植物生长调节剂对蓝莓离体繁殖影响研究论文Word下载.docx
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摘要Ⅰ
AbstractⅠ
引言1
1.材料与方法1
1.1实验材料1
1.2培养基1
1.3实验方法1
1.3.1配制培养基1
1.3.2灭菌和无菌操作2
1.3.3培养和测量2
2.结果与分析2
2.1不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓株高的影响2
2.2不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓分蘖数的影响4
2.3不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓生根率的影响6
2.4不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓根长的影响7
3.讨论9
3.1IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓株高的影响9
3.2IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓分蘖的影响9
3.3IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓生根率的影响9
4.小结10
参考文献10
致谢11
植物生长调节剂对蓝莓离体繁殖影响研究
生物科学专业1班黄琴指导教师黄科
摘要:
本研究以蓝莓为实验材料,主要研究不同浓度的植物生长调节剂对其离体繁殖生根的影响。
本研究所采用的植物生长调节剂有吲哚-3-丁酸(3-Indolybutyricacid,IBA)、α-萘乙酸(1-Naphthlceticacid,NAA)、玉米素(Zeatin,ZT)和苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)。
结果表明,IBA浓度为0.05mg/L时蓝莓生根率最高达到73%;
NAA浓度为0.40mg/L时蓝莓生根率最高达到72%;
ZT和6-BA促进蓝莓分蘖而抑制生根,ZT浓度为0.25mg/L时蓝莓分蘖数达到2.89,6-BA浓度为0.40mg/L时分蘖数为2.00。
本研究认为,综合运用植物生长素及细胞分裂素能促进蓝莓离体繁殖。
关键词:
生长素;
细胞分裂素;
蓝莓;
生根率
TheinfluencestudyofPlantgrowthregulatoronblueberrypropagationinvitro
Student:
HuangQinTutor:
HuangKe
Abstract:
WeusedBlueberryasexperimentalmaterialtostudytheinfluenceofdifferentconcentrationofplantgrowthregulatoronblueberryradicateinvitropropagation.Plantgrowthregulatorsincludeindole-3-butyricacid(IBA),alphaapathyaceticacid(NAA),zeatin(ZT)andBenzylaminopurine(6-BA).Theresultshowsthatblueberryradicaterateis73%,whenIBAconcentrationis0.05mg/L;
Blueberryradicaterateis72%,whenNAAconcentrationis0.04mg/L.Cytokinecansuppressblueberryradicatebutenhancethetillers.Blueberrytilleris2.89,whenZTconcentrationis0.25mg/L;
Blueberrytillerrateis2.00,when6-BAconcentrationis0.4mg/L.Thisstudyprovidesthatcombinationauxinandcytokineonblueberrypropagationcanpromoterootingrateandtillernumbers.
Keywords:
Auxin;
Cytokine;
Blueberry;
Radicaterate
引言
蓝莓(Sementrigonellae)又被人们称为甸果、地果,属于常绿灌木或多年生落叶,生产于北美,生长在高为400~1400m的山地或丘陵地区,是酸性土壤的指示性植物[1-2]。
其果实颜色深蓝,含甙较多,含糖量低,低脂肪型水果,其抗氧化能力比其他水果强。
它对预防白内障、心脏病,防止人体细胞衰老效果突出,因而被国际粮农组织列为健康食物之一[3]。
蓝莓能抵抗贫瘠地,抗病虫害力强,研究蓝莓规模育苗技术,从而满足市场的需求,已经成为蓝莓发展的重要问题[4]。
国内外研究蓝莓繁殖技术处于初始阶段[5-7],报道如何诱导蓝莓离体不定芽再生的很少。
孙阳等通过蓝莓叶片愈伤组织建立蓝莓离体再生和生根技术,为加快蓝莓组培繁殖技术体系提供了参考。
20世纪80年代中国才开始对蓝莓栽培进行研究,例如吉林农业大学教授郝瑞首次详细地调研了衍生在长白山的笃斯越橘[8],1983年吉林农业大学教授李亚东在蓝莓引种栽培工作方面研究较多,特别是针对土壤改良工作、蓝莓栽培技术方面[9-10]。
蓝莓离体再生和增殖体系经过多年的研究已经有了很大的进步,蓝莓苗的组培快繁技术体系还没有建立起来,制约蓝莓苗的组培快繁养技术难点就在于瓶内生根。
现在大部分研究人员在增殖继代的基础上实现了蓝莓的体外生根技术。
韦吉梅的研究表明2.0mg/LIBA溶液处理兔眼蓝莓绿枝插条,生根率能达到84.17%以上。
乌凤章等研究表明泥炭藓是适合蓝莓嫩枝扦插的最佳基质,此结论与李亚东的结果一致[11]。
王连润提出蓝莓在添加0.3mg/LIBA的改良1/2WPM基本培养基上再光照培养60d生根率达到70%~90%[12];
董朝莉的研究表明添加浓度为1~2mg/LZT的WPM培养基,蓝莓茎段的初代发芽增值率可达3~6倍,试管内生根率相对较低,因此研究者扦插蓝莓大多选用试管外[13],张凤生认为培养基MW+NAA0.05mg/L+IBA0.5mg/L效果更好[14]。
王淑珍等研究表明添加ZT1mg/L的培养基能促进蓝莓芽初代增殖率提高5~6倍,ZT1mg/L与ZT2mg/L交替使用,继代培养可达10~15倍。
本实验以蓝莓为实验材料,研究不同浓度的植物生长调节剂对蓝莓离体繁殖生根的影响。
1.材料与方法
1.1实验材料
实验材料由重庆文理学院花卉研究所提供,选取长势好的继代苗进行试验。
1.2培养基
培养基配制:
母液包括大量元素20ml/L、钙盐20ml/L、有机物5ml/L、7水合硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)5ml/L,微量元素5ml/L,20g/L糖和6g/L卡路胶。
1.3实验方法
1.3.1配制培养基
取40mL大量元素、40mL钙盐、10mL有机物、10mL7水合硫酸亚铁、10mL微量元素、40g糖和12g卡路胶,置于2L的烧杯中边加开水边搅拌,定容到2L,然后等分入4个1L的烧杯中,向4个烧杯中依次加入0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.20mg/L配制好备用的IBA。
重新配制新的培养基直到加入的IBA达到0.50mg/L,最后的一组作为对照组(见表1)。
重复上述的过程分别制作用NAA、ZT和6-BA处理的实验组。
表2NAA浓度列表
Tab.2ListofNAAconcentration
编号
NAA浓度(mg/L)
1
0.00
2
0.05
3
0.10
4
0.15
5
0.20
6
0.25
7
0.30
8
0.35
9
0.40
10
0.45
11
0.50
表1IBA浓度列表
Tab.1ListofIBAconcentration
IBA浓度(mg/L)
表46-BA浓度列表
Tab.4Listof6-BAconcentration
6-BA浓度(mg/L)
表3ZT浓度列表
Tab.3ListofZTconcentration
ZT浓度(mg/L)
1.3.2灭菌和无菌操作
将配制好的培养基按浓度不同分装到20个培养瓶中并贴上标签,在高温灭菌炉中灭菌20min。
冷却后运至接种室。
选取长势好的蓝莓苗放于接种室,操作在无菌台上完成。
蓝莓苗切成2cm左右(保留顶端),接种到培养基中。
每瓶培养基接种6株蓝莓苗。
1.3.3培养和测量
接种好的蓝莓苗在培养室培养,每5瓶一组分三组,43d后用刻度尺直接测量蓝莓苗的株高和根长,直接数生根数。
采用Excel2003软件对实验数据进行整理,采用SPSS进行显著性分析。
2.结果与分析
2.1不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓株高的影响
注:
图中
表示差异显著(P<
0.05),下同
图1IBA的蓝莓株高长势图
Fig.1TheconcentrationofIBAinfluenceplantheightofBlueberry
0.05mg/L、0.15mg/L、0.10mg/L、0.45mg/LIBA处理间没有差异,0.45mg/L、0.50mg/L、0.35mg/LIBA处理间没有差异,0.50mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.00mg/L处理间没有差异,0.20mg/L、0.30mg/LIBA处理间没有显著性差异,0.05mg/L、0.15mg/L、0.10mg/L与0.50mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.00mg/L、0.30mg/L、0.20mg/L、0.25mg/L处理间有显著性差异。
图2NAA的蓝莓株高长势图
Fig.2TheconcentrationofNAAinfluenceplantheightofBlueberry
0.00mg/L、0.10mg/L、0.05mg/L、0.20mg/L、0.15mg/L处理间没有差异,0.20mg/L、0.15mg/L、0.25mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/LNAA处理间没有差异,0.30mg/L、0.50mg/L处理间没有显著性差异,0.45mg/L、0.50mg/L处理没有差异,对照组与0.25mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L、0.50mg/LNAA处理有显著性差异。
图3ZT的蓝莓株高长势图
Fig.3TheconcentrationofZTinfluenceplantheightofBlueberry
0.10mg/L、0.15mg/处理间没有差异,0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L处理间没有差异,0.05mg/L、0.20mg/L处理间没有差异,0.35mg/L、0.40mg/L、0.50mg/L处理间没有差异,对照组与0.25mg/L、0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.20mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L、0.50mg/LZT有显著性差异,0.25mg/L与0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.20mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L处理间有显著性差异。
图46-BA的蓝莓株高长势图
Fig.4Theconcentrationof6-BAinfluenceplantheightofBlueberry
0.40mg/L、0.30mg/L、0.15mg/L处理间没有差异,0.30mg/L、0.15mg/L、0.45mg/L处理间没有差异,0.05mg/L、0.35mg/L处理间没有差异,对照组和与0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.20mg/L、0.25mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L6-BA处理均有显著性差异。
图5蓝莓株高长势图
Fig.5TheplantheightofBlueberrygrowingfigure
IBA浓度为0.05mg/L时蓝莓幼苗最高达5.13cm,比对照组高出0.65cm,IBA浓度从0.15mg/L~0.25mg/L的处理蓝莓苗株高呈下降趋势,IBA浓度从0.25mg/L~0.35mg/L的处理蓝莓苗株高呈上升趋势。
不同浓度的NAA处理蓝莓苗其株高变化趋势波动不大,对照组蓝莓株高最大,NAA浓度为0.45mg/L时蓝莓苗株高出现最低值3.21cm。
ZT浓度从0.05mg/L~0.15mg/L、0.30mg/L~0.45mg/L的处理蓝莓苗株高呈上升趋势,ZT浓度为0.25mg/L时蓝莓苗株高为3.87cm,ZT浓度为0.30mg/L时蓝莓苗株高出现最小值3.14cm。
不同浓度的6-BA处理蓝莓苗其株高变化趋势波动不大,6-BA浓度为0.10mg/L时蓝莓株高为3.79cm,6-BA浓度从0.10mg/L~0.25mg/L的处理蓝莓苗株高呈下降趋势,6-BA浓度为0.25mg/L时蓝莓苗株高出现最小值3.18cm。
浓度分别为0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L的IBA处理蓝莓均促进其生长,对照组的结果均高于添加了NAA、ZT和6-BA的处理,由此可见,它们对蓝莓的株高均表现出抑制效果,用IBA处理蓝莓苗对其株高效果比NAA、ZT和6-BA处理都要好,且最适浓度为0.05mg/L。
2.2不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓分蘖数的影响
图6ZT的蓝莓分蘖数图
Fig.6TheconcentrationofZTinfluencetillernumberofBlueberry
0.35mg/L、0.20mg/L、0.30mg/L、0.50mg/L处理间没有差异,0.05mg/L、0.40mg/L处理间没有差异,0.25mg/LZT处理与0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.20mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L均表现出显著性差异。
图76-BA的蓝莓分蘖数图
Fig.7Theconcentrationof6-BAinfluencetillernumberofBlueberry
0.35mg/L、0.25mg/L、0.10mg/L处理间没有显著性差异,0.40mg/L6-BA与0.30mg/L、0.50mg/L、0.10mg/L、0.35mg/L、0.25mg/L、0.20mg/L、0.45mg/L、0.15mg/L、0.50mg/L处理均有显著性差异,对照组没有发生分蘖。
图8蓝莓分蘖数图
Fig.8ThetillernumberofBlueberryfigure
对照组均没有发生分蘖,用不同浓度的IBA和NAA处理蓝莓苗也不发生分蘖,但是用不同浓度的ZT和6-BA处理,蓝莓苗均发生了分蘖。
ZT浓度从0.05mg/L~0.25mg/L的处理蓝莓苗分蘖数呈上升趋势,ZT为0.25mg/L蓝莓分蘖最多平均值达到2.89,ZT为0.30mg/L和0.50mg/L两个浓度处理蓝莓苗分蘖数均为2.17。
6-BA浓度从0.05mg/L~0.15mg/L和0.40mg/L~0.50mg/L的处理蓝莓分蘖数均呈下降趋势,0.40mg/L蓝莓分蘖达到2.00,6-BA为0.25mg/L和0.35mg/L浓度处理蓝莓苗分蘖数均为1.50。
浓度从0.05mg/L~0.35mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L的ZT处理蓝莓苗分蘖数均高于同浓度处理的6-BA,由此可见,用较低浓度的ZT处理蓝莓苗分蘖效果比6-BA好。
2.3不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓生根率的影响
图9IBA的蓝莓生根率图
Fig.9TheconcentrationofIBAinfluencerootingrateofBlueberry
0.05mg/L与0.10mg/L、0.30mg/L、0.40mg/L处理间没有显著性差异,0.15mg/L、0.35mg/L、0.00mg/L处理没有差异,0.35mg/L、0.00mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L处理间没有差异,0.45mg/L、0.50mg/L、0.25mg/L处理没有差异,0.25mg/L、0.20mg/L处理没有差异,0.05mg/L、0.40mg/L与0.15mg/L、0.35mg/L、0.00mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L、0.25mg/L、0.20mg/L处理有显著性差异。
图10NAA的蓝莓生根率图
Fig.10TheconcentrationofNAAinfluencerootingrateofBlueberry
0.40mg/L与0.10mg/L处理没有差异,0.20mg/L、0.00mg/L、0.05mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.15mg/L没有显著性差异,0.45mg/L、0.25mg/L、0.50mg/L处理间没有差异,0.40mg/L、0.10mg/L与0.20mg/L、0.00mg/L、0.05mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.15mg/L、0.45mg/L、0.25mg/L、0.50mg/L处理间表现出显著性差异。
图116-BA的蓝莓生根率图
Fig.11Theconcentrationof6-BAinfluencerootingrateofBlueberry
0.45mg/L、0.10mg/L、0.35mg/L处理间没有差异,0.40mg/L、0.15mg/L处理没有差异,对照组与浓度为0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.20mg/L、0.25mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L6-BA处理均有显著性差异。
图12蓝莓生根率图
Fig.12TherootingrateofBlueberryfigure
IBA浓度为0.05mg/L蓝莓生根率为73%,比对照组高17%,IBA浓度从0.05mg/L~0.20mg/L、0.40mg/L~0.50mg/L蓝莓生根率均呈下降趋势,0.10mg/L、0.40mg/L的IBA处理蓝莓生根率均为71%。
NAA浓度从0.25mg/L~0.40mg/L蓝莓生根率呈上升趋势,NAA浓度为0.40mg/L处理蓝莓苗其生根率为72%,比对照组高16%,NAA浓度从0.40mg/L~0.50mg/L蓝莓生根率呈下降趋势,0.15mg/L、0.30mg/L的NAA处理蓝莓生根率均为53%,0.25mg/L、0.45mg/L的NAA处理蓝莓生根率均为50%。
培养基中添加了6-BA均抑制蓝莓生根,并且对蓝莓生根率波动较大。
用ZT处理蓝莓生根率为0。
浓度同为0.15mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L时IBA促进蓝莓苗生根而NAA表现出抑制效果,浓度同为0.20mg/L时NAA促进蓝莓苗生根而IBA表现出抑制效果,浓度同为0.25mg/L时两者均表现出抑制效果,浓度同为0.40mg/L时两者均表现出促进效果。
由此可见,为了使蓝莓苗生根使用IBA处理比NAA效果更好,使用浓度为0.05~0.10mg/L。
2.4不同浓度IBA、NAA、ZT和6-BA处理对蓝莓根长的影响
图13IBA的蓝莓根长图
Fig.13TheconcentrationofIBAinfluencerootlengthofBlueberry
0.50mg/L、0.25mg/L、0.45mg/L、0.20mg/L处理间没有差异,0.45mg/L、0.20mg/L、0.05mg/L、0.40mg/L处理间没有差异,0.35mg/L、0.00mg/L、0.15mg/L、0.10mg/L、0.30mg/L处理间没有差异,0.50mg/L、0.25mg/LIBA与0.00mg/L、0.05mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.30mg/L、0.35mg/L、0.40mg/L均表现出显著差异。
图14NAA的蓝莓根长图
Fig.14TheconcentrationofNAAinfluencerootlengthofBlueberry
0.15mg/L、0.35mg/L、0.25mg/L、0.30mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L、0.10mg/L、0.00mg/L处理间没有差异,0.35mg/L、0.25mg/L、0.30mg/L、0.45mg/L、0.50mg/L、0.10mg/L、0.00mg/L、0.20mg/L、0.05mg/L处理间没有差异,0.15mg/L与0.05mg/L、0.20mg/L、0.40mg/L有显著性差异。
图156-BA的蓝莓根长图
Fig.15Theconcentrationof6-BAinfluencerootlengthofBlueberry
0.45mg/L与0.20mg/L没有差异,0.40mg/L、0.15mg/L没有显著性差异对照组与0.10mg/L、0.35mg/L、0.50mg/L、0.05mg/L、0.25mg/L、0.45mg/L、0.20mg/L、0.30mg/L、0.40mg/L、0.15mg/L均表现出显著性差异。
图16蓝莓根长图
Fig.16TherootlengthofBlueberryfigure
IBA浓度从0.10mg/L~0.25mg/L、0.30mg/L~0.50mg/L处理蓝莓苗其生根数呈上升趋势,IBA浓度为0.50mg/L时蓝莓苗根长出现最大值为3.44cm,浓度为0.10mg/L时蓝莓苗根长出现最小值为2.45cm,IBA浓度为0.05mg/L、
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