾病,也是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的一种传染病。
为广泛、危害性最严重的一种传染病。
n乙型病毒性肝炎无一定的流行期,一年四季均可发乙型病毒性肝炎无一定的流行期,一年四季均可发病,但多属散发。
近年来乙肝发病率呈明显增高趋势病,但多属散发。
近年来乙肝发病率呈明显增高趋势估计全球半数以上人口已被估计全球半数以上人口已被HBV感染过,感染过,5%的人口为的人口为HBV慢性感染慢性感染.n中国:
乙肝高发区,人群中国:
乙肝高发区,人群HBsAg的检出率达的检出率达9.8%电镜下电镜下HepatitisBVirus乙型肝炎病毒HBVn乙型肝炎病毒(HBV)为专一的嗜肝病毒,近年由于核酸分子杂交技术的进展,在肝外器官细胞也能检出HBV-DNA。
通过北京乙肝肝病毒试验研究提供了在肝外细胞复制的证据。
人HBV也可能在肝外细胞内复制,有待深入研究。
HBV感染者血清经电镜检查有3种病毒颗粒.n1.大球形颗粒,完整的HBV颗粒直径为42nm,又名Dane颗粒,分为包膜与核心的两部分,外衣壳及包膜含有表面抗原,衣壳内为核心结构,有核心抗原,核心抗原下面藏有e抗原。
乙型肝炎病毒HBVn.小球形颗粒,阳性血清中最多的颗粒,主要为表面抗原,不含核酸及成分,为不完整的n.管形颗粒,实际上是一串小球形颗粒聚合在一起的,也含有表面抗原1.HBV1.HBV形态结构形态结构大球形颗粒大球形颗粒(Dane颗粒)颗粒)小球形颗粒小球形颗粒管形颗粒管形颗粒HBVvirionTheinfectiousvirioniscalledtheDANEparticle.Dane颗粒(完整的病毒)形态颗粒(完整的病毒)形态HBsAgHBcAgHBVDNADNAP(外膜蛋白)(外膜蛋白)(核衣壳蛋白(核衣壳蛋白)BothcomprisedofHBsAgHBVnomenclaturenHBV:
hepatitisBvirusnHBsAg:
hepatitisBvirussurfaceantigennHBsAb:
hepatitisBvirussurfaceantibodynHBcAg:
hepatitisBviruscoreantigennHBcAb:
hepatitisBviruscoreantibodynHBeAg:
hepatitisBviruseantigennHBeAb:
hepatitisBviruseantibody抗原组成抗原组成(一一)-)-HBsAgn位于病毒表面,是一种糖蛋白位于病毒表面,是一种糖蛋白(曾用名:
澳抗曾用名:
澳抗)n出现时间:
出现时间:
HBV感染后感染后26个月(潜伏期)个月(潜伏期)nHBsAg有10个亚型,各亚型间存在不完全的交叉免疫。
近年用亚型单克隆抗体研究表明,d和y、w和r决定簇可以同时存在于同一病毒抗原颗粒上,形成adwr、aywr、adyw和adyr复合亚型。
n其机制为不同亚型病毒的双重感染;单一亚型病毒感染后,有的HBV-DNA发生点突变。
临床表现病情反复,肝脏损害较重,因而有的HBV感染者血清中同时HBsAg阳性、抗-HBs阳性。
4种亚型种亚型(adr,adw,ayr,ayw)。
刺激机体产生保护性抗体即抗。
刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs.HBsAg血清中HBsAg阳性是HBV感染的标志。
本身具有抗原性,无传染性。
但由于HBsAg常与HBV同时存在,故认为是传染性标志之一。
但须注意,HBV-DNA可自X基因区终点起逆向与肝细胞发生整合,整合后的S基因表达较强,不断产生HBsAg,整合的HBcAg基因组被抑制,不表达HBeAg、HBcAg,在这种情况下,即使HBV已从体内清除,而HBsAg仍可持续阳性,从理论上讲,这种HBsAg阳性血液并无传染性。
急性HBV感染后,血清中首先出现HBsAg,整个急性期均可阳性,至恢复期可滴度下降或转阴。
如HBsAg持续阳性半年以上,称为慢性HBsAg携带者(无症状HBsAg携带者),可持续阳性达数年。
一般认为HBsAg滴度与病变程度不成比例。
肝功能正常,HBsAg滴度高,肝脏可重要病变,若HBsAg阴性及DNAp阴性,表示无重要传染性。
反之,肝功能异常,HBsAg滴度不高,肝脏可有明显病变,如有部分肝硬化、肝癌患者呈HBsAg阴性或低滴度。
无症状HBsAg携带者或慢性活动性乙型肝炎均可有相同的HBsAg滴度变化不能代表病情的轻重,因此分解此不能将HBsAg滴度的变化作为判断病情轻重和药物治疗效的指标。
n用免疫电镜及免疫荧光法在肝细胞浆内证实有HBsAg,而血清中HBsAg阴性,其机制尚无确切解释。
已知原因之一是现用的RIA检测法,其测试灵敏度为10-5,尚不能测出最低感染量(10-7),因此有10%假阴性,故对HBsAg的判断,以阳性有诊断意义,阴性不能排除HBV感染。
近年发现血清中HBV标志均阴性,而在白细胞或肝细胞内检出HBV-DNA,说明确定或除外HBV感染不能单凭HBsAg是否阳性,应与其他标志结合判断。
HBsAgn持续时间持续时间急性自限性肝炎:
血中急性自限性肝炎:
血中HbsAg大多可持大多可持续续1-6周,最长可达周,最长可达6个月内可消失个月内可消失慢性肝炎或慢性慢性肝炎或慢性HBsAg携带者:
可持续携带者:
可持续阳性。
阳性。
抗原组成抗原组成(二二)-)-HBcAgnHBcAg为为HBC复制指标复制指标.位于位于Dane颗粒核心部分和肝颗粒核心部分和肝细胞核内,在血清中不易检出游离的细胞核内,在血清中不易检出游离的HBcAgn主要成分是蛋白质主要成分是蛋白质n刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体非保护性抗体)n存在于受感染的肝细胞核内,有很强的免疫原性,在存在于受感染的肝细胞核内,有很强的免疫原性,在乙肝急性期、恢复期和乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗携带者中常可检出抗-HBc。
除非。
除非HBVC基因序列出现极少数变异或感染者基因序列出现极少数变异或感染者有免疫缺陷。
有免疫缺陷。
n抗抗-HBcIgM阳性提示急性期或慢性感染急性发作,抗阳性提示急性期或慢性感染急性发作,抗HBcIgG出现较迟,但可保持多年或者终生。
出现较迟,但可保持多年或者终生。
(抗抗-HBsHBs出出现现时时间间:
急急性性感感染染后后期期或或HBsAg转转阴阴后后(数数月月才才能能检检测测出出).6-12月月内内逐逐步步上上升升至至高高峰,可持续多年,但滴度会逐渐下降。
峰,可持续多年,但滴度会逐渐下降。
抗抗-HBsHBs为为保保护护性性抗抗体体(中中和和抗抗体体)其其出出现现标志着标志着HBVHBV感染进入恢复期感染进入恢复期-HBsHBs对对相相同同HBsAgHBsAg亚亚型型的的HBVHBV再再感感染染有有免免疫疫力,但对不同亚型的力,但对不同亚型的HBVHBV保护力不完全。
保护力不完全。
抗原组成抗原组成(三三)-)-HBeAgn位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白抗原nHBeAg和Dane颗粒出现相平行,且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合n血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标.急性HBV感染时HBeAg的出现时间略晚于HBsAg,在病变极期后消失,如果HbeAg持续存在预示趋向慢性。
大部分情况持续存在表示患者处于高感染低应答期。
n刺激机体产生抗-HBe。
转换过程意味着由免疫耐受转换为免疫激活,此时常有病变活动的激化。
n抗-HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗-HBe的出现是预后良好的征象。
抗HBe阳转后,病毒复制处于静止状态,传染性降低。
部分病人仍有病毒复制,肝炎活动,称为HBeAg阴性慢性肝炎。
HBVDNA是病毒复制和有传染性最直接的证据是病毒复制和有传染性最直接的证据检测方法:
斑点杂交法、PCR法近年用多聚酶链反应(PCR)这一体外DNA扩增技术,使灵敏度提高100倍以上(10FGfg/ml),可测出极微量的病毒。
HBV-DNA-p是HBV核心所具有的DNA-p,在病毒复制过程中起逆转酶作用。
DNA-p活性是表示HBV复缺点活力的重要指标。
HBV-DNA及DNA-p检测有助于判断HBV感染者病毒复制程度及传染性大小,较灵敏评价抗病毒药物的疗效。
乙乙肝肝抗原组成抗原组成(四四)-Pre-S)-Pre-S抗原抗原n位于位于HBV的外衣壳上,有两种的外衣壳上,有两种n刺刺激激机机体体产产生生抗抗Pre-SPre-S11和和抗抗Pre-SPre-S22,能能阻阻断断HBV与与肝肝细细胞胞受受体体结结合合,从从而而起到抵抗病毒起到抵抗病毒的作用的作用n抗抗Pre-SPre-S11和和抗抗Pre-SPre-S22的的出出现现,表表示示病病情好转,趋向痊愈情好转,趋向痊愈传染源传染源n患者患者n潜伏期潜伏期n急性期急性期n慢性期慢性期n无症状无症状HBsAg携带者携带者高高中等中等低低/不能检出不能检出血液血液精液精液尿尿血清血清阴道分泌物阴道分泌物粪便粪便伤口渗出物伤口渗出物唾液唾液汗液汗液泪液泪液乳汁乳汁各种体液中各种体液中HBV的浓度的浓度血源性传播血源性传播输血、注射、外科和牙科手术、针刺等输血、注射、外科和牙科手术、针刺等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等母婴垂直传播母婴垂直传播宫内传播宫内传播分娩时微小皮损处传播分娩时微小皮损处传播产后母婴密切接触产后母婴密切接触性传播性传播HBV传播途径传播途径病原学诊断病原学诊断(一一)-抗原抗体检测抗原抗体检测n项目:
项目:
HBsAg、抗抗-HBs、HBeAg、抗抗-HBe、抗抗-HBc以及抗以及抗-HBcIgMn方法方法nELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay,最常用,定性最常用,定性)n发光免疫分析发光免疫分析(定量定量)n反相间接血凝试验反相间接血凝试验(少用少用)ELISA的基本原理的基本原理n利用抗原和抗体特异性结合利用抗原和抗体特异性结合n主要的试剂主要的试剂n固相抗原或抗体固相抗原或抗体n酶标记的抗原或抗体酶标记的抗原或抗体n酶的底物酶的底物ELISA的主要方法的主要方法n间接法间接法:
测定抗测定抗-HBsn
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 乙肝 血清 标志 检测
![提示](https://static.bdocx.com/images/bang_tan.gif)